文摘
确定登革热感染的发生率,我们建立积极监测发热的一群学生从三所学校在麦德林,哥伦比亚。我们跟着一群2379学生在2010年和1840年之后的这些孩子。在随访期间,264学生显示297发热;其中,23集(7.7%)是由严重的登革热感染造成的。所有被发现的四种登革热血清型,和所有的病例是轻微的。最常见的症状登革热病例相比在其它发热性疾病衰弱(96%和87%),厌食症(78%和57%),鼻液溢(65.2%和58%),腹痛(56.5%比47.8%)、关节痛(43%和33%),和积极的止血带测试(13%比3%)。这种差异没有统计学意义。脉冲是高架,收缩期动脉压力低登革热病例相比其它发热性疾病()。蚊子指标确定8的房屋和学校的孩子。埃及伊蚊成人被发现在家庭和学校,而埃及伊蚊幼虫被发现只有在学校。这些结果显示,儿童登革热频率升高,症状类似于其它发热性疾病传播的风险在家庭和学校。
1。介绍
登革热病毒感染(DENV)是世界上最重要的蚊媒病毒性疾病,占每年112个国家的5000万例感染病例和50000例死亡。这种疾病可以引起的任何四种登革热的血清型,DENV-1 4,及其临床表现范围从无症状形式未分化的发烧急性发热;最严重的形式可以产生出血,等离子体泄漏,器官衰竭(1]。2010年,登革热的发病率在哥伦比亚151774例,其中5420被当前的定义(归类为严重2]。所有四种血清型循环,DENV-2(44%)和DENV-1(41%)是最常见的(3]。在麦德林,提奥基亚省的首府,17632例登革热病例和112年流行严重的登革热病例报道2010年(4]。登革热患者的平均年龄是14岁,患有严重的登革热病例的平均年龄是22岁3]。频率和疾病的临床和流行病学特征的青年人口是未知的。
世界各地的不同的研究报告登革热病例学龄儿童的频率。在尼加拉瓜,两年随访研究报告登革热的发病率是第一年12%,第二年6% (5]。在委内瑞拉,观察累积发生率25.8% (6]。在泰国,两项研究报告登革热的发病率很高的5.8和3.4,分别为(7,8]。据报道在越南,登革热的发病率是11.7%在一项研究[9),在另一个[41.2 - 45.0%10]。
控制登革热感染的关键之一是认识其重要性。在哥伦比亚,登革热的发病率是唯一已知的病人参加卫生保健服务。我们提出了确定发病率、临床流行病学和昆虫学方面的登革热感染学生。这项研究是第一个使用随访队列方法在哥伦比亚。
2。材料和方法
2.1。研究网站和人口
本研究进行的麦德林,提奥基亚省首府哥伦比亚。它的人口是279301111]。它位于海拔1479米,年平均气温是24°C(图1)。
前瞻性纵向研究是在2010年5月到2011年12月进行的。研究人口由一群来自小学和中学的2379名学生在麦德林(三个不同的地点位于San Javier的地区,Poblado,和Laureles)。选择这些机构按照下列标准:在市区,有小学和中学人口超过2000的学生,和从学校批准的方向。
2.2。积极监测情况
在研究期间,登革热病例,学校旷工由于发热的小于7天的时间,用温度计(> 38°C)和报告由父母或学生的导师。研究护士访问每个学校每4天,验证参与学生的缺勤。在缺席的情况下,学生的家长联系确认。如果学生满足入选标准,研究医师执行一个完整的医学检查。临床信息被恢复使用一个标准化的病例报告形式通过掌上电脑。收集血清样本(3 - 5毫升)在急性期(同一卷)另一种血清样本在恢复期的阶段(程度天日期后出现症状)。所有血清样本存储在−80°C到正在处理。社会人口数据也收集。
2.3。实验室化验
诊断测试执行的病毒学实验室”接受药物热带“所有症状的学生。通过以下方法登革热感染被诊断。血清学诊断。特定穴IgM抗体进行检测IgM捕获ELISA (Panbio, Sinnamon公园,澳大利亚)在急性和恢复期的血清样本阶段,根据制造商的协议。
2.3.1。检测的登革病毒RNA逆转录酶聚合酶链反应(rt - pcr)
