的保护作用gydF4y2Ba凤凰dactyliferagydF4y2Bal .种子对Paracetamol-Induced在大鼠肝毒性:比较与维生素CgydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

凤凰dactyliferagydF4y2Bal .(枣椰树)种子已经在摩洛哥药典中提到有效的补救措施与广泛的疾病,包括肝脏和胃肠道功能紊乱和无数的感染。当前工作进行评估酚醛概要和王亚南潜在的两个日期的种子品种,当地称为gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba和gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba水提取物对扑热息痛(PCM)驱动在42 Wistar鼠肝毒性。多酚概要文件是由高效液相色谱分析的手段。由暴露大鼠肝损伤是引起PCM剂量为1.5 g / kg一周一次。除了PCM,gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba和gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期种子提取物(200和400毫克/公斤)的口服药物在日常例行公事。我们的研究结果表明,在研究多酚化合物,gydF4y2BapgydF4y2Ba香豆酸、槲皮素、咖啡酸、芦丁是最丰富的植物化学物质。日期明显坑(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba稳定了PCM-driven肝功能改变参数(AST、ALT、高山、LDH、总蛋白质,直接胆红素、总胆红素)。此外,gydF4y2Ba凤凰dactyliferagydF4y2Ba坑大大增强(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba抗氧化酶的活动(SOD, CAT, GPx)以及减少谷胱甘肽(GSH)的水平。建立了王亚南效应可能是由于种子抗氧化作用和日期捕获自由基的能力。本研究的主要结果可以验证这些日期的传统使用种子管理不同的健康状况。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

肝脏是一个重要的解毒和代谢药物和外源性物质在人体gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。过度或不准确的使用药物会导致肝脏疾病,占所有病例的一半以上的急性肝衰竭gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。PCM是一种常见的止痛和退热的药物被认为是一个安全的药物在治疗剂量,因为它主要是代谢药物活性葡糖苷酸和硫酸轭合物,与未成年人分数(5 - 10%)氧化的活性代谢物gydF4y2BaNgydF4y2Ba乙酰-gydF4y2BapgydF4y2Ba苯醌亚胺(NAPQI) [gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。NAPQI,由肝细胞色素p - 450亚型(CYP2E1和体内CYP2A6基因表现)主要负责PCM-induced肝毒性,是通过其绑定有效解毒的谷胱甘肽巯基(谷胱甘肽),最终在尿液中排出半胱氨酸和硫醇尿酸轭合物(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。然而,在高剂量的PCM(超过4克/天),硫酸盐化作用和glucuronidation途径变得饱和,而氧化增加,导致过度生产NAPQI耗尽肝脏谷胱甘肽的商店和引起氧化应激(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。这些NAPQI实体共价结合半胱氨酸组织细胞的蛋白质,特别是线粒体蛋白质和离子通道引起的抑制能源生产,离子失衡,细胞死亡gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

目前合成药物用于治疗肝脏疾病是无效的和可能有害的副作用gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。因此,天然化合物源于草本植物最近获得了科学的利益作为一种新的治疗肝损伤的光明之路。gydF4y2Ba

在民间医学,枣椰树的粉末(gydF4y2Ba凤凰dactyliferagydF4y2Bal .)种子是由几个生产国家用于治疗各种疾病,包括胃肠道功能紊乱、腹泻、肝脏疾病、咽喉疾病,癌症,牙疼,糖尿病和肺部和许多感染(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。在摩洛哥传统医学、日期种子实现治疗黄疸和作为解毒剂。我们之前的研究已经证明日期种子提取物具有各种药理活动,包括抗氧化、抗炎、降血脂药的属性,都与高酚和类黄酮含量gydF4y2Ba7gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。先前的研究已经证明,日期CCl种子具有王亚南潜力高gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba治疗大鼠(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。然而,直到现在,没有一项研究进行了评估日期的王亚南种子对PCM-induced肝损伤以及评估疗效的差异之间的可能存在的不同品种的种子。因此,当前的研究旨在考察两个日期的酚醛概要文件被称为本地种子品种gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba和gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba生长在东南PCM-induced摩洛哥和检查他们的影响在Wistar鼠肝损伤提供科学依据他们在传统医学使用。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。Polyphenol-Rich提取物的制备gydF4y2Ba

