影响Binahong (Anredera等(Tenore) Steenis)提取物在白内障的丙二醛(MDA)水平山羊镜头

文摘

白内障失明的原因之一。氧化应激可以形成白内障等病理条件。这种氧化应激能力可以测量的丙二醛(MDA)的生物标志物。Binahong树叶(Anredera等(Tenore) Steenis)从印尼本地植物用于治疗各种疾病,包括白内障治疗。Binahong叶(Anredera等(Tenore) Steenis)有大量的类黄酮,富含抗氧化剂,可用于治疗白内障。客观的。本研究的目的是评估binahong叶提取物对MDA的水平的影响与cataract-induced山羊透镜材料。方法。尽可能多的40只山羊眼睛镜片被分成几组,即集团我正常的镜头控制(葡萄糖5.5毫米),第二组镜头与葡萄糖的浓度55毫米,白内障诱导第三组镜头与葡萄糖55 mM + binahong叶提取物(100μg / ml),第四组镜头与葡萄糖55 mM + binahong叶提取物(200μg / ml)和组V镜头与葡萄糖55 mM +槲皮素(积极的控制)。生化参数测量在镜头匀浆丙二醛镜头在所有组的形态学观察和比较。结果。研究结果发现,透镜组的binahong提取显示多个结果相比透明度透镜组引起的葡萄糖浓度的55毫米)。这表明糖尿病性白内障组高氧化应激由于山梨糖醇化合物的积累来自葡萄糖造成浊度在山羊目镜和MDA水平的提高镜头。Binahong水平在100年或200年可以抑制MDA浓度生产。结论。Binahong (Anredera等(Tenore) Steenis)提取物能够抑制MDA的生产水平。在glucose-induced山羊镜头,binahong提取和槲皮素抗氧化和anticataract属性。

1。介绍

白内障的目镜是和解的条件减少进入眼睛的光线,所以它可以导致失明1]。世界卫生组织(世卫组织)表明,到2020年,全球盲人的数量将达到9000万(2,3]。白内障的患病率随年龄增长,从62年5%的患者年龄在52 - 64%患者超过70年,在欧洲(4]。最常见的白内障的症状是视力下降,对比敏感度降低,颜色干扰和眩光5]。白内障可能由许多因素如氧化应激、紫外线辐射、钙含量的镜头,和糖尿病并发症(糖尿病性白内障)[6,7]。Cataractogenesis糖尿病主要是由于生成的自由基导致氧化应激。氧化应激是一个条件,自由基的数量超过了体内的抗氧化剂。这种情况会导致病理条件下,其中一个是白内障。这种氧化应激也可以定义为增加活性氧(ROS)和生理减少内源性抗氧化剂(8)氧化应激密切相关,白内障。氧化应激发生由于氧化剂和抗氧化剂之间的不平衡。这种氧化应激能力可以测量的丙二醛(MDA)生物标志物(7]。丙二醛是诱变的副产品脂质过氧化物酶(9]。

MDA的相关生物标志物的活性氧可以导致晶状体混浊;所以在更高的MDA,脂质过氧化物酶产量增加,导致浊度(10]。MDA的相关性与氧化应激增加了MDA水平,所以它越来越表明氧化应激的存在条件(11]。虽然在白内障患者视力的恢复是通过手术,费用和风险依然存在一个问题12]。Binahong药用植物。生物活性测试binahong植物antihyperlipidemic提到这种植物是有用的,抗炎,镇痛,和退热的13]。

Binahong叶子通常用于治疗各种疾病,包括白内障治疗。Binahong含有抗氧化剂,它可以增加内源性抗氧化剂哪个函数来捕获自由基和抑制氧化应激,这镜头浊度是可以预防,可以自动防止白内障。binahong工厂(Anredera等(Tenore)执行)是落葵科家族的物种之一,广泛应用于医学领域的人类健康,也作为一种抗菌植物病原体(14]。Binahong叶子含有齐墩果酸。Binahong叶是另一种抗氧化剂的来源,可以进一步开发作为白内障治疗的天然成分。

Binahong叶子的本地植物从印尼已广泛用于糖尿病,这是在中国被称为党恒圣气叶;在欧洲,它被称为heartleaf马德拉的葡萄藤叶;在南美,它被称为Madeira-vine [15]。许多研究显示binahong的好处,但是没有多少研究进行了评估binahong叶提取物对MDA水平的影响。本研究旨在确定binahong叶提取物对MDA含量的影响白内障晶状体模型。