检测登革热病毒RNA和血清型鉴定了所有的样品收集在急性期根据Lanciotti等人程序(12)改编的哈里斯et al。(13)做了一些调整。简单地说,140年μL的血清样本被用来使用QIAamp RNA提取病毒RNA工具包(试剂盒、Hinden、德国),根据制造商的建议的协议。RNA在60筛选了μL(洗脱缓冲并存储在−80°C到使用。提取的样本然后接受逆转录PCR扩增。反应混合物包含10μL的RNA模板;五个寡核苷酸引物:D1和壹空间为0.5μ米,引物TS2, TS3, DEN4浓度为0.25μM;0.5 U (lamv RT (Promega Corp .,麦迪逊,WI,美国);0.625 U GoTaq热态启动DNA聚合酶;3.5μL 5 x绿色GoTaq福莱希缓冲区;2.6毫米的MgCL2美国(Promega Corp .)、麦迪逊WI);的四个deoxynucleotide三磷酸腺苷浓度的150μ在35米μL反应体积。反转录是由42°C 60分钟,紧随其后的是一个周期的初始变性的逆转录酶和激活热起动Taq在95°C 5分钟;40周期为15秒95°C, 30年代的55°C;72°C的1分钟和5分钟72°C扩展。放大是在进行Bio-Rad C1000热循环。放大后,10μL部分分析了每个产品用2%琼脂糖凝胶电泳1 x此种琼脂糖和50个基点DNA梯(GeneRuler 50个基点DNA阶梯,Fermentas,维尔纽斯,立陶宛)。积极的血清型样本的大小是由扩增子(登革热virus-1, 482个基点;登革热病毒2,119个基点;登革热virus-3、290个基点和登革热virus-4, 389个基点)。隔离病毒。从学生的群体发热事件,17 DENV-positive样本诊断的任何方法(rt - pcr或血清转化IgM)是随机选择执行登革热病毒隔离使用C6/36 (白纹伊蚊)细胞通过直接检测荧光显微镜使用anti-Flavivirus组抗原抗体(14]。积极的血清型样品由rt - pcr决定。此外,免疫球蛋白登革热病毒抗体测定样品的急性期使用窝免疫球蛋白捕获ELISA (Panbio, Sinnamon公园,澳大利亚)根据制造商的协议。
2.4。定义
严重的登革热感染定义为临床疑似登革热集病毒学和血清学确认。登革热血清学证实由检测IgM抗体在急性和/或康复的病人血液样本。病毒学确认由积极的测试通过rt - pcr和/或病毒隔离。二、主要的登革热感染被检测登革热一分为二免疫球蛋白抗体在急性血液样本。患者疑似登革热感染,但其血清测试为阴性DENV作为计价其它发热性疾病(OFI)。临床分类是基于标准(15]。
2.5。蚊子索引
他们决定在8学童的房屋和三个学校。以前描述的捕捉和分类方法(1,16,17]。空间分布的发热症状的学童是映射使用软件ArcGIS 10.1(美国Ersi雷德兰兹,CA)。
2.6。统计分析
社会科学统计软件包SPSS软件(Inc.01 SPSS,版本15日,芝加哥,美国)是用于数据处理。卡方分布测试是用于定性变量组间的比较。学生的以及用于正态分布定量变量的比较。Mann-Whitney测试是用于比较变量并不是正态分布。Kolmogorov-Smirnov测试作为正常测试。的值被认为是重要的。
研究伦理委员会批准的协议接受药物热带和符合赫尔辛基宣言,声明8430年哥伦比亚卫生部。入学的学生是基于自愿参与。书面知情同意请求从每个学校的孩子们的父母或负责人,和书面知情同意从所有学生获得8岁。
3所示。结果
学生从两个公共(A和B)和一个私人(C)在研究期间学校入学,导致2379名儿童的前瞻性群组。学生年龄从5到19岁;男性女性比例是0.9:1。第二年(后续),508名学生撤回和31个新学生入学,总共1840名参与者的研究中,年龄在6到19岁改变男性对女性比例(见表1)。
3.1。急性感染登革热的发病率和病毒学特征