丰富的酚类提取物制备的技术Bouhlali et al。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。简洁、30克种子粉提取使用150毫升水,在35°C使用轨道shaker-incubator 12 h。混合物被筛选,其余都集中在40°C到减压下总溶剂通过旋转蒸发器的蒸发。最后原油提取不惜−20°C分析之前在黑暗的玻璃烧瓶内。gydF4y2Ba

2.2。识别和量化的酚类和黄酮类化合物gydF4y2Ba

酚酸和类黄酮的种子品种测定用高效液相色谱法(HPLC)作为描述Bouhlali et al。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba),与未成年人修改。一克日期种子首次可溶性粉25毫升酸化甲醇溶液(盐酸1 N /甲醇/水、1/80/19 v / v / v)然后ultrasonicated 30分钟。混合物在1000 rpm离心机15分钟和2毫升的上层清液终于通过0.45过滤gydF4y2BaμgydF4y2Bam过滤器前注入。酚醛标准(包括七个酚酸:咖啡,gydF4y2BapgydF4y2Ba香豆、绿原阿魏,高卢、香草酸和syringic酸和三个黄酮类化合物:木樨草素、槲皮素和芦丁)100年股票的解决方案gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL和准备使用校准曲线。分析是在日本岛津公司进行高效液相色谱分离系统(日本京都)配备一个autosampler (SIL-20A),双泵(LC-20AB),真空脱气装置(DGU-20A),二极管阵列检测器(SPD-M10A)和系统控制器(SCL-10A)。Restek的C18柱(150×4.6毫米,5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米颗粒大小)(美国Bellefonte)是用于多酚分离在40°C。二元流动相由water-acetic酸(97:3,v / v)(洗脱液)和乙腈(洗脱液B)。洗脱了1毫升/分钟的流量以下梯度轮廓:0 - 5分钟,0 - 8%解决方案B(线性渐变);做些分,8 - 25%解决方案B(线性渐变);25 - 30分钟,25%解决方案B(权力平等主义的洗脱);和30 - 50分钟,25 - 90%的解决方案B(线性渐变)。起动器,20毫升每个提取的注入和波长的检测是设定在280年,320年和350海里。化合物被确定基于他们的保留时间,通过强化酚醛标准在相同条件下,和他们的数量确定的标准曲线。分析进行了一式三份,平均结果和报告为毫克每100克干种子重量的日期。gydF4y2Ba

2.3。动物gydF4y2Ba

42雄性Wistar鼠(200 - 240 g)被用于实验。这些动物得到生物系动物设施的(科学与技术学院、Errachidia、摩洛哥)。他们被安置在塑料笼子下12 h光/ 12 h黑暗周期控制房间温度(22±2°C),与免费的食物和水。gydF4y2Ba

2.4。实验设计gydF4y2Ba

7组,每组六大鼠建立了以随机的方式:gydF4y2Ba(我)gydF4y2Ba第一组(正常):动物收到口头蒸馏水为七天gydF4y2Ba(2)gydF4y2Ba第二组(PCM):老鼠给予蒸馏水口头和日常六天;第五天,大鼠口服剂量的PCM(1.5克/公斤)gydF4y2Ba(3)gydF4y2Ba第三组(抗坏血酸):老鼠强饲法每日与抗坏血酸为6天(450毫克/公斤);第五天,大鼠口服剂量的PCM(1.5克/公斤)gydF4y2Ba(iv)gydF4y2Ba第四章和第五章(gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba种子提取物):老鼠每天填喂法gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba种子提取各自的剂量的200和400毫克/公斤6天;第五天,大鼠口服剂量的PCM(1.5克/公斤)gydF4y2Ba(v)gydF4y2Ba第六组和七世(gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba种子提取物):老鼠每天填喂法gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba种子提取各自的剂量的200和400毫克/公斤6天;第五天,大鼠口服剂量的PCM(1.5克/公斤)gydF4y2Ba

