文摘

背景。视Neuromyelitis(动)是一种严重致残,中枢神经系统的自身免疫性疾病,主要影响视神经和脊髓。然而,最近的研究表明,extra-opticospinal在动比之前认为的更常见。客观的。调查患者的嗅觉功能的neuromyelitis视(动)与健康对照组(HC)。方法。心理物理测试执行orthonasal的使用Threshold-Discrimination-Identification测试(TDI),测量不同品质的嗅觉,在10没有动病人和HC。结果。五10动病人(50%)显示,嗅觉减退,而所有10个HC normosmic。此外,基于患者显著降低的意思TDI分数与HC相比,基于性能降低的歧视和识别单项成绩。结论。我们的研究结果表明,嗅觉减退可能扩大临床表现的一部分动。

1。介绍

视Neuromyelitis(动,德维克氏综合征)是一种中枢神经系统自身免疫性疾病,主要影响视神经和脊髓(1,2]。嗅觉受损越来越认可在神经退行性疾病如帕金森氏症和老年痴呆症,据报道在多发性硬化(MS)患者(3,4]。动可能超越复发的临床表现的视神经炎和脊髓炎2,5这里,我们调查是否嗅觉功能的改变在动。

2。患者和方法

这个试点研究了从2011年7月到2012年10月。十个病人动根据2006年的诊断标准(1]从的前瞻性招募了门诊。Aquaporin-4抗体测试使用的是商业上可用的细胞试验采用重组人类目标抗原(EUROIMMUN, Luebeck,德国)6]。健康对照组(HC)的10个人密切匹配的性别和年龄(±3年)是医院工作人员中招募。两组人嗅觉障碍的排除标准(传染病后、创伤后、sinunasal),上呼吸道感染,肿瘤放疗或化疗,治疗过敏,抑郁症和帕金森氏症或阿尔茨海默氏症。所有的研究参与者声明为不吸烟者。病人服用的药物可能会导致嗅觉障碍例如阿米替林和D-penicillamine被排除在研究之外。此外,在测试期间接受皮质类固醇治疗的患者被排除在外,因为糖皮质激素的影响。嗅觉是评估使用三方Threshold-Discrimination-Identification测试(TDI),基于形似odour-dispensing设备推荐的“工作组嗅觉学和Gustology”德国ENT社会(7]。的阈值测试( 以及)由48“嗅探棒”16强稀释系列的正丁醇对确定患者的嗅觉感知阈值。的歧视测试( 以及)由48嗅探棒测试的区别不同的气味。日常气味必须认同了识别测试( 以及)。低各分测验成绩证明低嗅觉性能。的所有三个单项成绩总结到TDI分数。一个TDI的价值小于16意味着嗅觉缺失症,30分嗅觉减退,normosmia超过30分。统计分析了GraphPad Prism 4.01(美国圣地亚哥)。的Mann-Whitney 测试是用来比较的中位数嗅动患者和对照组之间的测试结果。比例hyposmic患者两组之间比较确切概率法。显著性水平是定义 。由于这个试点研究的探索自然,没有调整多个测试。这项研究是伦理委员会批准的,和所有参与者给书面知情同意。

评估的绑定NMO-IgG AQP4表达在嗅球,7μ成年大鼠和小鼠嗅球cryosections (10μ米)被孵化10%磷酸盐福尔马林4分钟。在磷酸盐(PBS)三个洗后,洗涤剂(1%的皮套裤PBS)申请了4分钟。在PBS三个额外的洗后,PBS含有10%正常山羊血清申请60分钟。部分被孵化与患者和对照组的血清(1:60)在室温下为60分钟。一个商业Alexa萤石488 -共轭山羊anti-huIgG抗体(表达载体,达姆施塔特,德国)是用于检测病人的免疫球蛋白。60分钟后,井在PBS彻底清洗,玻璃盖玻片和延长黄金安装介质应用于每个幻灯片(表达载体)。

3所示。结果

五个十个患者(50%)动显示,嗅觉减退,没有了味觉。其余患者正常的嗅觉功能。相比之下,所有的对照组normosmic(表1)。的两个hyposmic病人并没有意识到自己的嗅觉赤字。此外,都意味着全部TDI分数和D- - -我基于患者的部分的得分较低而HC(表1),表明较低的嗅觉能力。hyposmic动病人的意思TDI分数的26个标准差为2.0。4的5 (80%)hyposmic患者AQP4抗体阳性。嗅觉障碍的患病率在AQP4-IgG-positive病人(67%)高于AQP4-IgG-negative患者(25%),但差异不显著。没有联系和疾病持续时间。

表1
人口数据和手段的嗅觉测试结果动患者和健康对照组。

免疫组织化学。按照NMO-IgG染色模式最初描述的小脑组织部分,强染色的星形endfeet相邻软脑膜和微脉管系统(数据被发现1和2)。只有轻微的(如果有的话)染色的嗅觉发现肾小球。没有明显的绑定是在外围嗅觉神经,旁边的结缔组织的内侧表面嗅球,或(除了血管周的染色)的任何内在的嗅球层。总的来说,二十组织部分(10倍的老鼠,老鼠10倍)染色。观察上述染色模式有5/5没有AQP4-Ab-positive动样品,但不是有三个没有AQP4-Ab-negative动样品而不是两个健康控制样本。相同的模式观察老鼠而不是老鼠组织部分工作时,虽然使用老鼠组织导致更强烈的染色(没有显示)。


