评估的蛋白质组活动蚂蚁的毒液Ectatomma tuberculatum(膜翅目:蚁科:Ectatomminae)

文摘

Ectatomma tuberculatum蚂蚁有一个最有毒的毒液知道但没有详细研究其特性。鉴于这一点,知道毒液的化学成分是至关重要的为了获得信息机制的组件。几种生物活性分子在膜翅目昆虫毒液已经确定,即:,proteins such as phospholipases, hyaluronidases, and proteinases, as well as peptides. Protein databases show that information on protein components of ant venoms has been recently growing exponentially. In this study, we have identified proteins from the venom ofEctatomma tuberculatum通过2 d页面,与质谱串联nanochromatography紧随其后。共有48个蛋白质被确定,其中42参与代谢过程,运输,和结构的支持。此外,6个节目没有蛋白质特征相似。9个蛋白质相关的攻击/防御或维护过程殖民地(殖民地无菌,毒液保护成分,毒液扩散在猎物,麻痹猎物,体内平衡的改变,和细胞毒性)。我们的发现可能有助于识别新的自然原型的分子药理学的合成和使用在几个方面。

1。介绍

毒液产生潜在的生物技术药物与抗菌素等不同的应用程序,镇痛药、降压药和杀虫剂的动机研究这种产品(1]。物质从自然获得的使用产品,如动物毒液,包括昆虫,是由众多的民间医学实践采用本地人口自古以来。他们会在自然界中找到这些治疗的原材料资源(2,3)治疗各种疾病(4]。这是由于免疫,镇痛,抗菌、利尿,麻醉,治疗风湿病的这些产品的属性(3),其中也包括一些物质与潜在治疗癌症,微生物,病毒感染,以及可能的抗微生物剂性质如杀虫剂(5,6]。

因此,寻找与生物活性物质从天然产物已经越来越有价值的替代找到并产生生物活性化合物与实际应用1,9,10]。这动机很多最近的科学研究支持的制药行业寻找新的生物活性分子(6,11]。

一系列的生物活性分子,是重要的几个领域,如过敏,免疫学,微生物学,生物技术已经被确认在膜翅目昆虫的毒液。蛋白质和磷脂酶、透明质酸酶和蛋白酶曾被观察到在确定组件,和肽与多样化的活动已经被发现在蚂蚁,黄蜂和蜜蜂1,12]。

由于生物活性化合物的丰富性和多样性的毒液,膜翅目昆虫已经获得名声在过去几十年,通过研究使用不同技术的特征和生化分析1]。药理利益被发现的许多物质,随着信息结构,生物活性和行动机制。这些物质的多样性和复杂性不同,包括信息素、激素、防御物质,酶,和肽(1,12,13]。

然而,这些昆虫会导致生理损伤和严重的病态,如过敏,剧烈的疼痛,剧烈出汗、恶心、心动过速等症状(14,15),在某些情况下可能导致死亡的影响个人16]。蚁毒液产生的数量虽小,由蜜蜂和黄蜂的相比,有更大的结构多样性的组件(14,17]。根据,深入研究膜翅目昆虫的毒液是基本的复杂的组成和多样性函数显示一个巨大的新的大分子的合成生物技术的潜力,可用于治疗的目的,甚至害虫控制(18]。

在研究蚂蚁,19]指出蛋白过敏原的存在与澳大利亚蚁毒液的转译后的修改Myrmecia令党参。陶查德和合作者20.,21)透露的资料毒液蛋白质和肽的不同种类的蚂蚁通过质谱法和高效液相色谱法(HPLC),因此,加强这组膜翅目昆虫的论文是希望在寻找分子产生新的药物和bioinsecticides。根据施密特、布卢姆和扶持政策(22),大肠tuberculatum蚂蚁之间有一个最有毒的毒液。Pluzhnikov和合作者和Arseniev23,24)已经证实高毒性的原始毒液和研究了孤立的肽ectatomin的作用。为了识别毒液的化学成分大肠tuberculatum在更详细,而且极其重要的获取信息的特点,其组件及其作用机理。

