的Hydroethanolic叶提取物的神经药理学评估Calotropis procera（AIT）。R.Br。（Apocynaceae）在老鼠中

抽象的

背景．Calotropis procera已广泛用于其镇痛和抗炎作用。据报道，即使在没有支持科学数据的情况下，也据报道用于心理健康障碍，包括癫痫病症，包括癫痫。因此，评估了植物影响神经功能的潜力。方法．进行Irwin的测试以确定口服施用提取物的影响（30-3000毫克千克^-1)的大体行为和生理功能。采用活动计、旋转仪、戊四唑诱发惊厥、戊巴比妥诱发睡眠试验和尾浸水试验评价大鼠自发活动、神经肌肉功能、惊厥阈值、镇静和镇痛作用Calotropis procera提取液(30 - 1000mg /kg)。结果．Calotropis procera提取物(CPE)表现出显著( ）抗惊厥和镇痛作用。在尾部浸泡镇痛试验中，cpe处理的动物的戒断潜伏期显著增加( ），而ptz诱发的惊厥潜伏期和持续时间则受到正向调节。Calotropis procera提取物显示显著( ）central nervous system depressant effects in pentobarbitone-induced hypnosis at 100–1000 mg/kg and spontaneous activity test (30–1000 mg/kg). The extract also depicted impaired motor coordination at 100–1000 mg/kg dose levels. LD₅₀估计超过1000毫克公斤^-1．结论．Calotropis procera提取物具有显着的中枢神经系统抑制剂和小鼠的镇痛作用。

背景

认知和神经障碍是全球公共卫生面临的一项重大挑战，特别是在发展中国家，文化因素和无法充分获得现代医疗保健导致对传统药物的依赖[1］．这些神经系统障碍往往是全世界障碍的主要原因，他们对整体负担的所有健康问题之间的比例正在增长。神经疾病的负担的权利在于低收入和中等收入国家[2］．

最近，人们做出了重大的尝试，以确定可能有助于预防严重神经系统疾病的药物。天然产物是存在于各种天然来源中的小分子。它们在治疗包括神经系统疾病在内的所有人类疾病方面发挥着重要作用[3.］．有人认为它们是最强大的药物源引线[4.］．大多数用于治疗神经系统疾病的早期药物都是从植物中提取的，从这一事实可以清楚地看出，从植物中提取的天然产品与神经系统疾病的治疗的相关性。

作为持续寻找具有中枢神经系统活动的植物的一部分，潜在的Calotropis procera(Ait) r . Br。(夹竹桃科)对中枢神经系统的影响。尽管这种植物被广泛用作消炎药[5.,抗癌6.]，抗菌剂[7.，止痛剂[8.]，很少的科学信息存在关于其对中枢神经系统的影响，尽管它在癫痫的管理和一些精神障碍[传统使用9.］．因此，有必要对这一主张进行科学评估，并为其在中枢神经系统疾病中的民族医学应用提供支持或其他方式。

直到最近，大脑被认为是免疫豁免器官，这是不容易发炎或免疫激活和被认为是由全身性炎症和免疫反应基本上不受影响。这个观点一直与实现显著修改了促炎细胞因子和其它介质通过小胶质细胞活化和导致神经退行性影响其下游机制在中枢神经系统炎症的重要作用。这种机制现在在几个中枢神经系统疾病如抑郁症的认可，帕金森氏症，阿尔茨海默氏症和癫痫[10.］．与c . procera显示出强大的抗炎特性，它被假设在已知炎症发挥作用的疾病中具有一些神经药理学作用。乳胶蛋白的c . procera在ptz诱发的癫痫模型中，有中枢神经系统活动，反映在戊巴比妥诱导的睡眠时间的增强和抗惊厥作用。这表明c . procera具有穿过血 - 脑屏障的能力[11.］．

本研究所采用的方法是由国际会议安全药理学协调会议（ICH）S7A指南提出的中枢神经系统评估的核心电池的调整[12.］．它建议在中枢和外周神经系统上测试新的化合物/提取物，作为评估安全性和有效性的“核心电池组”的一部分[13.］．这些通常是安全评估中使用的简单测试，经常在发现过程的一开始就使用，以筛选可能对中枢神经系统有益或有风险的物质，并测量大体行为体征、运动活动、癫痫发作和疼痛阈值。欧文的试验被用来确定口服提取物对大体行为和生理功能的影响。用活度计笼测定其效果c . procera在运动活性上，使用旋转码试验评估植物提取物对神经肌肉协调的影响。在尾浸渍测定中评估植物的镇痛活性。使用戊基苯醌诱导的睡眠时间和五苯甲酸四唑诱导的癫痫发作模型测定睡眠增强效果和潜在的抗惊厥作用。

