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Gajanan德斯穆克,Suresh b . Venkataramaiah Chandrashekar m . Doreswamy Mohan c . Umesh Rajesh b . Subbanna Bikram k . Pradhan斯Seekallu, Rajan Sekar, Karthick您正在,Sathish萨达高潘,先生Natrajan Arumugam, Satish沙玛,Govindarajulu Gavara,身边Balaraman, Ganesh Sambasivam, Ravindra k . Chandrappa莎拉·弗林,Prasad ShivarudraiahgydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2Ba泛醇乙酸酯的安全评估:Subchronic毒性和基因毒性的研究gydF4y2Ba”,gydF4y2Ba毒理学杂志》gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2019年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba3680757gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2019年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2019/3680757gydF4y2Ba
泛醇乙酸酯的安全评估:Subchronic毒性和基因毒性的研究gydF4y2Ba
Gajanan德斯穆克gydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 苏雷什b VenkataramaiahgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Chandrashekar m . DoreswamygydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Mohan c UmeshgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Rajesh b SubbannagydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Bikram k .普拉丹gydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 斯SeekallugydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Rajan SekargydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Karthick您正在gydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 萨达高潘SathishgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 先生Natrajan ArumugamgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Satish沙玛gydF4y2Ba1gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba Govindarajulu GavaragydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 身边BalaramangydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Ganesh SambasivamgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba Ravindra k ChandrappagydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba 撒拉弗林gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba 普拉萨德ShivarudraiahgydF4y2Ba
1gydF4y2Ba
1gydF4y2Ba国歌生物科学pvt Ltd .) # 49, F1和F2, Canara银行路,Bommasandra工业区,第一阶段,Bommasandra,班加罗尔560099,卡纳塔克邦,印度gydF4y2Ba
2gydF4y2BaGlanbia plc, Glanbia房子,环城公路,基尔肯尼,爱尔兰gydF4y2Ba
文摘gydF4y2Ba
辅酶Q10(辅酶q)是一种脂溶性,内源性抗氧化剂在最高水平的心脏其次是肾脏和肝脏。减少辅酶q泛醌是众所周知的化学不稳定性和生物利用度低。本研究旨在合成泛醌醋酸,更加稳定和生物活性,并进一步评估其安全性和基因毒性的潜力。醋酸合成泛醌显示更好的稳定性比泛醌的3个月。体外基因毒性研究(艾姆斯测试,体外微核和染色体畸变)显示泛醇乙酸酯nongenotoxic没有致染色体断裂的或aneugenic效应在高剂量的5000和62.5gydF4y2BaμgydF4y2Ba分别g / mL。在subchronic毒性研究中,泛醇乙酸酯口服雄性sd大鼠中150,300和600毫克/公斤/天为90天。没有治疗相关的不良反应观察到男性在600毫克/公斤/天;然而,女性显示,AST和ALT治疗相关的增加小焦不规则黄白斑点在肝脏总验尸检查。组织病理学评价显示肝细胞坏死在高剂量女性被视为不利。根据结果,No-Observed-Adverse-Effect水平(科学)的泛醇乙酸酯在雄性和雌性决心600和300毫克/公斤/天,分别。gydF4y2Ba
