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萨拉Moslemi Izadpanah Gheitasi,阿米尔·侯赛因·Doustimotlagh, ”保护作用的Hydroalcoholic提取的的士大古安有毛类动物Oxidant-Antioxidant状态在雄性小鼠肾缺血/再灌注损伤”,毒理学杂志》, 卷。2021年, 文章的ID6646963, 8 页面, 2021年。 https://doi.org/10.1155/2021/6646963
保护作用的Hydroalcoholic提取的的士大古安有毛类动物Oxidant-Antioxidant状态在雄性小鼠肾缺血/再灌注损伤
文摘
背景。肾缺血再灌注(I / R)有一个关键的角色在急性肾功能衰竭的进展。活性氧的主要成分是参与的生化和病理生理变化显示在肾脏I / R。本研究的目的是检查的renoprotective效应的士大古安有毛类动物ethanolic提取oxidant-antioxidant状态在雄性小鼠肾I / R-injuries。材料和方法。21岁的雄性Wistar鼠被任意分成3组:虚假的控制(SC)、I / R, I / R +的士大古安有毛类动物ethanolic提取(500毫克/公斤)。动脉和静脉的右肾完全封锁,和右肾完全删除组。然后,左肾动脉阻塞用缝合的线30分钟在I / R和I / R +SP提取组织。肾功能指标、氧化应激标志物和苏木精和伊红染色法研究了在等离子体和肾脏组织。结果。表明,尿钠和钾,部分钠和钾的排泄,和蛋白质羰基含量明显增加仅仅是I / R组相比SC老鼠,而管理SP提取这些指数明显下降( )。此外,肾小球滤过率和总硫醇显著降低I / R老鼠SC组相比,在治疗SP提取显著增强这些指数( )。然而,在协议与肾脏功能测试,SP提取组织病理学检查没有显著影响。结论。看来,SP提取使用renoprotective对I / R,引起的肾损害的影响可能通过改善oxidant-antioxidant状态的抗氧化系统。
1。介绍
急性肾损伤或急性肾功能衰竭(ARF)是一种直接损失的肾功能与高死亡率(1]。缺血再灌注(I / R)是一种常见的并发症在部分切除,肾移植,肾盂积水,心肺旁路,导致肾脏功能障碍和伤害2]。ARF的最重要原因是肾脏I / R损伤。没有特定的治疗ARF患者(3]。心力衰竭、透析和脓毒症是ARF患者死亡的主要原因,在发达国家(4]。活性氧(ROS),嘌呤代谢物,血管舒张,激活中性粒细胞参与I / R损伤的发病机制5,6]。已经指出,不同的细胞通路如氧化应激和炎症急性肾缺血发挥关键作用。实际上,极端的形成活性氧导致细胞毒性代谢物的生产,可引起不可逆的疾病如脂质过氧化反应和DNA损伤(7]。这些变化是在协议与肾功能的恶化,表示肾I / R诱导肾活性氧的形成,减少细胞清除活性氧的能力,增强内源性抗氧化损耗,和恶化肾功能损伤8,9]。
在先前的研究中,保护的影响锦葵的抗旱性l . (10),牛至属植物马约拉那l . (11),而丹参(12)一直在探索I / R-induced损伤。有毛类动物士达古Benth(SP)是属唇形科的家庭之一,属士达古分布在热带和亚热带地区13,14]。士达古大约有300种,描述了三十四伊朗其中13种植物的原生(13,15]。它具有抗菌16),抗氧化剂(17,抗炎18),抗肿瘤和抗糖尿病的19],王亚南[14),免疫保护(20.抗肝炎),(21),和消毒剂13]属性。这种植物的天线部分用于伊朗传统医学草药茶治疗各种疾病如哮喘,感染,和风湿性关节炎14,15]。由于化学药物有副作用和障碍,传统医学趋势的方向和药用植物是世界上上升。的士大古安有毛类动物的抗氧化性能;没有研究已经完成在I / R-induced肾功能衰竭的效果。然后,本研究的目的是评估的影响SPethanolic提取物对肾损害引起的I / R在雄性Wistar鼠。
2。材料和方法
2.1。的制备的士大古安有毛类动物提取
天线的部分SP收集由一个专家在2019年春天从Yasuj山(Yasuj、伊朗),它是由植物学家公认的(植物标本。1897)。天线部分的植物(200克)干,碾碎,浸泡在70% (v / v) ethanolic溶液25°C 48 h下摇晃。获得的提取是干在孵化器50°C和保持在一个冰箱−20°C,直到开始研究[22]。
2.2。实验设计
21岁的雄性Wistar鼠(300±50 g)得到Yasuj大学医学科学(Yasuj、伊朗),采用一个星期访问水和标准饮食在12 h光明与黑暗周期。所有进程都承认的道德委员会Yasuj大学医学科学(道德准则IR.YUMS.REC.1399.171)。
