细胞因子多态性,其影响力和水平对公开在巴西的肺结核患者的治疗

文摘

细胞因子在疾病活动性结核病起着关键作用,描述了细胞因子基因与细胞因子水平的改变。因此,本研究的目的是验证IFNG IL12B, TNF、IL17A IL10, TGFB1基因多态性影响免疫反应的巴西肺结核(PTB)的患者在不同时间点对公开治疗(T1、T2和T3)。我们的结果显示以下关联:IFNG+ 874 T等位基因IFNG+ 2109与更高的干扰素-等位基因γ水平;IL12B+ 1188 C等位基因与il - 12水平较高;肿瘤坏死因子−高出308等位基因与肿瘤坏死因子-α等离子体水平控制和mRNA水平在T1肺结核病人;IL17A一个等位基因在rs7747909 IL-17水平较高;IL10−819 T等位基因与il - 10水平较高;和TGFB1TGF - 29 + CC基因型高β等离子体在肺结核病人T2水平。目前的研究表明IFNG+ 874吨/年,IFNG+ 2109 a / G,IL12B+ 1188 a / C,IL10−819 c / T,TGFB1+ 21 c / T与微分肺结核患者细胞因子水平和可能发挥作用的启动和维护了细胞免疫在结核病和活动性疾病的结果在公开处理。

1。介绍

结核分枝杆菌(结核分枝杆菌)是一种细胞内专性需氧病原体有偏爱肺部(1]。巨噬细胞启动的吞噬作用结核分枝杆菌杆菌和调节免疫反应等促炎细胞因子介导的肿瘤坏死因子-α。效应T淋巴细胞(T细胞)和自然杀伤(NK)细胞分泌干扰素-γ激活肺泡巨噬细胞产生活性中间体的氮气和氧气,抑制增长和促进分枝杆菌死亡(2]。主要由巨噬细胞和树突细胞产生白介素,免疫反应的一个关键的角色结核分枝杆菌,桥接先天和适应性免疫。此外,白介素诱发T细胞和NK细胞产生促炎细胞因子,如干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α同时调节生产IL-17 [2,3]。干扰素-的协同反应γ白介素、肿瘤坏死因子-α和IL-17激活巨噬细胞,刺激这些细胞,消除细胞内病原体,作为细胞免疫应答的主要效应机制(4]。

尽管Th1反应的保护作用结核分枝杆菌,某些细胞因子,如肿瘤坏死因子-α,与疾病的免疫发病机理(5]。为了防止组织损伤,活动性结核病与减少Th1和增加生产和行动Th2和T抑制细胞因子产生的监管(Treg)细胞,il - 10, TGF -β分别处于待发状态行为的巨噬细胞,调节促炎细胞因子,减少T细胞的抗原呈递功能(6]。TGF -β还参与纤维化的感应,一个标志的肺结核病(7]。

肺结核(TB)的动态疾病是复杂的,各方面的parasite-host交互导致结果的发生和演示。在这个场景中有一个重要的贡献的人类接触后基因对疾病的易感性结核分枝杆菌(8- - - - - -10]。细胞因子有关键作用的防御分枝杆菌和他们的基因可能被视为候选主持人对活动性结核病的发病的易感性疾病。

细胞因子多态性和人类结核病易感性之间的关系已经在研究报告体外细胞因子的生产在分枝杆菌抗原及其相关变异基因型;然而很少有研究调查他们的角色在整个细胞因子调节反应在治疗肺结核(11- - - - - -19]。我们假设研究的实际整体免疫细胞因子模式的肺结核病人可能是重要的我们对活动性疾病的理解和可能的恢复和建立生物标记抗结核治疗效率。因此本研究的目的是验证的影响IFNG,IL12B,肿瘤坏死因子,IL17A,IL10,TGFB1细胞因子基因多态性对整个反应的巴西肺结核患者在抗结核治疗。

