在斯里兰卡堡垒地区卫生地区选定医疗官员中导致成人蚊子和蚊虫幼虫育种的纤维病。

摘要

进行了本研究以确定丝虫病的患病率导致成人蚊子寄生虫，斯里兰卡堡垒（Moh）四个医疗官员（Moh）地区的四名医务官员中的寄生虫幼虫育种。在他们休息的地方的成年女性蚊子使用Prokopack Aspirator每天运行的前往7:00至8:00和8.00下午9点在预定日期。解剖蚊子中的微型蠕虫在形态学上鉴定出来。九种蚊子，即，CX Quinquefasciatus，CX。pipiens，cx。fuscocephala，cx。Gelidus，Armigeres Subalbatus，Mansonia Serialis，MA。Anulifera，Aedes Aegypti， 和Ae。白纹伊蚊共采集蚊虫幼虫1194只，分为三属，即：，库蚊（62.73％），武装人员(25.62%)和Mansonia.（11.64％），来自封闭的排水沟，污染排水管，阻塞运河，大污染水体，停滞水体，沼泽土地，稻田泥浆和混凝土坑。大污染水体（Shannon-Wiener多样性指数/H’ = 在养殖水体中，平均pH值主要在6~8之间，平均溶解氧在3~7之间 毫克/升。残雪。金龟子和armigeres subalbatus.从Kelaniya MOH地区捕获的成年雌蚊对微丝蚴呈阳性反应，并被鉴定为Wuchereria Bancrofti.和重复毛丝虫这项研究得出结论，可能的淋巴丝虫病情况处于极低水平的持续性（0.06%），传播无法持续，仅限于研究区域内的孤立区域。导致人体皮下毛丝虫病的人兽共患病丝虫病菌株Dirofilaria Repen.由于流浪狗作为宿主的存在，美国仍在继续生存。

1.介绍

淋巴丝虫病（LF）是一种由蚊子传播的人类疾病，也是世界范围内致残的主要原因[1.,2.]LF最常见的临床症状是鞘膜积液、淋巴水肿和腺淋巴管炎[2.,3.]．象皮病是淋巴水肿的晚期，会给病人及其家人带来社会心理问题[4.,5.].LF的病原体是螺旋体目和盘尾丝虫科的几种线虫寄生虫，即，Wuchereria Bancrofti.,马来丝虫， 和B. Timori.[6.]．据WHO称，w .丝虫负责所有人类LF感染的90％[7.].LF由不同类型的蚊子传播，例如库蚊蚊子在城市和半城市地区广泛分布，按蚊，主要发现在农村地区，和伊蚊，主要分布于太平洋的特有种岛屿[7.].当受感染的蚊子叮咬人时，成熟的寄生虫幼虫会沉积在皮肤上，从那里进入人体[7.]．

在斯里兰卡，LF在八个地区数百年的流行病，即科伦坡，卡尔塔拉，古普拉，加勒，马塔拉，汉班塔，Kurunegala。和PuttaLam，与西海岸接壤，该地区众所周知为“丝虫病皮带”[8.]．在这个国家，LF是由Wuchereria Bancrofti.和马来丝虫．超过90%的城市班克罗夫特丝虫病病例是由于w .丝虫虽然被称为农村布鲁日菲拉病的剩余部分主要是由于B. Malayi.[9,10].据报道，在斯里兰卡引起布鲁氏菌丝虫病的蚊媒是Mansonia.,即嘛。Annulifera.,嘛。统一， 和嘛。印第安纳州[11]．它们是斯里兰卡报告的159种属于19属的蚊虫物种中[12]．此外,重复毛丝虫引起皮肤diro丝虫病，由不同种类的蚊子传播AEDES AEGYPTI.,armigeres subalbatus.,均匀曼氏肌， 和嘛。Annulifera.[13].皮肤毛丝虫病主要影响儿童[13]．然而，导致斯里兰卡城市班克罗夫特丝虫病传播的唯一媒介是致倦库蚊蚊子(14]．它在受污染的水域大量繁殖，例如淤塞的排水渠和泥滩，这些水域以低溶解氧(DO)和高生物需氧量(BOD)为特征[14,15]．根据(7.]，斯里兰卡目前正在消除LF作为一个公共卫生问题[7.]．这是由斯里兰卡Antifilariasis运动，以减少感染者的血液中的微丝蚴密度水平，其中蚊虫不再能够将其转交新的人类宿主实现大规模药物管理局（MDA）的结果并减少社区中的微恐怖普遍存在潜水率，尽管存在蚊子载体的情况，但仍然不能持续运行的水平[16–18]．然而，世卫组织建议该国继续监测努力和干预措施，以清除疫区持续感染的残余感染[2.]此外，研究人员最近发现w .丝虫和布鲁氏菌SPP。在孤独的案例中，斯里兰卡选定的堡垒地区[9,19]．更远， [19]报道布鲁氏菌在流浪狗的染色血涂片中也检测到了spp。根据作者的说法，这种重新出现的菌株布鲁氏菌spp在40年的静止期后被检测到，并提示为人畜共患源[19]．因此，迫切需要确定潜在蚊种中淋巴丝虫病寄生虫的低持久性，并了解其在该国高风险地区的繁殖栖息地需求。

