文摘

非结核性分枝杆菌的信息贡献(特种加工)分枝杆菌感染在非洲稀缺是由于有限的实验室文化隔离和标识。招募了一百三十七名痰涂片阳性患者的分子流行病学研究结核分枝杆菌在跨河的状态。痰培养后,获得的97纯隔离和标识使用Capilia TB-Neo,进一步证实了基因型分枝杆菌CM工具。97年的隔离,81(83.5%)隔离Capilia TB-Neo积极而16 (16.5%)Capilia TB-Neo负面的。进一步确认与基因型分枝杆菌CM工具显示,4(25%)的16隔离属于特种加工,包括M . fortuitum我M . fortuitum II / M magaritense M .脓肿和m . aviumssp。剩下的12 (75%)Capilia TB-Neo负隔离不属的成员分枝杆菌尽管他们的空军基地的外观。6个(33.3%)的Capilia TB-Neo -来自HIV阳性的肺结核患者。本研究中的患者都放在点空军基地后不久结果。复合菌群隔离16.5%的非结核隔离的含义进一步强调需要HIV阳性患者的痰标本的文化特别是对公开政府之前的治疗。

1。介绍

结核分枝杆菌是最重要的病原体结核(TB)的复合菌群,而非结核分枝杆菌(特种加工)可能发挥关键作用的病因TB-like综合症(1]。

复合菌群数据非结核分枝杆菌病在撒哈拉以南非洲地区有限,主要是由于缺乏实验室文化设施分枝杆菌物种的识别。因此,许多实验室不区分结核分枝杆菌和特种加工类似的原因(2- - - - - -4]。治疗的结核病患者大多数撒哈拉以南非洲国家包括尼日利亚是完全基于显微镜涂片积极的结果。因此,所有痰涂片阳性诊断患者不分青红皂白地放在点,当前国际结核病治疗的策略。言下之意是,特种加工与一线管理不当antituberculous药物(4,5),病人的病情恶化,提高耐药的风险。尽管众所周知,大多数是真正的结核病患者痰涂片阳性患者(6),耐药性结核病持续增长提出了一个问题的影响这种滥用的结核病药物来治疗所有诊断痰涂片阳性的病人。在评估的分子流行病学结核分枝杆菌复杂的交叉尼日利亚河流州,数据显示分枝杆菌以外的空军基地参与tuberculosis-like症状人群中。

2。材料和方法

2.1。病人和设置

这项研究是进行跨河,位于南南尼日利亚的一部分。病人包括137涂阳病人连续3收集痰标本。患者在一段时间内的12个月(2008年6月至2009年5月)主要结核病医院和保健设施在北部,中部和南部国家参议员选区。性别和年龄组10到70年被包括在内。允许执行工作从当地获得伦理委员会,并告知医疗同意也同样来自所有参与的病人。

2.2。痰液培养

痰标本从患者获得保存使用碳酸钠(75毫克)和/或冷藏,直到培养。标本被净化的方法的使用修改彼托夫(7]和培养使用BACTEC 960(美国NJ07417,正欲富兰克林湖)。涂片是由分离获得的BACTEC MGIT管,彩色的Ziehl Neelsen染色方法,并分析了存在的抗酸的细菌(空军基地)。生长在空军基地积极MGIT管进一步接种成两个Lowenstein-Jensen偏,一个含有丙酮酸钠。文化是每周检查两次殖民形态及其增长率和记录。污染进一步re-decontaminated和recultured偏。消极的文化和丢弃的严重污染偏减少我们的工作文化97纯隔离。

2.3。标识隔离

主要的生物识别使用Capilia TB-Neo(较实验室有限公司日本),一个检测试纸方法可以检测MPT64,专门分泌的一种蛋白质结核分枝杆菌执行复杂的而不是由特种加工,根据制造商的指示(http://capilia.jp/english/capilia_tb_neo.html)。

确定的物种Capilia TB-Neo -隔离,基因型分枝杆菌CM工具,测试基于DNA-STRIP技术,允许一些分枝杆菌物种的识别,根据制造商的说明使用(海Lifescience GmbH, Nehren,德国)。短暂、DNA提取是由声波降解法培养的生物,热死亡 30分钟,其次是与生物素化的复合扩增引物和一个反向杂交。放大产品的化学变性所包含的杂交,杂交单链,biotin-labeled扩增子包围的探针,严格的清洗,加法链霉亲和素/碱性磷酸酶共轭和碱性磷酸酶染色反应介导的。一个模板确保带型的简单和快速的解释。三个控制(共轭、通用和属)都包含在每一个地带。

3所示。结果

97年的文化和身份隔离在这项研究中,81名(83.5%)的成员结核分枝杆菌复杂(公布的数据8)使用检测试纸技术(Capilia TB-Neo积极)和基因型分枝杆菌厘米。18(18.6%)患者HIV阳性。然而,21人并不知道他们的艾滋病毒状况进行了研究。18岁的艾滋病毒阳性结核病患者,6 (33.3%)Capilia负( )(表1)。

