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热带医学杂志/2020/文章

研究论文|开放获取

体积 2020 |文章编号 4087394 | 9 页面 | https://doi.org/10.1155/2020/4087394

的相互作用金丝mucronata亚种。mucronata甲醇提取物与一线抗生素协同作用体外通过活性氧的生产

Aderonke Ariyike Olajuyigbe，1 Olufunmiso Olusola Olajuyigbe，2，3 和 罗杰·穆鲁加斯·库普萨米3

1生物化学，Olabisi Onabanjo大学，以前-Iwoye，奥贡州，尼日利亚系

2巴布科克大学科学技术学院微生物学系，PMB4005，伊利斯雷莫，奥贡州，尼日利亚

3自然科学的自然保护系，学院，科技大学Mangosuthu，德班4026南非

学术编辑器:希亚姆孙大信
收到 2019年12月27日
修订 2020年2月19日
公认 2020年3月9日
发布时间 2020年4月8日

摘要

随着越来越多的微生物抗菌性的发生率，天然产物植物抗生素结合，可考虑协同有趣的选择，以实现多目标的影响。在这项研究中，甲醇提取物的抗氧化活性金丝mucronata并与反对的临床意义抗生素细菌的相互作用进行了调查。虽然它的植物化学物质和抗氧化活性通过清除自由基的测定法测定，所述提取物的抗菌活性和其与抗生素的相互作用是由macrobroth稀释和棋盘方法测定。From the results, total phenolic content was 29.67 ± 1.90 mg GAE/100 g, total flavonoid content was 8.72 ± 0.08 mg QE/100 g, and total proanthocyanidin content was 1.94 ± 0.00 mg CE/100 g of dry plant material. The inhibition concentration 50% (IC50)DPPH、BHT和抗坏血酸分别为0.04   0.02 mg/ml。ABTS、BHT和抗坏血酸的含量分别为0.02、0.04、0.03和0.04、0.02 mg/ml。棋盘格分析表明，不同抗生素与提取物联合使用，可产生协同作用（38.75%）、无协同作用（30%）、加性作用（28.75%）和拮抗作用（2.5%）。提取物与抗生素之间的相互作用增强了抗菌活性，这可能是由于提取物的抗氧化活性清除了抗生素产生的活性氧，或者提取物和抗生素同时产生活性氧的能力，从而产生有害的影响协同抗菌作用。

1.简介

为先进的民族医学实践奠定基础，为新药开发提供良好的指导[1]，由于药用植物在治疗微生物感染方面的用途，其治疗意义已成为广为传播的知识[2]。虽然许多植物的药性已经报道3]而药理活性则取决于其中所含的生物活性化合物[4，今天可用药物的治疗失败，新型抗生素的缺乏[五]，耐病原体，不利影响和中当前可用的药物[动作的有限的频谱出现6，以及与合成抗氧化剂如丁基羟基甲苯(BHT)和叔-丁基对苯二酚（TBHQ）[7]促使人们需要集中精力寻找新的和更好的植物源抗菌剂和抗氧化剂。

此外，从天然植物的产品被认为是有趣的选择是增加抗生素耐药性的发生的结果[8]。已对许多植物的抗菌素及其耐药修饰活性进行了评价[9]。提取物与抗生素的协同作用实现了多靶点效应[10]。这些药物-草药组合提高了化疗药物的疗效，对正常细胞的毒性最小[11]以及没有内在抗菌活性的抗生素，以及细菌对先前无效抗生素的易感性[12]。尽管药用植物具有抗感染，目前难以治疗的有效phytoconstituents，它们在疾病治疗的作用已被归因于这些生物活性化合物的抗氧化性能的植物[13]。含有自由基清除酚类化合物许多植物与催化金属和自由基和扫气的氧反应，以保护所述生物系统免受由活性氧物质（ROS）产生的氧化反应的有害影响。然而，尽管许多酚类已经知道了它们的抗氧化和抗微生物活性，许多植物都显着地与抗生素相结合，以显示不同程度的相互作用[14，15至于哪一种行动机制尚待确定。