1。介绍gydF4y2Ba
辅酶Q10(辅酶q)是一种天然内源性亲脂性的抗氧化剂存在于组织和食物。肉和鱼是辅酶q10的最富有的动物来源。油是最富有的蔬菜来源与浓度范围从100到280毫克/公斤大豆,玉米,和橄榄油。坚果和谷物也包含低数量的辅酶q10 (gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。辅酶q10的总摄入量范围从3到6毫克/天在发达国家。辅酶Q10是一种代数余子式的ATP合成和线粒体电子传递链的一部分[gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。它主要存在于两种形式,减少形式和泛醌氧化形式作为辅酶q。泛醌主要在哺乳动物的身体和泛醌(相比有更多的生物利用度gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。大约80%的辅酶Q10在健康个体的存在形式。泛醌是最强的脂溶性抗氧化剂biosynthesized或人体自然产生的。低水平的辅酶q与衰老和几个年龄相关的疾病。外生口服补充人类间接证据,辅酶q10辅酶q10可以纳入线粒体在条件组织缺乏可增强电子转移和ATP合成年龄相关的病理条件的改善(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。口服辅酶q10可以改善心脏收缩和稳定温和的充血性心力衰竭患者的内皮功能障碍(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。脂质过氧化反应强烈暗示,玩各种病态发展的一个重要的角色,比如一些心血管和神经系统疾病(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。血浆脂蛋白的氧化生热作用似乎代表了一个至关重要的一步,也可能发生在其他疾病会增加自由基的生产(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。作为一种抗氧化剂,防止起始和延伸的辅酶q10是已知的脂质过氧化和保护免受不利影响淬火产生的自由基(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
近年来,辅酶q作为营养补充剂的使用大大增加了由于高流行和被免费为膳食补充剂。辅酶q10的每日推荐摄入量在人类还未确定任何立法和有限的相关研究已经完成关于剂量和生物利用度gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
泛醌闻名化学不稳定和迅速氧化泛醌在大气中的氧气gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。因此,成分含有保护泛醌需要提供保护性包装或特殊处理必要的保护他们的行动,这是太昂贵的商业上可行的大规模。由于这种固有的不稳定性,这完全不可能救自己的生物潜能,真正的效用尚未完全实现。因此提高稳定性,提高生物活性是商业上可行,我们设计和合成泛醌醋酸克服泛醌的缺点。gydF4y2Ba
大部分的动物安全性研究报告已经完成使用泛醌或泛醌。自从人类营养补充剂的使用目的是持续时间更长,醋酸合成泛醌是评估其潜在毒性gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba基因毒性研究和gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba重复剂量subchronic口服毒性研究(填喂法)在雄性sd大鼠中路线。gydF4y2Ba
2。材料和方法gydF4y2Ba
2.1。合成和稳定gydF4y2Ba
克服泛醌的缺点,泛醇乙酸酯合成泛醌的减少使用硼氢化钠在乙醇和乙酸酐乙酰化吡啶和溶剂,如正庚烷。化合物(泛醌和泛醇乙酸酯)用琥珀颜色的瓶子是由高效液相色谱法在室温下测试其稳定性的方法。gydF4y2Ba
2.2。基因毒性的研究gydF4y2Ba
基因毒性的研究。,bacterial reverse mutation test, in vitro chromosomal aberration test, and在体外gydF4y2Ba哺乳动物微核测试,进行了泛醇乙酸酯按各自的经合组织测试指南和方法描述Kothari [gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
2.2.1。细菌回复突变试验gydF4y2Ba
