文摘
本研究评估改善效果的维生素C在甲状腺激素的改变引起的低剂量subchronic共同服用毒死蜱的(CPF)和铅(Pb)。四十Wistar鼠被分成4组,每组10个动物。组I和II是管理豆油(2毫升/公斤)和维生素C(100毫克/公斤),分别。集团第三coadministered论坛(4.25毫克/公斤~把有限的50)和Pb(250毫克/公斤~把LD50),分别。第四组是使用维生素C(100毫克/公斤)然后coadministered论坛(4.25毫克/公斤)和Pb(250毫克/公斤),30分钟以后。方案是由填喂法一段9周。边际降低血清三碘甲状腺氨酸和甲状腺素和促甲状腺激素的浓度显著增加,组中的malonaldehyde coadministered论坛和Pb改善了维生素C部分由于其抗氧化性能。
1。介绍
男人和动物暴露在环境中的化学污染物的“汤”,它直接或间接地影响他们的健康和福祉。农药和重金属是最常见的环境污染物,因为各自的广泛使用在农业和工业。迄今为止,大多数研究这些化学污染物以考试为中心的一个代理,因此,当前的理解许多环境毒物的毒性污染物主要基于毒性研究进行实验动物暴露在单一毒性药物(1,2]。然而,与许多化学品环境严重污染,相互作用的方式修改他们在人类和动物的毒性反应。
有机磷化合物(OP)是最广泛使用的杀虫剂占全球的50%杀虫使用[3]在Pb是最普遍的重金属污染物广泛应用(4]。职业和环境铅暴露继续成为最重要的公共卫生问题(4- - - - - -7]。由于持续的自然环境和toxicodynamics,论坛和Pb导致有害的影响在人与动物8]。
铅的毒性仍然是一个重要的公共健康问题(9)由于其普遍性的环境和意识对其毒性作用[10)暴露水平低于以前被认为是有害的(11]。生殖铅暴露的后果是广泛的12),影响繁殖[的几乎所有方面13]。Pb诱发精子数目和活性的降低和增加动物形态异常(14,15]。论坛是最常见的一种杀虫环境污染物(16,17]。尽管限制在一些国内使用由美国环境保护署(构成)2000年,论坛还广泛用于残留已发现在柑橘类水果在世界的某些地方18]。不良生殖结局CPF中毒(后曾被观察到16,17,19- - - - - -21]。不良生殖健康状况甚至由于环境暴露论坛已经部分与甲状腺功能减退(17]。此外,其他研究已经发现在论坛(甲状腺功能减退17,22- - - - - -24和铅25- - - - - -28中毒。因为足够thyroidal函数对有效和最优繁殖性能至关重要,因此,措施旨在缓解甲状腺机能障碍被暴露于低剂量的环境污染物相关的煽动。
虽然两个代理的毒性机制不同,氧化应激是一种常见的特性在论坛29日- - - - - -33和铅34- - - - - -36)中毒。然而,抗坏血酸已经显示出巨大的承诺减轻毒性诱发的论坛(31日,33,37,38和铅28,39]。因此,本文旨在评估低剂量的效果subchronic暴露在论坛和Pb在甲状腺功能,角色的thyroidal lipoperoxidation, Wistar鼠的改善作用的维生素C。
2。材料和方法
2.1。实验动物
四十6只成年雄性Wistar鼠从动物屋获得兽医系的生理学和药理学,Ahmadu贝洛大学Zaria,尼日利亚。老鼠被喂食标准鼠丸,和水随意。实验进行了符合美国国立卫生研究院的指导护理和使用实验动物(40]。
2.2。化学物质
商业级论坛(Termicot 20% EC,外出远足有机物、古吉拉特邦、印度)重组在豆油10%解决方案,随后被用于实验。分析级醋酸铅(Kiran光实验室,孟买,印度)用于研究重组成20%解决方案使用蒸馏水。商业级维生素C片剂(100毫克/片;Emzor制药有限公司、尼日利亚、BN: 618 N)溶解在蒸馏水至10%解决方案就在日常管理。
2.3。动物治疗
四十的成年雄性Wistar鼠被分成4组每组10动物。老鼠在我组(C /油)管理玉米油(2毫升/公斤),而在第二组中(VC)服用维生素C(100毫克/公斤)。老鼠在第三组(CPF) coadministered CPF 4.25毫克/公斤,~把机器LD50(24)和醋酸铅225毫克/公斤,~把机器LD50(28),分别。老鼠在第四组(VC +公积金+ Pb)使用维生素C,然后coadministered论坛(4.25毫克/公斤)和Pb(225毫克/公斤),30分钟以后。这些方案被填喂法一次口服每日一段9周。的剂量,老鼠被光氯仿麻醉后颈venisection牺牲。血清获得每个浓度的血液样本被用来评估triodothyronine (T3)、甲状腺素(T4)和促甲状腺激素(TSH)、甲状腺重量时,然后评估malonaldehyde lipoperoxidation指数(MDA)浓度。
