使用接种体密度降低结核分枝杆菌在MGIT吡嗪酰胺敏感性测试,以防止False-Resistant结果和提高精度:一个多中心的评估

文摘

主平台用于吡嗪酰胺(PZA)的敏感性测试结核分枝杆菌是MGIT文化系统(正)。false-resistant结果以来与该系统的使用,我们进行了一项多中心的评估来确定使用的效果降低细胞密度接种体假电阻率。两个减少接种体密度与规定的制造商(指定为“BD”方法)。降低培养液方法(指定为“A”和“C”)与制造商的协议在所有方面除了培养液的细胞密度。20个基因和表型特征结核分枝杆菌隔离是由十个独立的实验室测试重复使用三剂的方法。False-resistant结果使用标准“BD”方法从21.1%下降到5.7%使用中间(“A”)培养液和进一步下降到2.8%使用最稀释剂方法(“C”)。false-resistant的耐药结果的百分比从55.2%下降为“BD”测试28.8%和16.0%的“A”和“C”测试,分别。这些结果代表了令人信服的证据表明发生false-resistant MGIT PZA磁化率测试结果可以减轻通过使用接种体密度减少。

1。介绍

吡嗪酰胺的antituberculous财产(PZA)在1952年首次报道1和第一个动物研究的结果2,3)和人类临床试验(4发表在同年。这一现象被称为“PZA悖论”,药物几乎没有在体外活动对结核分枝杆菌在标准的文化条件下,它还高在活的有机体内活动(5]。这个矛盾的行为解释为酸性环境的必要性PZA活动(6]。PZA中扮演着一个关键的角色在肺结核治疗方案由于其杀菌活性semidormant杆菌隔离在酸性环境中巨噬细胞的7,8]。这种独特的财产PZA促进当前结核病(TB)的缩短治疗方案和PZA仍然是一个标准的组件在临床药物组合试验,包括那些以新批准的药物bedaquiline和delamanid [9]。

PZA是前体药物,要求pyrazinamidase (PZase)介导的转换pyrazinoic酸(POA)。PZase的生理作用是将烟碱转化为烟酸的一部分细菌NAD救助途径(10]。当烟酰胺是底物,酶被指定为nicotinamidase。PZA可以作为一个替代基质由于其结构相似度接近烟酰胺。两种反应导致的脱氨基作用底物各自的羧酸,生产氨作为副产品。PZase编码的基因pncA(11]。由于PZA的功效是视PZase催化转换PZA POA, apncA突变,可以消除或减少这种酶活性预测授予PZA阻力。DNA测序检测pncA与PZA突变已被证明是高度相关的阻力。两个荟萃分析报告的总体敏感性为83%和87%pncA测序(12,13]。在实践中,DNA测序pncA已经被证明是一个强大的工具PZA抗性基因型诊断的结核分枝杆菌。两个重要说明这种方法,它不能被认为是先天的,所有突变带来阻力,相反,缺乏突变表明易感性。一个特定的影响pncA必须建立突变通过功能基因或重复的协会与耐药表型。突变,不授予电阻已报告(14,15]。PZA阻力与野生型隔离pncA已经观察到,是由于其他机制(16- - - - - -18]。由于这些限制,但仍有必要进行培养PZA敏感性测试。