2.材料和方法

2．1.植物收集和提取制剂

新鲜的叶子Calotropis procera从2015年8月至12月，采集自Cape Coast大学(UCC)附近的Iture镇(5°05 ' 54.6″N, 1°18 ' 48.7″W)。这些叶子是由Cape Coast大学生物科学植物标本室的植物学家鉴定的，代金券标本(UCC/SBSH/15/M044)保存在标本室。它在阴凉处干燥了14天，然后用锤磨粉。粉末状样本是如前所述提取的[14.］．使用索氏提取装置(Aldrich®索氏提取装置，Z556203, St. Louis, MO, USA)，用2 L 70%乙醇提取200 g叶粉，浸泡48 h。获得的萃取物随后在减压和温度(50°C)下使用旋转蒸发器(Rotavapor R-215, BÜCHI Labortechnik AG, Flawil，瑞士)进行浓缩。然后在水浴上进一步干燥成粉末，标签为CPE (Calotropis procera提取物），然后在含有活性二氧化硅的干燥器中保存，直至其准备使用。获得的产率为4.8％ ．提取液以蒸馏水为载体，通过轻轻发酵制备溶液，用于实验。

2.2。动物

体重20-25克的雄性ICR(癌症研究所)小鼠购自阿克拉加纳大学Noguchi纪念医学研究所(NMIMR)。在进行实验之前，它们被关在UCC生物科学学院的动物屋七天，以适应环境。动物饲养在34 × 47 × 18 cm的笼子中^3.）软木刨花作为床上用品，并保持在12小时光暗循环中。他们免费获得食物和水。该研究是由NIH指南进行的，以便在药理学伦理委员会批准的实验动物的护理和使用。

２.３.药物和化学物质

吗啡是从植物检疫赖克，阿克拉，加纳购买。戊巴比妥，咖啡因，D.- 从美国的Sigma-Aldrich，Sigma-Aldrich，St Louis，St Louis，ST Louis，St Louis。

２.４.欧文的测试

的影响Calotropis procera用Irwin描述的原始程序研究了CPE对大体行为和生理功能的影响[15.］．小鼠被随机分为6组(N = 7) and left to acclimatize for 24 h. Animals were fasted overnight but had free access to water. They were treated with oral doses of either CPE 30, 100, 300, 1000, 3000 mg kg^-1，或蒸馏水10 ml kg^-1．随后观察这些动物的行为和生理功能的变化。在0 ~ 15、30、60、120、180分钟和24小时，采用严格的标准化程序对镇痛、运动活动、触觉反应和死亡等参数进行评分。

2.5。活度计测试

CPE对自发运动的影响[16.采用Ugo Basile活动笼(7401型，Comerio, VA, Italy)进行评估。小鼠被随机分为7组(N = 7) and treated orally with either extract (30, 100, 300, or 1000 mg kg^-1)、地西泮(8mg kg^-1)、咖啡因(16毫克/公斤)^-1)或蒸馏水(10ml /kg, p.o)。1 h后，动物被单独放置在活动计笼中，它们的活动在5分钟内进行评分，持续30分钟。地西泮和咖啡因分别作为中枢神经系统抑制剂和兴奋剂的参比。以30分钟内的总活度作为时间-过程曲线的AUC。

2.6。Rotarod测试

进行该测试以阐明效果Calotropis procera神经肌肉协调提取。旋转杆由一个旋转杆(直径:3厘米)组成，以25转/秒的恒定速度旋转，每个小鼠有单独的间隔，这样每个小鼠在物理上与其他小鼠分开(Ugo Basile 7600模型，科梅里奥，VA，意大利)。老鼠经过三天的训练，在旋转棒上停留180秒。在试验日(最后一次训练后24 h)，分别口服30、100、300和1000 mg kg的CPE^-1)、地西泮(8mg kg^-1），D.-tubocurarine (0.01 mg kg^-1)，或蒸馏水(10毫升公斤^-1口服），并放置在旋转棒上行走。Latency to fall off the rotating rod within a maximum cut-off time of 180 s was determined at 0, 1, 1.5, 2 h, and 3 h after drug administration [17.］．

2.7。戊巴比妥诱导的睡眠时间

采用戊巴比妥相互作用试验研究了CPE对戊巴比妥诱导的睡眠时间的影响。[17.]通过。小鼠在七组（N= 7)接受CPE(30、100、300和1000 mg kg^-1那订单。)、地西泮(8mg kg^-1)、咖啡因(16毫克/公斤)^-1)，或蒸馏水(10毫升公斤^-1那订单。)口服。戊巴比妥钠(50mg kg^-1)分别于药物治疗后1小时腹腔注射。记录睡眠潜伏期(注射戊巴比妥到翻正反射消失之间的时间)和睡眠持续时间(翻正反射消失和恢复之间的时间)。