2.4。评价Triodothyronine-Thyroid刺激激素和甲状腺素的浓度
T的浓度3T4,TSH化验使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(Microwell TSH, T3,T4包;美国公司Synthron生物学研究)。
2.5。治疗对甲状腺的影响Lipoperoxidation
硫代巴比土酸水平的活性物质,malonaldehyde (MDA)作为一个索引的脂质过氧化作用是评估甲状腺使用德雷伯的双重加热法和哈德利(41]。方法的原理是基于光度测量的颜色反应,硫代巴比土酸与malonaldehyde(稍后通知)。每个动物的甲状腺在所有组重,然后在一个已知体积的冰冷的均质磷酸盐缓冲获得匀浆10%,在2000 g离心10分钟得到上层清液。然后上层清液是用来评估样品中蛋白质和MDA的水平。MDA的评估甲状腺匀浆上清液的浓度从而执行;2.5毫升的100 g / L三氯乙酸溶液添加到0.5毫升的甲状腺匀浆在离心管放入沸水浴15分钟。自来水下冷却5分钟后,混合物被离心10分钟的1000克。2毫升的上层清液加入1毫升的6.7 g / L(0.67%)硫代巴比土酸(稍后通知)解决方案在试管和放置在一个沸水浴15分钟(100°C)。解决方案是在自来水冷却和吸光度是此后以使用紫外分光光度计(T80 532海里+UV / VIS光谱仪PG仪器有限公司、英国)。MDA的浓度的吸光度系数计算MDA-TBA复杂(厘米−1),表示为nmol /毫克组织蛋白质。蛋白质浓度测定用洛瑞等描述的方法。42]。
2.6。统计分析
获得的数据被表示为意味着+ SEM然后受到单向方差分析其次是图基的事后测试使用Graphpad prism 4.0版。的值被认为是重要的。
3所示。结果
3.1。治疗对血清三碘甲状腺氨酸浓度的影响
治疗血清T的影响3如图1。血清T没有显著差异3团体之间的水平。然而,公积金+ T Pb组最低3浓度水平降低了14.3%,29%,和14.3%,分别相对于S /石油、VC、和VC +公积金+ Pb组。
3.2。治疗对血清甲状腺素浓度的影响
没有明显()不同血清T4团体之间的水平。然而,最低的T4水平被记录在论坛+ Pb组水平下降了0.6%,32%,和26%相比,S /油、VC、分别和VC +公积金+ Pb组(图2)。
3.3。治疗对血清促甲状腺激素浓度的影响
治疗的效果在TSH浓度如图3。有一个重要的()增加TSH浓度在论坛+ Pb组比S /石油集团。TSH浓度在VC +公积金+ Pb组显著(比S /石油集团)增加。没有明显(TSH浓度)变化在VC组与S /油相比,公积金+铅、或VC +公积金+ Pb组。
3.4。治疗对甲状腺的影响丙二醛浓度
治疗的效果在thyroidal MDA浓度的各种组织如图4。有一个重要的()MDA浓度增加论坛+ Pb组相比,S /油、VC、VC +论坛组。MDA浓度显著()增加了在VC +公积金+ Pb组相比,VC组。
3.5。治疗的甲状腺重量的影响
治疗甲状腺重量的效果如图5。没有显著变化)在甲状腺的重量之间的组织。然而,甲状腺重量高论坛组的11.4%,8%,和7.2%相比,C /油、VC、分别和VC +论坛组织。
4所示。讨论
低剂量subchronic论坛共同和Pb模仿环境暴露,并没有造成任何明显的系统性毒性,已被证明导致无意义的降低血清T水平3和T4在目前的研究。虽然,甲状腺激素的浓度的变化不显著,这些非常低剂量的论坛和Pb造成某种程度的荷尔蒙变化不应该被忽略,因为它可能表明系统中正在进行的亚临床代谢改变。论坛已被证明导致母羊(甲状腺功能减退22)和大鼠(23,24,43]。扎伊迪et al。44)血清中甲状腺功能减退构建一些农药的记录。同样,米克尔et al。17演示了一个逆尿CPF代谢物的浓度之间的联系,3,5,6-trichloro-2-pyridinol和T4与TSH水平和积极的联系。同样,甲状腺功能减退与铅有关(45,46)中毒。也许论坛共同的原因及其Pb没有导致甲状腺激素浓度显著的改变可能是由于低剂量使用的两种化学物质。