目前,有两种fda PZA敏测试平台;正欲的BACTEC™MGIT™((BD),火花,MD)系统(从今以后被指定为“MGIT系统”)和Versa-TREK MYCO结核病™(长途跋涉的诊断系统,克利夫兰,哦)系统。MGIT系统是更常用的两种方法(19]。使用MGIT系统与false-resistant有关结果。在一个报告中,57 743(7.7%)的隔离使用MGIT PZA-resistant当测试,但当这些隔离测试使用一个替代方法,放射BACTEC 460 tb,只有33耐(总额的4.4%)。其余24(3.2%)隔离敏感;因此,42%的MGIT耐药结果false-resistant [20.]。假电阻使用MGIT系统也被观察到在几个熟练测试调查。瑞典传染病研究所进行的一项研究发现,控制在两个五个有经验的临床实验室中,阳性预测值的耐PZA MGIT结果分别为45%和63% (21]。MGIT假阻力模型中也观察到绩效评估程序(MPEP),一个能力评估调查由美国疾病控制和预防中心(CDC)。在七个调查(35测试隔离)在2012年到2015年,三个分离株没有突变pncA反复的高速率false-resistant结果(22%,78%,和62%)[22- - - - - -24]。交替PZA抗性相关基因等panD和rpsA没有在这些隔离检查。这些报告,和其他20.,25),提供令人信服的证据表明使用MGIT PZA磁化率测试系统可以产生false-resistant结果。

敏感性测试PZA需要使用酸化文化媒体;pH值必须足够低,以便好PZA活动而不是仅仅如此之低,抑制细菌生长的基础上酸度。pH值5.5到6.0的决心表示两者之间最好的妥协的条件(6,26]。要求一个酸性环境PZA活动使得磁化率测试技术挑战性。随着在体外PZA活动是高度依赖于媒体的酸度,媒体的中和,生成的氨酶转化的副产品PZA POA可能影响PZase活动。pH值增加从5.5到6.1预计提高PZA麦克风从50到200μ克/毫升(27]。培养液浓度是一个关键因素影响PZA活动(5];媒体pH值的大小成正比增加的数量的细菌用于接种文化,并与更高浓度的细胞接种产生虚假的阻力。由于PZA磁化率测试的准确性可以视培养液浓度,必须建立一个培养液细胞密度范围限制pH值增加。本研究的主要目标是确定使用的培养液细胞密度小于规定的MGIT包插入将减轻发生false-resistant PZA磁化率测试结果。

2。材料和方法

2.1。研究参与者

十个实验室参加了研究:六个州和两个县公共卫生实验室、临床实验室,疾病预防控制中心结核病消灭分工实验室分支(磅)。这项研究是通过疾病预防控制中心提供的资金管理协会的公共卫生实验室(APHL)。除疾控中心实验室,实验室都是由一个竞争的过程。综述了应用中心和APHL员工。标准评估得分过程中包括整体经验MGIT PZA磁化率测试,测试卷,和员工的经验。九个得分最高的实验室被授予赠款进行所需的测试。

2.2。菌株的选择

的15株结核分枝杆菌用于本研究从文化获得由美国疾病控制和预防中心集合。菌株的表型和遗传型的特征。PZA麦克风和pncA这些菌株(序列表1)被用来分离成三个通用组:第一组是由总是紧张,或主要测试结果(大于70%),对100年的PZA临界浓度μ使用MGIT系统g / ml;第二组,总是或主要PZA-susceptible;和第三组的结果在敏感和耐药间摇摆不定,因此被归类为不确定。

2.3。紧张的准备

每个15研究菌株培养在100毫升的7 h9麦德汤补充与牛albumin-dextrose-catalase 37°C和偶尔的温柔搅拌直到浑浊的然后在1毫升整除。两瓶准备5株。副本有不同的标识符和包括评估再现性。总的来说,研究小组包括20隔离。瓶储存在−70°C到包装和运到研究网站。

2.4。PZA敏感性测试

10实验室执行PZA敏测试以下3种不同的协议使用BACTEC MGIT系统(图1)。第一个协议是一个小的修改制造商的协议中描述MGIT PZA装备包插入(28)和总结。接种物是由vortex-mixing种子管10秒,然后允许它解决了15分钟。0.5毫升整除来自定居种子管的顶部和用于接种文化包含100管μg / ml PZA(注:本剂制备方法中描述略有不同,包插入它没有指定vortex-mixing种子管,让它来解决和吸气管的顶部)。类似的,第二个0.5毫升整除被转移到一个管含4.5毫升无菌生理盐水产生1:10稀释。这种稀释管涡5秒钟,然后允许设置为5分钟。0.5毫升整除取自这稀释管用于接种管没有PZA(控制)。每一对文化管(控制和PZA)孵化MGIT仪器。因为这个测试执行制造商的指示后,我们指定“BD”方法。