2。材料和方法

2.1。研究人群

研究小组参加31日巴西参加传染病和寄生虫病的病人服务Botucatu医学院大学医院,UNESP Botucatu教学卫生中心和初级医疗保健单位Botucatu和周边地区肺结核诊断证实了痰涂片或培养积极性结核分枝杆菌或clinical-epidemiologic和图像数据与实验室考试(放射学或计算机断层扫描(CT))兼容活动性结核病。肺结核患者并发与其他活跃的肉芽肿性疾病或艾滋病毒被排除在外。所有患者诊断为肺结核接受治疗6个月,使用四个一线药物:异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺和利福平。免疫功能,评估病人的样本收集基于抗结核治疗时间轴,定义为T1:确诊后治疗和不超过一个月;T2:为期三个月的治疗;和T3: 6个月的治疗。每个时间点包括T1 (Patient-specimen分布);T2 ();T3 ();有两个时间点T1和T2 ();和三个时间点T1, T2和T3 ()。正常对照组(C),我们研究了20卫生保健工作者Botucatu医学院(Botucatu、SP、巴西),男性(平均年龄40.4岁),9和11个女性(平均年龄34.1岁),没有临床投诉和结核病史,自身免疫性疾病,和其他传染性疾病。所有控件BCG接种在童年和结核菌素皮肤试验(TST)积极(硬化≥5毫米)。所有患者和控制同意参与这项研究,在研究澄清和书面知情同意。

2.2。单核苷酸多态性(SNP)基因分型

在当前的研究中七个单核苷酸多态性进行了分析:IFNG+ 874 t / A;IFNG+ 2109 / G;IL12B+ 1188 a / C;肿瘤坏死因子−308 g / C;IL17Ars7747909;IL10−819 c / T;和TGFB1+ 29 c / T。这些多态性被选中后验证他们的存在在高频(5%)在巴西人口。

在当前的研究中,5毫升的外周血是EDTA血管(通过标准放血过程),从肺结核病人()和控制(在基线(T)₀),基因组DNA提取白细胞用人DNAzol商业试剂(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA),根据制造商的指示。量化和提取的DNA纯度测定的分光光度计(NanoDrop 2000热费希尔科学)。放大的基因组区域的利益是由使用20到50 ng的DNA, PCR Taq重组DNA聚合酶,每个核苷酸的0.2毫米(deoxy-nucleotide-adenine、鸟嘌呤、胸腺嘧啶或cytosine-triphosphate), 0.3 - 1毫米的浓度的每个特定的引物,适当的缓冲,和超纯水。的IFNG+ 874 t / A基因通过所述PCR-ARMS Pravica et al。20.]。的变化IFNG+ 2109 / G创建一个限制酶的网站AciI并通过一组之前报道PCR-RFLP方法(21]。的IL12B+ 1188的基因进行了使用PCR-RFLP方法依照Garcia-Gonzalez et al。22]。荧光技术TaqMan技术(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)应用于生产的基因型IL17A和TGFB1多态性根据制造商的指示。的肿瘤坏死因子−308 a / G基因型定义使用PCR-RFLP方法按照威尔逊et al。23]。

2.3。细胞因子基因表达的实时逆转录酶聚合酶链反应(RT-qPCR)

评价干扰素-γ白介素、肿瘤坏死因子-αIL-17, il - 10, TGF -β信使rna表达,20毫升的外周血肝素化血管的标准程序,在一个单一的时间点控制()和三个连环肺结核病人的时间点(),基于对公开治疗时间表(T1、T2和T3),正如前面定义的。外周血单核细胞(PBMCs)被孤立Histopaque梯度分离方法(24]。层富含淋巴细胞和单核细胞无菌,洗两次与PBS 15分钟在1500 RPM。1毫升的细胞悬液是resuspended PBS和识别和细胞计数测定的可行性与机器人解决方案(50μ50 L整除的细胞悬液μL染料溶液的5%)。总RNA提取PBMC (细胞/毫升)使用试剂盒制备试剂(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA),根据制造商的指示。相对纯度、浓度和孤立的RNA质量分光光度法测定和A260-A280海里的比值超过1.8为所有准备工作(NanoDrop1 1000分光光度计,热科学)。为了确保完整切除基因组DNA的痕迹,1μ克总RNA孵化DNase我(Amp年级)。

合成第一链cDNA与1执行μ每60 g的总RNAμL使用逆转录酶反应超级脚本II(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)和随机引物(3μ克/μL)(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)根据制造商的指示。核糖核酸酶H后5分钟内(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)添加和孵化37°C 20分钟。