醚溶剂被用于麻醉大鼠后24 h PCM治疗,血液抽样进行retro-orbital静脉和血清在2500转离心10分钟,然后进行生化分析。牺牲动物后,他们的肝脏是直接取出。gydF4y2Ba

2.5。制备肝匀浆gydF4y2Ba

老鼠的平均叶的一部分肝脏被冰冷的0.9%氯化钠。匀浆是准备1 g的肝组织样本的比例在10毫升冰冷的磷酸钾缓冲(1.25%;pH值7.0)使用glass-Teflon均质器。每一个齐次解受到离心20分钟在600 rpm,后来他们的上层清液回收储存在−80°C到操纵。gydF4y2Ba

2.6。测定血清肝毒性指数gydF4y2Ba

血清AST(天冬氨酸转氨酶)、ALT(丙氨酸氨基转移酶),高山(碱性磷酸酶)、LDH(乳酸脱氢酶),总蛋白质,直接和总胆红素从草毒死实验室评估通过分析工具有限公司,英国,据该公司的方向。gydF4y2Ba

2.7。测定肝组织中氧化应激标志物gydF4y2Ba

超氧化物歧化酶(SOD),减少谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)活动进行评估,在肝脏匀浆,根据协议提供的市场供应(Biodiagnostic,吉萨金字塔,埃及)。gydF4y2Ba

2.8。统计分析gydF4y2Ba

实验结果表示为平均值±标准偏差。数据受到单向方差分析(方差分析)实施社会科学统计软件包(SPSS,版本23)软件。对照组(PCM单独治疗组)和日期种子提取物组被因果Dunnett的调查gydF4y2BatgydF4y2Ba以及。gydF4y2Ba 被认为是具有统计学意义。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

3.1。识别和量化的酚类和黄酮类化合物gydF4y2Ba

量化phenol-derived化合物进行实现高效液相色谱分析。主要结果中描述表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。检查日期种子提取物显示重大不整合(gydF4y2Ba )。gydF4y2Ba两个品种包含所有检查化合物除外gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba种子没有包含syringic酸。主要的酚类化合物gydF4y2BapgydF4y2Ba香豆酸(107.03 - -119.96毫克/ 100克DW),紧随其后的是咖啡酸(63.80 - -70.27毫克/ DW) 100克、没食子酸(16.37 - -18.42毫克/ DW) 100克、阿魏酸(9.18 - -11.40毫克/ DW) 100克、香草酸(12.60 - -20.42毫克/ 100克DW)和绿原酸(11.88 - -17.41毫克/ 100克DW)。syringic酸才发现的gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期籽萃取物(3.87毫克/ 100克DW)。关于类黄酮化合物,芦丁(54.11 - -58.56毫克/ 100克DW)被发现在更高浓度之后,槲皮素(19.63 - -26.62毫克/ 100克DW)和毛地黄黄酮(9.01 - -12.08毫克/ 100克DW)。gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba种子日期记录的最高水平gydF4y2BapgydF4y2Ba香豆、绿原酸、香草酸、阿魏酸、没食子酸,syringic酸、槲皮素和木樨草素,而gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期显示高水平的咖啡酸和芦丁的种子。gydF4y2Ba

3.2。日期种子提取物和抗坏血酸对血清Hepatospecific标记gydF4y2Ba

如图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba和表gydF4y2Ba2gydF4y2BaPCM集团显示显著增加(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba在血清AST、ALT、高山、LDH、直接和总胆红素明显降低血清总蛋白相比,正常的控制。然而,随着PCM-treated组相比,不同日期的管理种子提取物显著降低剂量依赖性的方式(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba水平的AST、ALT、高山,LDH,直接和总胆红素显著提升总蛋白。没有很大的差异(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba被发现在gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期种子提取物治疗组剂量400毫克/公斤和消极的控制(PCM)集团关于高山的水平。建立正常血清参数观察gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba,这是最有效的王亚南日期籽萃取物,不是在抗坏血酸高达(200毫克/公斤)治疗大鼠。gydF4y2Ba