2.8。抽搐的阈值测试

将小鼠随机分配到五组，并施用CPE（100,300和1000 mg kg^-1)、地西泮(10mg kg^-1)，或蒸馏水(10毫升公斤^-1、订单)。One hour after drug treatment, the seizure was induced by a single subcutaneous dose of pentylenetetrazol (85 mg kg^-1)在颈后。随后将小鼠单独放置在塑料笼子(有机玻璃室(15 × 15 × 15 cm))中观察[17.］．Latency to convulsion and frequency and duration of clonic and tonic convulsions were observed through video recording (Sony-Handycam, model: HDRCX675/B, Tokyo, Japan) for 30 min and quantified with the behavioural analysis software, JWatcher TM version 1.0 (University of California, Los Angeles, USA, and Macquarie University, Sydney, Australia; available athttp://www.jwatcher.ucla.edu）.阵挛发作表征为面部肌阵挛，肌阵挛前爪和前肢阵挛的外观，和强直性发作表征为与野生运行和补药前肢和后肢伸展炸药阵挛性发作。为的发作，频率，和惊厥发作（阵挛或强直）的持续时间的等待时间记录为CPE的亲或抗惊厥效果的指标。

2.9。尾部浸渍试验

测试是根据[18.经过一些修改。小鼠尾部远端(2- 3cm)浸泡在50.0±1.0℃水浴中。反应时间(T)以秒为单位，取尾部偏转或退出水中的时间。尾部浸泡的截止时间为10秒，之后停止测量，以避免组织损伤。停药潜伏期分别在给药后0.5、1、2和3 h(30、100和300 mg kg)^-1，p.o.）或吗啡（10 mg kg^-1、订单)。尾浸泡试验前，将动物尾浸泡在热水(50.0±1.0℃)中进行筛选，只选取退尾潜伏期<5 s的动物进行实验。尾部退缩潜伏期的增加是抗刺激反应的度量，计算为 在哪里T._0.和T.₁被定义为药物治疗前后获得的延迟，以及T.₂为截止延迟。

2.10。数据分析

所有结果均以平均值±SEM表示。数据采用单因素方差分析(ANOVA)和双因素方差分析(ANOVA)进行分析。当方差分析显著时，使用Tukey进行治疗之间的多重比较事后测试。GraphPad Prism for Windows, Version 7 (GraphPad Software, San Diego, USA)用于所有统计分析。

结果

3．1.欧文的测试

的D.rug candidate, CPE (30–3000 mg kg^-1)，在24小时的观察期间对动物没有任何致命影响。然而，与对照组相比，经cpe处理的动物在所有剂量下表现出镇痛、镇静和对触摸的反应性降低。这些作用在药物治疗后持续3 h。此外，未观察到抽搐、震颤、呼吸改变和死亡等不良反应。

３．２．活度计测试

CPE在30-1000毫克千克的剂量下显着降低自发运动^-1安定8毫克公斤^-1的参考中枢神经系统抑制剂(F_6,42 = 23.66 ）.一种s shown in the time-course graph, the effect of the extract exhibited a significant reduction in locomotion compared to the control 10 min of test observation. This reduction was seen at all doses of the extract and continued to significantly decrease throughout the experiment. Caffeine, the reference CNS stimulant at 16 mg kg^-1，活动显著增加(图1）.

3.3。Rotarod测试

CPE仅在100-1000 mg kg的剂量上显着降低了杆上的时间^-1（F_6日,39岁 = 73.36, ）.低剂量的提取物不能改变在旋转棒上花费的时间。参考肌肉松弛剂，安定(8mg kg)^-1）和D.-tubocurarine (0.01 mg kg^-1），花费在该杆也显著减少的时间（图2）.

3．4．戊巴比妥诱导睡眠时间试验

提取物对睡眠潜伏期无显著影响;然而，在100到1000毫克公斤的剂量下，它显著延长了睡眠时间^-1（F_6日,41= 7.804, ）.Diazepam，参考CNS抑制剂，增加睡眠时间，而咖啡因显着降低延迟睡眠持续时间（图3.）.

3.5。抽搐的阈值测试

CPE（100-1000 mg kg^-1)能够显著降低频率(F_{4, 30}= 11.79, ）和持续时间（F_{4, 30}= 14.05, ）的阵挛性惊厥。However, only 1000 mg kg^-1CPE能显著增加阵发性抽搐的潜伏期(F_{4, 30} = 6.479, ）.如图所示4.．提取物(100 - 1000mg kg^-1)也显著缩短了持续时间(F_4,27 = 6.297, ）并延迟了滋补惊厥的发作（F_4,27= 4.882, ）.低剂量CPE不能降低强直性惊厥的频率;但是，1000毫克公斤^-1提取物的剂量可显著减少强直性惊厥的频率(F_4,27 = 2.997, ）（数字5.）.总体来看，CPE能够减少总的频率（F_{4, 30} = 10.33, ），和持续时间（F_{4, 30}= 12.93, ）抽搐显着（图6.）.使用的参考抗惊厥药物(地西泮)也能够减少惊厥的频率和持续时间，并延迟强直性惊厥的发生。