每个目标的相对量化mRNA进行使用标准曲线相对实时PCR方法数据处理7300实时PCR系统(美国应用生物系统公司)和电力SYBR绿色PCR反应混合液(25]。引物组用于qPCR(放大细胞因子mRNA的碎片和人类β肌动蛋白mRNA,内生mRNA控制)展示在表1。每个q-PCR设置在20毫升,复制里面的每一个正向和反向引物0.2毫米,2毫升的模板cDNA、10μL qPCR大师混合,和7.2毫升nuclease-free水。此外,“没有模板”控制包含在重复在每板来验证扩增子没有污染。PCR条件如下:最初在95°C变性10分钟在95°C和40周期15年代和60年代60°C,紧随其后的是一个融化曲线。放大的具体记录证实了融化曲线生成配置文件在每次运行。控制表达式的意思是收到样品的相对价值1.0和浓度在所有其他样本归一化比例。

2.4。血浆细胞因子水平

血浆样本来自相同的外周血用于细胞因子的基因表达控制()和三个连续时间点从肺结核患者,根据公开治疗时间表(T1、T2和T3),正如前面定义的。样本保持冷冻(−80°C),直到当天使用,然后在室温下解冻使用它们。Quantikine ELISA试剂盒(R & D系统)被使用,根据制造商的指示,来衡量干扰素-γ白介素、肿瘤坏死因子-αIL-17, il - 10, TGF -β等离子体水平和方法灵敏度是按照每个工具包。细胞因子分析是不可能的在所有31肺结核病人因为样品也被用于其他实验;因此个体的分布在细胞因子是干扰素-γ():T1 ();T2 ();T3 ();有两个时间点T1和T2 ();有两个时间点T1和T3 ();和三个时间点T1, T2和T3 ();白介素、IL-17和il - 10 ():T1 ();T2 ();T3 ();有两个时间点T1和T2 ();和三个时间点T1, T2和T3 ();肿瘤坏死因子-α():T1 ();T2 ();T3 ();有两个时间点T1和T2 ();和三个时间点T1, T2和T3 ();TGF -β():T1 ();T2 ();T3 ();有两个时间点T1和T2 ();和三个时间点T1, T2和T3 ()。

2.5。统计分析

比较不同基因型之间的控制和使用Mann-Whitney患者团体测试双尾价值。为分析对比的三个时间点治疗肺结核病例组(T1、T2和T3),弗里德曼测试是用来验证时间点不同于其他,邓恩的多个比较测试应用作为后续测试。结果被认为是重要的时候。测试使用GraphPad棱镜执行5.00版Windows, GraphPad软件(美国圣地亚哥,CA),http://www.graphpad.com/。

3所示。结果

3.1。肺结核病人的人口统计特征

性别和年龄分布在肺结核病人23岁男性(平均年龄48.8岁)和8女性(平均年龄38.9岁),所有患者BCG(卡介苗)接种疫苗在童年。尽管年龄和性别的巨大差异控制和肺结核病人群体,这些变量没有影响细胞因子的表达和等离子体水平(数据未显示)。

肺结核病人的诊断证实了痰涂片或培养积极性结核分枝杆菌(),痰涂片或培养阳性结核分枝杆菌和图像考试(放射学或CT)兼容活动性结核病()或图像考试(放射学或CT)兼容活动性结核病()单独与诊断确认后与临床反应的开始抗结核治疗。所有患者呼吸道症状符合呼吸困难,咳嗽,和ventilation-dependent疼痛,和大多数面对宪法症状,符合减肥,发烧,和弱点在抗结核治疗的开始(T1)。症状不太频繁以及治疗时间(T2)最后(T3)所有的病人被认为是恢复。研究分类肺结核的严重程度最小,温和,或先进的疾病,这取决于clinical-epidemiologic数据的特征和/或图像考试(放射学或CT) [16,19]。在我们的医学评估这些特征的研究表明,我们所有的结核病患者一种温和的活跃。

3.2。一般免疫反应在抗结核治疗

一般来说,当控制相比,等离子体水平的干扰素-γ、il - 12、il - 10中类似的肺结核病人在抗结核治疗。IL-17和TGF -β等离子体水平提高肺结核病人中只有在抗结核治疗的开始(T1)和肿瘤坏死因子-等离子体水平α低肺结核病人抗结核治疗期间(T1、T2和T3)(数据没有显示)。相比,控制,信使rna表达水平的il - 12, TNF -α,IL-17类似在肺结核病人抗结核治疗期间(T1、T2和T3)。干扰素-γ和il - 10增加肺结核病人抗结核治疗期间(T1、T2和T3)和TGF -β提高肺结核病人中只有在T2时间点(数据没有显示)。

