文摘

本研究关注口服急性毒性的叶提取物的浓度变化E。fluctuans在斑马鱼。研究还针对鳃组织病理学变化的细节,肝脏、大脑和肠道的斑马鱼暴露于植物的叶提取物E。fluctuans。Enydra fluctuans不悦之色是一种食用半水生草本植物广泛用于不同疾病的缓解。因为没有这种植物毒性研究,本研究试图调查植物毒性的元素。两种类型的实验是在本研究进行的。首先,急性口服毒性研究按203年经合组织指导方针。第二,组织病理学改变观察鱼类暴露在致命的植物提取物的浓度。口服对斑马鱼的急性毒性研究表明,提取的离开E。fluctuans鱼是有毒的测试在200毫克/公斤体重的浓度。肠道的组织病理学研究治疗鱼类表明治疗诱导的绒毛结构断裂和绒毛细胞膜的融合和超然的绒毛结构的基底膜肠。肝脏的组织学显示严重在细胞液泡化,而不是控制的影响。腮上的研究表明,基底膜的分离鳃相比,控制可能导致鱼的死亡。大脑组织的组织病理学观察处理测试样品还显示明显撞击大脑实质而控制是正常的没有大脑的冲击。

1。介绍

草药工业的发展,人们开始使用许多植物提取物在草药产品商业化的准备工作。人们假设所有植物的消费产品是安全的,没有需要调查他们的安全方面。许多研究没有进行这些草药产品的毒性。本研究旨在调查在植物叶提取物的毒性水平Enydra fluctuans在斑马鱼不悦之色。毒性药物主要是释放源像叶子一样,水果,和叫植物、动物和微生物。毒性药物,它将通过各种模式的传播有毒物质主要是通过直接接触传播。毒理学测试是必要的,不仅为对抗疗法也补充和替代医学发现任何副作用的迹象和症状之前并不知道高消费[1]。毒性的评估使用急性毒性生物测定可以证明传统医学使用核电站的安全E。fluctuans并促进其消费。

毒性测试的重要性是为剂量依赖性变化对毒性效应,研究安全组件的示例,验证的方法调查毒性(2]。毒性研究,Zebrafsh (鲐鱼类)是作为一个好的模型来研究毒性效应。它是用来检查样品的生物活性化合物通过毒性试验。常用的哺乳动物模型有一些缺点与高成本和延长时间的结果,还被道德问题(1,3,4]。研究已经证明人类显示遗传基因序列的相似性和大脑模式鲐鱼类。因此,这使得斑马鱼一个有利的试验探索许多娱乐的毒理学研究中产生一个提示的结果(4- - - - - -6]。

Enydra fluctuans皱眉头(图1)是一种可食用半水生草本植物属于菊科家庭。方言这种植物的名字是Helencha, Hinchashak, Harhach和英文名字水田芥,沼泽草本植物等7]。叶子略苦,叶子是用来治疗炎症,皮肤疾病,支气管炎,神经失调,白斑病,暴躁,天花和泻药。具有生物学价值,其燃料提取已报道的止痛剂,细胞毒性,抗菌,王亚南,降血压药、中枢神经系统抑制剂,止泻的活动(8]。

本研究的目的是调查在口服急性毒性的叶提取物浓度的变化E。fluctuans在斑马鱼。组织病理学的研究也集中在细节吉尔的变化,肝脏、大脑和肠道的斑马鱼暴露于植物的叶提取物E。fluctuans。组织病理学评价是评估的重要组成部分之一的不利影响植物提取物对整个有机体。植物并不总是安全的消费,因为他们可能含有有毒化合物在植物的不同部分。许多研究表明,许多植物提取物成为有毒的不同器官浓度的方式和可能导致致命性。许多草药产品用于治疗不同的疾病是不会进行毒性水平(8]。本研究试图了解广泛使用的植物的毒性水平E。fluctuans。在目前的研究中,hsitopathological研究鱼类中进行显示,死亡率。假设,更高浓度的叶提取物可能损害鱼暴露在叶提取物和影响敏感的器官,可以组织病理学检查。因为没有发表数据的组织病理学评价鱼暴露在不同的叶提取物的浓度E。fluctuans目前的研究已经开展。

2。材料和方法

2.1。制备Ethanolic叶中提取的Enydra fluctuans

Enydra fluctuans(认证/ PDDUIAS / 2019/01)收集从Yaiskul英帕尔西的曼尼普尔邦,印度。植物的叶子晒干,磨成细粉。植物提取物的准备用5克的干粉末的50毫升乙醇。提取过滤用旋转蒸发器,以及各种浓度测试解决方案的准备。