3.6。尾部浸渍试验

由图中的时间-过程曲线可知7.，双向Anova（治疗 × 时间)显示了药物治疗对尾部停药潜伏期的显著影响(以最大可能效果百分比(% MPE)计算)(F_5、15 = 55.06, ）.CPE (30–100 mg kg^-1那订单。）显著增加尾退缩潜伏期（F_4、14= 5.440, ）.吗啡(10mg kg^-1使用的标准止痛药物，也显示脱瘾潜伏期显著增加( ）.

4。讨论

本研究中已表明的hydroethanolic叶提取物Calotropis procera在所使用的动物模型中具有中枢神经系统抑制、抗惊厥、镇痛和肌肉松弛作用。

用CPE处理的小鼠显示镇静和镇痛的迹象，表明IRWIN测试中的中央抑郁症和镇痛作用。这相当简单的测试可以提供有关潜在治疗指示的相关信息，特定的作用机制或特定的生理功能。例如，在该测试中存在镇静的存在可能是可能的抗焦虑，抗精神病或抗惊厥活性的暗示[19.］．Irwin的测试还评估了测试物质的最小致死剂量和对行为和生理功能的主要影响。来自该测试的数据也可用于评估研究药物的安全药理学[15.］．In the first 24 h after administration, the plant extract caused no mortality and appeared to cause no apparent toxicity even at a relatively high dose. This result suggests that orally administered CPE is relatively nontoxic, since substances with an estimated LD₅₀一般在1000毫克公斤以上^-1．因此，它可以被认为是安全的或低毒的[20.］．

运动活动被用来评估一种新药中是否有精神兴奋剂或镇静作用。Irwin对随机活性测试和活性计测试的药物效果估计的区别在于量化过程[16.］．许多复杂的行为任务都需要运动活动，在许多行为测试中，运动活动的增加或减少会影响这些任务的表现[21.］．常用镇静剂最常见的副作用之一是损害精神运动功能的风险[22.］．通常，中枢神经系统激活会导致活动增加，而中枢神经系统抑制则会降低活动水平[23.那24］．因此，活动仪表试图确认在Irwin测试中观察到的镇静和减少的触摸响应，并评估了一些观察结果Calotropis procera提取自发运动。从实验中观察到，CPE的所有剂量(30-1000 mg/kg)都显著降低了实验动物的活性。这种运动减少可能是由于镇静作用、药物引起的运动无力或试验药剂引起的虚弱[25］．

进行旋转棒试验以确定自发运动的降低是由于药物诱导的电动机功能障碍或镇静。Rotarod上的小鼠输出是一种响应性和常用的工具，用于评估平衡和协调的运动功能方面[26那27];因此，可以研究前肢和后肢的肌肉同步和平衡。此作用要求完整的小脑和电机协调功能[28那29］．纺纱杆上剩下严重问题的小鼠仍有麻烦。从结果中，很明显，在减少活性仪测试中降低自发活性的提取物中存在显着的电动机损伤。许多CNS抑制剂化合物可导致实验室动物中的自发运动活性降低。几乎所有用于精神病学的神经糖尿病在所有物种中都会在包括男人的所有物种中减少自发运动活性[30.那31］．在实验中观察到，在使用的剂量下，中枢神经系统抑制剂地西泮减少了自发运动活动，并损害了运动协调能力，而咖啡因，中枢神经系统兴奋剂，增加了运动活动[32那33］．

在单独给出时，可以在巴比妥酸盐诱导的睡眠时间试验中易于检测物质引起睡眠增强效果的能力，这些睡眠时间试验，即使在给予高剂量时，也不会造成睡眠[34那35］．人们发现，在这项实验中发现的结果与在其他某些复杂实验和人类实验中观察到的结果密切相关[36］．巴比妥酸盐是著名的镇静剂，它通过引起中枢神经系统的压抑而诱导人和动物入睡[37］．戊巴比妥增强GABA的作用，作用于GABA受体-离子载体复合物[38］．加法的激活_一种受体会抑制中枢神经系统，因此有利于睡眠;因此，增加或减少戊巴比妥诱导的睡眠时间可能是研究gaba能系统影响的有用方法[39］．在本研究中，虽然提取物并没有显著影响延迟睡觉，它深刻地延长睡眠时间，这是在欧文的测试中观察到的镇静是一致的。在戊巴比妥诱导的睡眠的增强进一步支持该提取物的中枢抑制活性40］．