2。材料和方法

2．1.研究区域

据报道，Gampaha区在斯里兰卡的纤维病变区域。它的人口约为240万，超过1387公里的差价^2.Gampaha区每年降雨量约为2398 年平均气温27.3°C(https://en.climate-data.org/asia/sri-lanka/western-province/gampaha-12453/）.它被抬高到25 amsl，登上斯里兰卡西海岸(图)1.)。该地区由15个卫生部医疗官员组成。本研究选择了四个卫生部地区，即Kelaniya、Ragama、Seeduwa和Dompe（图1）1.）.表格1.给出所选MOH区域的简要说明。

２.２.蚊子抽样

在卫生部三个地区的自然休息场所使用电池驱动的Prokopack吸引器(型号1419;约翰W.霍克公司，盖恩斯维尔，佛罗里达州，美国)。在2019年5月至12月的预定日期内，每周两次采样，每天7点至8点，以及8点至9点。捕获的蚊子立即被带到实验室，以冷休克的方式杀死，并按种类进行分类[12,20.]．

检查潜在的蚊子幼虫养殖栖息地，每次浸入透明的宽口塑料瓶（300ml），使用250.0mL幼虫铲斗（宽11.5厘米，高度5.5厘米），安装在长金属手柄[21]每两周一次。估计平均幼虫密度。测量水的pH值和溶解氧（DO）原位使用多参数（HACH-HQ40d）。将装有蚊虫幼虫的瓶子带入实验室，并用小网眼尼龙网（网眼尺寸：1）覆盖 幼虫被饲养直到成年蚊子出现[22]．

使用标准蚊子识别键，确定由Prokopack Aspirator和来自幼虫饲养的出现成人收集的成年女性蚊子，从最近的可能的分类水平识别[12,20.]．

2.3。成年女性蚊子解剖

将Prokopack吸引器捕获的成年雌蚊置于直径9cm的培养皿中，分离翅膀和胸腿。每次10到15个批次放在一个小玻璃表上，用牧草吸管加一滴缓冲盐水。在立体显微镜下，用两个昆虫学探针分别将蚊子标本分开，以揭示其中肠中的微丝蚴。

2.4。染色丝虫蠕虫和识别

检测的丝状蠕虫仔细地转移到一滴盐水上，随后在微观玻璃载玻片上保持一滴水。样本是热固定的，并且进行了Giemsa染色[6.]．在显微镜下观察样本x400倍（奥林巴斯xC21;宁波华盛精密科技国际贸易有限公司，浙江，中国)。使用显微数码USB相机(Optika 4083)测量微丝蚴的总长度和头空间长度。B6)和OPTIKA 2.12版本图像处理软件。根据[23,14,24]．属的缩写是基于[25]．

2.5。数据分析

使用Minitab 19版本进行统计数据分析。使用95％CI的单向ANOVA分析不同幼虫栖息地的蚊虫物种丰富数据和物理化学参数，并在显着水平≤0.05。利用Shannon-wiener多样性指数测定不同生境记录的蚊种多样性指数。

3.结果

３．１．成年蚊子抽样

使用Prokopack Aspirator收集11702个成人蚊子，包括在内致倦库蚊,库蚊,Cx。加里多斯冰矿梭头绦虫,均匀曼氏肌．嘛。Annulifera.,AEDES AEGYPTI.,Ae。蚊， 和Armigerus subalbatus.，他们占主导地位亚阿尔巴特斯(平均1112±555)残雪。金龟子(平均值= 816±2162.).单因素方差分析和Tukey的配对测试显示亚阿尔巴特斯显着高于残雪。金龟子(F = 3.47, DF = 8,≤0.05)（桌子2.）.

