文摘

子宫平滑肌肿瘤(smt)是常见的女性盆腔肿瘤,诊断,其中大部分都是像往常一样平滑肌瘤(UL)。排除恶性疾病在smt的管理是很重要的。然而,smt的分化仍然是困难的。在这项研究中,我们旨在提高smt的术前诊断。我们检查了21个极限状态,7典型平滑肌瘤(ALs)和6平滑肌肉瘤(lms),所有这一切被子宫肿瘤活检确诊。免疫组织化学结果(low-molecular-mass多肽2 (LMP2)和ki - 67)和临床特征(血清乳酸脱氢酶水平和更年期)进行评估。在统计上有显著差异的表达观察LMP2和ki - 67 UL和艾尔和UL和LMS之间。结合LMP2和ki - 67得分显著不同的UL和基地之间,UL和LMS之间,艾尔和LMS之间。结合免疫组织化学和临床结果之间的得分(总分)也显著不同病理类型。本研究的结果表明,术前诊断的准确性的smt可能提高了使用免疫组织化学和临床结果的结合。

1。介绍

子宫平滑肌肿瘤(smt)是常见的女性盆腔肿瘤,和大多数普通平滑肌瘤(摘要)。平滑肌肉瘤(LMS)是罕见的,构成只有约1%的子宫癌症;然而,它有一个预后不良(1]。LMS的诊断依赖于存在的细胞异型性,高的有丝分裂指数(MI),凝结物的肿瘤细胞坏死(CTCN)。某些情况下部分有这些功能,这有助于区分UL和其他smt。非典型平滑肌瘤(AL)就是这样一种SMT,及其病理特点介于LMS和UL;然而,其程度的恶性肿瘤是不确定的2]。尽管大多数lms出现在绝经后妇女,几个病例在生育年龄的女性1,3]。AL患者更年轻比LMS和经常渴望有孩子4]。

各种治疗方法可用于UL症状的管理。Uterus-preserving治疗肌瘤切除术等,管理促性腺激素释放激素模拟,子宫动脉栓塞,聚焦超声手术被广泛执行。除肌瘤切除术,手术标本不是获得使用这些技术,以及病理诊断是不可能的。因此,预处理的分化smt是很重要的。成像模式,尤其是磁共振成像(MRI)和氟脱氧葡萄糖(FDG)正电子发射断层扫描,对于smt的诊断非常有用。然而,区别不同类型的SMT仍然困难在很多情况下(5,6]。

自1994年以来,我们执行transcervical针吸活组织检查提高smt的术前鉴别诊断(7]。尽管这个过程使我们能够直接评估肿瘤组织,活检标本非常小和诊断可能被低估。我们试图提高术前诊断使用免疫组织化学(包含IHC)。我们之前报道,LMS ki - 67的表达高于UL使用活检标本(8]。

最近的一项研究报告称,有缺陷的表达low-molecular-mass多肽2 (LMP2)可能开始自发的发展人类子宫LMS (9]。LMP2编码的主要组织相容性复合体类地区20 s蛋白酶体,这是26日年代复杂的一部分,降解ubiquitin-conjugated蛋白(10]。LMP基因敲除小鼠患子宫LMS的显示(9]。

smt提高术前诊断的质量,我们进行了回顾性评估临床和包含IHC特征的smt anti-LMP2和ki - 67考试transcervical针活检获得的标本。

2。材料和方法

2.1。病例选择

我们执行一个搜索所有住院病人的文件的大阪城大学妇科医院所有可用子宫smt患者穿刺活检标本在2000年和2013年。所有患者接受transcervical针吸活组织检查,因为不寻常的MRI结果(T1 -高强度和/或t2加权图像)或一个迅速扩大的肿瘤。34例SMT发现:LMS的6例,7,和21个UL。艾尔被定义为SMT中度到重度异型性,MI的< 10每10大功率领域,没有CTCN。

所有组织都使用大阪市立大学的伦理委员会批准后已经从患者获得书面知情同意。

2.2。Transcervical穿刺活检的子宫smt

Transcervical针吸活组织检查子宫的smt进行结论指导下使用Pro-Mag 2.2活检系统(Manan医疗产品,诺斯布鲁克,IL)与自动切割针(25厘米长,16-gauge 17毫米的切口)和连续20厘米长不锈钢导管(4毫米最大的外部尺寸,3毫米最大内部维度,诚实的医疗,东京,日本)。为了防止抽样误差,得到了三个或三个以上每个病人活检标本(7]。