2。材料和方法

2.1。Binahong叶剖面

Anredera等(Tenore) Steenis或更好的被称为binahong,根据印尼草药药典文献补充2,来自落葵科部落和支持的结果确定作品2285号/ IPH.1.01 /如果。07年/ IX / 2018在标本Bogoriense生物学研究中心研究所LIPI Cibinong,西爪哇。分光光度法分析或者定量分析基于binahong叶子含有牡荆素生药学参数后进行了标准中列出的印尼草药药典[16]。其他福利binahong叶子治疗伤寒、胃炎、痛风、肠道炎症、肿胀的肝脏和肾脏疾病和在伤口愈合也有作用17]。植物化学的化合物中发现binahong叶子生物碱、黄酮类、皂苷和苷。

2.2。准备的提取

Binahong叶子多达2公斤是cleaned-washed和排水。干(没有阳光直射)后,叶子被切成小块,与70%乙醇浸渍3天。提取集中使用真空旋转蒸发器,直到凝胶形成。

2.3。镜头文化

从屠宰场收集新鲜山羊眼球。的眼球并存储在一个有温度0 - 4°C到实验室。镜头被提取囊外的和孵化房水/溶剂幽默(氯化钠140毫米,氯化钾5毫米,MgCl₂2毫米,NaHCO₃0.5毫米,不(PO₄)₂0.5毫米,CaCl₂0.4毫米,葡萄糖和葡萄糖在0.5毫米5.5毫米)室温和pH值为7.8 72小时。青霉素32毫克和链霉素250毫克被添加到培养基,以防止细菌污染(18,19]。

2.4。代的白内障

葡萄糖的浓度55毫米用于诱导白内障(18]。在高浓度时,镜头通过山梨糖醇代谢途径中葡萄糖和积累的多元醇(糖醇),导致过度的水合作用和氧化应激。这导致cataractogenesis。

研究药物和组设计:共有30个镜头分为组织如下(n在每个类别= 6):(我)组i普通镜头(控制(葡萄糖5.5毫米))(2)第二组。葡萄糖55毫米(3)第三组。葡萄糖55 mM + binahong叶提取物(100μg / ml)(iv)组葡萄糖承运55 mM + binahong叶提取(200μg / ml)(v)集团诉葡萄糖55 mM +槲皮素

2.5。镜头不透明度评估(镜头形态)

经过72小时的孵化过程中,镜头是观察评估镜头的浊度在纸上把镜头后表面接触的纸拍照和观察可见框的评价晶状体的透明度20.]。研究形态的镜头,镜头是网格线的上方,然后,晶状体透明度的变化评估考虑的数量和特征网格(网格线)拍照。

晶状体透明度程度评分包括(210,清晰的镜头没有浊度(清晰可见网格线);1,镜头看起来很模糊和轻微可见浊度(看起来有点浊度网格线但网格线仍然出现);2,整个镜头的镜头出现模糊和扩散讲和(中度浊度网格线,但仍可见);和3,镜头出现不透明和浊度厚透镜(总浊度与不可见网格线)。

2.6。匀浆制备

孵化后72小时,镜头匀浆重量10% w / v是准备在三羟甲基氨基甲烷缓冲液溶液(0.23毫米,pH值7.8)包含0.25×10⁻³M。

EDTA匀浆是离心的速度10000转1小时,和一个上层清液(镜头匀浆)被用来估计生化检查参数,即MDA的决心。

2.7。检查参数估计的丙二醛(MDA)

脂质过氧化作用就是明证的形成活性物质硫代巴比土酸(TBARS)和氢过氧化物(HP)测量Nieshus和萨缪尔森的方法(22,23]。约0.1毫升的组织匀浆(三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液pH值7.4)被添加到2毫升(1:1:1的比例)TBA-TCA-HCl试剂(硫代巴比土酸0.37%、0.25 N盐酸和柠檬酸15%)和放置在一个恒温水槽15分钟,在室温下冷却,离心机在1000克10分钟。上层清液吸光度是衡量一个空白的解决方案在535海里。的值表示为MDA /分钟/ mg镜头蛋白质聚合物。根据其能力从binahong的叶子是一种抗氧化剂,它可以假定binahong叶植物可以平衡失调,出现在镜头。

3所示。结果与讨论

3.1。晶体形态

72小时后观察晶状体混浊孵化图所示1。的描述,(a)是一个正常的镜头(清晰的镜头没有浊度),(b)是葡萄糖55毫米的镜头(失去透明度,没有可见的行),(c)是葡萄糖55毫米的镜头+ binahong提取100μg / ml(镜头看起来模糊,整个镜头的扩散不透明,但网格线仍然可见),(d)是一个镜头在葡萄糖+ binahong提取200 55毫米μg / ml(镜头看起来模糊和轻微可见浊度),(e)是一个镜头在葡萄糖55 mM +槲皮素(镜头出现不透明和轻微可见浊度)。氧化应激是扮演一个角色在糖尿病及其并发症的发展如白内障。在暴露于高浓度的葡萄糖,葡萄糖的使用的镜头开始通过山梨糖醇通路。多元醇的积累(糖醇)导致水分过多和氧化应激导致白内障的一代的出现(24]。高血糖诱导氧化应激通过各种途径(25]。水晶镜片以及氧化膜蛋白进一步结果的形成不溶性蛋白质聚合。这项研究说明了可溶性蛋白质的损失从镜头由于转换为不溶性蛋白质由于晶状体蛋白质氧化的反射的总蛋白质含量下降镜头。