每个应变测试使用两个额外的协议,我们指定为“A”和“C的方法。”这两种方法都是相同的“BD”方法除了种子管稀释管用于接种文化。在无菌生理盐水稀释都准备好了。方法”,“控制(没有PZA)管是接种1:25稀释种子管和PZA包含管是接种1:2.5稀释的种子。“C”使用方法1:50 - 1:5种子管稀释,分别接种PZA管控制。重要的是要强调,尽管稀释用在每个不同的三种方法,1:10比率(即控制和PZA管维护。,没有稀释,1:10 (“BD”方法),1:2.5和1:25 (“A”方法),和1:5和1:50 (“C”方法))。此外,培养液的体积是相同的所有管。

2.5。分配算法分类PZA磁化率作为预测的结果

开发了一种算法,分配隔离预测类别的敏感,耐药或不确定(表1)。该算法由一个发展相关的问题pncA基因型和MGIT PZA每个孤立的结果。十一隔离缺乏pncA基因突变,并被列为敏感。一个隔离沉默突变,因此列为敏感。MGIT PZA测试结果被用来分类的八个隔离产生的或监管pncA突变。两个pncA突变体(隔离18 - 22)总是敏感,耐两个(隔离4和14)总是在100年μ克/毫升PZA。剩下的四个隔离的分类提出了最大的挑战,因为此前PZA磁化率测试结果之间的不一致。一个隔离(17)分为耐是因为先前的结果PZA敏测试主要是耐药。前面PZA其他三个分离的结果(数字19日21日和27)是高度可变的,因此被归类为不确定的,而不是分配一个预测分类的结果。

2.6。统计分析

和日期PZA测试结果收集和输入到Excel电子表格提供参与实验室。一旦在每个站点数据收集完成后,数据被传送到首席研究员。分析工具用于评估数据包括Microsoft Excel(微软,微软WA)和SPSS 21.0版(、IBM公司,纽约Armonk)。敏感性、特异性、正面和负面预测值的MGIT PZA测试确定通过交叉表的结果,预测PZA磁化率测定的比较器。本研究决心不是人类受试者的研究由美国疾病预防控制中心,国家中心艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病,和结核病预防、45 CFR 46所定义的。

