抗疟的潜力番木瓜和Vernonia amygdalina在老鼠身上感染鼠体内

文摘

如果管理研究决定Vernonia amygdalina和番木瓜工厂提供了协同效应改善疟原虫感染的老鼠。三十老鼠(17.88 - -25.3 g)被分成6组,每组5老鼠。组1是正常的控制,而组2 - 6腹腔内接种2.5×10⁷鼠体内寄生红细胞,紧随其后的是日常管理的350毫克/公斤水叶提取物后建立感染。组2疾病控制,而6组与标准药物治疗连续四天。结果显示显著()减少比例的寄生虫感染治疗组之间的负载和疾病对照组在感染后第三天,保持一致的,直到实验结束。所有被感染的治疗组显示显著(增加红细胞和PCV复苏与疾病控制相比,除了白细胞。有无关紧要的(所有治疗组)的平均体重变化除了疾病对照组。组织学的研究受感染的老鼠显示恢复肝细胞从拥挤的黑色色素沉着。减少寄生虫负载和恢复肝细胞损伤/血液参数被这些植物提取物诱导。这强调了重要的使用疟疾感染的植物在传统的补救措施。

1。介绍

疟疾仍然是最致命的传染病之一,属原生动物寄生虫引起的疟原虫(1]。可用的治疗药物已经有限的功效,而耐药性可能预防和治疗感染的能力(1]。疟疾是疾病和死亡的主要原因在撒哈拉以南非洲地区每年大约有一百万名5岁以下儿童的死亡率(2]。在尼日利亚和世界其他地区,疟疾感染继续造成重大的健康挑战。针对抗寄生虫的抗疟药物治疗,从而导致药物失败,迫切需要新的药物或药物组合治疗疟疾的感染从传统药用植物3]。传统药用植物发挥重要作用在医疗系统在尼日利亚;然而,植物材料仍然是一个重要的资源来对抗世界上严重的疾病。当前使用的植物一直被认为是一个可能的替代和丰富的新药,和一些抗疟药奎宁等今天使用和青蒿素是直接从植物获得或使用植物的化合物的化学结构作为模板开发(4]。

合成抗疟药物的使用是治疗疟疾的主要方法之一,有效地控制寄生虫负载。然而,大多数这些药物的实际应用仍限制由于其有限的行动,药代动力学性质,次要的失败率,和伴随的副作用5]。随着疾病的发病率在城市/农村人口在世界各地,有明确需要本土的发展,廉价的植物来源抗疟原油或提纯药物(5]。

Vernonia amygdalina德尔属于菊科家庭;共同的名字是苦叶。它是一种多年生的灌木,2 - 5米高,生长在热带非洲(6]。叶和茎是著名的传统中最常用的药用植物(7]。番木瓜林属于番木瓜科的家庭,通常被称为木瓜(8]。的叶子番木瓜结合Vernonia amygdalina传统上用于治疗感染(7,9]。在传统医学草药医师使用诉amygdalina和c .木瓜在尼日利亚打虫药、抗疟疾、消化补药,开胃菜,antihemolytic,抗真菌,antijaundice代理。叶子注入用于治疗泌尿疾病和淋病。新鲜的叶子包扎的伤口或用作antidysentery代理和慢性腹泻或作为镇静剂和治愈桩和尿液排出的伤口和其他疾病(9]。植物提取物已被科学证明函数作为抗菌(7,抗真菌7,10],抗癌肿瘤/ [11,12),和antiplasmodial代理(13,14]。

虽然一些植物有效成分的生理作用(s)已深入研究及其功能在健康和疾病条件下已经承认,这仍然是一个发展的医药研究的焦点代理能有效治疗疟疾和其他疾病,因此需要研究的有效性诉amygdalina和c .木瓜在生命系统以促进信息疟疾感染的医学应用。

2。材料和方法

2.1。植物样品收集和识别

新鲜的叶子Vernonia amygdalina和番木瓜收集2015年11月,从联邦低造价住宅房地产,Makurdi,尼日利亚。植物分类学者被识别和身份验证的生物科学,农业大学Makurdi,尼日利亚。