2.3。包含IHC染色过程

LMP2和ki - 67的表达了在石蜡包埋的部分使用avidin-biotin过氧化物酶复杂的方法。4μ米厚的石蜡切片deparaffinized和沉浸在3%氢过氧化物酶阻断内源性过氧化物酶活性。接下来,抗原检索程序只执行ki - 67表达的部分进行检查沉浸在10毫米幻灯片柠檬酸缓冲(pH值6.0)和加热20分钟的高压釜在120°C。的协议DAKO LSAB 2过氧化物酶工具包(DAKO,京都,日本)。ki - 67表达的部分进行检查在一夜之间被孵化与主抗体在4°C调湿室,和LMP2表达式的部分进行检查孵化与初级抗体1小时在室温下湿室。主要用于本研究单克隆抗体鼠标反ki - 67和20年代多克隆兔antiproteasome LMP2。每个主要的工作稀释抗体是1:20反- ki - 67和1:anti-LMP2 100。部分与PBS冲洗三次,孵化的10分钟二次抗体(生物素化的山羊anti-mouse和兔免疫球蛋白G二级抗体)。部分被孵化与streptavidin-peroxidase复杂,3、3′-diaminobenzidine作为发色体。的部分和迈耶的苏木精复染色。IHC反应的特异性被省略主要检查抗体(8]。

2.4。包含IHC得分

LMP2表达积极性被棕色染色显示细胞质。染色强度作为积极= 2分,弱阳性= 1点,- = 0分。脏的地方被列为负面= 0分,震源= 1点,分散= 2分(表1(a))。

ki - 67的表达是评估使用标记指数(LI)。我们计算阳性细胞与brown-stained核高倍镜下(40客观和××10眼);李≤5%被指派2分,> 5的李< 15%被分配1点,李≥15%(表被分配0分1(b))。我们观察到所有领域的核心,然后选择最活跃的区域和李计算针对每种情况。

最后,我们计算每个分数的乘积IHC得分。IHC和临床分数的乘积定义为总分。

2.5。临床特征

我们也评估每个病人的血清乳酸脱氢酶(LD)水平和月经情况。血清LD的水平,我们计算了LD比率最大血清LD值/正常范围的上限。LD比> 1.2时,我们发现病人有高血清LD水平和分配一个0分(表2(a))。我们分配分数为绝经前患者(表1点2(b))。

2.6。统计分析

的Mann-WhitneyU测试是用于比较分析组之间的分数(UL、半岛和LMS)。< 0.05的值被认为是具有统计学意义。SPSS版本21 (IBM)是用于所有计算。

3所示。结果

3.1。临床特征

总结了病人的临床特征表3。病人的年龄范围从31到69年患者的平均年龄为43年UL、46年,患者和患者56年LMS。没有病人服用药物、激素和补充。一个,一个,和三个UL、患者,分别和LMS绝经后。LD高水平在只有三个患者LMS。三个患者UL和一个半岛进行了肌瘤切除术;剩下的病人接受了子宫全切术。没有AL患者复发。

3.2。包含IHC发现

图1显示了LMP2和ki - 67免疫化学染色结果。IHC研究的结果如图2- - - - - -4。

UL的LMP2得分是2到4点(中位数,3分),艾尔是0到4点(中位数,3分),对LMS 0到2点(值,0分)。在产品分数差异显著的UL和LMS (),UL和艾尔()(图2)。

ki - 67 UL是1到2分(中位数,2分),艾尔是0到2点(中位数,2分),对LMS 0到2点(平均0.5分)。在产品分数差异显著的UL和LMS (),UL和艾尔()(图3)。

UL IHC得分为4到6点(平均5分),对AL 2到5点(平均4分),对LMS 0到3点(平均1.5分)。在产品分数差异显著的UL和LMS, UL和半岛,半岛和LMS ()(图4)。所有UL > 4分的情况下,和所有情况下LMS < 5分。区分AL和UL、检查的准确性是最好的截止时被设定为4分:敏感性为71.4% (95% CI, 41.8 - -88.5%)和特异性为90.5%(95%可信区间,80.6 -96.2%)。区分LMS和艾尔,检查的准确性是最好的截止时被设定为2分:敏感性为83.3% (95% CI, 54.4 - -95.3%)和特异性为71%(95%可信区间,46.3 -82.8%)。

总得分在图所示5。UL的总分是5到8点(平均7分),艾尔是3到7点(平均6分),对LMS 0到4点(中位数,2分)。在产品分数差异显著的UL和LMS, UL和半岛,半岛和LMS ()。区分AL和UL、检查的准确性是最好的截止时被设定为6分:敏感性为71.4% (95% CI, 41.8 - -88.5%)和特异性为90.5%(95%可信区间,80.6 -96.2%)。这些结果IHC分数相同。区分LMS和艾尔,检查的准确性是最好的,当截止是3分:敏感性为83.3% (95% CI, 54.4 - -95.3%)和特异性为85.7%(95%可信区间,60.9 -96.0%)。总得分比IHC分数更准确。