3所示。结果

数据从一个实验室被排除在外的总体重复再现性的测试是低于70%。因此,数据仅包括9 10参与实验室的分析。从参与网站直言PZA敏感性测试结果相比,我们的算法分配预测结果。因为只有耐药或敏感的研究结果是可能的,有四个比较结果:true-susceptible, false-susceptible true-resistant, false-resistant。是那些真正的比较研究结果和预测结果是相同的和虚假的比较是那些研究结果不同于预测结果。两个菌株(孤立隔离21日和27日19日)被认为是“不确定”而不是分配一个预测的结果。编译MGIT PZA磁化率测试结果如表所示2。有效的测试显示在表的数量2不同于预期的总(306)因为在某些情况下测试没有完成(“超时”)在21天内仪器协议。true-susceptible结果的百分比从61.2%上升(186 304)使用标准的76.4% (BD)方法(226 296)使用“A”方法(1:2.5稀释)和79.2%(230 289)使用“C”方法(1:5稀释)。true-resistant结果的百分比从17.1%下降304(52)标准方法以14.2%(42 296)和14.5%(289年42)“A”和“C”方法,分别。true-resistant结果与增加剂稀释的下降伴随着false-susceptible相应增加的结果。值得注意的是,81.8%(18 22)这些false-susceptible结果涉及到一个隔离(17)剩下的4个实例在另一个隔离(14号)和所有在同一个实验室。“BD”,“A”和“C”培养液协议结果78.3%(238 304),90.5%(268 296)和94.1%(272 289)整合,分别预测结果。False-resistant结果从21.1%下降近四倍(64 304)使用标准的“BD”方法使用中间5.7% 296年(17)(“A”)培养液和2.8%(289 8)使用最稀释剂方法(“C”)。两个false-susceptible结果发生使用“BD”方法,虽然有11和9实例使用“A”和“C”方法,分别。结果用“BD”、“,”和“C”培养液协议是21.7%(66 304),296(28),9.5%和5.9% 289年(17)不整合,分别预测结果。总的来说,大大减少false-resistant结果发生使用更稀释接种物的方法(“A”和“C”)相比标准(BD)剂。 Study results for the three isolates characterized as “inconclusive” showed that isolate 19 was susceptible in 72% of valid tests by the “BD” method (13 susceptible versus 5 resistant results) and susceptible in 100% of valid tests by both the “A” and the “C” methods. This strain had apncAHis82Tyr突变和其他没有耐药性。隔离21日和27日被发现使用“BD”方法主要耐药(67%和61%,分别地。)和主要敏感的“A”和“C”方法(72%和78%,resp)。这个隔离了pncAAla28Thr突变也耐异烟肼(INH)、利福平(RMP)、乙胺丁醇(EMB)。“断开”事件的发生增加了使用“BD”剂方法从2到10和17名使用“A”和“C”方法,分别。扣除19“断开”事件发生在一个应变(隔离11岁和23),“断开”总数成为1,4和5为“BD”,“A”和“C”方法,分别。平均天数从测试开始完成(不含“断开”事件)是9,10,11天的“双相障碍”,“A”和“C”方法,分别。

三个PZA易感性的诊断可靠性测试(“BD”,“A”和“C”接种方法)在桌子上3。这个表呈现耐药或敏感的百分比结果true-resistant或true-susceptible,分别。例如,在“BD”方法的情况下,有116耐药结果(52真的——和64 false-resistant);因此,44.8%(52 116)的耐药结果true-resistant。同样,“BD”方法,98.9%(186 188)的测试结果true-susceptible敏感。这些百分比对应测试的阳性和阴性预测值。有一个不同的百分比增加耐药结果true-resistant:从44.8%(116年52)“BD”测试59(42)的71.2%和84.0%(42 50)为“a”和“C”测试,分别。相反规定,false-resistant的耐药结果的百分比从55.2%下降(64 116)的“BD”测试28.8% 59(17)和16.0% (42)8“A”和“C”测试,分别。总之,耐的积极的表语值测试结果是大大提高了使用两个低密度接种物。有一个最小的测试方法之间的差别影响结果的百分比true-susceptible,所有方法有值大于95%。

培养液浓度没有影响的敏感性结果隔离在“老是”类别(表中4)。五的隔离”总是受到“类别没有false-resistant结果,无论培养液浓度(隔离1、8、11、22和23)。一个隔离(18号)有四个false-resistant结果使用“BD”培养液和没有使用两种减少剂的方法。形成鲜明对比,培养液浓度有很大影响PZA易感性的结果对于那些隔离归类为“主要易感”(隔离12、13、16、24、25日和26日)。false-resistant要少的多,结果使用两个减少剂方法相比“BD”方法。考虑到所有20隔离的结果相结合,有统计上的显著差异(皮尔逊卡方检验,值< 0.05)之间的“BD”和“A”方法和“BD”和“C”方法而不是“A”和“C”方法。卡方分析三种方法不能有效执行个体隔离由于小数量的测试。