尽管T3是一个贫穷的亚临床指标或公开的甲状腺功能减退,边际降低血清T3水平组中观察到subchronically coadministered论坛和Pb可能是由于低T4水平组中观察到,而不是减少合成。这是因为T4必须被转换成T3对激素的生物学效应。此外,相对低的T3水平也可能是由于缺乏合成的5′-deiodionase,酶负责T的转换4代谢更为活跃的T3。事实上,Pb已经证明抑制活性的i型iodothyronine 5′-monodeiodinase (5′- d)活动(45]。论坛已经建议不同影响外围deiodination [23]。低5′-deioodinase活动可能是由于病变器官负责论坛和铅的合成。
边际T水平降低4组中观察到coadministered论坛和Pb可能是由于甲状腺腺泡的一定程度的损坏可能是由于氧化应激诱导的论坛(23,24,43,44和铅47,48]。尽管如此,目前的研究没有评估甲状腺组织学变化,Pb的已被证明导致甲状腺功能减退通过抑制碘的摄入(25,26),导致的功能障碍pituitary-thyroid轴(27]。
一定程度的改善T的浓度3和T4在使用维生素C组可能突显出甲状腺机能障碍诱发的氧化应激的作用共同论坛和Pb的低lipoperoxidative VC +公积金+ Pb组的变化。维生素C有甲状腺腺泡的免受氧化损伤可能帮助恢复甲状腺激素的合成功能。除了它的抗氧化性能,其他一些nonantioxidant活动的维生素C可能补充恢复thyroidal函数。例如,维生素C已经证明援助paraoxonase的合成,一个重要的酯酶,解毒的艾滋病行动(49]。
在TSH浓度显著增加组coadministered论坛和Pb可能是由于身体试图刺激甲状腺增加T的合成和精化4为了补偿系统中明显的赤字。CPF-induced TSH浓度的增加已经记录在人类[17,44)和实验室动物模型(23,24]。低T4公积金+ Pb组的浓度可能会刺激下丘脑神经元分泌促甲状腺素释放激素(皇室)导致增加刺激TSH合成(50]。明显的TSH浓度正常化使用维生素C组积极与相关的边际改善T4和T3浓度组。
研究揭示,在MDA浓度显著增加甲状腺论坛+ Pb组与其他组相比。这增加了MDA浓度是甲状腺的氧化损伤。这可能归因于高代谢率,高水平的自由基积累,低水平的内源性抗氧化剂在甲状腺。氧化应激诱导的分子机制论坛(31日- - - - - -33和铅28,34)中毒。氧化应激,其特点是海拔稳态浓度的活性氧(ROS),已经涉及到广泛的生理和病理条件下(51]。甲状腺激素相关的氧化和抗氧化状态的生物52]。因为在氧化代谢的作用,增加ROS浓度形成甲状腺。然而,论坛和Pb被加剧了ROS感应或许是由于他们与甲状腺腺泡的直接交互。细胞脂质过氧化作用使其失去活性成分通过氧化或引起氧化应激通过接受激进的连锁反应,最终导致失去膜完整性(53]。同样,MDA浓度的增加可能已经加剧了由于损伤的抗氧化酶在甲状腺功能减退(已报告54]。Pb的诱发lipoperoxidation通过抑制的活动δ-aminolevulinic酸脱水酶导致底物的积累-aminolevulinic酸,迅速氧化生成过氧化物离子自由基,氢氧自由基和过氧化氢7]。
预处理与维生素C所示,本研究以改善lipoperoxidative变化引起subchronic论坛共同管理和铅。这显然是由于抗氧化维生素的性质。抗氧化剂维生素C的性质已经在许多研究证明涉及CPF-induced lipoperoxidation [31日,33,37,38]。
甲状腺的重量在论坛+ Pb组略高于其他三个小组。相对较高的原因在论坛+ Pb组可能与TSH浓度显著升高,这可能在一定程度上刺激甲状腺滤泡细胞的增殖(55),显然是为了弥补边际降低甲状腺激素。虽然,甲状腺的重量略高组中使用比C /油和维生素C VC组,这一事实是低于公积金+ Pb组展示了明显的恢复甲状腺重量的维生素C。
5。结论
Subchronic共同的论坛和Pb已经证明本研究略微减少甲状腺激素浓度,增加TSH浓度和甲状腺lipoperoxidation,略微增加甲状腺的重量。这些甲状腺参数的改变是通过预处理改善维生素C显然由于其抗氧化性能。