来自Kelaniya和Dompe MOH地区的成人收藏主要由亚阿尔巴特斯（平均值= 393±79.4和95±18.3）（图(2)和(2 d)）.单向Anova和Tukey的一对明智的测试揭示了这一点亚阿尔巴特斯每月平均相对丰度明显高于两种莫姆地区的其他蚊虫物种（F= 18.99, df = 8， ≤ 0.001 andF = 16.72, DF = 8, ≤ 0.001, respectively). In Ragama and Seeduwa MOH areas, collected mosquitoes were dominated by残雪。金龟子(平均值分别为128±16.5和97±25.4(2 b)和(2 c)）.

3.2。蚊子幼虫抽样和育种栖息地

调查期间共捕获蚊幼虫1194只，占捕获总数的62.73%库蚊,有25.63%的人武装人员，11.64％是Mansonia.（桌子3.）.从幼虫收藏中出现的成年蚊子被确定为Cx．Quinquefasciatus，CX。格里德斯,残雪。隐耳漠虎,残雪。tritaeniorhynchus,梭头绦虫,亚阿尔巴特斯， 和Mansonia均匀化。单向Anova和Tukey的一对明智的测试揭示了这一点Cx．金龟子和亚阿尔巴特斯月平均密度显著高于其他蚊子种类(Fd = 6.02,F= 6, ≤ 0.001) (Table3.）.

在本研究中遇到的幼虫栖息地有堵塞的排水沟、污染的排水沟、污染和停滞的水体、沼泽地、稻田泥滩和混凝土罐/坑。蚊密度及其在其繁殖生境的平均pH值和溶解氧水平见表4..大型污染水体（香农-维纳多样性指数）/H' = 1.5591)和堵塞的排水管(H’= 1.5381)为最高的潜水生境类型，4种蚊种分别为残雪。金龟子,库蚊,残雪。Fuscocephala， 和武装人员，在其中报告（表1）4.）.一切库蚊物种幼虫和亚阿尔巴特斯幼虫自然分布在低水平的溶解氧（3-5）中 毫克/升），仅限嘛。统一幼虫完全取决于其氧气需求的水生植被被记录在溶解的氧水平高于5mg / L.幼虫丰富，除了残雪。金龟子，在DO含量高的情况下从7 天然养殖水中的mg/L。库蚊tritaeniorhynchus在许多据报有其他食蚊占据的生境中明显缺失。

3.3。Microfilariae的蚊子解剖

副法庭和残雪。金龟子从Kelaniya MOH地区采集成蚊(图1.)9月份，微丝蚴呈极低持续性阳性，分别为0.0674%和0.0613%，而其他蚊子物种的微丝蚴呈阴性（表1）5.）.

从中检测到Microfilariae亚阿尔巴特斯被确认为重复毛丝虫通过确认有裸露的身体、短的头间隙和三角形的体细胞，而从中检测到微丝蚴残雪。金龟子被确认为Wuchereria Bancrofti.身体有鞘，头间隙短，尾尖锥形，末端无核。

4.讨论

斯里兰卡最近的一项研究报告了MDA后在人类中检测到布鲁格和班克罗夫特淋巴丝虫病寄生虫[9，确认有必要确定与蚊子中丝虫病寄生虫持久性较低有关的蚊种特征。为此，我们解决了以下问题:(i)斯里兰卡甘帕哈地区的高危地区目前有哪些种类的蚊子大量存在?(ii)这些蚊子在哪种生境繁殖?(iii)蚊子数量是否有时空变化?(iv)丙二醛注射后，哪些种类的蚊子会参与LF传播?