泛醇乙酸酯的诱变潜力被预培养方法和评估板合并方法使用gydF4y2Ba鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2Ba1537株1535年助教,助教,助教,98年102年100年助教,助教。执行的研究是按照细菌回复突变试验,经合组织TG 471。致突变性试验在两个独立的化验没有被处决,老鼠的肝脏S9。每个测试的试验进行了一式三份的压力。测试项目是不溶于水的解决方案是使用己烷稀释至不同浓度。泛醇乙酸酯测试剂量水平的50.1,158.4,500.7,1582.2,5000gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板预培养和板合并方法。叠氮化钠(3gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)用作TA100积极控制和TA1535 2-nitrofluorene (5gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)对TA98、icr - 191 (2gydF4y2BaμgydF4y2BaTA1537 g /板),孜然氢过氧化物(50gydF4y2BaμgydF4y2Ba试验中,g /板)为TA102菌株S9活化并不是必需的。在增加,2-aminoanthracene (10gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)TA102和2-aminoanthracene (5gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)对TA98, TA100, TA1535, TA1537担任积极诱变剂菌株要求S9代谢活化。己烷作为消极的控制。gydF4y2Ba
剂量测距研究gydF4y2Ba鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2BaTA100菌株确定noncytotoxic浓度主要诱变研究。细胞毒性被定义为清除或减少的背景草坪,一个个独立王国的外观,和/或减少> 50%的殖民地与己烷车辆控制。泛醇乙酸酯是5000年没有细胞毒性的浓度最高gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板与应变测试预培养和板合并方法,没有S9代谢活化条件。细胞毒性测试结果的基础上,5000年gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板被选为最高浓度与所有5个菌株诱变研究包括TA98、TA100, TA102 TA1535, TA1537gydF4y2Ba鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2Ba菌株。泛醇乙酸酯测试剂量水平的50.1,158.4,500.7,1582.2,5000gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板预培养和板合并方法。gydF4y2Ba
对于预培养方法,不同浓度的醋酸泛醌(158.4,500.7,1582.2,5000gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)或积极的控制,或车辆控制在S9分数的存在与否,是与测试人员混合应变和孵化为30分钟,与顶级琼脂混合含有组氨酸+生物素,和倒在琼脂板包含最小的葡萄糖琼脂。凝固后,盘子是孵化48 - 72 h。对于板合并方法,不同浓度的测试项目,积极控制或车辆控制、测试应变S9 /混合磷酸盐缓冲被添加到顶级琼脂管含有组氨酸+生物素。镀混合物轻轻混合,包含最小的葡萄糖琼脂板上的媒介。凝固后,盘子在孵化为48 - 72小时37°C。gydF4y2Ba
2.2.2。体外染色体畸变试验gydF4y2Ba
潜在的基因毒性泛醇醋酸诱导结构和数值染色体畸变是评估在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)测试系统。按照经合组织研究进行指导测试的化学物质# 473(体外哺乳动物染色体畸变试验,采用gydF4y2Ba2016年7月)符合GLP实验室。测试系统,从写明ATCC CHO-K1细胞被获得。液氮冻存细胞的股票CHO-K1复苏、培养细胞(通道没有6)在火腿F-12K培养基补充10%胎牛血清,1.0毫米谷酰胺,青霉素100单位/毫升和100gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升链霉素。细胞培养是在T75厘米血压得到较好的控制gydF4y2Ba2gydF4y2Ba培养瓶,在37°C和5%孵化有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
剂量范围找到研究的测试项目进行测量CHO-K1细胞和细胞毒性也选择剂量水平的主要研究来评估其致染色体断裂的潜力。CHO-K1细胞在6培养板(20小时后播种)浓度和暴露在6 (n = 1)的测试项目从62.5到1.953不等gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL的存在(4小时)和(4 - 24小时)的代谢活化系统。测试介质与代谢活化系统由1% (v / v)大鼠肝脏S9准备从男性的雄性sd大鼠中对待aroclor - 1254(美国分子毒理学,Inc .)、磷酸钾10毫米,0.5毫米葡萄糖6磷酸,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.4毫米,3.3毫米氯化钾、氯化镁和0.8毫米。测试项目的浓度选择基于其溶解度火腿F-12K培养基。测试项股票在丙酮和准备在最后一个使用丙酮浓度为1% (v / v)在测试介质。丙酮股票和测试媒体准备的新鲜和立即使用治疗的细胞。车辆控制文化对待1%丙酮是包括在每个孵化条件。的文化治疗持续时间4小时洗了2毫升无菌1 x磷酸缓冲盐和添加2毫升含10%胎牛血清的培养基。文化被胰蛋白酶化收获后24小时内开始治疗。