金丝mucronata亚种。mucronata俗称水牛刺，是小到中等大小的树。该工厂可以在其浆果类水果的成熟，从3月至9存在冬季来识别。在开花月，爱花蜜的动物在寻找花蜜的访问这些花。虽然它的茎皮和根用于风湿病，梅毒，淋病，胃肠道障碍如痢疾和腹泻，和蛇咬[治疗16，17，植物的各个部分都有药用价值[18]。为了进一步确立该种植物的治疗潜力，本研究调查的植物化学物质，抗氧化潜力，甲醇提取物的影响金丝mucronata亚种。mucronata在针对不同的细菌种类一些抗生素的抗菌活性在体外说明将提取物与抗生素结合后可能产生的活性氧的作用。

2.材料和方法

2.1。收藏和植物材料的处理

茎皮ž。mucronata亚种。mucronata从福特哈尔大学校园艾丽丝进行收集，风干在室温下，通过D.S.格威尔森教授验证，并用铣床粉碎。One hundred grams of the pulverized sample was extracted with 500 ml of methanol for 72 h with shaking. The extract was filtered with Whatman No. 1 filter paper and concentrated under reduced pressure at 40°C using a rotary evaporator. After the extraction, the crude extract was redissolved in the extracting solvent to the required concentration for bioassay analysis. A voucher specimen (OLAJ/2010/ZM/01) was prepared and deposited in the Griffin’s Herbarium of the University.

2.2。使用的化学品和试剂

所有化学品用-2,2'- azinobis -3-乙基苯并噻唑-6-磺酸（ABTS）二铵盐，1,1-二苯基-2-苦基苯肼（DPPH），丁基化羟基甲苯（BHT），没食子酸，芸香苷，抗坏血酸酸（VC），槲皮素和的FeCl3，香草醛，福林 - 乔卡梯奥酚试剂，和碳酸钠和溶剂都是分析级的。制备阿莫西林的抗生素粉末（AMX），氯霉素（CHL），环丙沙星（CIP），红霉素（ERY），盐酸四环素（TET），甲硝唑（MET），卡那霉素（KAN），和萘啶酸（NAL），并根据使用的to the manufacturers’ instructions.

2.3。菌株

金黄色葡萄球菌ATCC 6538，粪肠球菌写明ATCC 29212,大肠杆菌ATCC 25922，阴沟肠杆菌ATCC 13047，肺炎克雷伯菌ATCC 10031，普通变形杆菌写明ATCC 6830,志贺氏杆菌sonneiATCC 29930号，枯草芽孢杆菌KZN，普通变形杆菌我们吃,粪肠球菌本研究使用了KZN。它们来自南非艾丽斯市福特黑尔大学生物化学和微生物学系。采用Mueller-Hinton II琼脂(MHA) (Biolab)和肉汤进行抗菌试验。试验菌的接种采用菌落悬液法制备[19]。Colonies picked from overnight cultures grown on nutrient agar were used to make suspensions of the test organisms in saline solution to give an optical density of approximately 0.1 at 600 nm. The suspension was then diluted 1 : 100 by transferring 0.1 mL of the bacterial suspension to 9.9 ml of sterile nutrient broth before being used.

2.3.1条。总黄酮的测定

采用Marinova等人的方法对总黄酮进行估算[20.]。Here, 0.5 ml of 2% AlCl3Ëthanol solution was added to 0.5 mL of extract and allowed to stand for 60 min at room temperature before the absorbance was measured at 420 nm using an AJI-C03 UV-VIS spectrophotometer.

2.3.2。总酚含量

用改良Folin-Ciocalteu法测定ZMM的总酚含量[21]. 在此，将提取物（1 mg/mL）与5 mL Folin-Ciocalteu试剂（先前用蒸馏水1 ： 10 v/v稀释）和4 mL（75 g/L）碳酸钠混合。将混合物旋涡15 s，并在40℃下静置30 minØC表示颜色显影。用AJI-C03紫外-可见分光光度计在765 nm处测定了三个重复样品的吸光度。

2.3.3条。原花青素总量的测定

ZMM的原花色素含量是由Sun等人的修改的方法来确定。[22]。A volume of 0.5 mL of 0.1 mg/mL of the extract solution was mixed with 3 ml of 4% vanillin-methanol solution and 1.5 ml hydrochloric acid. The mixture was allowed to stand for 15 min while the absorbance was measured at 500 nm using AJI-C03 UV-VIS spectrophotometer.