研究结果和预测MGIT PZA测试结果比较来评估这些结果的准确性为每个稀释方法(表5)。一个精确的结果是一个实际的实验分类结果是一样的预测结果。相反,一个不准确的结果发生在报告的分类结果与预期相反的结果。测试精度提高78.3%(238 304)使用“BD”培养液到90.5%(268 296)和94.1%(272 289)使用“A”和“C”接种物,分别。虽然精度测量的正确性测试结果,精确测量结果的再现性无论精度(表6)。精确和准确的结果的百分比从72.2%上升(109 151)使用“BD”培养液到87.6%(127 145)和93.5%(131 140)使用“A”和“C”剂稀释,分别。精确的数量相应减少但不准确的结果发生,减少来自23个实例“BD”剂方法为“A”方法和10 4“C”方法。不精确的结果的比例从12.6%降至151年(19)使用“BD”剂方法5.5%(145 8)和3.6%(5 140)使用“A”和“C”接种物方法,分别。总体来说,测试准确度和精密度都显著改善使用两个减少细胞密度接种物而“BD”培养液。

4所示。讨论

这项研究的结果提供了令人信服的证据表明,使用的培养液的细胞密度MGIT PZA敏测试可以产生深远的影响测试精度。这剂效果似乎没有一个普遍的现象,而是似乎仅限于菌株的一个子集。当PZA磁化率测试结果为每个单独培养液法检查,有明确区分那些隔离列为“老是”到100年μg / ml PZA和“主要易感”类别。六个主要受“隔离有很高的假阻力当“BD”方法;然而,所有结果false-resistant明显减少接种体密度较低时使用。相比之下,几乎没有false-resistant结果中总是容易分离,不管培养液浓度。有些菌株显然非常敏感剂的效果,对于那些压力,使用方法较低细胞密度接种体大大减少false-resistant结果的可能性。的两个菌株被认为“不确定”,研究结果表明,分离出19最有可能可以归类为敏感,因为所有网站发现它是容易使用的“A”和“C”方法。其他“不确定”应变(隔离21日和27),同时显示减少电阻使用“A”和“C”方法,没有说明清楚易感性PZA因此它真正的分类仍然是不确定的。

本研究关注PZA虚假阻力;因此,只包含三个预测抗药性。两个菌株(数字4和14)PZA麦克风远高于100年的临界浓度μg / ml,被包括在研究抗控制。这两个菌株PZA-resistant所有实验室和接种方法除了一个实验室,有四个false-susceptible结果一个应变(14号)使用“A”和“C”方法。因为这些研究仅限于单个实验室,我们假设这些都是错误的结果。第三PZA-resistant应变(17)耐多药结核病,参与了几个爆发在1990年代早期(29日- - - - - -31日]。有矛盾的报告关于这一毒株(PZA敏感性的32,33]。这种不一致是推断的结果Thr47→阿拉巴马州pncA突变产生PZA麦克风靠近临界浓度(34]。基于之前MGIT PZA测试,使用标准的(BD)协议,我们分类这一毒株”主要耐药”,研究结果证实了我们的经验。当测试使用较低细胞密度“A”和“C”接种物,敏感和耐药结果的数量几乎是等价的。这一毒株是故意选择研究证明实现准确MGIT PZA敏感性测试结果将变得更加有挑战性的麦克风应变接近临界浓度(35]。在这种情况下,结果可能是高度受接种体密度的影响。

一个重要问题有关细胞密度较低剂的使用是影响完成测试所需的时间长度。培养液的细胞密度成反比关系,测试完成预期的时间。这样一个关系是观察,测试完成的时间被延长一个或两天使用中间值和最低细胞密度接种物,分别。一或两天的延迟测试完成,以换取显著减少false-resistant)伴随改善测试精度会被接受的。在某些情况下,然而,使用降低细胞密度接种体可能导致未能达成测试仪器21天内完成规定的协议。增加数量的这种“断开”事件使用低细胞密度接种物在一个应变(隔离11岁和23)。这一毒株,尤其是生长缓慢,被选为本研究基于这个特点。根据我们的经验,这种慵懒的菌株是罕见的。排除这种不同寻常的压力,只有一个小“断开”事件的发生增加使用低细胞密度接种物。一个不完整的测试的可能性而使用稀释剂可以接受鉴于false-resistant大幅削减在这项研究中观察到的结果。

