文摘
在哺乳动物中,脂血症的血液抽样后过早动物饲料可以生化值产生实质性的影响。在爬行动物血浆生化值可能会影响到物种,年龄、季节和营养状态。然而,禁食状态不是抽样时经常考虑爬行动物的血。在本文中,我们评估2小时餐后血收集两个海龟物种调查以血液和血浆生化的影响值。喂养没有显著影响血液值在任何一种物种,也没有影响等离子体在坎皮海龟生化值。在餐后绿海龟、总蛋白、白蛋白、高山、AST、ALT、淀粉酶、氯化和胆固醇显著增加,显著降低。虽然显著变化观察,中位数百分比差异和餐后值不超过10%的这些分析物,不可能改变的临床解释。
1。介绍
绿海龟(龟鳖目mydas)被发现在世界各地的热带亚热带的水域,第二个最丰富的美国东部[海龟发现1,2]。少年绿海龟在沿海水域发现的一个过渡阶段更多的肉食饮食(虾、蜗牛、栉水母门动物)主要食草饮食(海草),它创建一个独特的生理状态与其他海龟(3]。坎皮海龟(摘要本文kempii)是最小的,最濒危的海龟。他们发现在北美东部沿岸水域,从墨西哥到北至纽约和马萨诸塞州(2]。坎皮海龟是肉食和机会主义,主要饲养在螃蟹、软体动物和鱼类3]。少年绿海龟和坎皮海龟使用浅的沿海水域觅食,使他们容易受到许多人为创伤(如船罢工和钓鱼的交互)和自然疾病过程(例如,cold-stunning)。数百名少年发现海龟死亡或严重疲惫不堪的每一年,许多被带进康复中心治疗。
血液学和等离子体生物化学特性是有价值的监测动物卫生;然而,环境和程序性因素可以有变量影响报告值。餐后采血可以产生脂血症的样品由于增加血清甘油三酯chylomycrons的形式。几个生化分析物改变饮食、喂养、脂血在范围广泛的物种,包括哺乳动物(4- - - - - -13)、鸟类(14- - - - - -19],鲨鱼[20.),和爬行动物(21,22]。观察到的改变生化值导致建议prephlebotomy禁食时间许多物种(4,6,17,19]。然而,很少有建议了爬行动物。
爬行动物、环境和生理因素,包括季节、性别、年龄、大小、和营养状态,可能改变临床病理学值(22- - - - - -24]。海龟、血液和血浆生化值已经调查了几个种类(21,25- - - - - -34),和生化值已被证明是受性别、大小、年龄、健康状况和觅食21,31日,34- - - - - -37]。然而,有一个缺乏数据对于餐后采样的影响在海龟的等离子体化学分析物,导致需要空腹血液样本的不确定性。
了解是否或如何喂养影响临床病理学值海龟在圈养和野生环境中均可会很有帮助,因为巨大的不确定性在知道去年美联储野生甲鱼和偶尔的拟合样本收集困难的管理例程和物流康复或水族馆设施。本研究评估的影响,餐后在血液和血浆生化值抽样绿海龟和坎皮海龟。
2。材料和方法
2.1。动物和环境
十名少年绿海龟和十名少年坎皮海龟的各种条件进行康复凯伦比斯利海龟救援和康复中心,上桅帆岛,北卡罗莱纳被用于这项研究。值和权重,直甲壳长度(颈背的等级至臀的等级),和天康复如表所示1。只乌龟,活跃,吃得好,而不是任何主要的治疗方法包括在内。并不是所有被认为是准备释放,一些仍在接受治疗小壳病变(局部治疗)和所需的身体条件下被释放。海龟被单独安置在不定地大小的塑料或玻璃纤维包含过滤盐水坦克。大坦克跌入到一个公共的过滤系统和多种形式的机械和生物过滤;小坦克被每天转储和填补常规。大部分海龟留在室内坦克,但几被安置在临时户外围栏在下午来促进康复机构的日常运营,并提供紫外线曝光。水温范围从25°c29°C。
2.2。采样和喂养
血液收集与常规的健康监测和预映考试。最初的血液样本被早晨的第一件事是在大约24小时快速提供任何食物之前。海龟是在考试中手动克制表,在腹侧弯曲的头被克制的表来促进血液采集。22 ga×2.54厘米和3毫升注射器针肝素化,用于收集2 - 3毫升的血液从颈外静脉。初始取样后,海龟回到他们的控股坦克和提供食物。冷冻解冻毛鳞鱼(Mallotus绒毛)和较小的鱿鱼(枪乌贼sp),和/或蓝蟹(Callinectes sapidus)提供1.5% - -9.0%的体重。基于近似分析饮食项目执行之前在这个基金(鱿鱼和蓝蟹;Microbac实验室,Inc .,南方测试和研究部门,威尔逊,美国NC)和以前公布值毛鳞鱼和鱿鱼38),毛鳞鱼含有适量的脂质干物质基础(7.0%的-23.3%),而鱿鱼和蓝蟹包含一个小的脂质(鱿鱼8.3% - -11.4%,蓝蟹2.4%干物质基础)。海龟都是30分钟给饲料,和所有消耗最少的50%或更多的饮食。两小时后进食,第二个血液样本收集。海龟,超过10分钟消费提供饮食,餐后血液样本的时间计算从乌龟不吃或多余的食物从容器中删除。中值(范围)时间从进料到餐后抽血是126分钟(113 - 142分钟)。
