Methanolic提取物的体外抗菌活性水果、种子、树皮花椒属植物armatum直流

文摘

粗甲醇提取物的水果,种子和树皮花椒属植物armatum进行了体外抗菌活动对9个不同的菌株:枯草芽孢杆菌,粪肠球菌,变形杆菌属寻常的,铜绿假单胞菌,伤寒沙门氏菌,痢疾,金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌),葡萄球菌epidermidis使用琼脂扩散法,和MBC值测定。只有5细菌,即枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,葡萄球菌epidermidis表现出抗菌特性对不同的提取。果实和种子提取物显示活动对5细菌,而树皮中提取积极反对2只(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和细菌金黄色葡萄球菌)。金黄色葡萄球菌被发现更容易的提取与其他菌株相比。20.72毫米的最大ZOI是由水果(野生)和18.10毫米(培养)金黄色葡萄球菌。同样,至少ZOI 11.73毫米是由种子(野生)和11.29毫米(培养)粪大肠。同样,0.78毫克/毫升的最低MBC值获得果实提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,1.56毫克/毫升水果、种子和树皮提取物枯草芽孢杆菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,最高价值50毫克/毫升的水果和种子提取物美国epidermidis。果实、种子、树皮提取物z armatum表现出显著的抗菌特性对不同致病菌引起一些疾病,这表明这种植物治疗的潜在使用不同的细菌疾病,如皮肤感染,尿路感染,牙齿问题,腹泻,痢疾。

1。介绍

在8种花椒属植物(家庭芸香料)发现,在尼泊尔,花椒属植物armatum直流。是最常见的一种香料植物,有许多药用价值。俗称帖木儿,subdeciduous芳香灌木或小树6米高。发现在炎热的亚热带向温带喜马拉雅山脉的山谷不丹(克什米尔),东北印度和巴基斯坦、老挝、缅甸、泰国、中国、孟加拉国和不丹(1]。在尼泊尔,发现从西向东开放的地方森林或灌木丛在海拔1000米到2500米(2]。

在现代医学体系中,广泛使用的抗菌素治疗一些传染性疾病,这可能会导致不良的副作用,严重的医疗问题(3,4]。商业抗菌素的滥用也导致多重耐药的发展。这敦促科学家发现或从天然来源中提取天然抗菌素与更少的健康程度5]。植物是小说的潜在来源抗菌药物(6,7]。中草药实践,它使用植物来源治疗各种感染性疾病,这些天也越来越受欢迎。类黄酮和酚醛树脂,潜在的代理抗菌,抗氧化,抗癌活性,已确定和孤立的从不同的植物8,9]。

树叶、果实、种子、树皮z armatum具有多种药用价值,传统上用于驱风剂几种疾病,退热剂,开胃,增进食欲,消化不良,牙痛2,10- - - - - -12]。一系列广泛的化合物如生物碱、黄酮、苷类、萜类、类固醇、酚类、木质素,香豆素,benzoids [13- - - - - -18)已报告从植物的不同部分,负责几个生物活性包括抗菌、抗氧化剂,退热剂,杀灭幼虫和消炎作用。幼枝被用作牙刷和有用的治疗牙龈疾病和牙痛。精油的主要成分是芳樟醇,柠檬烯。果实和种子的芳香主音发烧,消化不良,排出蛔虫(2,11]。水果作为调味品和香料。几个土著的医药实践z armatum在各种疾病显示,植物成分的抗生素的潜力。因此,本研究试图在评估潜在的抗菌活动methanolic提取的水果,种子和树皮花椒属植物armatum在尼泊尔收集的野生和栽培的人群。

2。材料和方法

2.1。收集和处理样品

新鲜水果、种子、树皮z armatum收集来自尼泊尔的萨利亚内区野生和栽培的人口在2018年5月。样本清洗和阴影提取过程之前干了一个星期。凭证标本的标本制备,是沉积在国家植物标本和植物实验室(·)NPZA 20-NPZA 50。