2.3.4。的铁离子还原力判定

费雷拉等人的改良分光光度法[23]用于测量ZMM的还原功率。不同浓度的提取物及标准品、芦丁、BHT (0.02-0.10 mg/mL;分别加入2.5 mL 0.2 M磷酸盐缓冲液(ph6.6)和2.5 mL铁氰化钾(K3铁（CN）6）（1％W / V）。将混合物在50下温育ØC反应20 min，加入2.5 mL (10% w/v)三氯乙酸(TCA)， 1000 rpm离心10 min。然后将混合物上清(2.5 mL)与2.5 mL蒸馏水和0.5 mL 0.1% w/v的FeCl混合3. 用AJI-C03紫外可见分光光度计在700纳米处测定吸光度。

2.3.5条。DPPH自由基清除试验

为了确定ZMM针对DPPH，Liyana-Pathirana和沙希迪[方法中的自由基清除活性24]通过。One milliliter of 0.135 mM DPPH in methanol was mixed with 1 mL of different concentrations (0.02–0.1 mg/mL) of ZMM. The reaction mixture was vortexed thoroughly and left in the dark at room temperature for 30 min. Ascorbic acid and butylated hydroxytoluene (BHT) were used as reference standards while methanol was used as control. Reduction of the stable DPPH radical was used as a marker of antioxidant capacity of ZMM. The free radical scavenging activity of the extract indicated by changes in colour from deep-violet to light-yellow was measured using AJI-C03 UV-VIS spectrophotometer at 517 nm.

2.3.6。ABTS自由基清除试验

对于甲醇提取物清除ABTS自由基的活性，Johnstone等人的改进方法[25]通过。The working concentration containing equal volumes of 7 mM ABTS solution and 2.4 mM potassium persulfate solution was prepared and allowed to react for 12 h at room temperature in a dark cabinet. The resulting solution was further diluted by mixing 1 mL ABTS+solution with 60 ml of methanol to obtain an absorbance of 0.708 ± 0.001 units at 734 nm using AJI-C03 UV-VIS spectrophotometer.

2.3.7。最低抑菌浓度的测定（MIC）

根据CLSI（临床实验室标准化研究所）的规定，用Mueller-Hinton肉汤（MHB）中的大肉汤稀释法，对ZMM和抗生素的最低抑菌浓度（MICs）进行了两次测定[26]。为了确定每种抗生素的MIC，浓度为每AMX，TET，MET，NAL，KAN的制备，和CHL 0.224和500之间的范围内 μ克/毫升。虽然CIP浓度0.005和5之间的范围内 μg/mL，ERY浓度为0.049～50 μ克/毫升和ZMM的为4.88和5000之间 μ克/毫升。抗生素浓度通过连续稀释在双倍强度MHB制备。以确定它们的组合效果，在双倍强度MHB中制备不同浓度的范围从1/2 X MIC各抗生素的8×MIC和那些提取物的组合。各试管用100接种 μL各自细菌菌株的。空白的Mueller-Hinton肉汤用作阴性对照。The bacterial containing tubes were incubated at 37°C for 24 h. The MIC was defined as the lowest concentration that showed no growth in the Mueller-Hinton broth. Each combination assay was performed in duplicate.

2.4。棋盘分析

提取物和抗生素之间的相互作用是通过前面描述的棋盘分析来确定的[27]。分级抑菌浓度(FIC)指数计算公式为:FIC指数=(复方提取物的MIC /单独提取物的MIC) +(复方抗生素的MIC /单独抗生素的MIC)。在抗菌联合，彼得森等[27]将协同定义为∑FIC ≤ 0.5，加性定义为5  4。

2.5。统计分析

数据以三次重复测定的平均标准差（SDs）表示，然后用SPSS V.16（社会科学统计程序，SPSS Corporation，Chicago，IL）进行分析。采用单因素方差分析（ANOVA）和Duncan新的多因素方差分析（multiple-range test）来确定平均数之间的差异。 values < 0.05 were regarded to be significant. The Pearson correlation analysis was performed between antioxidant activity and total phenolic content.