3.2。Binahong提取物对MDA丙二醛水平的影响在白内障晶状体

Binahong叶提取包含许多次生代谢产物的抗氧化作用。在表1,可以看出有积极控制之间的差异结果表明槲皮素的价值积极抑制浊度的镜头。200年的binahong浓度的结果μg接近的值方法积极的控制和远低于阴性对照组(糖尿病镜头)。

表1和图2表明binahong浓度的100年和200年已经能够抑制MDA生产。与剂量的100和200年,它已经显示出一个重要反应。减少MDA水平被认为发生由于binahong叶中提取的抗氧化剂含量高。外源性抗氧化剂来源从binahong植物可以看到从水平的维生素C,维生素E,类胡萝卜素和抗氧化剂酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和(Se-GPx) [25]。binahong代谢物含有抗氧化剂的内容。高binahong提取可以看到从目镜MDA的水平较低。MDA含量低还表明,抗氧化剂可以anticataractogenesis活动。的抗氧化活性binahong由减少表示MDA水平的氧化应激的生物标志。有几种氧化应激的标记,即MDA和脂质氢过氧化物。抗氧化剂可以作为一个工具,将防止活性氧的形成。预防抗氧化剂活性氧的形成作为清道夫,捕获并消除活性氧或作为离子结合的金属离子不作弊(26,27]。MDA称为主导产品从脂质过氧化损伤。皮质性白内障在人类以及核白内障、MDA在各种研究已经发现增加3.5倍正常水平并确定活性物质2-thiobarbiturate酸(TBARS) [28,29日]。MDA水平的增加白内障模型在实验研究中模拟这种效果在人身上发现过。破坏防御机制对活性氧代谢产物已被证明在人类白内障的镜头表达显著减少活动的各种抗氧化酶(28]。

图3显示有5组的镜头匀浆孵化72小时后,和MDA水平测量。在正常组(负控制)和糖尿病组(积极的控制),MDA水平0.0248μg / g和0.0466μg / g,而槲皮素组(标准药物组)的透镜组与糖尿病加槲皮素,MDA是0.0303μg / g。糖尿病透镜组与binahong叶提取物浓度的增加了100个μ克/毫升和200年μ0.0324 g / ml了MDA的水平μg / g和0.0308μg / g的比较糖尿病组binahong 100和200组,和有一个效果binahong降低MDA水平的100年和200年binahong组。比较糖尿病组的槲皮素组(标准药物组),结果是有一个减少槲皮素组MDA含量的影响。这些结果表明,有糖尿病镜头中MDA含量的增加。减少MDA水平发生在镜头给binahong 100年和200年的水平。减少MDA水平被认为发生由于binahong叶中提取的抗氧化剂含量高。除了这些抗氧化剂的存在,次生代谢物,如类黄酮还能够抑制cataractogenesis。抗氧化剂被推迟cataractogenesis [30.]。先前的报道表明,植物化学物质或天然植物产品延迟cataractogenesis通过清除氧自由基的过程。抗氧化剂含量高的过程可以抑制cataractogenesis在眼睛的镜头31日]。基于能力从binahong的叶子是一种抗氧化剂,它可以假定binahong叶植物可以平衡失调,出现在镜头的白内障患者。Keratogenesis抑制发生的途径是通过激进的抑制途径免费用叶绿醇与活性氧(ROS)。这种抗氧化剂会改变大气氧化成氧化。黄酮类化合物已被证明增加抗氧化酶的活性(超氧化物歧化酶和过氧化氢酶)可以防止cataractogenesis亚硒酸引起的下一个(32,33]。植物提取物比花青素,更有效地防止cataractogenesis flavon-3ol、黄烷酮、黄酮,或总黄酮醇(34]。大多数anticataract化合物测试,包括植物提取物和天然化合物,在于他们的抗氧化和/或自由基清除和/或抗炎倾向(35]。

4所示。结论

Binahong (Anredera等(Tenore) Steenis)提取物能够抑制丙二醛(MDA)的生产水平。减少MDA水平被认为发生由于binahong叶中提取的抗氧化剂含量高。在实验的试验羊透镜与葡萄糖感应产生糖尿病白内障,binahong叶提取物显示抗氧化性能通过抑制MDA的生产。Binahong提取浓度在100μ与200年g / mlμg / ml表明binahong叶提取物有anticataractogenesis活动。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢药理实验室,兽医学院、意大利遭到,分配设施在这学习。

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