2.2。提取的样品

然后干样本分别粉磨。知道粉样品的重量是装载在顶针,在索氏仪器。然后他们被先后由热索氏提取法提取。装置运行72小时到有色溶剂出现在虹吸获取原油提取的样本。完整的提取后,溶剂蒸发在旋转65°C下减压真空蒸发器。获得的提取物在水浴那么干。干提取被密封在20毫升消毒文化管和存储在一个冰箱在2 - 8°C进行进一步分析19]。

2.3。抗菌活性

Methanolic提取的水果、种子、树皮花椒属植物armatum从野生和栽培群体对不同细菌筛选通过琼脂扩散方法所描述的佩雷斯et al ., 199020.]。

2.3.1。测试生物

提取物9不同菌株的筛选:枯草芽孢杆菌写明ATCC 6051,粪肠球菌写明ATCC 29212,变形杆菌属寻常的写明ATCC 6380,铜绿假单胞菌写明ATCC 9027,伤寒沙门氏菌临床样本,痢疾临床样本,葡萄球菌欧雷斯山写明ATCC 6538 p,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床样本,葡萄球菌epidermidis写明ATCC 1228。氯霉素作为标准的抗菌剂。

2.3.2。文化的细菌

营养琼脂(NA)媒体被用于培养细菌。所需数量的媒体准备,热压处理过的,然后冷却到40°C和倒无菌培养皿中,并允许固化。所需数量的殖民地的测试生物培养各自的盘子和保持在一个孵化器18 - 24小时在接种之前35°C。所有这些实验进行无菌生物安全柜。

2.3.3。制备培养液/暂停

需要殖民地(1.5×10⁸cfu·毫升⁻¹)的新鲜培养细菌接种无菌玻璃小瓶包含生理盐水。暂停是由涡流均质浊度的解决方案并与0.5麦克法兰标准浊度,推荐的199121),药敏试验。

2.3.4。筛查和评估区抑制(ZOI)

地毯的文化准备细胞悬浊液是由均匀传播悬浮液的帮助下棉签在干燥表面Mueller-Hinton琼脂(尼古拉斯)板块。这些过程是重复三次旋转板通过一个60°C之间裸奔,角和接种盘子留给最大15分钟允许表面吸收多余的水分。

四个水井,每个直径6毫米,无聊在接种板使用无菌软木钻孔机。50μL 20%的测试解决方案的提取物溶解在甲醇,积极控制,和消极控制投入各自的井。氯霉素和甲醇作为积极的和消极的控制,分别。因此接种盘子放在孵化器在35±2°C。18 - 24 h后,车牌区域进行评估的抑制(ZOI)。每个ZOI的直径以毫米的数字游标卡尺。

2.3.5。确定最低抑制浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)

最低抑制浓度(MIC)决心通过观察可见增长的双重serial-diluted抗菌物质的测试生物营养肉汤(NB)文化传媒在MBC由接种麦克风文化决定合适的琼脂板(22]。

(1)最低抑制浓度(MIC)。。一组12消毒瓶标签包含1毫升presterilized Mueller-Hinton肉汤(MHB)准备。1毫升的各自的提取的解决方案是添加到11瓶,和第一个瓶是用于控制负增长。解决方案的完整的均质化后,1毫升含有营养肉汤和提取解决方案被转移到第二瓶包含1毫升的营养肉汤。以同样的方式,双重的连续稀释了十瓶。此后,1毫升的内容从第十瓶丢弃和11瓶作为积极的控制。现在,所有的瓶,除了第一个和最后一个包含相同体积,即。1毫升,逐步降低浓度的解决方案。所有这些瓶,20μ细菌悬液L(浊度等于0.5麦克法兰标准,应该1.5×106 CFU /毫升)放入每个瓶彻底和混合。瓶被孵化24小时37°C。麦克风是作为最低浓度,防止细菌的生长文化(23]。