3.结果

在这项研究中，总酚含量，类黄酮，原花色素和在的甲醇提取物中的量Z、 木犀草属（ZMM）如图所示1. ZMM的总酚含量为29.67   1.901 mg GAE/100 g。总黄酮含量为8.72μg/100μg干物质。总原花青素含量为1.94   0.004 mg CE/100 g干物质。


图1
Quantity (mean ± SD) of phytochemicals in the methanol extract ofZ、 木犀草属。

采用FRAP法测定ZMM的还原能力，在700 nm处用分光光度计测定其吸光度，如表所示1. 这个ferric reducing activity of ZMM was significantly lower than those of the standard drugs, but a gradual increase in concentrations of this extract increased its reducing power capability significantly. The dose-dependent reducing potentials of this extract indicated that there are antioxidant compounds with electron donating ability inZ、 木犀草属。
的甲醇提取物的三价铁还原力Z、 木犀草属
0.02 mg/mL 0.04毫克/毫升 0。06 mg/mL 0.08毫克/毫升 0。10 mg/mL
ZMM 0.021±0.002Ë 0.113±0.001d 0.237±0.001C 0.335±0.002b 0。342 ± 0.002一个
二叔丁基对甲酚 0.182 ± 0.001Ë 0.347±0.001d 0.445±0.002C 0.564 ± 0.001b 0.633 ± 0.001一个
抗坏血酸 0。27五 ± 0.00Ë 0.562 ± 0.001d 0.752 ± 0.001C 0.837±0.001b 1.218±0.002一个
同一排不同标号的平均铁还原力清除活性差异显著( ）。
表格1
甲醇提取物铁还原力的平均标准偏差Z、 木犀草属。

用DPPH自由基对药用植物提取物清除自由基或供氢潜能及抗氧化活性的评价已得到广泛的测试[28]并且，通常使用DPPH和IC的百分比抑制来确定50摘录部分[29]. DPPH抑制率越高，IC值越低50值越高，药用植物的自由基清除能力/抗氧化能力越强。本研究中提取液与BHT、抗坏血酸对DPPH自由基的浓度依赖性抑制百分比见表2. 这个在体外50%抑制浓度（IC50) values obtained for the DPPH inhibition of ZMM, BHT, and ascorbic acid were found to be 0.043 ± 0.02, 0.042 ± 0.03, and 0.040 ± 0.02 mg/mL, respectively.
%不同浓度提取物对DPPH ± SD的抑制作用
浓度。 0.02 mg/mL 0.04毫克/毫升 0。06 mg/mL 0.08毫克/毫升 0。1 mg/mL 集成电路50
ZMM 33.9±0.03Ë 45.99度0.02度d 73。01 ± 0.02C 86个。07 ± 0.04b 94.86±0.02一个 0。043 ± 0.02
二叔丁基对甲酚 38。96 ± 0.02Ë 47。2 ± 0.03d 7五。86个 ± 0.03C 91.92度0.05度b 97。78 ± 0.03一个 0。042 ± 0.03
抗坏血酸 25.23±0.04Ë 49.56±0.03d 72。23 ± 0.02C 94.77±0.03b 96。89 ± 0.02一个 0。040 ± 0.02
沿同一行不同的标平均DPPH自由基清除活动显著不同（ ）。
表2
DPPH抑制（％）由甲醇提取物Z、 木犀草属。

ZMM、BHT和抗坏血酸对ABTS自由基阳离子清除活性的影响见表3。虽然IC50ZMM为0.023±0.02 mg/ml，与BHT（0.041±0.03）mg/ml、抗坏血酸（0.042±0.02）mg/ml、BHT和抗坏血酸无显著性差异。下集成电路50结果表明，该提取物比BHT和抗坏血酸具有更强的自由基清除活性。
ABTS的禁忌％+ ± SD at different concentrations of the extracts
浓度。 0.02 mg/mL 0.04毫克/毫升 0。06 mg/mL 0.08毫克/毫升 0。1 mg/mL 集成电路50
ZMM 43。67 ± 0.02Ë 五8。6 ± 0.02d 81。67 ± 0.03C 92。33 ± 0.03b 97.00±0.02一个 0.023 ± 0.02
二叔丁基对甲酚 34。96 ± 0.02Ë 49.2±0.03d 81。86个 ± 0.02C 91。92 ± 0.02b 97。78 ± 0.03一个 0.041±0.03
抗坏血酸 35。23 ± 0.02Ë 47。五6 ± 0.02d 78。23 ± 0.02C 94.77±0.02b 96。89 ± 0.03一个 0。042 ± 0.02
平均ABTS清除不同的标活动，在同一行有显著不同（ ）。
表3
ABTS抑制（％）由甲醇提取物Z、 木犀草属。