文化接受连续治疗(24小时)原状,直到收获。收获后,可行的细胞被台盼蓝排斥法计算为每个处理文化和%相对增加,细胞计数(RICC)和%细胞毒性测定使用公式:gydF4y2Ba 主要研究是使用3浓度的测试项目执行(n = 2)浓度的选择基于测距研究剂量。62.5选择剂量水平gydF4y2BaμgydF4y2Ba31.25克/毫升(高剂量)gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升(中剂量),15.63gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL(低剂量)和分离的2倍。剂的制备、孵化条件和持续时间与剂量测距研究除了所有的文化都加上中期逮捕代理秋水仙胺®(0.2gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL)收获前2 - 3小时。积极控制在CHO-K1诱导结构畸变细胞如丝裂霉素C (0.4gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL)和环磷酰胺(5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL)包括与车辆和媒体控制。收获后,从每个治疗小细胞整除文化被数来确定细胞毒性。收获细胞治疗低渗的溶液为0.8% (w / v)柠檬酸三钠的12 - 15分钟37°C和后,细胞被固定用甲醇和醋酸固定剂(3:1)。细胞储存在5±3°C颗粒状下降离心法在200gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟4°C。体积小的颗粒状细胞resuspended固定剂和20 - 30gydF4y2BaμgydF4y2BaL细胞悬液落在了免费油脂,清洁,和甲醇冷冻玻片在一个倾斜的角度使用微量吸液管从10 - 15厘米的高度。幻灯片是干和吉姆沙染色剂染色为5%。彩色幻灯片是永久安装使用DPX mountant媒体和盖玻片,可以干,和编码的面具身份。gydF4y2Ba
幻灯片是在1000 x放大复合显微镜下检查。以及传播与20±2染色体中期考虑得分结构畸变。最低300年中期在复制中平均分配了染色体畸变。当清楚观察畸变的积极响应与频率增加,进球数量减少。细胞的比例和结构染色体畸变(s)是评价。染色单体和chromosome-type畸变分类的亚型(休息、交流)分别列出它们的数量和频率实验和控制文化。差距分别记录和报告但不包含在总畸变频率。观察除了结构畸变等多倍体和核内复制表,但是他们并不包括在计算细胞与染色体畸变的%。统计分析结果进行了确切概率法对每一个治疗和车辆间的成对比较对照组使用GraphPad Prism 5.03统计软件包。显著性水平是选择在P < 0.05。gydF4y2Ba
2.2.3。体外哺乳动物微核测试gydF4y2Ba
泛醌的潜力醋酸诱导clastogenicity / aneugenicity通过测量微核形成的程度在间期细胞的细胞质是评估在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)作为测试系统。按照经合组织研究进行指导测试的化学物质# 487(体外哺乳动物细胞微核测试,采用gydF4y2Ba2016年7月)符合GLP实验室。中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)上皮细胞形态和模态的染色体数目20±2。从写明ATCC CHO-K1细胞采购,cryostocks prorogated,保存。CHO-K1细胞的冻存股票(通道没有6。)是恢复和培养在火腿的F-12补充10%胎牛血清,1.0毫米谷酰胺,青霉素100单位/毫升和100gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升链霉素。文化是生长在5%的股份有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba气氛在37°C。gydF4y2Ba
剂量进行测距的研究来确定测试项CHO-K1细胞的细胞毒性,并选择适当的剂量水平评估潜在致染色体断裂的主要研究。在剂量范围发现研究中,CHO-K1细胞治疗与八个不同的测试浓度从62.5到0.488不等gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL的存在(4小时)和缺乏(4和24小时)的代谢活化系统。测试介质与代谢活化系统由1% (v / v)大鼠肝脏S9准备从男性的雄性sd大鼠中对待aroclor - 1254(美国分子毒理学,Inc .)、磷酸钾10毫米,0.5毫米葡萄糖6磷酸,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.4毫米,3.3毫米氯化钾、氯化镁和0.8毫米。测试项的乙腈股票高出100倍上升到文化媒体所需的浓度为1%。车辆控制含1%丙酮和媒体控制被包含在所有的治疗条件。所有的文化都是胞质分裂阻断剂处理细胞松弛素B (4gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL)收获前20个小时。细胞被收割后24小时内开始治疗的测试项目。收获细胞治疗低渗的溶液1% (w / v)柠檬酸三钠的10分钟和离心10分钟200克颗粒细胞。颗粒状细胞被固定使用甲醇和醋酸固定剂(3:1)和在一夜之间被储存在4°C。再次细胞体积小的颗粒状下来resuspended冷固着,放到干净的冷冻幻灯片。幻灯片染色使用莱特Geimsa 20分钟。彩色干幻灯片是永久安装使用DPX(西格玛奥德里奇)mountant和盖玻片。幻灯片从每个文化复合显微镜下打进了mono - bi和多核细胞。对待文化的细胞毒性或抑制细胞生长的活动估计通过比较cytokinesis-block增殖指数(CBPI)值与CBPI值的控制文化根据以下方程:gydF4y2Ba 在T =测试项治疗文化吗gydF4y2BaC =控制文化gydF4y2Ba