在目前的研究中,蛋白质的Ectatomma tuberculatum毒液已确定通过2 d页面,与质谱串联nanochromatography紧随其后。共有48个蛋白质已确定和讨论的行动机制。这可能有助于指出其中一些组件作为一个自然的原型生物活性分子的合成制药应用。

2。材料和方法

2.1。从蚂蚁腺体中提取蛋白质

工人的Ectatomminae ant大肠tuberculatum收集在实验领域的可可研究中心(CEPLAC)在小岛,巴伊亚,巴西。额外的信息在这个物种的生物学可可种植园中可以找到Delabie和赫拉和合作者26,27]。在实验室里,100名工人被麻醉和有限公司₂并为提取毒液腺解剖。

这些毒液的水库含有腺体被从刺器钳和microscissors把他们的尸体。毒液水库被小心翼翼地清洗和悬浮在小卷的磷酸缓冲盐溶液的pH值7.8,刺破,离心机在10.000 g×10分钟在4°C。上层清液的收集和保持在-20°C到使用。据罗查毒液蛋白提取的上层清液和合作者28)和二维定量工具(通用电气医疗集团)被用来量化的蛋白质。牛血清白蛋白(BSA)作为标准。

2.2。二维电泳(2 d)页

对于每一个样本,350μ补液缓冲区(7 g毒液蛋白均质摩尔·L⁻¹尿素2摩尔·L⁻¹硫脲,1%的家伙,和溴酚蓝的痕迹)使用40 mmol.L德勤⁻¹在pH值和0.5%两性电解质3-10NL最终成交量为250μl

能源论坛样本进行合作,在凝胶条13厘米,酸度梯度3-10NL (Amersham生物科学,Immobiline™干燥的加沙地区)。能源论坛的合作,在Ettan IPGphor 3(通用电气医疗集团)系统是根据制造商的手册。二维凝胶电泳进行12.5% SE600 Ruby垂直电泳系统(Hoefer)。使用的运行条件与母马和合作者29日],染色在0.08%胶体Coomassie [30.]5天,其次是使脱色在蒸馏水5天每日水替代胶体Coomassie去除多余。

凝胶扫描在映象II(通用电气医疗集团)成像。之后,分析了使用图像主2 d铂7.0(通用电气医疗集团)软件评估点的数量,等电点(π),分子质量(MM)、凝胶和相对丰富的地方。

2.3。现场准备和MS / MS分析

凝胶上的所有点都是切除借助手术刀,分别插入超小型电子管,据席尔瓦和合作者和加工(31日]。

肽消化和提取后,4μL样本对应的每个点都应用于nanoAcquity UPLC(水域®)并受C18“捕获”列的5μ米、180μm x 20毫米,紧随其后的是1.7的分析柱μ米、100μ0.6 m x 100毫米,在流动μL / min在50分钟内运行。肽分离根据梯度1%乙腈为1分钟,40分钟从1%到50%,从50%到85% 5分钟,剩余浓度2分钟,然后回到1%的浓度在一分钟,在这种情况下和剩余2分钟,共计5分钟的运行。

分离肽被转移到质谱仪(Micromass Q-TOF微),和电离毛细管在3000 V的电压。接下来,他们分散在积极的模式选择的最低强度的10项,和3最强烈的离子分析每个扫描1秒,碰撞能量从20到95 eV根据质量/电荷(m / z)肽的比例。

获得的光谱分析ProteinLynx全球服务器4.2(水),以及由吉祥物(矩阵科学),并与SWISSPROT NCBI数据库,分别。胰蛋白酶水解,可能损失的裂解位点被认为是。肽质量的公差为±0.3哒,和碎片的质量公差为±0.1。

肽识别通过NCBI数据库的完整序列位于同一银行和分析与NCBI Blast2GO使用BlastP蛋白质识别算法。

自大肠tuberculatum蚂蚁基因组尚未测序,蛋白质的识别是基于完整的基因组序列的生物系统接近的物种。

3所示。结果

350年μg的质量大肠tuberculatum毒液蛋白2 d页面上解决导致好看,配套的现货在14 - 97 kDa和pH值的范围4 - 9所示。更高密度的点出现的pH值范围5 - 8.5和25 - 93 kDa的分子量(图1)。