最低抑制浓度(MIC)被定义为最低浓度的抗菌剂,阻止生物的可见的增长被缺乏可见的浊度。解决方案的清晰(无浊度)表明微生物的抑制作用。然而,浊度是否由于细菌的生长或由于浊度的植物提取物本身是很难确定的。因此,MBC决心找出最低浓度的提取杀死微生物。

(2)最小杀菌浓度(MBC)。。最低杀菌浓度(MBC)所需的最低浓度的抗菌剂杀死微生物。MBC值测定接种的所有测试稀释的提取新鲜营养琼脂(NA)介质和进一步孵化24小时37°C。提取的最低浓度(毫克/毫升),并没有导致的外观单一固体培养基上的菌落被视为MBC [24]。

3所示。结果与讨论

Methanolic提取的水果、种子、树皮z armatum测试对各种细菌。提取物的抗菌性能进行了比较与氯霉素积极控制。带抑制的直径(ZOI)所产生的特定微生物的提取测定在mm估计他们的抗菌活性。在生物检测抗菌性能、水果和种子提取物表现出抗菌活性枯草芽孢杆菌、粪大肠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,葡萄球菌epidermidis和树皮提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌只有,提取并没有产生任何ZOI其余的生物。

抗菌性能的果实、种子、树皮提取物对不同菌株和ZOI展示在表1和数字1- - - - - -3。最敏感的菌株金黄色葡萄球菌所有的水果,种子和显示最大ZOI树皮提取物金黄色葡萄球菌与其他菌株相比。最高ZOI由提取金黄色葡萄球菌,20.72毫米为种植水果,野生水果和18.10毫米17.83毫米野生种子和种植16.33毫米,和野生的树皮ZOI为17.01毫米和16.44毫米的培养。最少的活动显示了种子提取物粪大肠,11.73毫米的最低ZOI(野生)和11.29毫米(培养)。

水果提取显示最高抑制细菌菌株比种子和树皮提取物。水果的ZOI反对枯草芽孢杆菌16.24毫米(野生)和17.04(培养);粪大肠14.28毫米(野生)和14.62毫米(培养);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(野生)和16.28毫米15.02毫米(培养);和葡萄球菌epidermidis16.38毫米(野生)和16.19毫米(培养)。种子提取物显示中度活动对生物体进行测试。种子的ZOI枯草芽孢杆菌是15.72毫米(野生)和16.28毫米(培养);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(野生)和16.44毫米17.79毫米(培养);和葡萄球菌epidermidis15.58毫米(野生)和13.25毫米(培养)。树皮提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的ZOI 14.30毫米(野生)和13.28毫米(培养),金黄色葡萄球菌17.02毫米(野生)和16.44(培养)(表吗1)。

不同提取物的抗菌活性显示变量结果野生和栽培种群和栖息地的独立因素被发现。的一些摘录野生种群显示良好的抗菌性能,和一些培养样本显示更好的结果。所有提取的水果,种子和树皮被发现效果低于标准的抗生素用于本研究(图4)。

最低杀菌浓度(MBC)值的范围从0.78毫克/毫升到50毫克/毫升。MBC值最低的0.78 mg / mL展出了水果提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和最高,即。,50毫克/毫升,是种子(野生)和水果美国epidermidis。这项研究的结果发表在表2。1.56毫克/毫升的MBC值获得果实(野生和栽培)和种子(野生)枯草芽孢杆菌;种子(野生和栽培)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;和水果(野生和栽培)和树皮(野生和栽培)金黄色葡萄球菌。同样,MBC值为3.12毫克/毫升的种子(野生和栽培)金黄色葡萄球菌。MBC值的提取粪大肠和美国epidermidis是相对较高(图5)。