4所示。讨论

统计上显著的差异被发现之间的UL和LMS和UL和基地之间使用一个包含IHC在当下研究的测量。然而,艾尔和LMS没有显著区别。包含IHC发现和临床特征的结合使检测艾尔和LMS之间的显著差异。

最重要的形态smt术前诊断的磁共振成像。MRI发现LMS的暗示包括大型异构群众和出血或囊性坏死(11]。然而,这些研究结果往往存在于细胞平滑肌瘤的病例,退化平滑肌瘤,典型的平滑肌瘤。最近的报告表明,diffusion-weighted图像可能是有用的信号强度smt的鉴别诊断12]。Goto等人报道,结合使用动态MRI和血清LD测量用于LMS和退化平滑肌瘤的诊断13]。FDG正电子发射断层扫描发现的LMS氟- 18 -去氧葡萄糖摄取中等到高强度的特性。然而,UL很少显示氟- 18 -去氧葡萄糖摄取高氟- 18 -去氧葡萄糖摄取和LMS很少显示轻度(6),很难区分smt。

我们旨在提高smt的术前诊断使用transcervical子宫肿瘤活组织检查(7]。我们执行这个技术,transcervical穿刺活检,从1994年超过600患者。无重大并发症,如感染、腹腔出血,或一个相邻结构的损伤,需要手术,据报道发生了。预防感染,我们在transcervical活检针注射抗生素。为了避免相邻结构的损伤和主要血管,我们仔细执行transcervical活组织检查结论:超声指导下14]。活组织检查使肿瘤组织的直接评价。然而,诊断可能被低估,因为活检标本非常小。LMS的诊断需要两三个病理特点:细胞学的异型性,高MI, CTCN。小标本有时不能包含所有功能。与血型坏死CTCN常常困惑,CTCN的诊断是很困难的。林等人报道说,当6病理学家检查CTCN的发生在LMS的34例,全部达成协议关于CTCN的存在与否只在12例(7被认为对CTCN) (15]。为了防止抽样误差,三块核心活检取样。考虑到LMS的恶性肿瘤,我们检查活检标本的病理结果严格在所有领域的核心。如果我们怀疑是恶性肿瘤,我们建议手术病人。详细,我们认为恶性肿瘤的可能性,当有一些轻微的非典型细胞核(中度到重度异型性的一个特征LMS),不到10有丝分裂的人物,不能明确诊断为透明或坏死,坏死。另一方面,由于这个原因,我们不能排除一些假阳性的患者。

几项研究已经报道在smt IHC发现。在LMS,细胞的增殖指数(ki - 67, PHH3)通常是高,细胞周期调控蛋白(p16、p53 p27、p21和细胞周期蛋白A和E)往往是高度表达。这些标记物的表达有时是增加在基地的情况下(16- - - - - -19]。我们在此报道IHC染色的结果在smt ki - 67。区分LMS和UL的最佳截止李ki - 67与活检标本是5%。IHC评价ki - 67年使用手术标本,所有LMS标本显示李≥15%。因此,我们分类ki - 67(李为5%和15%8]。在目前的研究中,ki - 67的表达高LMS,艾尔和LMS但是没有区别。

哈亚希等人报道LMP2缺乏症的发生与LMS的发展有关。在考试包含IHC LMP2的切除标本,55例LMS - 46,而所有48例UL是积极的20.]。缺陷LMP2功能和子宫LMS肿瘤发生之间的关系并不清楚。然而,LMP2建议扮演一个肿瘤抑制诱导干扰素调节因子1和calponin 1的表达(21]。同样,目前研究显示不同的染色模式之间的UL和LMS活检标本(图2)。的组合包含IHC ki - 67和LMP2的分析有助于LMS和铝之间的歧视。

smt有类似的表现症状包括痛经、月经过多、贫血、群众和骨盆。患者血清总LD的LMS往往异常高,但这些退化肌瘤和某些类型的平滑肌瘤患者也常常升高(13]。我们检查临床指标(主诉,MRI发现,血清LD的水平,和更年期)是smt的诊断最有用的。7 AL患者和8与分析了LMS和血清LD的显著差异水平和更年期状态被发现之间的AL患者和那些LMS。最好的截止LD比率是1.2;因此,我们定义一个高水平的LD在这项研究> 1.2。大多数LMS患者绝经后;绝经前患者分配1点。

恶性程度与艾尔是未知的;大多数病人接受子宫切除排除LMS。Ly等人发现,AL患者复发的风险很低,因此由肌瘤切除术治疗非典型性平滑肌瘤是一种可行的选择,育龄妇女;确认怀孕后也可能这个过程(4]。因此,艾尔和LMS之间的歧视是很重要的。

总之,这项研究表明,smt的术前诊断的准确性可以使用包含IHC和改善临床结果。然而,本研究的样本量小,更多情况下需要检查达到一个明确的结论。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。