凝胶分析ImageMaster 2 d铂7.0软件显示点的数量,π和分子质量值,点在每个复制的表达水平。244在凝胶点检测。

从129点胰蛋白酶处理和分析质谱,48的毒液蛋白已确定大肠tuberculatum。其中,六显示相似,没有蛋白质的特征。

表1显示了蛋白质与各自在NCBI接入码,分子质量(毫米),等电点(π),得分,为每个点和肽序列。大肠tuberculatum蛋白质序列类似于其他膜翅目昆虫的蛋白质,包括黄蜂、蜜蜂和蚂蚁。

4所示。讨论

根据Blast2Go软件,42中发现的蛋白质大肠tuberculatum参与昆虫毒液基本上可以组合成蛋白质代谢(膜联蛋白B9,核苷二磷酸激酶;aconitate水合酶;超氧化物歧化酶;磷酸丙糖异构酶;glyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶;琥珀酰辅酶连接酶;fructose-bisphosphate醛缩酶;精氨酸激酶;柠檬酸合成酶;烯醇酶; ATP synthase; 4-hydroxybutyrate coenzyme A transferase; medium-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, and isocitrate dehydrogenase); transport protein (transferrin); and structural proteins (cyclophilin, actin, and chitinase).

三的毒液中发现的蛋白质大肠tuberculatum是一组化合物与已知过敏效果:磷酸丙糖异构酶,精氨酸激酶,cyclophilin-like蛋白质。通过各种分子生物学技术,包括蛋白质组学研究中,过敏的蛋白质存在于膜翅目昆虫毒液已确定,以及各自的行动机制。

磷酸丙糖异构酶蛋白,确定现货9,与碳水化合物的新陈代谢,扮演一个重要的糖酵解途径的酶。它已经被研究和分类32过敏,因为它出现在患者的血清呈现过敏蚊的叮咬Forcipomyia taiwana(Ceratopogonidae)。霍普,斯坦哈特,Paschke [33)发现过敏酶在蛋白质提取荔枝水果(荔枝无患子科)和磷酸丙糖异构酶高的同源性。

精氨酸激酶,表达点21日,22日,23日,24日和25个亚型的蛋白,是一种酶,催化磷酸基的可逆的转移从ATP供应需要energy-requiring细胞。它被发现在孤独的黄蜂Eumenidae的毒液Eumenes pomiformis和Orancistrocerus drewseni(34),在社会黄蜂的毒液Polybia保利斯塔人(胡蜂科),人类过敏行动的证据(35等)以及其他各种无脊椎动物Dermatophagoides pteronyssinus(壁虱:Pyroglyphidae),Blatella蠊(昆虫纲:布莱托帝:Blattellidae),中国对虾学名:(甲壳纲动物:Penaeidae),螯龙虾gammarus(甲壳纲动物:Nephropidae),贝壳类(软体动物类:双壳纲:贻贝科)Plodia interpunctella(昆虫纲:鳞翅目:Pyralidae),一种新的过敏原(36]。山本和合作者37)孤立的精氨酸激酶的毒液独居蜂蛛蜂科Cyphononyx背的蜘蛛,并证实其麻痹活动自然猎物。根据Hofling罗查[18膜翅目昆虫),使用他们的毒液麻痹或杀死猎物,以及脊椎动物保护自己当他们感到威胁,包括人类。根据(38),大肠tuberculatum是一个活跃的捕食者的可可害虫、食叶甲科(鞘翅目),切叶蚁,毛毛虫。这种蛋白质的毒液的存在大肠tuberculatum可能麻痹猎物的功能,促进交通鸟巢,喂养的幼虫或其他个人的殖民地。

Cyclophilin-like蛋白质点5中被确认。还有是peptidyl-prolyl顺反异构酶,酶存在于原核和真核细胞,促进肽债券的异构化反式来独联体在脯氨酸残基形成,促进蛋白质折叠39- - - - - -41]。他们是一个家庭的一部分同源蛋白质不同亚型,有明显的过敏活动(42]。膜翅目昆虫的毒液的作用还有不清楚但是很有可能,这种蛋白质结构功能,作用于蛋白质的异构化的毒液大肠tuberculatum。这也可能与过敏反应引起的毒液接种。