在主要研究3剂量水平低(15.625gydF4y2BaμgydF4y2Ba31.25 g / ml)、中期(gydF4y2BaμgydF4y2Bag / ml),高(62.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / ml)在复制文化面前测试(4小时)和缺乏(4和24小时)的代谢活化系统。除了测试项目和阴性对照组(媒体和车辆),阳性对照组如丝裂霉素C在0.5gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升无代谢活化和环磷酰胺在5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / ml的代谢活化系统包括在内。所有的处理措施、收获和幻灯片准备,进行剂量范围中描述发现除了主要研究随着白细胞郁滞CBPI估计;幻灯片是得分的微核确定致染色体断裂的潜力。统计分析结果进行了确切概率法对每一个治疗和车辆间的成对比较对照组使用GraphPad Prism 5.03统计软件包。显著性水平是选择在P < 0.05。gydF4y2Ba
2.3。Subchronic研究gydF4y2Ba
2.3.1。研究合规gydF4y2Ba
subchronic毒性研究泛醇醋酸按照经合组织原则进行良好实验室规范(C(97) 186 /最后),经合组织指导测试的化学物质:重复剂量口服毒性研究408年啮齿动物(90天gydF4y2Ba1998年9月),标准操作程序在国歌生物科学pvt Ltd .,班加罗尔,印度,所描述的方法(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba),按照双方同意学习计划的赞助商。这项协议是动物伦理委员会批准的机构(IAEC协议。:ABD / IAEC /公关/ 33 r6/15-16)gydF4y2Ba2017年1月,根据委员会的建议为目的的控制和监督动物实验(CPCSEA)实验动物设施指南印度发表在《公报》,1998年12月15日。研究在动物设施国歌生物科学是AAALAC(评估和认证实验动物保健协会)和GLP认证。gydF4y2Ba
2.3.2。测试项目gydF4y2Ba
测试项目,泛醇乙酸酯在目前的研究中,使用合成和化学系,国歌生物科学pvt Ltd .)班加罗尔,印度(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba、规格和泛醇乙酸酯的分析证书)。gydF4y2Ba
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泛醇乙酸酯(很多没有测试项目。A31600427)是白色的,白色的颜色粉纯度测定(高效液相色谱% w / w)的99.1%。测试项目是存储在琥珀颜色的瓶子在室温下(19-25°C)的保质期三年。gydF4y2Ba
2.3.3。动物gydF4y2Ba
雄性sd大鼠中从注册CPCSEA供应商采购(建邦者体内生物科技有限公司,纳、印度)被用于这项研究。兽医检查所有的动物被记录当天收到他们隔离一段六天。一旦动物检疫室被宣布为健康的兽医,动物被转移到实验适应环境的空间。一百只老鼠被分成4主要学习小组10动物/性和2卫星/恢复组与5动物/性。动物治疗时的平均年龄是5 - 6周大。最多三种动物被安置在一个标准的聚碳酸酯笼子里(大小:42.1 L x W 29 x H 19厘米)与不锈钢网前烧烤设施对颗粒状食物和饮用水水瓶子里装有不锈钢饮者管。清洁热压处理过的玉米棒子是提供床上用品材料。所有的动物都被安置在标准实验室条件下,环境监测空调房间里有足够的新鲜空气供应(10 - 15每小时换气次数),室温22°C±3°C,和相对湿度30 - 70的%,12小时光和12小时黑暗周期。温度和湿度记录整个实验周期每天一次。gydF4y2Ba
这些动物喂养gydF4y2Ba随意gydF4y2Ba整个驯化和实验时期除了禁食的时期。热压处理过的标准啮齿动物饲料(Amrut Pranav农业生产的工业有限公司)提供了随意水整个驯化和实验时间。水从水保护滤水器及净化器通过热压处理过的聚丙烯中提供紫外线是热压处理过的和水瓶。gydF4y2Ba
2.3.4。治疗gydF4y2Ba
动物分组是根据体重分层随机化完成的。动物分组后的体重记录和统计分析组织在每个性之间的统计显著性差异。玉米油是用作测试项目制定车辆。主要研究组织动物分成四组(10动物/性/组),口服药物(填喂法)每天一次单独使用玉米油车辆对照组(G1 -车辆控制)和测试项目制定的剂量水平150 (G2 -低剂量),300 (G3 -中期剂量)和600毫克/公斤体重(G4 -高剂量)的剂量体积4毫升/公斤体重连续90天。卫星把动物分为两组(5动物/性/组),口服药物(填喂法)每天一次单独使用玉米油车辆控制复苏组(G1R-vehicle控制)和测试项公式剂量水平的600毫克/公斤体重(G4R -高剂量恢复)的剂量体积4毫升/公斤体重连续90天。卫星群动物保存退出后观察14天的治疗。稳定性测试项的车辆被发现是稳定的每个方法验证研究6个小时在室温(22±3°C)和七天当存储在2 - 8°C。根据稳定性结果,准备制定存储在7天内2 - 8°C和用于管理。每个动物的实际剂量体积计算基于最近nonfasted每周体重的动物。gydF4y2Ba