该测试戊四氮是使用最广泛的急性化学实验模型，以确定新的抗癫痫药物[41］．戊烯甲特拉唑施加其作用的普遍接受的机制之一是通过在GABA作为拮抗剂作用_一种复杂的受体(42］．PTZ可防止GABA介导的氯^-涌入cl^-通过颠覆互动的渠道，导致动物的抽搐[43那44］．长期以来，gaba能机制一直参与癫痫的发生。改善和抑制GABA的神经传递可分别减轻和增加癫痫发作[45那46］．在实验动物模型和人类综合征中的GABA神经递质中的缺陷与癫痫有关[41那47］．一种药物在动物中避免或推迟ptz诱导的阵挛和强直阵挛性惊厥发作的能力是抗惊厥药活性的指标[48那49］．的Calotropis procera提取物显著抑制ptz诱发的癫痫发作，这有助于确认其在癫痫管理中的传统用途[9.[这是抗惊厥药的良好验证的测试。观察到，以30mg kg以上剂量^-1中，提取延迟阵挛性和强直性惊厥的发作和也减少了阵挛性和强直性惊厥的频率和持续时间。如明显在PTZ诱发的惊厥地西泮的有效的作用与GABA能神经传递其增强效果[同意50］．GABA是在人类中枢神经系统的主要抑制性神经递质[42］．抑制戊四唑引起的癫痫发作可能表明CPE的抗惊厥作用可能与中枢神经系统GABA活性调节有关。这可能并不令人惊讶，因为它已经证明了显著的中枢抑制特性。

Irwin试验中，CPE (30-3000 mg/kg)产生镇痛作用。在急性热痛模型尾部浸泡试验中进一步证实了这一观察[51]，其中吗啡是参考镇痛。在尾部浸渍试验，CPE引起延长的等待时间段，指示在伤害感受阈值的增加。到尾浸渍试验的响应是脊髓反射具有较高的神经结构的参与，并用于评价中枢镇痛活性52］．还有就是，因此，所述提取物的镇痛作用可以与脊柱或脊髓上途径相关联的可能性。CPE的在该测试中的抗伤害感受作用是在欧文的测试中观察镇痛的进一步确认。

在各种植物提取物中出现的几种具有生物活性的植物化学物质，如类黄酮、三萜类、生物碱、甾体、单宁和苷，可以对它们各自的药理特性负责[53-55］．在先前的研究中筛选植物提取物揭示了单宁，皂苷，萜类化合物，黄酮类化合物和生物碱的存在[5.］．该提取物在各种动物模型中所观察到的药理活性可以归因于这些植物化学物质的存在。先前的研究表明，含有类黄酮、皂苷和单宁的植物对许多中枢神经系统疾病有益[56那57］．

5.结论

从本研究中使用的ICH S7A指南的核心CNS电池测试，Calotropis procera提取物具有显著的中枢神经系统抑制作用、抗惊厥作用和镇痛作用，口服时被认为是相对安全的。

数据可用性

目前的研究过程中使用和/或分析的数据集是请直接从相应的作者。

的利益冲突

作者宣布没有利益冲突。

作者的贡献

欧内斯特肥胖设计的工作，实验室工作和分析，并起草并编辑了最后的手稿;Emmanuel Awintig Adakudugu和Robert Peter Binyy参加了实验设计和数据收集的一些方面和数据的最终分析。Elvis Ameyaw提供了对数据收集的监督和对工作的统计分析和Eric Woode概念化和监督工作。所有作者都阅读，编辑并批准了最终手稿。