超氧化物歧化酶蛋白质(现货4)是一种酶,是蚂蚁防御系统的一部分,减少无功的函数形式的氧(43]。Peiren和合作者44和桑托斯和合作者35)揭示了毒液的这种酶的存在的蜜蜂蜜蜂和黄蜂在社会Polybia保利斯塔人,分别。这两项研究属性存在这种蛋白质在膜翅目昆虫毒液事实行为与自然氧化应激,避免破坏细胞结构,也可能发生大肠tuberculatum。

肌动蛋白(现货27)是一个有关细胞结构蛋白和细胞骨架的能动性45]。烯醇酶(点33 - 61)是一种金属酶,参与葡萄糖代谢的糖酵解阶段,和膜联蛋白B9(点1和76年)是一个家庭的一部分的蛋白质位于质膜下面,绑定到磷酸基的Ca2 +的存在中磷脂膜融合过程。这些都是描述为有关液蛋白,细胞外形成的泡状结构中间的融合与质膜内吞作用的隔间,负责释放胞内囊泡(46]。这些蛋白质在毒液的作用仍在评估,但几个组件通过液膜翅目昆虫毒液的分泌,而不需要一个信号肽,如在孤独的黄蜂大肠pomiformis和o . drewseni,这些蛋白质被发现。肌动蛋白,也称为蛇毒的一个组成部分,影响血压和血糖稳态的猎物34和也的毒液中发现Bombus terrestris(47]。几丁质酶蛋白,发现37岁的现货是一种酶,降解几丁质外骨骼的猎物,扮演一个重要角色的昆虫蜕皮的时期,因为它作用于前外骨骼的退化,允许重建一个新的几丁质的结构(48]。这种酶是一类化合物,是植物育种行业特别有趣,因为它在害虫控制程序,破坏几丁质存在于他们的外骨骼49,50]。克里希和合作者51)验证了这种酶的存在的毒液水库拟寄生物Chelonussp。(小茧蜂科)。他们观察到的几丁质酶在毒液促进退化猎物的角质层,使透明质酸酶等有毒成分的渗透,蜂毒肽和磷脂酶。根据宋和合作者52),这种蛋白质同源性与过敏物质。毒液的几丁质酶的存在大肠tuberculatum表明这种蛋白可能参与了捕获的猎物,因为这个ant以各种节肢动物为食,这显然有其几丁质组成的外骨骼。

转铁蛋白在66点确定,71年,72年和74年作为亚型,是一种运输蛋白亲和力高铁,允许其传输多个组织。在火红蚁火蚁、转铁蛋白合成发生在应对外部侵略,如由微生物引起的感染。这种蛋白质是重要的生理防御昆虫铁、封存的极端重要性的营养微生物新陈代谢(53]。它作为一种抗氧化剂代理控制细胞外铁水平,表明其在膜翅目昆虫毒液与保存的猎物,为了保持它的新鲜,直到喂养幼虫的时刻(34]。这种蛋白质也发现蜈蚣毒,被认为是一种有效的抗菌剂54]。德格雷戈里奥和合作者55)发现了这种酶果蝇sp。(双翅目:果蝇科)和相关的表达式与感染性病变的发生和子囊菌引起的感染真菌白僵菌。大肠tuberculatum蚂蚁吃小型节肢动物,可能导致感染宿主对微生物蚂蚁和/或它们的巢穴。转铁蛋白的存在大肠tuberculatum毒液可能与感染的预防机制这只蚂蚁,这刺痛和处理猎物的时候,孕生这种蛋白质的抗菌效果,从而减少风险的潜在感染的猎物进入他们的巢穴。

蛋白质表达点6,7,8,64年,73年和77年被记录在数据库“non-characterized”,但这些蛋白质所属保守域已经被识别,分类到特定的总科。点6 (SINV_05483), 7 (EAI_1007) 8 (LOC_100743840), 64 (LOC_100743840)和73 (EAI_10007)属于总科LPMO10(溶解多糖单氧酶、纤维素降解)。他们最近发现了一组氧化带来的重要作用的酶降解几丁质和纤维素等多糖裂开糖苷键的氧化颈- 1,c - 4个碳,或两者兼而有之(56,57]。现货77 (SINV_07147)属于总科GMC-OXRED-C (glucose-methanol-choline氧化还原酶)。他们与氧化还原酶活性聚合同源蛋白质,它使用时尚作为一个辅助因子(58,59]。