在研究期间,297发热疾病被发现在264年学生。其中,23个实验室确诊急性登革热感染,给小学生的登革热发病率8.7% (95% CI = 5.60 - -12.78)和7.7% (95% CI = 4.97 - -11.39)登革热发病率在发热性发作的疾病。在第一年,登革热发病率在发热性疾病为6.9%(14/202),而在第二年9.5% (9/95)。平均天出现症状与天检查的医生研究3.8±1.9天(范围从1到7天)。急性感染登革热病例报道6月至9月在第一年和第二年3月至5月之间(见图2)。
所有登革热病例分为登革热(,1995),和5这些二级登革热感染(21.7%)。血清学证实获得了48%(11)的情况下,而52%(12)例病毒学的确认。23例,11名被证实只有IgM抗体,七只与rt - pcr,两个rt - pcr和隔离病毒,和三个病人经IgM抗体,病毒rt - pcr和隔离。所有四个血清型登革热病毒被rt - pcr检测和/或隔离:DENV-1 (5/23, 41.7%), DENV-2 (4/23, 33.3%), DENV-3(2/23, 16.7%),和DENV-4(1/23, 8.3%)(见图1)。第一年(2010)的研究中,只有DENV-1和DENV-3被检测到,而所有登革热血清型检测到第二年(2011年)。均值±SD天出现症状和画样本高登革热病例证实了IgM抗体检测比登革病例证实了rt - pcr或隔离病毒,虽然这些差异没有统计学意义(4.1±1.9天为IgM抗体和3.8±1.7天为rt - pcr和病毒隔离,)。
观察急性登革热感染在三分之二的学校学习。私立学校(C)有更高的发病率(11.9%)。最高的发病率在男性(女性相比)和混血儿(与Afro-descendant民族相比)。这些差异没有统计学意义(和、职责)。我们观察到一个更高的发病率在年轻受试者从5到9岁(10.8%)较低,但不显著,年长组发生率7.9% ()。登革热发病率最高的年龄是8-year-age,其次是13-year-age 27.3% 23.5%(见表2)。
登革热观察急性感染人群的社会经济地位,有更高的发病率在中间状态(11.4%),(见表2),分布在11个社区。
3.2。登革热的临床体征和症状急性感染和其它发热性疾病(OFI)患者
登革热病例的平均年龄为10.6±3.1(范围= 6 - 15岁)。相比之下,其它发热性疾病病例的平均年龄为11.4±2.8(范围= 5 ~ 17岁),这不是明显不同()。受试者的临床特征与登革感染没有提出具体的迹象而与OFI科目。常见的出血性特性似乎更频繁地发生登革热比OFI急性感染。子宫出血虽然没有统计上的显著差异(),有一个更大的频率的趋势正止血带在急性感染登革热和OFI测试()。心率增加,收缩期动脉压较低相比,急性登革热感染OFI ()。所有发热病例的临床特征如表所示3。登革热在所有情况下,大部分的症状和体征忍受,直到康复的阶段,随着关节痛急性期(65%比43.5%),肌痛急性期(65%比39.1%),背部疼痛急性期(40%比30.4%),呕吐在急性期(30%比17.4%),皮疹在急性期(30%比8.7%),牙龈出血急性期(15%比4.3%),和鼻出血急性期(20%比4.3%)。相比之下,在OFI情况下,只有皮疹在急性期(13.9%比8.1%)和牙龈出血急性期(13.9%比8.1%)症状,增加在恢复期的阶段。
没有一个医生证实登革热病例诊断的研究。这些病例的更常见的诊断是病毒综合征(69.6%),上呼吸道感染(17.4%)、“其他诊断”(8.7%)、腹泻(4.3%)。OFI组最常见的诊断是病毒综合征(59.3%),上呼吸道感染(23.7%)、“其他诊断”(6.7%),登革热(4.8%)、腹泻(4.1%)、支气管炎(1.1%),尿路感染(0.4%)。
只有一个急性登革热感染病例住院。这个病人头晕,呕吐,广义皮疹,比容、增加14.5%和白血球减少症。解决没有并发症。
3.3。登革热的蚊子指数和空间分布和OFI急性感染病例