致谢

笔者想表达对所有技术人员的努力表示赞赏和感谢药剂业及制药科学学院谁在实验室工作帮助耶利米Aderoju先生。

参考文献

1. P. Amoateng, E. Quansah, T. K. Karikari等人，“加纳用于治疗精神和神经疾病的药用植物，”基于证据的互补和替代医学文章编号8590381,14页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学者
2. GBD 2016神经病学合作者，“全球，区域和神经系统疾病的国民负担，一九九零年至2016年：疾病研究2016年全球负担进行系统的分析，”《柳叶刀》杂志上。神经学，卷。18，不。5，PP。459-480,2019。视图:出版商的网站|谷歌学者
3. N. Karim, H. Abdelhalim, N. Gavande, I. Khan，和H. Khan，“天然产品作为神经系统疾病治疗的一种新兴治疗替代品”，循证补充和替代医学，卷。2018年，文章编号3056847，2页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学者
4. H.纳斯里，A. Baradaran，H. Shirzad，和M. Rafieian-Kopaei，“营养制品中作为替代药品新概念，”国际预防医学杂志，卷。5，不。12，pp。1487-1499,2014。视图:谷歌学者
5. E.肥胖，E.Ameyaw，R. Biney，I.Henneh，F.Edzeamey和E. Woode，“Calotropis Procera（AIT）的氢噻醇叶提取物的植物化学筛选和抗炎性质。R.Br。（apocynaceae），“医药研究杂志，第23卷，第2期。1，pp。1-11,2018。视图:出版商的网站|谷歌学者
6. T. Choedon, G. Mathan, S. Arya, V. L. Kumar，和V. Kumar，“乳胶的抗癌和细胞毒性Calotropis procera在肝癌转基因小鼠模型中，世界华人消化杂志，第12卷，第2期16，第2517-2522页，2006。视图:出版商的网站|谷歌学者
7. G. Nenaah“的抗菌活性Calotropis procera河中的小岛。和四种黄酮类苷类化合物的分离，世界微生物学和生物技术杂志，第29卷，第2期7, pp. 1255-1262, 2013。视图:出版商的网站|谷歌学者
8. S.有得玩，H. Sangraula和V. L.库马尔，“关于乳胶的镇痛活性的初步研究Calotropis procera”,民族药物学杂志，第73卷，第2期1-2，页307-311,2000。视图:出版商的网站|谷歌学者
9. P.Cinda，P.Zerbo，S.Guenné，M.Compaoré，A.Ciobi​​ca和M. Kiendrebeogo，“用于伯基法索Hauts Bassins地区的神经精神病疾病治疗的药用植物”药物，卷。4，不。2，p。32,2017。视图:出版商的网站|谷歌学者
10. J. Stephenson，E. Nutma，P.Van der Valk和S.Amor，“CNS神经变性疾病的炎症”免疫学第154卷第1期2，页204-219,2018。视图:出版商的网站|谷歌学者
11. R. C. S. Lima, M. C. Silva, C. C. T. Aguiar等，“抗惊厥作用Calotropis procera乳胶蛋白”,癫痫和行为，第23卷，第2期。2, pp. 123-126, 2012。视图:出版商的网站|谷歌学者
12. H. R. Amouzadeh, M. J. Engwall，和H. M. Vargas，“生物制药的安全药理学评估”安全药理学原则，pp.385-404，斯普林克，柏林，德国，2015年。视图:出版商的网站|谷歌学者
13. M. Williams, R. D. Porsolt，和P. Lacroix，“安全药理学II-CV, GI，呼吸和肾脏的安全，xPharm:综合药理学参考，S. J.恩纳和B. B.大卫，编辑，第1-22，爱思唯尔，纽约，NY，USA，2007年。视图:出版商的网站|谷歌学者
14. E. Obese, R. P. Biney, I. T. Henneh等人，“水乙醇提取物的抗伤害性作用Calotropis procera(Ait) r . Br。（夹竹桃科）：谷氨酸，细胞因子，阿片样物质能和腺苷能途径的可能参与，”民族药物学杂志，第278卷，第114261条，2021年。视图:出版商的网站|谷歌学者
15. S. Irwin，“系统分析:药物实验和评估的策略”，生物学与医学展望，第11卷，第5期。4，pp。654-674，1968。视图:出版商的网站|谷歌学者
16. V. Castagné， C. Froger-Colléaux, E. Esneault, H. A. Marie, M. Lemaire, and R. D. Porsolt，“中枢神经系统(CNS)安全药理学研究”，刊于药物发现与评估：安全性和药代动力学试验H. G. Vogel, J. Maas, F. J. Hock和D. Mayer, Eds。，施普林格，柏林，德国，2013。视图:出版商的网站|谷歌学者
17. D. W. Adongo, P. K. Mante, E. Woode, E. O. Ameyaw, K. K. E. Kukuia，“水乙醇提取物的影响Pseudospondias microcarpa(答:有钱。)心血管病。(Anacardiaceae)对小鼠中枢神经系统的影响，”2014。视图:谷歌学者
18. P. A. Janssen, C. J. Niemegeers，和J. G. Dony，“芬太尼和其他类似吗啡的镇痛药对大鼠温水诱导的尾脱反射的抑制作用”，Arzneimittelforschung，第13卷，第502-507页，1963年。视图:谷歌学者