2.3。血液的处理和分析
对于每一个海龟,两个血涂片,两个血球容积计管了,剩余的血液被放置在一个无菌1.5毫升锥形瓶无添加剂(费舍尔科学公司,宾夕法尼亚州匹兹堡,美国)在湿冰直到离心。所有样品都是离心机的67分钟内集合。血球容积计管在3900×g离心5分钟,和包装细胞体积(PCV)确定。总固体(TS)是由折射计。锥形瓶是离心机在1000 g×10分钟,和等离子体收获。血浆样本提交连同两个相应的商业血涂片诊断实验室(美国Antech诊断,孟菲斯,田纳西州)生物化学分析和微分血细胞计数一天内收集。等离子体生物化学板进行了日立717化学自动分析器(日立仪器有限公司,加州圣何塞,美国)。细节血浆生化测定方法总结了其他地方(39]。
2.4。统计分析
所有分析人民币7 (SAS研究所卡里、数控、美国)。值和范围确定为所有血液和血浆生化数据。的Wilcoxon配对符号秩餐前的测试是用来比较差异和餐后的值。血液被分组的数据值(%异嗜性的,PCV %淋巴细胞,单核细胞百分比,%嗜酸性粒细胞,嗜碱粒细胞百分比),等离子体酶(高山、AST、ALT、肌酸磷酸激酶、淀粉酶、脂肪酶),代谢指标(血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、包子、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯和总胆红素),和离子(钠、钾、氯、钙、无机磷、镁),和顺序Bonferroni技术应用在每组减少错误的机会40]。一个<的价值。05年之后连续Bonferroni调整被认为是具有统计学意义。10%或更高的平均差异分析物是任意选择的统计差异可能成为临床相关的,因此,可能会导致一个改变的临床解释或治疗课程。
3所示。结果
之间没有明显差异和餐后PCV和差异绿海龟或坎皮海龟(数据没有显示)。餐前的和餐后值之间没有明显差异的坎皮海龟(表2)。在餐后样品绿海龟(表3)、总蛋白有显著增加()、白蛋白()、碱性磷酸酶(高山;)、丙氨酸转氨酶(ALT);)、天冬氨酸转氨酶(AST);)、淀粉酶()、胆固醇()。此外,有显著减少氯()。这些分析物在统计学上不同的喂养后,都有一个值之间的差异大于10%的百分比和餐后(表样本4)。虽然平均百分比差异大于10%的球蛋白和肌酸激酶(CK)绿海龟,和脂肪酶和尿酸坎皮海龟,数据的可变性很高,这些差异没有统计学意义。
4所示。讨论
所有血液生化值两种海龟都符合值之前报道这些物种(25,30.,31日,35,41- - - - - -43]除了无机磷酸盐、AST和ALT绿海龟。无机磷酸盐在上部范围或略高于报道值(25,30.,35,41,43),可能与饮食有关。标志着海拔的AST和ALT大多数绿海龟,正如报道值相比,是一个现象,曾被观察到在这个人口(未发表的数据)。根本原因是不确定的,但它也可能是相关的饮食来源更多的肉食饮食被囚禁。因为餐后值与每个海龟餐前的值相比,初始值没有一个因素的分析。
餐前的之间没有显著差异被发现和餐后血液值绿海龟或坎皮海龟。这个发现是预期,因为抽样与餐后脂血和干扰分析物,利用光度分析(4,5,12,44]。血液学的值是通过直接的微观评价细胞数量和类型;因此,由于餐后采样不会改变的预期。脂血也与增加由于红细胞溶血脆弱性(4];然而,没有任何的观察溶血样本使用。