一些蛋白质的毒液中发现大肠tuberculatum中发现的蛋白质成分一般不属于膜翅目昆虫的毒液。很可能这些蛋白质是细胞的膜组件的毒液水库。表2总结了这些蛋白质的情况及其相应的功能。

毒液的蛋白质组学分析的结果大肠tuberculatum允许9个蛋白质的识别与攻击/防御的过程和维护的殖民地。活性成分的毒液被分为五组:

殖民地asepsis-transferrin和膜联蛋白B9:他们所使用的抗氧化和抗菌活性,预防感染的昆虫储存食物和群体成员自己的34,53,54]。

蛋白质的毒液constituents-superoxide歧化酶和cyclophilin-like:他们与细胞的功能完整的保存/腺成分,防止氧化和破坏细胞结构的毒液袋及其储层(35,40,41,44]。

扩散的毒液prey-chitinase、烯醇酶膜联蛋白B9,和肌动蛋白:扩散的过程中成分的毒液46]。

猎物paralysis-arginine激酶:它会引起神经毒性,导致瘫痪和随后的死亡的猎物38]。

烯醇酶,改变体内平衡和细胞toxicity-actin glyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶:他们造成损害的不同组织类型和蚀变细胞内稳态和可能毒害神经的34]。

图2简历的计划提到的功能。

识别和描述的蛋白质的毒液大肠tuberculatum可以帮助更好的理解蚂蚁如何使用蛋白质成分等不同的行为防御自然和致病性的敌人,攻击猎物,和维护的殖民地,除了相关的存在某些过敏组件在毒液的影响接种后发生在人类身上。此外,提供知识如上所述,这样的研究也有助于识别合成大分子物质尽可能原型的新用途,从他们作为分子标记来制造药物和杀虫剂。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

特别感谢将马丁Brendel回顾英语手稿。本研究获得的支持PRONEX程序(SECTI-FAPESB & CNPq项目011/2009)。最后青年队,承认她的研究(MS)拨款斗篷,从CNPq JHCD承认他的研究资助。