昆虫学指标由测量8个家庭和学校的设施。这些房子和学校位于San Javier El Poblado麦德林和Laureles-Estadio地区:埃及伊蚊成人被发现在50%的家庭和100%的学校。埃及伊蚊幼虫也被发现在66.6%的学校。
发热的学生分布在12麦德林的16个城市地区。大多数的公立学校的学生B是在San Javier区,区域影响力的学校。相比之下,学生与发热从公立学校和私立学校C分布在整个城市。登革热感染病例分布在6区(见图1)。
4所示。讨论
我们的研究证明了发病率和严重的临床表现,症状登革热感染2372年一群5到19岁学生通过积极监测发热症状在三个城市学校的麦德林,哥伦比亚。2010年5月到2011年12月,297例发热综合征发作在264年发现学生。发热症状的频率在2010年和2011年是8.5%和5.2%,分别和登革热感染的发病率在2011年6.9%,2010年为9.5%,为整个研究期间累积发病率为7.7% (23/297)。
其他群组研究与监测学生据发热在不同的国家有不同的结果。一项研究在泰国1980 - 81检测到60发热1757年一群学生;5.6%的登革热感染(8]。另一个为期三年的研究(7在同一个国家的登革热感染发生率5.8% 2119年一群学生和负责3.2%,7.1%,和1.1%的旷工造成的发热性疾病,分别在三年(1998年至2000年)。泰国农村地区3055例发热性疾病所导致的学校旷工期间观察为期两年的研究(2005 - 6)。登革热是试验检测到酶免疫测定(EIA)在7.2%的情况下,3.8%的病例在2005年和2006年的11.6%)(18]。在越南,2190年一群学生跟着四年(2004年至2007年),690年627名儿童被观察和发热约41 - 45%的这些病例经实验室确诊的登革热10]。在尼加拉瓜,在为期两年的研究与467年和719年的两组学生分别14和30疑似感染登革热的孩子们;其中,4和6例经实验室确认登革热(5]。在委内瑞拉,登革热累计发病率25.8%学生在两年的调查6]。
我们的结果是按照以前的结果在亚洲国家7- - - - - -9,18)和尼加拉瓜(5]。然而,这些结果在越南获得不同于数据(10)和委内瑞拉(6]。
在我们的研究中,每1000名儿童的发病率从5 - 19岁的2011年69年2010年和95年。这发现是高于登革热发病率得到官方的监视系统,在2010年和2011年的0.4 (9.719]。与其他作者的研究结果一致。在尼加拉瓜,登革热病例症状的发生率在一群学生10倍更敏感的监测系统报告的发病率比尼加拉瓜的卫生部(5]。在越南,登革热感染的发病率通过发热性疾病的积极监测是六倍比官方报告的发病率升高监测系统(10]。许多作者强调被动监测系统通常会导致低估的情况下,导致真正的登革热感染发病率的误读5,6,10,20.,21]。
在我们的研究登革热感染的发病率男性高于女性,但这种差异没有统计学意义。类似的结果被其他作者报道(10]。我们还发现小孩子登革热感染的发生率更高(无统计学意义)。而其他年龄组之间的作者没有发现显著差异,他们观察到更高的急性登革热病发病率在年长的孩子10),它被假定年轻登革出血热的可能是一个额外的风险因素(8]。我们观察到登革热病例中产阶级,所有社会经济地位与优势(尽管在这项研究中大多数学生都来自低社会经济地位)。根据我们的研究结果之间没有相关性socialeconomic地位和登革热病例的频率(22- - - - - -24]。
登革热病的严重程度的变化是由病毒血清型等因素(例如,DENV-1和DENV-2一直伴随着严重的登革热(10,25,26与其他血清型[]),连续的感染27,28),和宿主遗传背景29日- - - - - -32]。其他研究已经描述了,cocirculation四种血清型的登革热病毒严重登革热相关(33]。