图1
绑定的血清NMO-IgG嗅球,证明了间接免疫组织化学formalin-fixed cryosections鼠组织。结合患者的免疫球蛋白g绿色(AF488)所示。有关详细信息,请参阅方法部分。图显示了一个横截面的内侧表面附近的嗅球。箭头=软脑膜;箭=微脉管系统;GL =嗅小球;在=外围嗅觉神经(上);问=神经纤维层;CT =结缔组织的内侧表面旁边嗅球。

图2
血清NMO-IgG绑定到的内在部分大鼠嗅球,证明了间接免疫组织化学。有关详细信息,请参阅结果部分。结合患者的免疫球蛋白g所示绿色(AF488);细胞核蓝色所示(4′,6-diamidino-2-phenylindole)。箭头=微脉管系统;ExtPL-external网状层;ML-mitral细胞层;IntPL =内部网状层;GrL =颗粒层。

4所示。讨论

我们的研究显示orthonasal嗅觉减退被五分动病人心理物理测试。四,五hyposmotic患者AQP4抗体阳性。我们的研究结果与临床表现的拓宽频谱动,远远超出了经典的视神经炎和脊髓炎5)现在包含各种脑干症状,疼痛,后部可逆性脑病综合症。

嗅觉受损会导致损害嗅觉通路的不同部分。外围损坏主要是由于解剖异常的鼻腔、特别是嗅裂,嗅上皮损伤和嗅觉神经。嗅觉功能障碍也可以损害的结果或萎缩的嗅球,嗅皮层,和更高的处理区域的嗅觉系统,如边缘系统。

在临床常规检查嗅觉功能的不定期执行,可能由于耗时的程序需要objectify嗅觉受损。然而,嗅觉功能障碍被描述在许多神经退行性疾病(3),包括女士,嗅觉障碍从中枢神经系统损害的结果之间的关联嗅觉功能在大脑嗅觉和病变负载(4)和嗅觉功能的关系在嗅觉结构中部纵向斑块数量的变化(8]。我们报告一个嗅觉皮层的损伤负荷之间的关系和嗅球和嗅脑的体积(9]。

在动,现在被认为是一种疾病实体不同于女士(10),最近的神经影像学研究一直报道超过50%的患者大脑异常(5,11),然而,没有特别调查病变或体积减少嗅觉中枢神经系统结构。我们感谢神经病理或MRI研究展示典型动病变嗅觉结构需要正式证明应该动和OD在我们的病人之间的联系。重要的是,然而,我们的研究结果提供了一个强有力的理由将这种分析在未来多中心研究动。

动校正的主要目标抗原,AQP4表达在鼻嗅黏膜包括基底细胞、支持细胞和腺体鲍曼的嗅觉上皮作为嗅觉的微环境必要的(12和星形endfeet密封微脉管系统,和嗅球的软膜的表面;因此,我们发现一个强大的染色的嗅球AQP4-IgG-positive动血清(见图1和2)。AQP4-IgG已被证明导致组织损伤的补体的激活和锁定细胞介导细胞毒性13,14]。嗅觉功能障碍可能发生由于组织损伤与AQP4表达嗅觉结构。是否参与机制除了AQP4-IgG嗅觉减退的发病机制单一“血清反应阴性的病人(否则满足动)的所有诊断标准仍然是未知的。或者,“seronegativity”这个病人可能是由于目前有限的敏感性分析(15]。在重症肌无力(MG),证明了体液的另一个自身免疫性疾病发病机理,花了近25年,直到一个更加敏感的一类免疫测定了;随后,三分之二的患者先前划归为“血清反应阴性的毫克”被发现港口低亲和力乙酰胆碱受体(乙酰胆碱受体)血清自身抗体(16]。

总之,我们的研究结果表明,嗅觉减退可能扩大临床表现的一部分动并提供大规模的理由,多中心研究嗅觉障碍的频率在动。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

研究概念和协调是由费利克斯·施密特;数据采集和解释由费利克斯·施密特,出席Goktas, Klemens鲁普雷希特,Friedemann保罗,和Lutz危害;最初的草案是由费利克斯·施密特;AQP4抗体检测和免疫组织化学是由斯文Jarius;研究监督:Lutz危害;关键的修订手稿的重要知识内容是由费利克斯·施密特,出席Goktas,斯文Jarius,林Wildemann, Klemens鲁普雷希特,Friedemann保罗,Lutz危害。

确认

这项工作是支持的德国研究基金会和德国教育和研究(能力网络多发性硬化症)(DFG Exc 257 F.P.)。作者要感谢太太安娜Eschlbeck尼康成像中心的海德堡大学的优秀的技术援助。