3.3。的影响IFNG+ 874 t / A +干扰素- 2109 A / G基因多态性γ等离子体和信使rna表达水平

T等位基因携带者IFNG+ 874 t / A(在/ TT)在肺结核患者明显高于等离子体和干扰素-信使rna表达水平γ相比与AA基因型个体在T2 (;、职责)和T3 (;)治疗(数据的时间点1(一)和1 (b))。当我们三个时间点相比,AA基因型肺结核病人在T1等离子体水平呈现显著高于T2 ()和T3 ()(图8(一个)信使rna表达(图),没有差异8 (b))。T等位基因携带者T2面对mRNA表达水平显著高于T1 ()(图8 (b))和干扰素-没有任何区别γ等离子体水平(图8(一个))。没有这种多态性对对照组(数字1(一)和1 (b))。

结果IFNG+ 2109 a / G SNP表明,AA基因型的人提出了更高水平的干扰素-γ在控制比AG基因型(),在肺结核病人在T2 ()和T3 ()(图2(一个))。比较杂合的AG基因型的肺结核病人的时间点,使用相同的个体,显示的水平明显高于T1干扰素-γ被认为比T2 ()和T3 ()。没有区别的肺结核病人治疗时间点与AA基因型(图8 (c))。无显著差异基因型之间的信使rna表达被认为在对照组和肺结核病人,尽管AA基因型患者往往存在较高的表达水平与AG基因型个体相比(图2 (b))。也没有区别的肺结核病人治疗时间点内mRNA表达这两种基因型(数据没有显示)。在我们的研究小组没有发现GG基因型的个体。

3.4。的影响IL12B+ 1188 a / C基因多态性对白介素等离子体和信使rna表达水平

C等位基因携带者IL12B+ 1188 (AC / CC)血浆il - 12水平要明显高于个人的AA基因型对照组(在T2)和(时间点的肺结核病人(图)3(一个))。白介素mRNA表达分析显示当没有区别AA基因型和C等位基因携带者在对照组比较。然而,T2时间点的肺结核病人,C等位基因携带者表达白介素mRNA表达水平高于AA基因型的人()(图3 (b))。也没有时间点差异的肺结核病人白介素等离子体和信使rna表达水平在两个基因型(数据没有显示)。

3.5。的影响肿瘤坏死因子−TNF - 308 g / C基因多态性α等离子体和信使rna表达水平

控制个人AG基因型有显著较高的血浆TNF水平α比那些GG基因型()。没有差异基因型肺结核病人组(图4(一))。分析时间点之间的GG基因型肺结核病人表现出更高水平的TFN的-αT1和T3相比()。没有时间点之间还是有差异的AG基因型肺结核病人(图8 (d))。的肿瘤坏死因子-308 g / C基因SNP TNF -没有影响α信使rna表达控制(图4 (b))。T1,肺结核病人AG基因mRNA表达水平明显高于那些患者GG基因型()(图4 (b))。也没有时间点差异的肺结核病人mRNA表达与基因型(数据没有显示)。在我们的研究小组没有发现个人携带AA基因型。

3.6。的影响IL17Ars7747909基因多态性IL-17A等离子体和信使rna表达水平

的标记rs7747909在IL17基因对IL-17控制等离子体水平没有影响。肺结核患者一个等位基因携带者(AA / AG)明显高于IL-17等离子体水平只有在T3的时间点()(图5(一个))。在控制中,一个等位基因携带者IL-17 mRNA表达水平显著高于个人GG基因型()。在肺结核病人是一个等位基因携带者我们发现IL-17 mRNA表达水平明显高于T2 ()和T3 ()时间点比患者GG基因型(图5 (b))。没有时间点差异的肺结核病人IL-17等离子体和信使rna表达水平在两个基因型组(数据未显示)。

3.7。的影响IL10−819 c / T基因多态性和mRNA表达il - 10等离子体水平

il - 10等离子体水平没有区别CC基因型之间的控制和T等位基因携带者。肺结核患者T等位基因携带者的(TC / TT)拥有更高水平的il - 10与肺结核病人相比与CC基因型在各时间点治疗T1 ()、T2 ()和T3 ()(图6(一))。il - 10−819 c / T SNP没有影响il - 10 mRNA表达在对照组和肺结核病人当CC基因型和T等位基因携带者比较(图6 (b))。也没有时间点差异的肺结核病人血浆和mRNA表达il - 10水平在两个基因型(数据没有显示)。