引用

1. r·丰塔纳c·p·Pirovani h·科斯塔et al .,“Complexidade e atividade biologica das peconhas de formigas em特殊de poneromorfas”作为formigas Poneromorfas巴西,j . h . c . Delabie r . m . Feitosa j . e . Serrao c . s . f·马里亚诺·和j·d·maj。Editus,页271 - 284年,小岛,巴西,2015年。视图:谷歌学术搜索
2. h·b·维斯“昆虫学过去的药物,”纽约社会昆虫学杂志》上,55卷,第168 - 155页,1947年。视图:谷歌学术搜索
3. e . m . Costa-Neto”Entomotherapy或药用昆虫,”人种生物学杂志》上,25卷,不。1,第114 - 93页,2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. e·m·科斯塔否决权和j·m·帕切科”Utilizacao药用de insetos没有povoado de岩石布兰卡,圣Terezinha巴伊亚,巴西”Biotemas,18卷,不。1,第133 - 113页,2005。视图:谷歌学术搜索
5. a•t•多塞”昆虫和它们的化学武器:新的潜在的药物发现,“天然产品报告,27卷,不。12日,第1757 - 1737页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. n·a·拉特克利夫c·b·梅洛e·s·加西亚·t·m .对接和p . Azambuja“昆虫天然产品和流程:新人类疾病的治疗方法,”昆虫生物化学和分子生物学第41卷。。10日,747 - 769年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. a·w·芬顿p·r·西g . v . Odell et al .,“节肢动物毒液柠檬酸抑制磷脂酶A2,”Toxicon,33卷,不。6,763 - 770年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. p .杨J .朱m·李,李J。,和X. Chen, “Soluble proteome analysis of maleEricerus佩拉通知二龄幼虫表皮的阶段,”非洲的微生物学杂志》上的研究,5卷,不。9日,第1118 - 1108页,2011年。视图:谷歌学术搜索
9. a·c·平托d·h·席尔瓦诉d。Bolzani, n . p .洛佩斯和r . d, Epifanio”Produtos naturais: atualidade, desafios e perspectivas,”Quimica新星卷。25日,45 - 61年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 格拉茨,j . Falquet,大肠Elisabetsky”民族药物学、可持续发展与合作:在实地调查收集临床数据的重要性,”民族药物学杂志,卷130,不。3、635 - 638年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. p . Bulet和r . Stocklin昆虫抗菌肽:结构、属性和基因调控,”蛋白质和多肽的信件,12卷,不。1,3-11,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. b e c银行和r . a . Shipolini”彼此之间的化学和药理学的毒液,”膜翅目昆虫的毒液:生化、药理和行为方面,t . Piek。页330 - 416,学术出版社,伦敦,英国,1986年。视图:谷歌学术搜索
13. a·f·c·托雷斯y p—a . Havt g . Radis-Baptista和a . m . c·马丁斯”分子药理学和toxinology毒液的蚂蚁。膜翅目昆虫集成视图的分子识别和toxinology,”分析方法的生物医学应用程序,8卷,第222 - 207页,2013年。视图:谷歌学术搜索
14. m . s .布卢姆,“蚁毒液:化学和药理性质。”毒素的评论,11卷,不。2、115 - 164年,1992页。视图:谷歌学术搜索
15. 诉哈达德Jr .) j·l·c·卡多佐和r·h·p·莫拉”描述的损伤在人类引起的假tocandira (Dinoponera gigantea, perty, 1833)与民俗的修订,药理和临床方面的巨型蚂蚁属Paraponera和Dinoponera (sub-family猛蚁亚科),“航空杂志上做研究院药物热带de圣保罗卷,47号4、235 - 238年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c . j . Steen c . k . Janniger s e·舒兹和r·a·施瓦兹”昆虫刺痛反应蜜蜂,黄蜂,和蚂蚁,”国际皮肤科杂志,44卷,不。2、91 - 94年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. j . Orivel和a . Dejean”比较的影响蚂蚁的毒液培(膜翅目:猛蚁亚科),属“Toxicon,39卷,不。2 - 3、195 - 201年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. m·a·c·Hofling和t .罗查Aspectos da Miotoxicidade e Neurotoxicidade de Venenos de膜翅目”Alergia Venenos de Insetosf·f·m·卡斯特罗和m . s .帕尔马,Eds。,p. 231, Manole, Barueri, Brazil, 2009.视图:谷歌学术搜索