3.3。日期种子提取物和抗坏血酸对肝脏抗氧化酶gydF4y2Ba

与正常大鼠相比,PCM治疗显著降低(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba活动肝酶抗氧化剂(SOD, CAT和GPx)以及非酶的抗氧化剂谷胱甘肽(表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba和图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。Prefeeding不同日期种子提取物相比大大提高了这些肝脏抗氧化酶PCM-treated组。同样,与抗坏血酸预处理(450毫克/公斤)肝脏谷胱甘肽水平升高,SOD,猫和GPx活动显著(gydF4y2Ba )。gydF4y2Ba没有很大的差异(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba观察之间的gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期种子提取物(200毫克/公斤)和PCM-received组。在研究日期种子品种,gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba日期显示最高的种子改善肝酶和非酶的抗氧化剂。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

目前的工作进行评估日期种子提取物的保护作用与PCM-induced肝毒性Wistar鼠为了提供科学依据他们在传统医学使用。PCM-driven肝损伤是一种最常用的实验模型来评估药物王亚南[gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。事实上,这些生物标记物在PCM-treated血清水平的增加大鼠与对照组相比证实肝损伤,表明模型已成功建立。肝细胞功能和完整性可以评估估计等生物标志物的血清ALT, AST,高山,LDH,胆红素(总和直接)和总蛋白最初出现在细胞质中(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。这些酶和分子渗入血液在肝病和作为肝脏损伤的标志(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

ALT主要在肝脏与AST也大量存在于其他器官,即心肌和肾脏。出于这个原因,ALT比AST特定检测肝脏炎症,通过增加并行ALT和AST水平(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。临床医生经常使用AST / ALT值区分肝外和肝损伤,AST / ALT的比率2:1表明肝脏损伤[gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。因此,AST / ALT比观察PCM-treated集团可能证实这种药物引起的肝损害。此外,升高血清ALP水平观察,在这项研究中,可能是由于有缺陷的肝脏排泄或高山合成增加了肝实质或导管细胞的增加胆道压力Iyanda报道和Adeniyi [gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。此外,胆红素水平的增加PCM-treated组中观察到的可能是由于肝脏清除率降低,表明它是一个功能的标记,而不是一个标记细胞完整性所反映的血清转氨酶水平(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

总蛋白水平的降低PCM-treated老鼠显示许多肝细胞的破坏,这可能导致肝脏合成蛋白质的能力减少大多数血浆蛋白合成的肝细胞(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

血清LDH水平是大大大后缺血性损伤和PCM肝毒性。然而,当这个高度是伴随着ALT和总胆红素增加,发现在这项研究中,它就变成了一个有效的指标,肝损伤(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

预处理与日期种子提取物和抗坏血酸对PCM-induced有效保护大鼠肝损伤,证明了降低ALT, AST,高山,LDH酶水平和提高总蛋白质含量比PCM-treated组。我们的结果是一致的与作为礼尚往来,阿里gydF4y2Ba10gydF4y2Ba)他们发现合并施打日期CCl籽的提取物gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba治疗大鼠恢复肝功能参数(AST、ALT、高山和白蛋白),脂质过氧化(MDA),和活动的肝脏抗氧化酶同华而中断gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba治疗。此外,符合我们发现,Al-Qarawi et al。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]发现号种子可能CCl作为预防和治疗gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba全身在大鼠肝毒性显著减少AST升高,ALT,高山和胆红素值被发现在老鼠受到CCl的腹腔内注射gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba之前或之后的日期种子水提取物。gydF4y2Ba