3.8。的影响TGFB1+ 29 TGF - c / T基因多态性β等离子体和信使rna表达水平

TGF -没有差异β等离子体之间的水平在对照组基因型。肺结核病人与CC基因型有更高的TGF -β等离子体水平相比,T等位基因携带者只在T2时间点()(图7(一))。分析时间点之间的肺结核患者CC基因型显示更高的TGF -β等离子体在T1相比T3水平()(图8 (e))。没有信使rna表达的差异被认为控制和肺结核病人在两个基因型(图7 (b))。也没有时间点差异的肺结核病人内mRNA表达这两种基因型(数据没有显示)。

4所示。讨论

众所周知,细胞因子免疫反应过程中起着关键作用的活动性结核疾病和细胞因子水平变化可能导致异常的或无效的免疫反应,如人类感染所致结核分枝杆菌(6]。有助于易感性的遗传因素和发展的肺结核肯定涉及多个等位基因位于不同的基因之间的相互作用(26]。描述了作为一个数量的细胞因子基因与细胞因子水平的改变(13,20.),我们评估在细胞因子基因的单核苷酸多态性的影响对整个细胞因子反应的肺结核病人接受抗结核治疗。当相关,控制结果被认为是,指示一个多态性的影响在正常情况下,没有活动性结核病的干扰和抗结核治疗,换句话说,一个独立的遗传效应。

我们的研究结果表明,肺结核患者T等位基因携带者有更高的等离子体和信使rna表达水平干扰素-γ在抗结核治疗的中间和结尾。研究表明,IFNG+ 874 a / T SNP影响干扰素-γ生产对NF -通过提供一个结合位点κB和与结核病易感性(14,15,20.]。这一事实可能对干扰素的转录功能的后果γ生产(27,28]。

在西班牙最近的一项研究表明IFNG+ 874 AA基因型IFN -最低γ生产在PBMC文化与产后抑郁症刺激后在肺结核病人的诊断和治疗完成后(14),同意我们的结果在抗结核治疗。仍然与我们的结果一致,2额外的研究表明,正常和肺结核的TT基因型纯合个体产生干扰素-高γ为了应对分枝杆菌抗原(15,16]。在另一个功能研究结核病患者携带基因型aa + 874显示显著降低干扰素-γ等离子体水平比+ 874,+ 874 tt基因型(11]。这一趋势也出现在等离子体活性肺结核患者的印度人(12]。

其他的研究,评价干扰素-γ血清乙型肝炎病毒感染和干扰素-γ生产在PBMC培养敏锐地病人,皮肤利什曼病,和正常个体与LPS刺激(脂多糖),PHA(植物凝集素),或麻风杆菌(麻风杆菌高等干扰素)抗原也支持我们的研究结果γ水平的肺结核病人T等位基因携带者(TA / TT) (29日- - - - - -31日]。另一项研究表明之间的关系IFNG多态性微卫星标记(等位基因2)多态性和干扰素-γ基因转录。因为这个区域显示了一个绝对的相关性IFNG+ 874 T等位基因,本研究的结果与我们的结果一致,这表明IFNG+ 874 T等位基因与干扰素-更高γ表达式从中间到最后的抗结核治疗20.]。

一些研究评价肺结核患者结核疾病的初始阶段使用正常对照组基因型之间没有发现差异IFNG+ 874 SNP在干扰素-γ生产,在PBMC文化结核分枝杆菌H37Rv、文化滤液抗原(CFA)结核分枝杆菌和PHA刺激(17,18]。一个额外的研究没有发现的影响IFNG+ 874位点在mRNA的表达幽门螺杆菌(幽门螺旋杆菌)感染32]。这些不同的结果可能是由于种族差异基因型频率在不同人口研究。这个结果是完全同意与遗传流行病学数据,T等位基因与预防结核病(33]。这个相同的等位基因还与抗麻风(34]。

另一个多态性INFG基因位于2109个基点从翻译开始下游站点在第三基因内区被报道参与转录调节干扰素-γ基因的多态性,尽管贡献仍不清楚(35,36]。据我们所知我们的研究是第一个报告关于功能的影响INFG+干扰素- 2109 a / Gγ等离子体和信使rna表达水平,我们的结果表明,控制和肺结核病人AG基因型等离子体较低水平的治疗。