唯一已知的向量Wuchereria Bancrofti.在斯里兰卡是夜间尖锐的蚊子，残雪。金龟子它们全年都会出现[11]．致倦库蚊在本研究期间，在Seeduwa Moh地区的繁殖栖息地和成人抽样中被记录在比较较高的密度。然而，在繁殖栖息地和成人抽样中记录的最常见的蚊虫物种是亚阿尔巴特斯．库蚊fuscocephala被记录为沼泽栖息地繁殖的主要物种之一。然而，他们的患者捕获的成年人在本研究中没有报告携带丝虫病寄生虫。虽然低密度Cx。加里多斯冰矿,库蚊， 和残雪。tritaeniorhynchus记录幼虫，成虫采集时未捕捉幼虫。

致倦库蚊蚊虫幼虫在植被覆盖的沼泽和稻田泥滩无法生存，但在人类活动导致的排水沟堵塞和被污染的死水水体中旺盛生长。均匀曼氏肌在植被填满的沼泽地出现异常。而且，残雪。tritaeniorhynchus仅在研究区域的稻田泥栏中发现。

本研究中提供了一个实证框架，用于辨别pH和溶解氧水平影响丝毫和其他蚊子幼虫的丰富和分布的贡献。据悉残雪。金龟子主要存在于与人类居住有关的受有机污染的水体，例如堵塞的污水渠[15]．根据本研究，46％的残雪。金龟子和44％的武装人员在DO介于3和5之间的栖息地中发现 mg/L。这批准了具有适当理化参数的滋生地，有利于丝虫病媒介的繁殖。繁殖栖息地中的蚊子幼虫密度和成年蚊子的吸引器采样在6月至12月的采样期间都有时间变化。在该月期间，成年蚊子的采集达到高峰而幼虫采集量在12月份最高，滞后期为两个月。

病媒丝状体感染的昆虫学方法提供了丝状体传播的“实时”估计[26]．这项研究显然报告了微自然的低水平持久性残雪。金龟子(0.0613%)于2019年9月在Kelaniya MOH地区捕获。Pi-Bansa等报道[27]，聚合酶链反应检测可能提示微丝蚴阴性，因为当用蚊子混合样本提取微丝蚴时，微丝蚴DNA被蚊子DNA掩盖。在这项研究中，利用染色幼虫的形态学特征进行寄生虫检测，虽然费力，但是准确的。

结果还表明丝虫病被部分淘汰。它目前仅限于斯里兰卡的孤立口袋。[28,29[在他们的研究中，表明，即使Microotiae在蚊虫体内增殖，寄生虫会导致蚊子宿主的致命作用，因此从蚊子到人类的变速器被中断。

在过去的几代中，以前被认为是非媒介的蚊子物种可能成为丝虫病寄生虫的媒介[30.]因此，对Prokopack吸引器采集的所有吸血蚊子物种进行微丝蚴阳性检测。Prokopack吸引器是斯里兰卡甘帕哈卫生服务办公室区域主任用于成虫监测的工具，用于进行昆虫学调查。这项研究报告了同一媒介蚊子在丙二醛（MDA）后参与LF传播，但有人畜共患病的丝虫通过丙二醛（MDA）增殖感染人类武装人员蚊子矢量。

5.结论

城市班氏丝虫病和人畜共患丝虫病均未达到零水平，而后者由于动物蓄水池的存在而继续存在。7-8 pH和3 - 5mg /L DO水平的多种孳生生境是丝虫病病媒蚊的首选孳生地。这项研究证实了亚阿尔巴特斯和残雪。金龟子在斯里兰卡甘帕哈区选定的卫生部地区。前一种涉及人畜共患丝虫病寄生虫的传播，后一种涉及班克罗夫特淋巴丝虫病寄生虫的低水平持久性。

数据可用性

本文包含支持本文结论的数据集。数据将不会在任何源中共享。

利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

作者的贡献

SASP设计研究，进行实地数据收集，并撰写手稿；LDA设计研究，监督研究，并编辑手稿。两位作者都阅读并批准了最终手稿。

致谢

作者感谢斯里兰卡甘帕哈地区卫生服务办公室主任分享Prokopack吸引器的使用。斯里兰卡甘帕哈卫生服务办公室区域主任和主任/昆虫学家在抽样方法方面提供了必要的培训，受到高度赞扬。经费由斯里兰卡克拉尼亚大学提供，根据研究资助RP/ 03／02／07／01／2017进行数据收集。

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