血清生物标志物的正常化日期种子提取物和抗坏血酸表明他们可能防止PCM毒性提供保护肝细胞薄膜的结构完整性,最有可能的是,由于膜稳定活动阻止细胞内酶泄漏。事实上,同一日期的种子品种有显示高和膜稳定作用存在剂量依赖的相关性,特别是gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba日期显示最高的种子王亚南[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

氧化应激是一个重要的机制,提出了一个角色在PCM毒性的发展(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。因此,谷胱甘肽、SOD和PCM醉猫活动组相比显著降低控制。管理日期种子提取物明显改善和剂量依赖性酶(SOD, CAT, GPx)和非酶的(谷胱甘肽)的抗氧化水平相比PCM单独对待动物。事实上,一些报告发现,补充抗氧化剂可以防止PCM-induced肝毒性(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。我们之前的植物化学的初步分析显示,日期种子含有大量的总酚类黄酮,浓缩单宁,和强大的抗氧化剂,anti-lipid过氧化属性(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。一些研究表明,预处理gydF4y2BapgydF4y2Ba香豆酸、咖啡酸、绿原酸、没食子酸,syringic酸、香草酸、芦丁,毛地黄黄酮,或发现槲皮素分析日期连续七天种子预防病理性增加AST和ALT和改善肝脏抗氧化能力的老鼠受到PCM-induced肝损伤增加SOD,谷胱甘肽和猫活动(gydF4y2Ba19gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]。CYP亚型中报道,另一方面负责NAPQI生产,体外试验表明,木樨草素和槲皮素抑制CYP 1 a2和CYP 3 a4 (gydF4y2Ba28gydF4y2Ba),绿原酸引起的抑制CYP 2 e1和CYP 1 a2酶的活动,但不是CYP 3 a4 (gydF4y2Ba21gydF4y2Ba),咖啡酸抑制CYP 3 a4和CYP 2 e1 (gydF4y2Ba23gydF4y2Ba],芦丁被发现是一个强有力的抑制剂CYP 3 a4 (gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba),而阿魏酸表达下调CYP 2 e1(的表达gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。可能性结果,这些化合物之间的协同作用在肝脏通过不整合机制有机和功能方面可以证明日期的王亚南种子提取物。此外,这些化合物的大量内部gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba日期的种子可以解释他们最强大的王亚南相比gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期的种子。gydF4y2Ba

重要的是,当前工作的结果证明,日期种子水提取物显著和剂量依赖性降低PCM-induced肝毒性增强肝细胞的抗氧化状态。gydF4y2Ba

5。结论gydF4y2Ba

我们的发现表明,水日期种子提取物是有效预防PCM的有害影响。这是体现通过降低血清生物标志物(LDH ALT, AST,高山,总蛋白质、总胆红素、直接胆红素)以及增强酶(SOD, CAT, GPx)和非酶的谷胱甘肽抗氧化水平。gydF4y2BaJihlgydF4y2Ba日期记录最大的种子王亚南相比gydF4y2BaMajhoulgydF4y2Ba日期的种子。提取物预防功效可能归因于其强大的抗氧化能力,膜稳定作用,抑制CYP和潜在能力,负责NAPQI形成,以及他们增强肝酶的抗氧化剂。我们的发现可能支持传统的使用日期种子来治疗缓解黄疸和作为解毒剂。gydF4y2Ba

数据可用性gydF4y2Ba

支持的所有数据都包含在本文的结果。gydF4y2Ba

伦理批准gydF4y2Ba

所有实验研究论文,包括动物,已被依法执行1964年赫尔辛基宣言》及其修正案晚些时候或类似的道德标准,和本研究协议是生物医学研究的伦理委员会批准,科学和技术学院Errachidia (FSTE),摩洛哥,参考下。FSTE-32/2020。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称他们没有利益冲突有关的出版。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

作者感谢Sellam博士和Bammou他们宝贵的指导完成这项工作。gydF4y2Ba

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