19. m·d·威斯s g a .布朗,t . k . Chataway et al .,“Myrmecia令党参(杰克跳)蚁毒液:过敏原的识别和修正命名,“过敏:欧洲变态反应与临床免疫学杂志》上,卷62,不。4、437 - 443年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 陶查德,j . m . s . Koh s . r .爱里et al .,“蚁毒液的复杂性和结构多样性peptidomes由质谱分析显示,“质谱快速通信卷,29号5,385 - 396年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. s . r .爱里陶查德,j . m . s . Koh et al .,“比较的蛋白质和肽的复杂性Poneroid Formicoid蚁毒液,“蛋白质组研究期刊》的研究,15卷,不。9日,第3054 - 3039页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. j·o·施密特,m . s .布卢姆和w·l .扶持政策“比较酶学的毒液从激烈的膜翅目昆虫,”Toxicon,24卷,不。9日,第921 - 907页,1986年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. k . Pluzhnikov e . Nosyreva l .舍甫琴科et al .,“ectatomin细胞膜,行动的分析”欧洲生物化学杂志,卷262,不。2、501 - 506年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. a . s . Arseniev k . a . Pluzhnikov d . e . Nolde et al .,“有毒的热带雨林蚁毒液是一种成孔蛋白变压器原理,“2月的信,卷347,不。2 - 3、112 - 116年,1994页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. d·e·Nolde a·g·Sobol k . a . Pluzhnikov e . v . Grishin和a . s . Arseniev”三维结构的ectatomin Ectatomma tuberculatum蚁毒液,“《生物分子核磁共振,5卷,不。1,1-13,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. j·h·c·Delabie”,蚂蚁在巴西可可农场的问题,”应用蚁学:一个角度看世界,r·k·范德米尔、k Jaffe和a . Cedeno Eds。,pp. 555–569, Westview Press, Boulder, CO, USA, 1990.视图:谷歌学术搜索
27. r·r·赫拉e . Vilela r . Feneron a . Pezon d . Fresneau和j . Delabie”兼性一夫多妻制在Ectatomma tuberculatum(蚁科,Ectatomminae)”社会昆虫》,52卷,不。2、194 - 200年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. t . l .罗查p h·a·科斯塔和j . c . c . MagalhaesComunicado Tecnico 136: Eletroforese注意de Proteomas二维的e巴西,巴西利亚,,“巴西农业研究公司”,2005年。
29. j . h .母马k . p . Gramacho e·c·多斯桑托斯et al .,“蛋白质和蛋白质相互作用网络Moniliophthora孢担孢子,”BMC微生物学,16卷,不。1,货号。120年,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. 诉Neuhoff: Arold、d . Taube和w·Ehrhardt”改善染色蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶等电点聚焦包括凝胶毫微克灵敏度有着明显的背景使用考马斯亮蓝g - 250和r - 250”电泳,9卷,不。6,255 - 262年,1988页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. f·a·c·席尔瓦c·p·Pirovani美国塞斯et al .,“蛋白质组的反应Moniliophthora孢暴露pathogenesis-related protein-10一种从可可树的东西可可,”遗传学和分子研究,12卷,不。4、4855 - 4868年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. 中州。陈,M.-F。李,J.-L。局域网et al .,“过敏症Forcipomyia taiwana(咬蚊):主要为t 1的临床分析和识别,为t t 2和3过敏原,”过敏:欧洲变态反应与临床免疫学杂志》上,60卷,不。12日,第1523 - 1518页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 美国霍普,h·斯坦哈特,a . Paschke”28 kDa荔枝过敏原的识别磷酸丙糖异构酶,”食品和农业免疫学,17卷,不。1,9-19,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. j·h·门敏和s h·李”,隔离和分子克隆的毒液肽Orancistrocerus drewseni(膜翅目:Eumenidae)”Toxicon,55卷,不。4、711 - 718年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. l·d·多斯桑托斯k . s .桑托斯,j·r·A·平托et al .,“蛋白质组的分析从社会蜂毒液polybia保利斯塔人:一个线索了解下毒机制,“蛋白质组研究期刊》的研究,9卷,不。8,3867 - 3877年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. m .粘合剂诉马勒,b .哈耶克et al .,“分子和精氨酸激酶的免疫学特征玉米面蛾,Plodia interpunctella,小说可交叉反应的无脊椎动物pan-allergen,”《免疫学,卷167,不。9日,第5477 - 5470页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 山本t、h . Arimoto t . Kinumi y Oba,和d . Uemura”识别的蛋白质从麻痹蜘蛛的毒液黄蜂,Cyphononyx背的,”昆虫生物化学和分子生物学,37卷,不。3、278 - 286年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. j . h . c . Delabie h·s·r·阿尔维斯v c语言,p·t·a·马丁斯和i . c . Nascimento Biogeografia das formigas predadoras generoEctatomma(膜翅目:蚁科:Ectatomminae)不达·巴伊亚帝汶岛e区vizinhas,”Agrotropica卷。19日,13-20,2007页。视图:谷歌学术搜索