从大发酵液的稀释液中，ZMM和抗生素对试验菌有不同程度的抑制作用和相互作用。而提取物的最低抑菌浓度(MICs)在141.82 ~ 568.18之间μg/mL，CIP（0.018和0.284 ）μ克/毫升），ERY（0.089和22.73 μ克/毫升），TET（0.44和14.20 μg/mL)， CHL(0.89和28.41μg/mL)， AMX(0.89和454.55μ克/毫升），NAL（1.78和56.82 μ克/毫升），KAN（1.78和454.55 μg/mL)， MET(14.20和113.64μ克/毫升）而变化。ZMM的MIC比的不同抗生素更高。根据MIC的断点建议EUCAST [19]和BSAC[30.]，菌株的肠球菌物种，肠杆菌物种，葡萄球菌种，革兰氏阳性需氧菌具有≤0.25MIC值 μ克/ mL的ERY，≤0.5 μCIP时，g/mL，≤1 μ克/ mL的TET，≤4 μ克/ mL的MET，≤4 μ克/ mL的AMX，≤8 μ克/ mL的KAN，≤8 μ克/ mL的CHL，和≤16 μNAL的g/mL为易感。根据EUCAST所示抗生素的MIC断点[19]和BSAC[30.]中，MIC断点表明，所有菌株对CIP，所有都以MET抗性，所有菌株对CHL的除外粪大肠KZN，宋内S.ATCC 29930号，金黄色葡萄球菌好吧2和k .肺炎ATCC 10031，其为易于ERY，k .肺炎ATCC 10031，枯草芽孢杆菌我们吃,金黄色葡萄球菌好吧2这是易受TET，k .肺炎ATCC 10031，P、 庸俗的我们吃,粪大肠对AMX敏感的KZN，金黄色葡萄球菌ATCC 6538，枯草芽孢杆菌我们吃,P、 庸俗的KZN这均对简而k .肺炎ATCC 10031，P、 庸俗的写明ATCC 6830,枯草芽孢杆菌我们吃,宋内S.ATCC 29930对NAL敏感。将TET与ZMM结合，使ZMM的MICs降低到0.0.0005～284.10 之间μg/mL，TET为0.028～14.20μ克/毫升。AMX结合ZMM导致ZMM的MIC值被减少到浓度0.0005和568.18之间的范围内 μ当AMX的浓度降至0.03~14.20 时，g/mLμ克/毫升。枯草芽孢杆菌KZN并不受草药药合用。ERY与ZMM组合导致ZMM的浓度为0.028和568.18之间的减速至浓度 μg/mL和浓度在0.003至568.18 之间的ERYμ克/毫升，与外P、 庸俗的ATCC 6830和金黄色葡萄球菌ATCC 6538不受ERY与ZMM结合。CIP与ZMM组合导致ZMM的MIC的减少到浓度8.88和284.1之间的范围内 μ而CIP浓度降低至0.018 ~ 0.0.284之间μ克/毫升。尽管NAL与ZMM的结合并没有导致ZMM对大多数分离物的MICs显著降低，但CHL显著降低了ZMM的MICs。CHL与ZMM结合后，ZMM的MICs在7.10 ~ 284.10之间μ克/ mL和那些CHL的测距0.44和14.20 μ克/毫升。随着外P、 庸俗的KZN和粪大肠KZN到KAN和ZMM的组合都没有效果，KAN减少ZMM的MIC值，以浓度7.10和568.18之间的范围内 μ克/毫升并且该抗生素的降低到0.444和28.41 μ克/毫升。一般地，与提取物中的抗生素的组合导致减少抗生素的MIC和萃取显著表所示4。
使用生物 ZMM话筒(μg / mL) 四极麦克风(μg / mL) ZMM /春节麦克风(μ克/毫升μg / mL) AMX话筒(μg / mL) ZMM / AMX MIC（μ克/毫升μg / mL) 金属话筒(μg / mL) ZMM / MET MIC（μ克/毫升μg / mL) ERY MIC（μg / mL) ZMM / ERY MIC（μ克/毫升μg / mL)
金黄色葡萄球菌写明ATCC 6538 568.18 7.10 284.1/14.20号 28.41 284.1/14.20号 14.20条 284.1/14.20号 5.68 568.1 / 5.68
粪肠球菌ATCC 29212 568.18 3.55 141.82 / 7.10 7.10 71.02 / 1.78 28.41 568.18 / 28.41 2.84 17.73/0.18
肺炎克雷伯菌ATCC 10031 568.18 0.44 0.05 / 0.03 1.78 35.51 / 0.89 28.41 141.82 / 7.10 0.089个 0.28 / 0.003
普通变形杆菌ATCC 6830型 568.18 7.10 17.73/0.89分 227.27 71.02/3.55 56.82 568.18 / 28.41 22.73分 568.18 / 5.68