老鼠被任意分成三组:虚假的控制(SC)、I / R(积极的控制),和I / R + 500毫克/公斤SPethanolic提取。虚假的控制和I / R组收到橄榄油72年,48岁的前24小时研究和手术后腹腔内(23]。此外,I / R +SP提取组接受500毫克/公斤SPethanolic提取72年,48岁和24小时之前的研究和手术后立即口头(24]。
这些动物被注射戊巴比妥钠麻醉(60毫克/公斤)。腹部是安全剃刀刮,用聚维酮碘溶液消毒。两个肾脏的肾动脉是使用显微镜仔细清洗和分离。动脉和静脉的右肾完全使用缝合线程阻塞,右肾是完全分离的。左肾动脉阻塞用缝合的线30分钟,之后,这一次,肾血流量恢复(25]。在SC老鼠,都进行了手术,但左肾动脉不阻塞。恢复意识后,动物被转移到他们的货架上。
再灌注后24小时,动物reanesthetized再次与戊巴比妥钠。剃须后喉咙,芯片被氧化的气管。体温是37控制在±1°C和连接到一个热敏电阻。剃须后,左股动脉插管记录血压和动脉血液取样,以及进行股静脉管子注入麻醉和生理盐水。永久记录动物的血压,股动脉是连接到PowerLab血压监测系统。膀胱管子做是为了收集动物的尿液,并收集尿液样本preweighed容器。这些措施后,为了缓解手术和管子的压力,动物们休息一个小时,然后尿样收集2 h。从股动脉血液样本准备插管,离心机,等离子体是存储在冰箱里测量钠(Na)的含量,钾(K)、尿素、肌酐(Cr),等等。在研究结束时,左肾切除手术和胶囊是清洗和放在干冰,称重,分成两部分。第一部分是放在cryotube测定氧化应激标记,和第二部分保存在10%福尔马林组织学研究[26,27]。
2.3。生物化学分析
血浆和尿液样本化验尿素和Cr使用商用设备(Pars Azmoon、伊朗)。钠和钾离子选择电极测定过程。每个肾脏重量的尿流率/ g (V°ml / min gKW)计算,以及尿液从左肾体积重量分析地决定。此外,Cr间隙作为估计的肾小球滤过率(GFR),绝对的K (UKV排泄°)和Na (UNaV°),部分K (FEK)和钠的排泄(FEK)是由典型的公式。
2.4。氧化应激的标记
等离子体水平的丙二醛(MDA)化验基于MDA与硫代巴比土酸的反应。MDA值确定使用摩尔吸光系数为1.56×105米−1厘米−1并表示,μmol / L (28]。蛋白质羰基(PCO)组测量使用dye-based分光光度法是基于2的反应,4-dinitrophenylhydrazine。PCO水平估计使用的摩尔吸收系数2.2×104米−1厘米−1和决心μ摩尔/ g组织(28]。组织匀浆和血浆总硫醇(中超)测定根据5的反应,5′-dithiols——与硫醇团体(2-nitrobenzoic酸)和创建2-nitro-5-thiobenzoic酸。中超内容估计利用13600的摩尔吸光系数−1厘米−l(29日]。铁降低抗氧化能力(收紧)化验基于等离子体的能力或肾脏匀浆铁离子(Fe的恢复3 +亚铁离子(Fe)2 +)在tripyridyl-s-triazine试剂(30.]。
2.5。组织学检查
组织学分析,肾组织标本和固定在10%福尔马林。嵌入后,肾组织切成3 - 4μm片段。件安装,苏木精和伊红染色(圆))染色和病理学家观察到被蒙蔽的组。
2.6。统计分析
数据评估利用单向方差分析测试图基的多重比较。数据显示为均值±SEM。 在这项研究中被认为是统计上的显著水平。
3所示。结果
3.1。生化标记
如图1、尿钠和钾明显扩大的I / R治疗组与SC老鼠( ),虽然治疗SP这些标记ethanolic提取显著下降( )。肾小球滤过率(GFR)在I / R治疗显著降低大鼠对SC组( ),虽然治疗SP提取显著增加这个标记。
(一)
(b)
(c)
的分数排泄钾、钠(FEK和FENa)是I / R组显著扩大SC动物相比,在治疗SP提取有意义的减少这些指数(图2)。
(一)
(b)
的UNaV°和UKV°,以及血浆尿素和Cr,在I / R明显增加大鼠与SC组;然而,消费SP提取稍微减少UNaV°,UKV°和Cr含量(表1)。
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的影响SP提取一些生化标记之后I / R损伤。数据显示为±SEM。重要的对SC组(
);
#重要的对I / R大鼠(
)。
SP:的士大古安有毛类动物;SC:虚假的控制;I / R:缺血/再灌注;千瓦:肾脏重量;紫外线:尿量;V°:尿流率;PK:等离子体K;机构:血浆钠;Purea:血浆尿素;PCr:血浆肌酐;加州:尿肌酐;Uurea:尿液尿素;UNaV°:绝对的钠的排泄;UKV°:绝对K的排泄。 |
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3.2。氧化应激的标记
血浆中超略降低,血浆PCO显然仅仅增加了I / R的老鼠相比,SC老鼠;然而,消费SP提取显著废除这些参数( (图3)。