2.2。口服Ethanolic叶提取液的急性毒性Enydra fluctuans

急性毒性的ethanolic叶提取植物的样本Enydra fluctuans测试在斑马鱼急性毒性模型(鲐鱼类- - - - - -IAEC /铜/ ZF / 2018/01)根据经合组织指南2039]。鱼被暴露于测试物质最好是一段96小时。死亡率记录在24、48和96小时,和浓度杀死50%的鱼都被记录下来。

鱼被检查后24、48、72、和96小时。浓度为12.5,25、50、100、200和400 mg / L被选为执行有效浓度的主要毒性测试不同浓度的植物提取物。鱼被暴露于示例基于静态接触政权。对于每一个实验中,7个健康的鱼类被直接转移到每个准备浓度。对照组(7鱼类)也包括对于每个治疗。死亡率是记录在24、48、72、96小时暴露之前,LD50值计算(8]。鱼被认为死如果没有可见的运动和感人的尾花梗没有反应。死鱼被当死亡率记录。LD 50确定基于测试物质的浓度在水中造成50%的测试批鱼观察暴露在一个特定的时期。

2.3。统计分析

半数致死浓度(LC₅₀)的急性毒性实验计算的数据使用PROBIT函数描述1971年由芬尼(10)和IBM SPSS 21.0统计软件分析了置信区间为95%。安全等级评估后96小时暴露斑马鱼的叶提取物E。fluctuans进行了基于工作(11]和[12),水质量标准委员会(CWQC, 1972)13),国家科学院/国家工程院(NAS /美国1973)[14),国际联合委员会(IJC, 1977)16]。

2.4。组织病理学的斑马鱼急性毒性

麻醉鱼安乐死后冷温度低于15°C,肝脏,心脏,大脑和肠道组织被移除和涂片与苏木精和伊红染色使用标准协议。行为毒性和运动,游泳运动试验和潜水舱试验进行。收集实验鱼的鳃和皮肤后96小时曝光时间和在10%中性缓冲福尔马林固定和石蜡切片在5μm,与苏木精和伊红染色。

3所示。结果

3.1。口服毒性研究Ethanolic叶的提取物Enydra fluctuans在鲐鱼类

在急性口服毒性研究表明,叶的提取物Enydra fluctuans更有毒性鲐鱼类。内侧致死浓度(LC₅₀)被认为是最接受的基础上确定急性毒性测试。观察在这个毒性研究中,100%的死亡率,注明植物提取物的毒性。LC₅₀值和95%置信区间的不同叶提取物的浓度E。fluctuans分别为204.132,170.513,139.478,和92.956 mg / L 24、48、72和96小时分别(表吗1)。48浓度变化死亡率在24日,72和96小时暴露在叶中提取的植物样本观察鱼类试验。植物提取物被发现致命的第一天最高浓度的实验在24 hr 400 mg / L,因为它杀死了所有的七条鱼在实验中。增加存在剂量依赖的相关性和观察时间减少死亡率随着曝光时间的增加从24到96小时,半数致死浓度降低。消极完美曝光时间之间的相关性观察和LC₅₀(表2)。

鱼被认为死如果没有可见的运动和感人的尾花梗没有反应。死鱼被当死亡率记录。LD50测定基于测试物质的浓度在水中杀死50%的测试批鱼暴露在一个特定的时期。毒性作用的这种植物的样本Enydra fluctuans被观察到。在一个剂量的200 mg / L > 70%,死亡率在斑马鱼。死亡率并没有观察到50 mg / L的植物提取物。致死剂量杀死50%的测试鱼类是记录为400 mg / L和200 mg / L在24小时和96小时暴露期间,分别。结果表明,ethanolic提取使用的剂量时不产生毒性≤50 mg / L(表1)。没有观察到的死亡率控制在实验期间。变化被观察到在安全水平不同的方法估计达96小时的暴露斑马鱼的叶子中提取的植物如表所示3。

3.2。组织病理学的斑马鱼的治疗Enydra fluctuans植物提取物与控制

治疗与植物提取物诱导斑马鱼的绒毛断裂的结构和融合的绒毛膜和超然的绒毛结构基底膜在小肠(数字2和3)。组织处理样品显示基底膜的分离鳃与控制(数字4和5)。肝组织在处理样本也表现出严重的细胞中液泡化(数据6和7)。脑组织对测试样本标注撞击大脑实质(数字8和9)。