枯草芽孢杆菌KZN 568.18 1.78 35.51 / 0.89 56.82 568.18 / 28.41 28.41 284.1/14.20号 5.68 284.1/2.84
普通变形杆菌KZN 568.18 7.10 284.1/14.20号 1.78 17.73/0.44分 56.82 284.1/14.20号 11.36 284.1/2.84
粪肠球菌KZN 284.1 14.20条 284.1/14.20号 0.89 17.73/0.44分 56.82 284.1/14.20号 11.36 35.51 / 0.36
金黄色葡萄球菌好吧2 284.1 0.89 0.0005 / 0.03 113.64 71.02/3.55 56.82 284.1/14.20号 0.18 4.44 / 0.044
金黄色葡萄球菌好吧2 b 568.18 1.78 17.73/0.89分 14.20条 71.02/3.55 113.64 284.1/14.20号 11.36 284.1/2.84
志贺氏杆菌sonnei写明ATCC 29930 141.82 1.78 0.05 / 0.03 454.55分 0.05 / 0.03 56.82 71.02/3.55 0.36 0.28 / 0.003
使用生物 ZMM话筒(μg / mL) CIP麦克风(μg / mL) ZMM / CIP麦克风(μ克/毫升μg / mL) NAL麦克风(μg / mL) ZMM / NAL MIC（μ克/毫升μg / mL) KAN MIC（μg / mL) ZMM / KAN MIC（μ克/毫升μg / mL) CHL MIC（μg / mL) ZMM /背影麦克风(μ克/毫升μg / mL)
金黄色葡萄球菌写明ATCC 6538 568.18 0.018 71.02 / 0.002 28.41 284.1/14.20号 1.78 35.51 / 0.44 1.78 7.10 / 3.55
粪肠球菌ATCC 29212 568.18 0.284 141.82/0.142 28.41 568.18 / 28.41 113.63 284.1/14.20号 1.78 35.51/1.78
肺炎克雷伯菌ATCC 10031 568.18 0.071个 35.51/0.018 3.55 71.02/3.55 14.20条 17.73 / 3.55 1.78 8.88/0.44
普通变形杆菌ATCC 6830型 568.18 0.071个 35.51/0.018 1.78 71.02/3.55 28.41 141.82 / 7.10 7.10 35.51/1.78
枯草芽孢杆菌KZN 568.18 0.018 8.88 / 0.005 7.10 71.02/3.55 3.55 7.10 / 2.84 3.55 35.51/1.78
普通变形杆菌KZN 568.18 0.284 141.82/0.142 56.82 568.18 / 28.41 7.10 568.18 / 28.41 0.89 284.1/14.20号
粪肠球菌KZN 284.1 0.284 284.1 / 0.284 56.82 284.1/14.20号 454.55分 568.18 / 28.41 28.41 284.1/14.20号
金黄色葡萄球菌好吧2 284.1 0.071个 71.02 / 0.002 28.41 284.1/14.20号 14.20条 17.73 / 3.55 7.10 17.73/0.89分
金黄色葡萄球菌好吧2 b 568.18 0.018 35.55 / 0.018 56.82 284.1/14.20号 28.41 7.10 / 2.84 7.10 35.51/1.78
志贺氏杆菌sonnei写明ATCC 29930 141.82 0.018 71.02 / 0.002 14.20条 284.1/14.20号 28.41 141.82 / 7.10 7.10 17.73/0.89分
加 = additive; ANT = antagonistic; IND = indifference; SYN = synergy; ZMM = methanolic extract ofZ、 木犀草属;TET = tetracycline; AMX = amoxicillin; MET = metronidazole; ERY = erythromycin; KAN = kanamycin; NAL = nalidixic acid; CIP = ciprofloxacin; CHL = chloramphenicol; REM = remarks.
表4
并与甲醇提取物联合应用Z、 木犀草属用不同的抗生素在体外。