有很多关于如何翻译成这些发现可能实验室实践。一个选择是最初测试所有使用“C”方法隔离剂,然后仔细检查每个结果考虑隔离的抗菌谱。我们已经表明,PZA-resistant结果使用低细胞密度“C”剂有更高的阳性预测值比使用标准的耐药结果(BD)培养液。当一个隔离PZA-resistant发现使用“C”方法,也是对一个或多个其他公开一线药物(s), PZA结果是支持的事实,因为PZA monoresistance结核分枝杆菌是非常罕见的(36]。PZA-resistant结果,结合没有其他一线药物耐药性,仍然可以使用“C”方法错误,因为错误的阻力不是消除虽然是显著降低。另一种解释为PZA monoresistant结果是隔离牛分枝杆菌(内在PZA-resistant由于具体pncA多态),而不是结核分枝杆菌。的困境PZA monoresistant遇到的结果将是更频繁地使用降低细胞密度接种体。

我们发现几乎没有证据证明低细胞密度增加培养液false-susceptible结果的发生,除了一个孤立的PZA麦克风靠近临界浓度。自从PZA-resistant结核分枝杆菌通常是对一个或多个其他公开的药物的可能性false-susceptible PZA结果当隔离pan-susceptible相当低。在孤立的情况下发现PZA-susceptible使用较低细胞密度接种体,但其他一线药物耐药性,可能还是需要谨慎地重新测试隔离使用标准培养液法排除远程假易感性的可能性。总的来说,使用一个细胞密度降低培养液可能导致更需要重复PZA测试。

5。结论

这项研究清楚地表明,MGIT PZA灵敏度测试是受false-resistant结果,可以减轻这一问题使用较低细胞密度接种体。而这个问题和建议的解决方案之前报道,这些研究仅限于一个实验室25,37]。这是一个严格控制的研究涉及多个实验室,所有测试相同的菌株面板,使用相同的方法。本研究建立的概念,使用降低细胞密度剂可以改善的准确性MGIT PZA灵敏度测试通过减少false-resistant结果。这些发现提供了科学依据,可能通知实验室决定考虑实现修改MGIT PZA灵敏度测试协议。临床实验室需要验证之前修改的方法根据适当的监管要求的实现。

信息披露

这份报告的调查结果和结论是完全的责任作者,不一定代表官方观点协会的公共卫生实验室(APHL)、疾病控制和预防中心(CDC),或卫生和人类服务。引用在这个手稿到任何特定的商业产品,过程,服务,制造商,公司不构成其背书或建议由美国政府或疾病预防控制中心。本文中描述的研究以前,在海报的形式,在2017年的会议国际防痨和肺部疾病联合会,北美地区。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

这个项目是100%的联邦基金资助112500美元通过合作协议。U60HM000803 APHL和疾病预防控制中心之间。以下个人起了重要作用,本研究的开展:艾米丽·迪恩,金正日迪翁,大卫·戈多斯泰西大厅,唐娜Kohlerschmidt,兰德尔·莫里斯,南希·罗宾逊,马公共卫生实验室Mycobacteriology部分员工,朱莉Tans-Kersten,戴夫Warshauer,和保罗·泽尔。