绿海龟显示餐后等离子体化学的变化值比坎皮海龟的观察。绿海龟,血清总蛋白、白蛋白、高山、AST、ALT,胆固醇,和喂养后淀粉酶显著增加,但没有改变在某种程度上,可能会导致改变医疗管理。坎皮海龟,有预处理和餐后样品之间没有显著差异。两个物种之间的差异可能与自然饮食的差异。少年坎皮海龟肉食性,主要食用甲壳类动物(3),而少年绿海龟从食肉更加食草的生活方式转变3,45]。然而,在康复设置当前的研究中,两个物种主要是美联储与一些鱿鱼、毛鳞鱼和许多坎普的雷利还被美联储心慈手软的蓝蟹。观察到的差异可能是由于每个物种的特殊生理的自然饮食(即。,青少年的饮食中包含的植被绿海龟的大小)。研究自然饮食的影响血浆生化资料在不同的生命阶段是十分必要的。
增加的值观察绿海龟与所观察到的红耳滑块(Trachemys scripta线虫),没有发现这些分析物的差异在24小时和48小时餐后的样本46]。变量高山、AST和ALT活动已经在多个组织在爬行动物中,测量结果不确定度的临床实用程序(47- - - - - -49]。尽管显著增加,这些(即酶发生了实质性的变化。,no median percent differences >10%) in the current study, and both pre- and postprandial ALP values were comparable to published ranges for green sea turtles [25,30.,41- - - - - -43]。AST和ALT的初始等离子体活动水平高于先前的报道(25,30.,41- - - - - -43),但平均百分比餐后变化很小(< 10%)。Apartate转氨酶和ALT在骨骼肌在某种程度上发现了(48,49]。可能最初放血引起轻微的肌肉损伤和随后的泄漏从肌肉细胞的酶。这种酶泄漏到末梢循环可以解释轻微增加酶活性在餐后样品。然而,CK变化是高度可变的,而不是一贯支持肌肉损伤的解释。这些研究发现这三种酶在肝、肾脏和其他器官组织中的浓度变量(48,49),餐后海拔可能暗示准备消化的器官(如肝、胰腺和胃肠道)。有很多的这些组织酶同功酶可能导致整个等离子体酶活性的增加。虽然超出了本文的范围,评估酶同功酶有助于更好地描述观察到等离子体活动。
胆固醇和甘油三酯可能增加在爬行动物由于肝脂沉积症,卵黄形成,prehibernation [50]。蟒蛇展出50倍增加餐后甘油三酯和胆固醇含量增加了80% (51];但是,没有时间框架。滑块在红耳龟喂高脂肪的食物,在2天内甘油三酯显著增加,才恢复正常喂养4天后(52]。没有评价正常饮食或胆固醇浓度。在当前的研究中,moderate-to-low-fat饮食、甘油三酯没有显著增加的物种,和胆固醇显著增加2小时后进食的绿海龟但不是坎皮海龟。然而,餐后胆固醇浓度增加了不到10%,或者最低限度以上发表的参考区间胆固醇在绿海龟25,41,42,50]。
虽然海龟有胃肠道中转时间长(7或8天(坎普的蠵龟53]和可以忍受长时间快(可能几个月为成人的绿海龟种群生殖迁移期间)(54]),本研究中使用的基本以24小时为快的少年海龟生态和生理有关。在野外,绿海龟觅食理由每天喂一次,两次,和白天主要是3,55,56]。在夏威夷,绿海龟已经发现饲料主要是晚上在一些地区,在那里他们采摘从暮光到日出57]。绿海龟的贫困地区粮食供应、高干扰草床,美联储更不断在白天(约9小时)(58]。坎皮海龟主要饲料更活跃和螃蟹等移动的猎物3,53,59- - - - - -61年),因此可能养活更多的零星一整天(61年]。由于其自然喂养行为,基本以24小时为周期没有食物构成一个有效的太快,这两个物种。
没有变化观察到血液和等离子体化学预处理和2小时餐后血液样本之间的值被认为是足够的临床解释或修改触发器改变动物的疗程。可能较长餐前的快,或生化资料后喂养更长一段时间后,会产生更大的改变。然而,对于一个少年绿海龟、坎皮海龟喂食每天一次,几乎没有什么后果抽样后2小时餐后与基本以24小时为快。采血时间的定期喂食海龟似乎解释临床病理学的关键值低于在其他物种。
确认
作者感谢所有志愿者在凯伦比斯利海龟救援和康复中心为他们奉献和工作对他们的帮助生病和受伤的海龟和海龟在这项研究。他们也感谢兽医学生两类技术援助与样本收集和处理。