2.2。实验动物

成年老鼠(17.88 - -25.3 g)的男女从实验动物获得房子,贝努埃州州立大学健康科学学院Makurdi,尼日利亚。动物们在标准环境条件下适应了两周。的温度和湿度保持在25°C和50%,分别。黑暗与光明周期保持在12小时。他们已经访问标准商业鼠丸(UAC大谷物有限公司,乔斯,尼日利亚)和水随意。按照使用的动物伦理委员会的指导方针和建议的使用动物研究大学的农业、Makurdi,尼日利亚。

2.3。设备/试剂

下列设备和试剂:奥林巴斯显微镜,血细胞计数器与吸气吸管,毛细管,microhematocrit离心机,PCV读者,盖玻片和幻灯片,水浴。土耳其人白细胞的流体,Dacie红细胞的液体,和吉姆沙染色剂从Sigma-Andrich化学公司购买(圣路易斯,美国)。所有其他化学物质和用于本研究均为分析纯试剂。

2.4。制备的植物样本

收集到的样本在干净的水冲洗和阴影在室温下干了两个星期。干燥的植物样本磨成粉用杵和臼。获得的粉末被用来准备提取。

2.5。水提取

100 g的粉末是干重和浸泡在溶剂(水)的比例solute-solvent 1: 10。提取是冷浸渍在室温下与间歇摇晃3小时间隔48小时。绘画纸8的滤纸μ用于过滤提取。得到的滤液集中在监管的水浴温度在45°C。

2.6。杀伤力(LD₅₀)测试

意味着致命剂量(LD₅₀水提取物的决心在老鼠(重达20 - 30 g)使用arithmetic-geometric-harmonic(啊)的粗略的估计方法修改Saganuwan [15]。

2.7。疟疾寄生虫

疟原虫氯喹敏感鼠体内(Nk65))从教师获得兽医,Ahmadu贝洛大学(阿布)Zaria。

2.8。寄生虫接种

鼠体内寄生红细胞从供体老鼠的尾巴,和0.9%生理盐水稀释。小鼠腹腔注射0.5毫升血液包含2.5×10的悬挂⁷寄生在0天红细胞和监控的表现寄生虫血症4天不治疗。的小鼠随机分为6组,每组5(5)小鼠和治疗连续4天的每日剂量提取物(350毫克/公斤合著)和标准抗疟药(halofantrine 25毫克/公斤合著)口服路线。

2.9。动物分组和治疗

组1:消极的控制,而不是感染了p .鼠而不是治疗组2:积极控制感染p .鼠但不治疗第三组:感染p .鼠,接受350毫克/公斤c .木瓜提取第四组:感染p .鼠,接受350毫克/公斤诉amygdalina提取组5:感染p .鼠和接受350毫克/公斤的提取c .木瓜和诉amygdalina比1:1第六组:感染p .鼠和抗疟药物治疗(halofantrine 25毫克/公斤)

2.10。血液分析

感染红细胞水平确定的百分比被布朗(16使用显微镜检查),薄血涂片显微镜幻灯片上。拥挤的细胞体积化验根据高斯(描述的方法17]。红细胞和白细胞计数估计根据布朗的协议16使用纽鲍尔血球计)。

2.11。组织学分析

在实验的最后,所有的老鼠心脏穿刺麻醉使用氯仿和流血。所有小鼠的肝组织被切割出并立即在冰冷的生理盐水洗。组织的一部分固定在10%福尔马林固定的解决方案所描述的组织学研究Strate et al。18]。

2.12。统计分析

分析进行了一式三份的所有决定和结果表示为意味着±SEM。SPSS程序(SPSS 20.0版公司,芝加哥,美国)是用于方差分析,其次是新邓肯的多个范围测试多个比较的手段19]。平均值之间被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

这项研究的结果表明,水叶的提取物诉amygdalina和c .木瓜抗疟活性显示在受感染的老鼠相比,感染,未经处理的控制。图1揭示了比例的寄生感染小鼠的红细胞鼠体内。组感染p .鼠开发寄生虫血症后感染。寄生感染未治疗组的红细胞的百分比(组2)显著()增加postinfection相比9天(组内)和其他组织(组间),分别。重要的()减少寄生负载组3和6中更加明显,分别。