干扰素-γ是一个关键的细胞因子激活的巨噬细胞对分枝杆菌瘀和杀戮2];低干扰素的持久性γ从中间生产结束患者的治疗IFNG+ 874 AA基因型和INFG+ 2109 AG基因型可能导致更糟糕的预后积极的解决疾病和抗结核治疗的效率,还可能造成他们的风险增加激活潜伏肺结核的焦点。同意我们的结果,减少了生产干扰素-γ在肺结核病人与健康对照组相比已报告,这可能是由于初始T细胞无力的疾病(18,37- - - - - -39]。这样一种干扰素-不足γ生产可能会导致巨噬细胞激活的失败,这可能导致积极的疾病进展和可能发挥作用影响结核病诊断测试,糖尿病前期等位基因与microscopy-positive /负相关疾病和细菌培养阳性/阴性形式(18,40]。

il - 12在与结核病的调停保护性免疫力是很重要的。3 'utr地区的SNPIL12B(+ 1188 a / C)基因编码IL-12p40调节IL-12p40水平。目前的研究表明IL12B+ 1188 AA基因型与降低il - 12等离子体水平在正常对照组和结核病患者经过3个月的抗结核治疗。我们的结果同意另一项研究,评价肺结核病人和正常对照组17]。

几项研究已经发现IL12B+ 1188 C等位基因是降低IL-12p40 PBMC的生产从健康个体刺激C3绑定糖蛋白,有限合伙人,或产后抑郁症41- - - - - -43]。Arababadi et al。30.)没有发现显著差异之间的血清il - 12水平AA和AC隐匿性HBV感染的基因型。之间的不整合的结果可能是由于不同的种族,疾病,和设计的研究。

白介素生产诱导的吞噬作用结核分枝杆菌通过巨噬细胞和树突细胞,从而导致发展与生产干扰素- Th1反应γ(1]。由于IL-12p40 IL-12p70和IL-23和调节的一个组成部分获得结核病细胞反应,启动和维护IL-12p40水平低在AA基因型个体在限制慢性炎症(可能有一个角色44),这可能导致更多的困难在解决活动性疾病,抑制抗结核治疗的效率。

肿瘤坏死因子-α在结核肉芽肿的形成中起着重要的作用[19]。的启动子区域肿瘤坏死因子基因是高度多态和评估肿瘤坏死因子−308 g / A轨迹显示正常个体AG基因型有更高的TNF -α等离子体的水平。肺结核病人携带相同基因型倾向于有更高水平的TNF -α,但不显著。有冲突的结果有关的功能效应肿瘤坏死因子−308 a / G SNP。一些作者已经证明增加TNF -α生产相关的肿瘤坏死因子−308等位基因携带者在LPS刺激PBMC在有限合伙人和麻风病人和全血培养麻风杆菌刺激和paracoccidioidomycosis病人,而其他人则没有表现出任何的影响这对TNF - SNPαLPS刺激后生产在活的有机体内或在体外、丙型肝炎患者和肺结核患者(19,44- - - - - -50]。

一个在体外研究表明,表达式TNF−308 g / A对肿瘤坏死因子- SNP有着直接的影响α基因调控和一个等位基因位点可能导致更高的表达水平(51]。我们同意这个研究结果表明,与AG基因型肺结核病人抗结核治疗有较高的初TNF -α信使rna表达比GG基因型个体。

自TNF -α是重要的墙体由肉芽肿形成,防止传播的感染,低水平的TNF -α,在我们的肺结核病人,可能损害的控制结核分枝杆菌细菌,导致困难的解决活动性疾病,抑制抗结核治疗的效率和增加激活风险,如类风湿性关节炎患者所示进行anti-TNF -α治疗(52,53]。

IL-17是一个强有力的炎性细胞因子引起的结核分枝杆菌感染(54]。据我们所知这是第一个研究来验证功能的影响IL17Ars7747909多态性IL-17A等离子体和信使rna表达水平。我们的结果表明,等位基因携带者(rs7747909)产生等离子体水平较高的IL-17A治疗结束时,一般来说,肺结核病人产生水平高于正常对照组。