引用

1. 库什纳,h . Dalalian j·l·Sanjurjo et al .,“实验性的肺结核化疗。二世。吡嗪酰胺的合成及相关化合物。”美国化学学会杂志》上,卷74,不。14日,第3621 - 3617页,1952年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. l·马龙Schurr。A, h·林德et al .,“吡嗪酰胺的影响(aldinamide)实验小鼠肺结核,”美国对肺结核,卷65,不。5,511 - 518年,1952页。视图:谷歌学术搜索
3. f·德绍,r·l·耶格尔f . j .汉堡和j·h·威廉姆斯,“吡嗪酰胺(aldinamide)在实验性豚鼠的肺结核,”美国对肺结核,卷65,不。5,519 - 522年,1952页。视图:谷歌学术搜索
4. r·l·伊格尔·w·g·门罗,f·德绍,“吡嗪酰胺(aldinamide)治疗肺结核,”美国呼吸和重症监护医学杂志》上,卷65,不。5,523 - 546年,1952页。视图:谷歌学术搜索
5. y张和d Mitchison”,吡嗪酰胺的好奇的特点:回顾”,Int J Tuberc肺说,7卷,不。1,p。21日,2003。视图:谷歌学术搜索
6. w·麦克德莫特和r . Tompsett体外激活吡嗪酰胺和烟酰胺在酸性环境中,“美国对肺结核,卷70,不。4,页748 - 1954。视图:谷歌学术搜索
7. l . Heifets和p . Lindholm-Levy吡嗪酰胺杀菌活性在体外对semidormant结核分枝杆菌细菌数量,”美国的呼吸道疾病,卷145,不。5,1223 - 1225年,1992页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. d . a . Mitchison”公开药物短程化疗的作用。”肺结核,卷66,不。3、219 - 225年,1985页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. ai Zumla, s . h·吉莱斯皮m .霍尔舍et al .,“公开新药物、治疗和辅助治疗:需要、进步,和未来前景,”《柳叶刀传染病,14卷,不。4、327 - 340年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. c . Vilcheze b . Weinrick K.-W。黄、陈b和w·雅各布斯Jr .)“NAD +营养缺陷型结节杆菌bacteriocidal,”分子微生物学,卷76,不。2、365 - 377年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. 答:天蝎座和y张”,突变pncA,一个基因编码pyrazinamidase / nicotinamidase,导致电阻antituberculous药物吡嗪酰胺结核菌,”自然医学,卷2,不。6,662 - 667年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. s . m . Ramirez-Busby和f . Valafar突变的系统回顾pyrazinamidase与吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌临床分离株,”抗菌药物和化疗卷,59号9日,第5277 - 5267页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. k . c . Chang w·w·紫杉,y,“在结核分枝杆菌吡嗪酰胺磁化率测试:系统回顾和荟萃分析,“抗菌药物和化疗,55卷,不。10日,4499 - 4505年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. m·g·惠特菲尔德r·m·沃伦·e·m·streich et al .,“不授予吡嗪酰胺耐药性的结核分枝杆菌pncA多态性在断点MGIT 100微克每毫升的浓度”临床微生物学杂志,53卷,不。11日,第3635 - 3633页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. s . o·西蒙斯j . Van Ingen范德朗t . et al .,“验证pncA基因测序结合分枝杆菌生长指示管测试方法敏感性结核分枝杆菌吡嗪酰胺,”临床微生物学杂志,50卷,不。2、428 - 434年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. w·史,x, x江et al .,“吡嗪酰胺抑制trans-translation结核分枝杆菌”,科学,卷333,不。6049年,第1632 - 1630页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. j·w·史,陈、冯et al .,”天冬氨酸脱羧酶(PanD)作为新目标结核分枝杆菌吡嗪酰胺的”新兴微生物与感染,3卷,不。8 p . e58 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. j . Werngren大肠Alm, m . Mansjo g . a .土地“Non-pncA种基因但Pyrazinamide-Resistant结核分枝杆菌:这是为什么呢?”临床微生物学杂志,55卷,不。6,1920 - 1927年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 疾病控制中心,结核病实验室总报告,亚特兰大,乔治亚州:美国健康和人类服务的部门。2013年。