数据2- - - - - -9。组织病理学的小肠、肝脏、鳃和大脑从斑马鱼暴露在400 mg / L。

3.3。行为反应

测试的鱼鲐鱼类接触到各种致命的叶提取物的浓度E。fluctuans表现出改变的行为反应。观察到在致命浓度的植物提取物、活跃的行为增加了最初,随后减少表达痛苦的迹象。随着粘液分泌身体显示褪色。减少游泳性能和昏睡的动作观察鱼的暴露在致命的植物提取物的浓度。

4所示。讨论

在这项研究中,我们分析了叶提取物的敏感性E。fluctuans在实验鱼和显示的致命影响叶提取最高在斑马鱼上96小时的曝光时间。LC₅₀在96小时的接触本研究斑马鱼的是92.956,大于信用证₅₀测试进行的cd^{2 +}和锌^{2 +}在斑马鱼,即。,6。5和44。48 mg/L and also greater than the 96 hr LC₅₀与铜^{2 +}和汞^{2 +},即,0.17 and 0.14 mg/L [17]。研究由Nwani et al。18在鱼鲤鱼各揭示了LC的毒性和表达吗₅₀草甘膦和阿特拉津32.540和42.380 mg / L和96年hr LC₅₀丁硫克百威,同为0.268 mg / L。急性口服毒性的研究苦瓜在斑马鱼也报道了鱼的杀伤力50毫克/公斤浓度的bw的植物提取物8]。

组织病理学的斑马鱼处理植物提取物和控制在本研究进行了研究。组织病理学研究鳃、肠、肝脏和大脑的孤立对待鱼相比,控制显示异常条件。治疗肠组织病理学研究的鱼类表明治疗诱发破裂的绒毛结构和融合的绒毛膜和超然的绒毛结构基底膜的肠道,导致鱼的死亡。肠道绒毛(单数:绒毛)很小,像手指一样的预测,延伸到小肠的腔。绒毛增加肠道壁的内部表面区域提供一个更大的吸收表面积。腮上的研究表明,基底膜的分离鳃控制相比,这可能会导致鱼的死亡。几项研究已经在过去的鳃组织组织学和生理学的在各种各样的鱼类19]。鱼的鳃是非常重要的,因为他们是气体交换的主要网站和参与渗透调节20.]。研究了以rajni et al。21]显示,吉尔的结构破坏炎性细胞浸润,最小拥塞在初级薄片,融合二级薄片,扩散上皮增生,multifoci粘液细胞增生观察在斑马鱼暴露在杀虫剂亚致死浓度的组合(21]。

目前的研究对肝脏也显示严重在细胞液泡化,它在控制不受影响。几项研究显示肝脏组织病理学的肿胀nonlipid细胞质空泡形成后广泛分布的肝细胞被认为一直轻微的急性和亚急性肝损伤。Rajini等人报道,温和,扩散严重细胞质空泡形成,扩散最小温和正弦拥堵,脂肪变性,核固缩的,karyorrhectic完全溶解坏死肝细胞观察鱼的肝脏暴露于杀虫剂(22]。严重坏死肝损伤在鱼的提取处理米。charantia被认为是损害的原因,由于发生了致命剂量的momordin [8]。Momordin被发现的一个主要phytocompounds中苦瓜有一个关键的角色在动物和鱼类的毒性的感应8,23]。了多方面的证据说明,这种变化可能反映了宿主细胞适应带来好处,而不是退行性改变。但是,在目前的研究中,因为鱼暴露于有毒水平被发现死亡,这些细胞一种退化明显毒性的证据。大脑组织的组织病理学观察处理测试样品还显示明显撞击大脑实质而没有撞击的大脑控制是正常的。组织学调查的大脑鲤鱼各为了应对急性和subchronic暴露在杀虫剂毒死蜱透露超然的表面区域光层,地层边际由于神经细胞的退化,海绵状结构,拥堵,坏死,和外观清晰的单核细胞的细胞核周围的衬里层地griseum superficiale,地层griseum舟状骨,和地层专辑中央24]。

5。结论

针对本研究的数据,可以得出的结论是,叶的提取物Enydra fluctuans是有毒的鱼浓度的方式,从而可以对人类有毒浓度越高。所以,这是剂量依赖性的使用植物是非常需要避免毒性。低浓度的植物提取物被发现是安全的,并且可以在低浓度。也报道,鱼类的组织病理学变化暴露在200 mg / L更严重和非常谨慎的使用在日常生活中。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

列出作者都做出了重大的科学贡献的研究手稿。两位作者进行了实验,分析了数据,并写了手稿。

确认

当前研究是由基督(被认为是大学),和作者感谢基督的管理层和员工(被认为是大学),班加罗尔。