虽然Th17细胞不一样重要在初选中介保护Th1细胞结核分枝杆菌感染,IL-17似乎是关键的感应结核分枝杆菌特殊记忆的响应和中介保护挑战期间感染和疫苗(55- - - - - -57]。我们的研究结果表明,肺结核病人没有障碍IL-17A生产。

il - 10是处于待发状态已知属性和破坏人类Th1免疫反应。大约50%的观察il - 10分泌的变化可以解释为遗传因素(58]。我们的结果表明,IL10−819 T等位基因携带者有更高的血浆水平il - 10在抗结核治疗的6个月。一项研究评价肺结核病人没有显示这个SNP对il - 10水平的影响(17]。此外,没有影响的IL10−819位点被发现在患者血清il - 10水平的控制和丙肝病毒感染或正常个体PBMC文化与LPS刺激和产后抑郁症13,48]。对麻风病人的一项研究显示,IL10−819 T等位基因携带者生产低水平的il - 10与non-T等位基因携带者(相比59]。

在最近的一项研究评估幽门螺旋杆菌患者,单核苷酸多态性在启动子区域IL10被证明有更高的il - 10和GCC单体型运营商在mRNA表达吗IL10−1082克/一个/−819年ct/ /−592 c/一个和低il - 10 mRNA表达水平在ATA单体型航空公司(32]。在我们的研究不同IL10−819年对il - 10基因型没有影响mRNA的表达。

公布的数据表明,il - 10抑制干扰素的合成γ通过T细胞产生il - 10与无力在肺结核有关60,61年]。我们的研究结果表明,肺结核病人T等位基因携带者可能更多的困难在建立保护性反应对活性肺结核时因为他们存在il - 10水平较高的抗结核治疗。这些结果表明,与高级形式的肺结核病例,il - 10高生产T等位基因有可能导致严重活动性疾病的康复和糟糕的抗结核治疗效率。

TGF -β肉芽肿病变的存在结核病患者(62年]。在低浓度TGF -β单核细胞的趋化现象的因素和行为诱导分泌的il - 1α和肿瘤坏死因子-α巨噬细胞在高浓度,灭活,抑制干扰素-受体的表达和功能γ,il - 1α2,降低TNF -的生产α胞内分枝杆菌增长,并行相关事件增加(63年,64年]。我们的结果表明,肺结核病人TGFB121 + cc基因型有较高的TGF -β等离子体在抗结核治疗的T2水平。这些结果是一致的与其他研究集中在癌症和心肌梗死(65年- - - - - -67年]。我们的研究结果显示,TGF -β等离子体水平更高的抗结核治疗肺结核病人与对照组相比,这可能会导致损伤的初始保护性免疫反应的解决活跃的疾病和令人沮丧的抗结核治疗的效率。肺结核病人的这一事实TGFB121 + CC基因型也保持高水平的细胞因子在T2可能导致一个更持久的活动性疾病。

我们的工作缺乏人口特征和细胞因子水平之间的关联。此外,细胞因子的影响snp对结核病的结果可能是由一个小样本大小和所有的病人有一个温和的演示的肺结核。我们也有不同的等离子体水平模式和信使rna表达水平模式中的细胞因子评估控制和结核病患者在抗结核治疗。这个事实可以解释通过信使rna的稳定性和转录率和转化监管因素可以直接影响的表达式和生产介质参与免疫反应(68年]。

目前的研究表明IFNG+ 874吨/年,IFNG+ 2109 a / G,IL12+ 1188 a / C,IL10−819 c / T,TGFB1+ 21 c / T与不同的细胞因子水平有关肺结核病人和可能发挥作用的启动和维护了细胞免疫在结核病和公开活跃的疾病和治疗的结果。作为结核病免疫细胞因子发挥重要作用,研究整个细胞因子由各自的功能单核苷酸多态性和/或其他密切相关基因可以证明实际的细胞因子的反应模式对分枝杆菌和可能提供更好的理解活动性结核病疾病进展和响应和抗结核治疗可以作为结核病易感性的遗传风险标记。

5。结论

在这项研究中我们证明了细胞因子单核苷酸多态性可以产生不同的细胞因子水平在肺结核病人抗结核治疗,这些水平可能是重要的治疗的结果。未来的研究与一个更大的人口和不同形式和结核病的严重阶段将有助于更好地理解为什么很多人感染了分枝杆菌杆菌但只有10%活动性疾病发展。

利益冲突

作者没有利益冲突与本文有关的。

承认

本研究资助从“Fundacao德帕罗尽管Estado de Sao Paulo”(FAPESP)必须占州政府,巴西。

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