19. S.Roux，E.Sablé和R. D. Porsolt，“啮齿动物中的初级观察（Irwin）试验，用于评估测试剂的急性毒性及其对行为和生理功能的影响，”当前药理学协议第27卷第2期第1页，2004年。视图:出版商的网站|谷歌学者
20. S. Obici，F.J.Obone，V.R.D.S.Sela等，“二氯甲烷提取物的初步毒性研究Kielmeyera coriacea茎在小鼠和大鼠，”民族药物学杂志，卷。115，没有。1，第131-139，2008。视图:出版商的网站|谷歌学者
21. T. Karl, R. Pabst，和S. von Hörsten，“药理学和毒理学研究中的小鼠行为表型”，实验和毒理学病理学，第55卷，第55期1，第69-83页，2003。视图:出版商的网站|谷歌学者
22. M. Hattesohl, B. Feistel, H. Sievers, R. Lehnfeld, M. Hegger, and H. Winterhoff， "摘要缬草officinalisL. S.L.显示抗焦虑和抗抑郁作用，但既不是镇静，也没有肌肉松弛剂的特性，”植物医学:国际植物治疗和植物药理学杂志，第15卷，第5期。1-2，第2-15，2008。视图:出版商的网站|谷歌学者
23. H. M.希梅尔，“少年和成年大鼠中枢神经系统功能的安全性药理评价：药理学参考化合物的效果，”药理毒理学方法杂志CHINESE，卷。58，不。2，第129-146，2008。视图:出版商的网站|谷歌学者
24. 问:张Y.-P。Yu杨绍明。关铭你们J.-T。张,W.-P。张,E.-Q。Wei，“中枢神经刺激剂和镇静剂对小鼠运动活动的时空特性的影响”，药理学、生物化学和行为学第97卷第1期3，页577-585,2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
25. R. Betarbet, T. B. Sherer和J. T. Greenamyre，《帕金森病的动物模型》，Bioessays，第24卷，第2期4，页308-318,2002。视图:出版商的网站|谷歌学者
26. R. J.哈姆，B. R.派克，D. M.奥德尔，B. G. Lyeth，和L. W.詹金斯，“旋转试验：其有效性的评估以下创伤性脑损伤运动缺陷的评价，”杂志上的创伤，第11卷，第5期。2，页187-196,1994。视图:出版商的网站|谷歌学者
27. S. T. Fujimoto, L. Longhi, K. E. Saatman, T. K. McIntosh，“实验性创伤性脑损伤后的运动和认知功能评估”，神经科学与生物侵蚀评论，卷。28，不。4，第365-378，2004。视图:出版商的网站|谷歌学者
28. R.J.Carter，L. A. Lione，T. Humby等，“对人类亨廷顿疾病突变的小鼠转基因的渐进电机缺陷的表征”神经科学杂志，卷。19，没有。8，第3248-3257，1999。视图:出版商的网站|谷歌学者
29. D. J. Clark, L. H. Ting, F. E. Zajac, R. R. Neptune, and S. A. Kautz，“合并健康运动模块可预测中风后运动能力和肌肉协调复杂性的降低，”神经生理学杂志号，第103卷。2，页844-857,2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
30. V. M. Simón, A. Parra, J. Miñarro, M. C. Arenas, C. Vinader-Caerols，和M. A. Aguilar，“预测等剂量的氯丙嗪、氟哌啶醇、舒必利、raclopride和氯氮平如何降低小鼠的运动活动，”欧洲神经精神药理学，卷。10，没有。3，pp。159-164,2000。视图:出版商的网站|谷歌学者
31. B.金基德和C. B.内梅罗夫，“神经降压素：一种内源性抗精神病？”目前在药理学意见，第2卷，第2期1，页99-103,2002。视图:出版商的网站|谷歌学者
32. M. Solinas，S.Ferré，Z.-B。您，M.Karcz-Kubicha，P. Popoli和S. R. Goldberg，“咖啡因诱导多巴胺和谷氨酸掩盖中的谷胱甘肽，”神经科学杂志第22卷第2期15，页6321-6324,2002。视图:出版商的网站|谷歌学者
33. F. Dunne, a . O’halloran和J. P. Kelly，“一种能够检测老鼠体内药物的兴奋和镇静特性的家庭笼运动跟踪系统的开发”，神经精神药理学和生物精神病学的进展第31卷第1期7, pp. 1456-1463, 2007。视图:出版商的网站|谷歌学者
34. R. D. Porsolt, M. Lemaire, N. Dürmüller，和S. Roux，“CNS安全药理学的新观点”，基础与临床药理，第16卷，第5期。3，页197-207,2002。视图:出版商的网站|谷歌学者
35. S. S. Nayak, A. K. Ghosh, B. Debnath, S. P. Vishnoi, T. Jha， "甲醇提取物的协同效应冷杉属webbiana叶对小鼠标准镇静剂诱导的睡眠时间和大鼠提取物的抗炎活性的影响民族药物学杂志，卷。93，没有。2-3，第397-402，2004。视图:出版商的网站|谷歌学者
36. X. Zhao，X.-Y.崔，q.-p。Chu等人，“L型Ca的增强效应²⁺戊巴比妥诱导的催眠通道阻滞剂受5 -羟色胺能系统的影响。神经传递杂志，卷。113，没有。10，pp.1395-1402,2006。视图:出版商的网站|谷歌学者
37. k·d·特里帕西医学药理学基础，JP医药有限公司，印度新德里，2013。