所述ZMM与每个抗生素联合的分数抑制浓度（FIC）指数导致协同的（38.75％），淡漠（30％），添加剂（28.75％），和拮抗相互作用（2.5％）。而对于协同相互作用的分级抑制浓度指数（FICI）为0.0004和0.50之间，所述FICI用于添加剂相互作用是0.531和1.0之间，冷漠，这是1.063和2.5之间，而拮抗作用的为3.0和18之间（表五）。
分数抑制浓度指数（FICI）的不同抗生素与Z. mucronata的甲醇提取物组合
使用生物 ZMM/吨 REM ZMM / AMX REM ZMM / MET REM ZMM /非常 REM ZMM / KAN REM ZMM / NAL REM ZMM / CIP REM ZMM /排名 REM
金黄色葡萄球菌写明ATCC 6538 2.50 IND 1.0 加 1.50 IND 2.00 IND 0.31 SYN 1.0 加 0.24 SYN 2.01 IND
粪肠球菌ATCC 29212 2.25 IND 0.38 SYN 0.50 SYN 0.09 SYN 0.63 加 1.5 IND 0.75 加 1.06 IND
肺炎克雷伯菌ATCC 10031 0.68 加 0.56 加 0.50 SYN 0.034 SYN 0.28 SYN 1.13 IND 0.32 SYN 0.26 SYN
普通变形杆菌ATCC 6830型 0.16 SYN 0.14 SYN 1.50 IND 1.25 IND 0.50 SYN 2.13 IND 0.32 SYN 0.31 SYN
枯草芽孢杆菌KZN 0.51 加 1.50 加 0.75 加 1.00 加 0.81 加 0.63 加 0.29 SYN 0.57 加
普通变形杆菌KZN 2.50 IND 0.28 SYN 0.75 加 0.75 加 5.00 蚂蚁 1.5 IND 1.00 加 16.46 蚂蚁
粪肠球菌KZN 2.00 IND 0.56 加 1.25 IND 0.16 SYN 2.06 IND 1.25 IND 2.00 IND 1.5 IND
金黄色葡萄球菌好吧2 0.03 SYN 0.28 SYN 1.25 IND 0.26 SYN 0.31 SYN 1.50 IND 0.28 SYN 0.19 SYN
金黄色葡萄球菌好吧2 b 0.53 加 0.37 SYN 0.62 加 0.75 加 0.11 SYN 0.75 加 1.06 IND 0.31 SYN
志贺氏杆菌sonnei写明ATCC 29930 0.02 SYN 0。0004 SYN 0.56 加 0.01 SYN 1.25 IND 3.00 IND 0.61 加 0.25 SYN
加 = additive; ANT = antagonistic; IND = indifference; SYN = synergy; ZMM = methanolic extract ofZ、 木犀草属;TET = tetracycline; AMX = amoxicillin; MET = metronidazole; ERY = erythromycin; KAN = kanamycin; NAL = nalidixic acid; CIP = ciprofloxacin; CHL = chloramphenicol; REM = remarks.
表5
抗菌组合的分级抑制浓度指数。