表1PCV显示平均红细胞,白细胞计数小鼠感染p .鼠随后处理水提取的诉amygdalina c .木瓜,结合c·p + v。和halofantrine。有显著的()减少意味着在所有实验组红细胞计数和PCV感染后与正常对照组相比。然而,随着治疗开始,有一个观察到显著()的意思是增加红细胞计数和PCV群体内部的所有治疗组的血压(加拿大皇家银行在4组除外)而感染,未经治疗的对照组。意思是白细胞计数所有的组织感染p .鼠明显()相比,增加了感染后正常控制。增加白细胞显著降低在政府不同方案的提取感染组。

所有实验组的体重是呈现在图2。有显著的()增加体重组1中获得整个postinfection时期,3、6 preinfection相比。然而,没有观察到显著增加组2,4,5 preinfection天相比。

图3显示了组织切片的小鼠感染的肝细胞p .鼠和处理水提取物诉amygdalina c .木瓜,结合c·p + v。和halofantrine。图3(一个)正常的控制小鼠肝细胞的正常结构和参考标准。图3 (b)是完全耗尽的疟疾控制小鼠肝细胞p .鼠。这里的图显示突出的正弦信号和正弦空间中,随着地区的坏死。图3 (c)是代表肝细胞受感染小鼠接受350毫克/公斤。提取的w。在这个图中,有一个轻微的扩散扩散肝细胞的修复。图3 (d)受感染的老鼠接受25毫克/公斤b。w halofantrine;这表明轻微扩散扩散肝细胞的修复。

4所示。讨论

实验动物疾病模型的存在艾滋病不仅对这种疾病的病理生理学的理解,而且在药物发展的候选人(20.]。

因此,筛查抗疟活性植物原油提取的第一步隔离的新分子的活动(21,22]。结果清楚地表明,水叶提取的个人管理c .木瓜,诉amygdalina,两者的结合植物显著()减少寄生负载在老鼠和增强他们的生存。有许多生物活性成分在提取和因此,目前,它是不确定的,这是负责观察效果。然而,一些报告表明,类黄酮,单宁,皂甙和其他植物成份可能扮演一些角色的抑制疟原虫在受感染动物23,24]。观察到的寄生虫血症在实验老鼠当分别与单剂量和治疗剂量的相结合c .木瓜和诉amygdalina协同降低连同halofantrine建立感染后9天,与疾病控制相比,特点是寄生虫过度增长,夸张的免疫反应,或两者的结合导致严重病理和死亡,这是不利于寄生虫和主机。因此,结果Saganuwan et al。25尼日利亚),许多植物可以用来治疗疟疾感染p .鼠几乎是致命的发生与死亡证实(1 - 3周内25]。

PCV的减少和增加红细胞和白细胞的所有被感染的群体感染后符合之前的报道,记录减少血清PCV,红细胞和白细胞水平增加疟疾科目(5]。在这项研究中,水叶的提取物诉amygdalina c .木瓜,和合并后的提取物显著降低白细胞,并引发PCV的增加由于增加红细胞的生产,因此,抑制红细胞溶血性损害。

体重的增加受感染组小鼠和未感染组不同意报告Saganuwan和Onyeyili5),这表明p .鼠减少体重。体重在这项研究中观察到的增加可能是由于持续喂养的动物在实验期间。

治疗组肝细胞的组织学检查显示提取无法清楚整个寄生虫包含从循环和修复肝细胞,并同意的工作Stenad et al。26),他说肝夹杂物被定义为胞内聚合物的可染色的物质代表了各自的人类疾病的标志。再生的迹象/维修使用药用植物组织在其他作品(已报告27,28),这与目前的研究一致。因此,组织维修或治疗在疾病条件下可能提供治疗的好处。

5。结论

总之,这项发现显示,减少寄生负载和恢复肝细胞损伤/血液参数诱导的植物提取物,因此给人的使用植物传统治疗疟疾。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突存在。

作者的贡献

这项工作是在所有作者之间的合作。Oche Okpe设计研究,写了协议,和解释数据。文森特·a . Upev和Omiagocho t·艾萨克固定领域研究中,收集原始数据,进行初步的数据分析。Nathan Habila约瑟Ikwebe管理产生的文献搜索和最初的草案。斯坦利。r . Okoduwa批判性知识内容的修订草案。所有作者阅读和批准最终的手稿。

确认

作者表达感激美国博士答:Saganuwan兽医系的生理学和药理学,农业大学Makurdi,以换取他的支持。

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