表1
分枝杆菌属和艾滋病协会主体的地位。

的16 Capilia -隔离,基因型分枝杆菌分子测试确定4厘米隔离M . fortuitum我M . fortuitum II / M magaritense M .脓肿和m . aviumssp。4隔离的两个获得艾滋病毒阳性患者。十二个空军基地发现涂片阳性分离株分枝杆菌属的成员,如表所示2。

表2
基因型分枝杆菌鉴定Capilia TB-Neo负面隔离痰涂片阳性的病人。

4所示。讨论

近年来,出现了一些新的检测试纸技术(例如,Capilia)快速区分结核分枝杆菌复杂和特种加工,减少麻烦,即使他们不能识别特种加工的物种。虽然它已被证明,大多数cultures-positive分枝杆菌结核分枝杆菌地区肺结核是非常普遍(6,9),特种加工分离已经逐渐增加。20 - 30%的空军基地涂片阳性分离株已经被确认为特种加工在韩国(10]。这些生物会造成真正的感染和疾病,临床上非常重要(11]。在非洲,特种加工等疾病的贡献已经检查只在小范围内(1]。两个尼日利亚的先前的研究表明,福塞特和沃特金斯(12]没有隔离分枝杆菌以外的其他导致肺结核在他们的研究在北部地区。然而,11%非典型分枝杆菌已报告1986年在拉各斯(6]。后者作者分类6m . avium,四个m . kansasii和一个m . fortuitum。特种加工的四个物种在这个研究包括孤立m . fortuitum我,m . fortuitum2 /m . magaritense,m . avium物种除了m .脓肿。两个研究同样孤立m . fortuitum,M . intracellulare米。chelonae m . avium,和m . kansasi痰涂片阳性样品中/文化隔离[9,13]。

大多数特种加工疾病病例涉及的物种m . avium复杂的,m .脓肿,m . fortuitum和m . kansasii。m .脓肿是被越来越频繁,尤其难以治疗医学14),因为疾病引起的m .脓肿多年来通常进展缓慢,因为老年人通常受到影响。在更加发达的国家,m . avium和m . simiae负责传播疾病感染艾滋病毒的人(15]。艾滋病时代带来了增加这些机会主义的人类病原体的感染。Nontuberculous分枝杆菌参与一系列的疾病,包括肺疾病、过敏性肺炎、颈部淋巴腺炎,感染和传播。与艾滋病毒感染有关的传播感染通常是:艾滋病和免疫抑制16]。虽然这项研究并没有显示任何特种加工和艾滋病毒感染之间的联系,这可能归因于病人的数量,不知道他们的地位在样本收集的时间。2008年,当病人在本研究中被取样,艾滋病毒咨询和检测在尼日利亚没有强制结核病嫌疑人或新诊断为结核病患者。此外,在2007年,只有3%的卫生设施在尼日利亚有艾滋病毒检测和咨询服务17]。

最初的16个特种加工孤立在这项研究中,分子技术显示,12个未属的成员分枝杆菌,尽管他们与痰涂片阳性的病人。也许这些生物诺卡氏菌属物种或红球菌属等,因为他们的显微镜图像与空军基地是相一致的。诺卡氏菌病的发病率,尤其是前者诺卡氏菌属的小行星复杂的一直在增加,由于增加免疫抑制患者的数量在最近几十年(18]。超过70%的患者nocardial感染免疫力低下,和传播诺卡氏菌病与几个免疫减弱条件相关联。最近,艾滋病毒感染已被描述为一个风险因素对传播诺卡氏菌病(19]。肺诺卡氏菌病是常误诊为肺结核和治疗抗结核的药物。这种情况下可能会致命的(20.]。

5。结论

挑战因此在大多数非洲国家,特别是在尼日利亚,仍然是大规模的引入实验室文化的特定识别分枝杆菌。在这项研究中获得的数据提供了一些证据复合菌群的作用非结核空军基地生物和点管理的公共卫生影响没有痰的文化。涂阳病人痰培养应该执行与已知的HIV阳性的状态或HIV患者临床结核病的症状,以确定所涉及的菌株,从而避免不必要的管理与药物毒性的风险患者抗结核药物,增加耐药性。一半(2/4)的患者在这项研究中所确定的特种加工是艾滋病毒阳性患者。此外,耐药性系统不应视为目前的情况,特别是在强化阶段之后仍然空军基地涂阳病人治疗的设置缺乏文化设施,因此患者可能感染了特种加工或空军基地不分枝杆菌属的成员。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

承认

分子的工作进行了纳Rastogi Mycobacteriology实验室的博士,法国巴斯德研究所的瓜德罗普岛。