39. s Kumari s罗伊·辛格·l·Singla-Pareek和a . Pareek”还有:蛋白质的功能,植物信号和行为,8卷,不。1,25-32,2013页。视图:谷歌学术搜索
40. r·韦斯曼j . Creanor和p .钟”,multicopy抑制细胞周期缺陷的年代。非洲酒编码热shock-inducible 40 kDa cyclophilin-like蛋白质,”EMBO杂志,15卷,不。3、447 - 456年,1996页。视图:谷歌学术搜索
41. 王p . j .海特曼”还有,“基因组生物学》第六卷,没有。7,货号。226年,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. s . Fluckiger h . Fijten·惠特利和r . Crameri k·布拉斯”的新家庭还有交叉反应的过敏原,”欧洲免疫学杂志,32卷,不。1 - 17,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. j·m·麦考德和i Fridovich”超氧化物歧化酶。红细胞铜蛋白的酶功能(hemocuprein)。”《生物化学》杂志上,卷244,不。22日,第6055 - 6049页,1969年。视图:谷歌学术搜索
44. n . Peiren d . c .格拉夫f . Vanrobaeys et al .,“蜜蜂的蛋白质组学分析工人毒液腺关注防止组织损伤的机制,”Toxicon,52卷,不。1,第83 - 72页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. j·p·杨,j .朱m . Li Li和陈x”,可溶性蛋白质组分析的男性Ericerus佩拉通知二龄幼虫表皮的阶段,”非洲微生物学杂志》上的研究,5卷,不。9日,第1118 - 1108页,2011年。视图:谷歌学术搜索
46. j·r·埃德加“问答:液是什么?”BMC生物学,14卷,p。2016。视图:谷歌学术搜索
47. m . Van Vaerenbergh g . Debyser g . Smagghe b . Devreese d·c·格拉夫,“解开大黄蜂的毒蛋白质组(Bombus terrestris)通过集成与女士FT-ICR组合肽配体库的方法,”Toxicon卷,102篇文章。4698年,第88 - 81页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. a . Nakabachi s Shigenobu, s . Miyagishima说“Chitinase-like基因组中编码蛋白质的豌豆蚜虫,Acyrthosiphon pisum,”昆虫分子生物学,19卷,不。2、175 - 185年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. k·j·克雷默和美国Muthukrishnan昆虫几丁质酶:分子生物学和潜在使用生物农药,”昆虫生物化学和分子生物学,27卷,不。11日,第900 - 887页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. h . Merzendorfer和l . Zimoch”在昆虫几丁质代谢:结构、功能和调节几丁质合成酶和几丁质酶,”实验生物学杂志》上,卷206,不。24日,第4412 - 4393页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. a . Krishnan, p . n . Nair, d·琼斯,“隔离、克隆和表征的新几丁质酶活性形式存储在chitin-lined毒液水库,”《生物化学》杂志上,卷269,不。33岁,20971 - 20976年,1994页。视图:谷歌学术搜索
52. 刘贤桢,c。在香港,js。李,J.-W。公园,“优化过敏原标准化”,延世医学杂志,52卷,不。3、393 - 400年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. s . m .水手和r·m·佩雷拉火红蚁转铁蛋白:cDNA克隆,基因架构,和老年病白僵菌感染,”基因,卷358,不。1 - 2日,60 - 66、2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. e·a·b·Undheim b·g·弗莱和g·f·王,“蜈蚣毒:最近发现和知识的当前状态,”毒素,7卷,不。3、679 - 704年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. e·德格雷戈里奥,p . t .首位,g·m·鲁宾和b . Lemaitre”的全基因组分析果蝇免疫反应利用寡核苷酸微阵列,”美国国家科学与美利坚合众国,卷98,不。22日,第12595 - 12590页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. z Forsberg, a·k·麦肯齐·m·Sørlie et al .,”结构和功能特征的一双守恒的细菌cellulose-oxidizing溶解多糖单氧酶,”美国国家科学与美利坚合众国,卷111,不。23日,第8451 - 8446页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. g·r·海默·e·j·泰勒,r .问:金正日et al .,“铜CBM33多糖加氧酶的活性部位,”美国化学学会杂志》上,卷135,不。16,6069 - 6077年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. d·r·卡文和p . a . Krasney果蝇葡萄糖脱氢酶和酵母醇氧化酶是同源和分享n端与其他黄素酶的同源性,”分子生物学与进化,8卷,不。1,第150 - 144页,1991。视图:谷歌学术搜索
59. k . Iida d, l·考克弗斯特x杨W.-Y。Ko, d·r·卡文“扩张和昆虫GMC氧化还原酶的进化。”BMC进化生物学7卷,货号。75年,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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