在我们的研究中,观察所有四种血清型的循环(DENV-1, 41.7%;DENV-2, 33.3%;DENV-3, 16.7%;DENV-4, 8.3%)。几个作者所描述的cocirculation几个血清型学生。一些作者报道更高频率的DENV-4 [7,18),其他报道更高频率的DENV-3 [6],和其他人DENV-2和DENV-1 [5,10]。
我们还观察到的差异主要血清型的频率取决于学校。在私立学校C,只有观察急性DENV-1感染,而所有的血清型流传在公立学校B,和DENV-2 DENV-3心态占据主导地位。然而,登革热感染的发生率较高的私立学校。
所有在我们研究登革热病例确诊是轻微的。这一发现与其他研究不同,相关报道严重登革热病例血清型或cocirculation好几种血清型的7,8,18]。低频率的一个可能的解释严重登革热病例,只有五有顺序登革热感染病例。另一个可能的原因是,前一年的登革热病毒感染发病率影响的严重性随后几年的登革热病。年是紧随其后的是更多的临床发病率较高的模糊的一年(7]。人口在登革热流行一年可以开发群保护的异形的抗体。这些可交叉反应的抗体,导致较低的疾病严重程度(26]。另一方面,我们的研究结果与登革热的流行病学报告协议麦德林,严重的登革热的频率大约是0.6%的登革热病例,死亡病例发生在成人患者(19]。
我们的研究结果表明,登革热感染的症状在急性和康复的阶段从其它发热性疾病是很难区分的。唯一的显著差异是增加心率和收缩压降低动脉压OFI相比,急性感染登革热。一些作者报道,瘀点的频率与登革热案例(34- - - - - -36]。其他作者没有发现差异,出血性登革热和OFI之间信号的频率(35,37- - - - - -39)的异常表现,如黑粪症与登革(和吐血更高的儿童39]。另一方面,tachy-brady心律失常报告了在感染了登革热病毒(40]。它也报道称,多达29%的心脏节律异常可以出现在儿童急性登革热感染(41观察与低血压),在严重的情况下(39]。我们观察到心脏频率显著增加,收缩期动脉压显著降低登革热OFI相比,急性感染。似乎重要的临床参数在较大的样品评估登革热的孩子而OFI最后得出结论。
在我们的研究中,医生并没有做出准确的临床诊断登革热的实验室确认的病例。所观察到的恩迪et al。26),未报告登革热的因素之一是温和的情况下显示非特异性临床表现。
高架昆虫学指标观察到我们的研究表明,小学生的传播登革热的风险是高的在他们的家庭和学校。此外,广泛分散的登革热病例中观察到整个城市麦德林。这些结果对预防项目的机构很重要。
5。结论
总之,我们显示的登革病毒高发的学龄人口在研究期间。正如已经被其他球队在世界范围内,登革热的发病率高于当地信息系统建立的。这强调了登革热诊断困难,主要是因为可以类似于其他传染病临床表现。这种研究是重要的定义控制策略的应用。开发周期监测登革热通过监测发热是一个很好的工具,暴发的早期检测,病媒控制措施的实施和管理的登革热病例。亚种群易于访问和局限于定义良好的地区,如学龄人口,可能代表方便“哨兵”这些调查,结果外推到整个社区。
利益冲突
这个手稿的作者没有直接金融与商业标识的关系本文提到可能导致利益冲突的任何作者。
确认
作者感谢Milyorit莫雷诺和范妮Vargas,本科生在细菌学Colegio de市长安蒂奥基亚省;朱莉安娜Duque·特鲁希略Marcela Escobar,医生,玛丽亚瓜达卢佩Argel和伊莎贝尔埃斯皮诺萨,护士的帮助。亚埃罗·门德斯也谢谢:泵房D,西班牙de Salud de哥伦比亚C6/36供应细胞Javier Diaz泵房D,安蒂奥基亚省大学教授建议的病毒隔离和威利Berlier泵房D,对论文的审阅。金融支持是由接受对位el Desarrollo de la Ciencia y la Tecnologia Jose de卡尔达斯”“旧金山Colciencias,哥伦比亚,项目没有。325649326211和Inviragen,美国。