四。讨论

在药用植物，提取物的药理活性是由于如生物碱，类黄酮，和酚类化合物的多酚类化合物。据报道，这些物质的生物学和药理学的重要性。单宁具有能够破坏细菌的细胞膜或延迟足够的时间细菌生长的细菌消除和主机开发其免疫系统[抗菌活性31]。黄酮抑制胞质膜的功能，DNA促旋酶，和β-羟基酰基-酰基载体蛋白脱水酶活性[32]，以抑制微生物的生长。酚有抗氧化剂，抗菌，抗病毒，抗癌和抗炎性质[33]。多酚的药理活性主要是由于它们的氧化还原特性，使它们可以作为铁血红蛋白的还原剂、氢供体、单重态氧猝灭剂、金属螯合剂和还原剂[34]。在本研究中，甲醇提取物中DPPH清除活性的多少与提取物中酚类物质的浓度有关。提取物对DPPH具有较强的清除作用，这可能与它们的儿茶素和一些低分子多酚有关[35]和芳环和羟基的取代的性质的数目[36]。

在治疗微生物感染，而氧化应激在细菌引起的外源性生物[37-39]所产生的毒性作用，许多抗生素，包括喹诺酮类[40，41]，氨基糖苷类[42]，利福平[43]，和氯霉素[44]均可在不同的细菌细胞中诱导产生活性氧(ROS)，而不论它们的特定目标为何[45]。在氧化过程中，细胞产生的活性氧受氧化还原循环过程中不同化学物质的影响[46]。Gyulkhandanyan等。[47]报道，从氧化还原循环此催化生产的氧化应激是抗生素作用的一种可能的模式。尽管抗生素的抗菌活性依赖于ROS产生和药用植物，尽管具有抗氧化和抗菌活性，从组合的抗生素和萃取所得的协同作用可以导致从它们在细菌菌种产生ROS的抗菌作用。从抗生素中的细菌，可能是，那些从提取物可能会影响不同的靶位点的ROS发挥其抗菌活性。如果由抗生素所产生的活性氧的破坏作用均超过提取物的抗氧化防御活动中，细菌的防御机制可能已经缩小，使抗生素能有效达到其目标网站。的协同作用能，因此，已在响应于来自提取物中的抗氧化剂和通过针对细菌分离株的抗生素产生的自由基之间的反应产生的反应性较低，但更长的寿命和更稳定的自由基。

在另一方面，由于抗氧化剂对ROS和多酚捍卫生理活性系统可以参与ROS的产生和充当prooxidants [48]，具有高抗氧化作用的提取物有可能防止从上施加的细菌的抗菌效果通过抗生素产生的ROS。在以前的研究中，Desesso等。[49报道具有低氧化还原电位可以防止细菌对抗生素的耐药，只有非特异性清除剂。ROS清除剂，如谷胱甘肽和抗坏血酸，防止的易感性环丙沙星敏感大肠杆菌MG1655，粪肠球菌和金黄色葡萄球菌[50]。他们赋予针对喹诺酮类和氨基糖苷类[保护51]，增强…的抗菌活性β-抗内酰胺大肠杆菌[52]。虽然增加ROS可能导致诱变剂和细菌耐药[诱导42和多酚保护细菌细胞免受环丙沙星毒性[53]，从组合的抗生素和提取产生的ROS可能导致一些分离株的减少细菌敏感性的植物化学物质可能保护，以防止各抗生素的有效性的细菌细胞通过产生添加剂的变化程度的敏感性所指示，冷漠，并从各种组合拮抗相互作用。

5.结论

有不同程度的微生物感染的治疗中通常使用的ZMM和不同抗生素之间的相互作用。从ZMM和抗生素之间的不同的协同相互作用产生的抗菌效果可以归因于它们的同时产生ROS到效果杀菌作用的能力而从ZMM和抗生素之间的其它相互作用造成的抗菌效果可以归因于将提取物行为的能力作为抗氧化剂的拖了由抗生素，反之亦然对抗细菌分离株产生的ROS。每个每个细菌物种每种抗生素的敏感性的植物化学物质的调节作用还需要进一步的调查，可能是在疾病的情况下，细菌感染的治疗显著的应用。

数据可用性

用于支持该研究结果的数据包括在项目之内。

利益冲突

作者宣称没有利益的潜在冲突。

致谢

笔者在此确认贝比考克大学研究的支持（批准号。BU / RIIC / 2016/03）。

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