几个实验展示了大量的抗菌活性z armatum叶、果实、种子、树皮提取物对不同菌株(25- - - - - -30.]。产生的ZOI ethanolic和己烷提取物的吠叫z armatum显示对不同细菌的抗菌活性。产生的ZOI提取枯草芽孢杆菌和大肠杆菌都是11.67毫米和反对金黄色葡萄球菌是17.33毫米为己烷提取乙醇提取物及其17毫米(26]。同样的,在另一项研究中,methanolic提取生产的水果7毫米ZOI反对金黄色葡萄球菌,MBC值是2.5毫克/毫升和23毫米ZOI和MBC值> 10枯草芽孢杆菌(30.]。树皮的methanolic提取显示28.7毫米ZOI反对金黄色葡萄球菌(31日]。

不同的植物提取物的抗菌活动表现出对一个特定的生物取决于几个外在和内在因素。琼脂扩散能力的媒体可能会导致提取生产ZOI比它的实际功效。因此,MBC值实际上决心找出所需的最小浓度提取物抑制测试生物体的生长(32]。

类黄酮和其他酚醛树脂表现出广泛的迷人的生物活动,如抗菌、抗病毒、抗氧化和抗癌特性33]。水果提取物的抗菌活性z armatum是相对比种子和树皮提取物。可能是由于较高的酚类和类黄酮含量比种子和水果皮(18]。粗提取物的抗菌特性可以归因于几个植物成份的大学生的影响存在于植物。z armatum据报道生产结构多样的化学物质包括萜类、黄酮类、香豆素类、甾醇类、生物碱类显示抗菌活性。许多活性成分已确定的植物可能会发展成为新型药物。因此,进一步重点应该是筛选、隔离和表征的单个组件负责不同抗菌活性及其潜在的作用机制。然而,进一步的研究需要量化的急性和慢性毒性动物临床试验前(12,34]。

测试提取潜在的抗菌活动针对不同病原体导致传染病在人类身上。这些实验部分验证这种植物的使用在一些传统的医药实践来治疗各种疾病。因此,进一步的研究应关注于利用的可能的用途花椒属植物armatum治疗不同的细菌疾病,如泌尿道感染、皮肤感染,腹泻,痢疾,和牙齿问题(数据1- - - - - -3)。

4所示。结论

研究结果显示,原油提取的水果、种子、树皮花椒属植物armatum从不同的栖息地有抗菌特性对一些传染性病原体引起了人类的一些疾病。水果被发现对细菌比种子或树皮更活跃,成果显示,最高ZOI反对金黄色葡萄球菌。同样,种子也有良好的抗菌性能。对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和树皮展出活动金黄色葡萄球菌只有。本研究的结果支持传统的使用中草药植物的实践。药用植物含有多种化合物,可以开发成几个药物的安全使用,造福人类。自现代抗生素的滥用可能导致严重的健康危害,这些植物可以安全的替代品来治疗一些疾病。抗菌特性所表现出的水果、种子、树皮z armatum建议这种植物的潜在使用皮肤感染,尿路感染,牙齿问题,腹泻,痢疾。因此,进一步的研究应针对广泛的体内和临床研究以及抗菌活性的作用机理,证明用理性的传统,也会导致小说植物抗菌剂的开发安全的卫生保健服务。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

吧Phuyal要感谢Dabur尼泊尔的授予“Dabur CSR奖学金(Sri Ashok后期集缅甸人)01/2016”。作者感谢UshaTandukar女士(科学官员)和Pramesh先生阁下Lakhey(助理科学官员)的植物资源为各种类型的帮助进行实验。作者也感谢地区植物资源的克里希纳双关语先生办公室,萨利亚内,实地访问期间给他极大的帮助。(Sanjeev Kumar拉伊先生,总经理系的植物资源,被公认为他的支持开展实验室工作。特别感谢将Ram凯拉什博士教授Prasad Yadav,头,中央部门的植物学、布汶大学对他的鼓励。

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