(一)
(b)
收紧和中超的水平内容在肾组织中明显减少I / R治疗大鼠SC组相比,而消费SPethanolic提取物能显著增强中超水平相比只是I / R动物( )。组织PCO水平明显增强在I / R老鼠与SC组( ),而治疗I / R组SP提取无关紧要的减少。MDA水平略增大大鼠对SC I / R,同时管理SP提取无关紧要的减少(图4)。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.3。组织病理学研究
肾部分SC组显示正常形态(图5(一));然而,I / R组的肾组织切断等损害肾小管坏死,血管堵塞,白细胞(WBC)渗透。然而,治疗SP提取对这些参数没有显著变化(数据5(b)和5(c)。
4所示。讨论
在这项研究中,我们审查的影响SPethanolic提取在生化、组织病理学和oxidant-antioxidant在I / R损伤状态。在最近的研究中,肾功能明显恶化的仅仅是I / R大鼠肾小球滤过率(GFR)下降的速率,增加尿素和Cr的水平,以及恶化的组织学变化,如血管充血,肾小管坏死,白细胞浸润。这些生化和组织病理学改变是与以往的研究一致的I / R大鼠(8,9),可能是由于管状血管变化侮辱通过氧化应激(31日]。
部分钾、钠的排泄,绝对的排泄,钾、钠的含量和尿钾、钠在I / R明显增强治疗大鼠与SC老鼠。尽管显然I / R大鼠的肾小球滤过率(GFR)下降,UKV显著增加°和UNaV°在这组;可能与缺陷有关的钾、钠重吸收系统尤其是在近端小管细胞极性的钠和钾atp酶(32),并减少在ATP水平细胞I / R (32]。此外,增加FENa FEK以及I / R大鼠的肾小球滤过率(GFR)下降可能是由于近端小管损伤的严重程度,因为近端小管细胞产生高水平的I / R后罗斯(33]。治疗SP提取物显著降低部分钾、钠的排泄,以及尿钾、钠,虽然略微降低等离子体Cr水平相比只是I / R组。此外,ethanolic提取的SP(500毫克/公斤)显著增加肾小球滤过率(GFR)率对I / R老鼠。修正案的肾功能在这项研究可能的抗氧化能力的结果SP乙醇提取、及其捕获的罗斯。
在最近的研究中,肾MDA,脂质过氧化作用的标志,只有I / R组中无关紧要的扩大对SC的动物。Ahmadvand和Mahdavifard (2019) [34)和赴麦加朝圣阿卜杜拉et al。(2018)35]表明,肾MDA含量升高的I / R的动物。此外,我们的研究结果表明,肾脏MDA水平略减少I / R老鼠与I / R +SP提取。我们的研究结果表明,等离子体PCO作为蛋白质氧化的早期指标,显著提高I / R组与SC老鼠,SP提取(500毫克/公斤)显著降低。与之前的研究结果相一致(11,35)、蛋白质氧化发生在I / R-induced肾损害。康et al。(2006)观察到,罗斯发挥至关重要的作用在I / R损伤的发病机制6]。此外,属士达古含有类黄酮和酚类化合物(23],酚基氢捐助者能够与罗斯和中和反应他们(36]。我们得出这样的结论:治疗SP乙醇提取可以适度阻止脂质过氧化作用及其除了通过灭活的罗斯完全抑制蛋白质氧化。
硫醇组(包括蛋白质巯基共同和谷胱甘肽)防御罗斯氧化参数很敏感。在与以前的研究一致35),肾中超内容仅仅被有意义地降低I / R老鼠SC动物相比,这可能是由于抗氧化剂由罗斯疲惫。像我们之前研究acetaminophen-induced肝毒性和cisplatin-induced肾毒性(14,24),中超水平在I / R +强烈增强SP动物相比,只有I / R的老鼠。看来,SP提取能够保持中和罗斯巯基共同存储,或增加谷胱甘肽合成。
氧化应激有关键作用的发展引起的肾功能障碍I / R损伤。oxidant-antioxidant地位和肾功能的改善这一研究表明,氧化应激在I / R损伤,有重要作用SPethanolic提取nephroprotective活动与I / R-induced肾损伤。
5。结论
看来,SP提取使用renoprotective I / R损伤的影响可能通过改善肾功能的标记,抑制蛋白质的氧化和硫醇的修复组存储。的renoprotective活动SP提取oxidant-antioxidant平衡可能与改变有关的抗氧化系统。这些研究结果建议的使用SPethanolic提取,补充疗法,可能会抑制I / R损伤引起的肾毒性。
数据可用性
本研究的数据支持这一发现文章中是可用的。
的利益冲突
作者声明没有利益冲突。
确认
作者希望感谢校长Yasuj大学医学科学研究支持本研究(批准号990114年)和博士Heibatollah Sadeghi准备的士大古安有毛类动物工厂。
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