38. R. Sankar，“GABAA受体生理及其与1,5-苯二氮杂卓氯巴赞作用机制的关系”中枢神经系统药物，卷。26，不。3，第229-244，2012。视图:出版商的网站|谷歌学者
39. h, c。Kim, Y. Ma等人，“厚magnolol增强戊巴比妥诱导的睡眠行为:可能涉及gaba能系统，”植物疗法的研究，第23卷，第2期。9, pp. 1340-1344, 2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
40. M. G. I.席尔瓦，M. R.德阿基诺内托，P. F.特谢拉内托等人，“在小鼠异胡薄荷醇的急性给药的中枢神经系统活性，”药理学、生物化学和行为学，卷。88，不。2，第141-147，2007。视图:出版商的网站|谷歌学者
41. W.Löscher，“对新型抗癫痫药物发现和开发的癫痫发作和癫痫癫痫的当前动物模型的关键评论”发作，第20卷，第2期。5, pp. 359-368, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
42. b·g·卡宗和a·j·特雷弗，edin基础与临床药理，第379-399页，McGraw-Hill Education, New York, NY, USA, 2004。
43. L. Velíšek，“化学诱发急性癫痫的模型”癫痫和癫痫的模型，第127-152页，学术出版社，马萨诸塞州剑桥，2006。视图:谷歌学者
44. H.Kubová，“模特|癫痫发作药物的药理学，“基本癫痫的百科全书，爱思唯尔，阿姆斯特丹，荷兰，2009年。视图:谷歌学者
45. P. Mehta, S. Srivastava, M. Sharma, I. Singh，和R. Malik，“使用结构引导的虚拟筛选、ADMET、量子力学和脱靶分析的临床验证来鉴定化学多样性的GABAA激动剂作为潜在的抗癫痫药物，”国际生物大分子杂志，卷。119，第1113至1128年，2018。视图:出版商的网站|谷歌学者
46. L. J. Quintans-儒尼奥尔，T. T. Souza的，B. S.雷特等人，“Phythochemical筛选和winterianus在啮齿类动物Jowitt（禾本科）叶精油香茅的抗惊厥活性”，植物医学，第15卷，第5期。8，第619-624页，2008。视图:出版商的网站|谷歌学者
47. S. D. AmbAvade，N.A.Mhetre，A.Mhetre，S. Muthal，以及S. L.Bodhankar，“小鼠索塞尔的根提取物的抗惊厥活性的药理评估”欧洲综合医学杂志， vol. 1, no. 13，第131-137页，2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
48. S. V. Vellucci和R. A. Webster， " Ro15-1788对小鼠咖啡因诱发癫痫的拮抗作用"欧洲药理学杂志第97卷第1期3-4，页289-293,1984。视图:出版商的网站|谷歌学者
49. K. E.Cannon，M.W. Fleck和L.B. Hough，“辛乙胺类药物对重组GabaA受体的影响”，“生命科学，第75卷，第5期21，页2551-2558,2004。视图:出版商的网站|谷歌学者
50. M. S.帕蒂尔，C. R.帕蒂尔，S. W.帕蒂尔和R. B.贾达夫，“菩提树的水性根提取物的抗惊厥活性”，民族药物学杂志号，第133卷。1, pp. 92-96, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
51. M. Barrot，“啮齿动物的伤害和疼痛的测试和模型，”神经科学，第211卷，第39 - 50,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学者
52. N. F. Pavin，F. Donato，F.Cibin等，“Se-Phenyl噻唑烷-4-碳烯丙酸酯在小鼠中的抗闭合性和抗高衰弱作用”欧洲药理学杂志，卷。668，没有。1-2，第169-176，2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
53. B. Singh, P. M. Sahu，和M. K. Sharma，“三萜的抗炎和抗菌活性Strobilanthes callosusNees，“植物医学，第9卷，第5期。4，页355 - 359,2002。视图:出版商的网站|谷歌学者
54. A. Yokosuka和Y.Mimaki，“来自整个植物的甾醇皂苷龙舌兰utahensis及其细胞毒性活动，“植物化学，第70卷，第2期6，第807-815页，2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
55. N. G. M. Gomes的，M. G.坎波斯，J. M. C.Órfão，和C. A. F. Ribeiro的，“神经生物学与活性用于药物发现的潜在目标的植物，”神经精神药理学和生物精神病学的进展，卷。33，不。8，PP。1372-1389,2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
56. P.戴伊，S.钱德拉，P. Chatterjee的和S.查亚“的神经药理特性Mikania飞（L.）斑鸠菊（菊科），”中国先进药业技术研究，第2卷，第2期4, p. 255, 2011。视图:谷歌学者
57. D. O. Kennedy和E. L. Wightman，“草本提取物和植物化学物质:植物次生代谢物和增强人类大脑功能，”营养的进步，第2卷，第2期1，页32-50,2011。视图:出版商的网站|谷歌学者

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