20. p . Chedore l . Bertucci j·沃尔夫,m·沙玛和f .吞云吐雾,“潜在的错误结果表明阻力当使用bactec MGIT 960系统用于测试易感性的结核分枝杆菌吡嗪酰胺,”临床微生物学杂志,48卷,不。1,第301 - 300页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. s . Hoffner k . Angeby大肠Sturegard et al .,“熟练的结核分枝杆菌对吡嗪酰胺药敏测试:瑞典的经验,“肺结核和肺部疾病的国际期刊,17卷,不。11日,第1490 - 1486页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. 疾病控制中心,模型性能评估程序:结核分枝杆菌药敏测试程序。美国健康和人类服务部门。2012年11月。2012年。
23. 疾病控制中心,模型性能评估程序:结核分枝杆菌complax药敏测试程序。美国健康和人类服务部门。2014年5月。2014年。
24. 疾病控制中心,复杂模型绩效评估程序:结核分枝杆菌药敏测试程序。美国健康和人类服务部门。2015年11月。2015年。
25. c . Piersimoni a . Mustazzolu f . Giannoni s Bornigia g . Gherardi和l . Fattorini”预防假阻力结果在检测结核分枝杆菌的敏感性的吡嗪酰胺bactec MGIT 960系统使用降低培养液,”临床微生物学杂志,51卷,不。1,第294 - 291页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. g . b . Mackaness“吡嗪酰胺和烟酰胺的细胞内激活,”美国对肺结核,卷74,不。1956年5日,页。718 - 28日。视图:谷歌学术搜索
27. s Permar张y, z太阳,”条件,可能影响结果的敏感性检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺,”医学微生物学杂志》,51卷,不。1,42-49,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. 和公司,正欲BD BACTEC MGIT PZA装备的抗结核分枝杆菌的敏感性测试。包插入L005486JAA (01)。正欲和Comapany。火花。2014年。
29. t·r·弗里登“多机构研究高度耐药结核病疫情,”美国医学协会杂志》上,卷276,不。15日,第1235 - 1229页,1996年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. v . g . Coronado c . m . Beck-Sague m·d·赫顿et al .,“耐多药结核分枝杆菌的传播与人类免疫缺陷病毒感染的人在一个城市医院:流行病学和限制性片段长度多态性分析,“《传染病杂志》上,卷168,不。4、1052 - 1055年,1993页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. s e . Valway s b·理查兹j . Kovacovich r . b . Greifinger j·t·克劳福德和s w·杜利,“耐多药结核病爆发在纽约州立监狱,1991年,“美国流行病学杂志》,卷140,不。2、113 - 122年,1994页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. d·休利特,d . l .角和c . Alfalla“耐药结核病:不一致的吡嗪酰胺磁化率测试的结果,“美国医学协会杂志》上,卷273,不。12日,第917 - 916页,1995年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. j . Dormandy a . Somoskovi b . n . Kreiswirth j·r·德里斯科尔d . Ashkin和m . Salfinger“吡嗪酰胺的敏感试验结果之间不一致的参考BACTEC 460 tb方法和pncA DNA测序感染耐多药患者W-Beijing结核分枝杆菌菌株,”胸部,卷131,不。2、497 - 501年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. g . p .摩洛克j·t·克劳福德w·r·巴特勒et al .,“pncA突变体的表型鉴定结核分枝杆菌”,抗菌药物和化疗,44卷,不。9日,第2295 - 2291页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. j . Werngren e . Sturegard p . Jureen k . Angeby s Hoffner和t . Schond”重新评价的临界浓度对吡嗪酰胺药敏检测结核分枝杆菌使用野生型麦克风分布和pncA基因测序,”抗菌药物和化疗卷,56号3、1253 - 1257年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. m·m·汉纳·e·p·德斯蒙德,g . p .摩洛克·g·h·Mazurek和j·t·克劳福德Pyrazinamide-monoresistant结核分枝杆菌在美国,“临床微生物学杂志,39卷,不。2、647 - 650年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. c . Piersimoni a . Mustazzolu a Iacobino et al .,“吡嗪酰胺敏感性测试:提出新的标准与BACTECTM MGITTM 960系统,”肺结核和肺部疾病的国际期刊,20卷,不。12日,第1680 - 1677页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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