2.3.5。观察和参数评估gydF4y2Ba
(1)同质性和剂量确认分析测试的配方。gydF4y2Ba测试项配方浓度的37.5,75.0,和150毫克/毫升为同质性评估(3层,顶部、中部和底部)和剂量验证的确认分析高效液相色谱法对天0,49岁,90治疗期的每个方法验证研究。玉米油样本被用作活性成分分析了车辆排除任何可能污染的测试项目。卢娜C18色谱进行(2)100 a, 150 x4.6mm, 5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米列与流动相组成的甲醇:2丙醇(50:50 v / v)。检测是由PDA在波长206纳米。化合物的筛选了isocratically以稳定的流速1.0 mL / min和分析物的泛醇乙酸酯保留时间为6.0分钟1.70一个不对称因素。gydF4y2Ba
(2)gydF4y2Ba死亡率,临床体征检查,体重和饲料消耗。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba所有的动物观察每天一次临床毒性的迹象,每天两次的死亡率和发病率。动物受到详细的临床检查之后在开始治疗之前和每周(±1天)在研究过程中。个体动物身体重量记录收据实验房间,那天之后开始的治疗和每周(±1天)在研究期间。禁食的身体重量记录终端的牺牲。个体动物食品消费记录每周(±1天)和组意味着食品消费(g /动物/天/周)计算。gydF4y2Ba
(3)gydF4y2Ba神经系统/功能&眼科检查。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba神经系统/功能检查期间进行gydF4y2Ba周车辆控制(G1)和高剂量组和(G4)gydF4y2Ba车辆控制周恢复(G1R)和高剂量恢复(G4R)组动物。家里笼等神经系统检查(姿势、呼吸模式,发声,眼睑闭合),手持(易于清除,易于处理、流泪、流涎症,chromodacryorrhea,毛外套,肌肉张力),田野(阵挛性的/主音非随意运动,步态,流动性,兴奋,刻板印象,立毛,眼球突出,排便,排尿,饲养的数量),反射测量(方法响应、触摸反应、听觉反应,瞳孔反射,角膜反射,空气扶正反射,耳廓反射),神经肌肉(前肢握力测试,后肢足斜面和生理测量(直肠温度)进行。眼科检查进行治疗以前,所有的动物gydF4y2Ba一周的研究在车辆控制(G1)和高剂量组动物和(G4)gydF4y2Ba一周的研究在车辆控制恢复(G1R)和高剂量恢复(G4R)组的动物。瞳孔放大使用局部诱发剂(1% Tropicamide)和间接检眼镜检查。如果治疗相关的变化被观察到在高剂量组动物的神经和眼科检查(G4),考试将会扩展到低剂量(G2)和中期(G3)组动物。gydF4y2Ba
2.3.6。临床病理学gydF4y2Ba
这些动物尿液和血液采集前禁食过夜。水是在禁食期间随意提供。动物被安置在代谢笼收集容器含有麝香草酚作为防腐剂尿液收集。所有幸存的老鼠的血液样本收集每个性每组使用细玻璃毛细管从retro-orbital丛下轻微异氟烷麻醉。收集血液样本的血液学和临床化学中包含K prelabeled管gydF4y2Ba2gydF4y2BaEDTA(2毫克/毫升)和肝素锂(20个国际单位/毫升),分别。gydF4y2Ba
(1)尿分析。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba收集尿液样本研究的最后一周(13周)和卫星集团在15周。整除的尿液样本在1500转离心10分钟4°C±2°C的尿液显微镜检查。参数,如颜色、外观、体积和显微镜检查尿液的沉积物(上皮细胞,红细胞,投下,晶体,脓细胞和细菌)记录。生化参数如比重、pH值、隐血、胆红素、尿胆素原,酮体,分析了蛋白质,葡萄糖利用Clinitek地位+尿液分析仪。gydF4y2Ba
(2)血液学。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba收集血液样本为主要研究小组91天,105天的卫星群的动物。下面的血液学参数进行了分析使用ADVIA 2120(西门子有限公司)血液学分析仪:血液学参数,血红蛋白(HB)、红细胞比容(HCT),红细胞总数(RBC)、总白细胞计数(WBC),意思是微粒体积(MCV)、平均血红蛋白(妇幼保健),意思是微粒血红蛋白浓度(MCHC),血小板计数,微分白细胞计数(DLC)。凝血时间是由毛细管的方法。gydF4y2Ba
(3)临床化学。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba血液样本收集在4000转离心10分钟4±2°C。以下临床化学参数进行了分析使用西门子维度Xpand最+临床化学分析仪:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白、白蛋白、总胆红素,gamma-glutamyl转移酶(GGT)、葡萄糖、总胆固醇、肌酐、血尿素氮(BUN)、甘油三脂、磷、钙、和球蛋白(计算)。钠,钾,氯估计使用电解质分析仪(西门子Rapidchem RC744)。gydF4y2Ba
2.3.7。病理学gydF4y2Ba
(1)总验尸。gydF4y2Ba治疗期结束时在105年90天,所有幸存的动物的主要学习小组和卫星组分别是禁食过夜。禁食动物的身体重量记录和使用剂量过多的二氧化碳安乐死。详细的总值验尸,包括身体的外部表面的仔细检查,所有的孔,和颅,胸和腹部腔及其内容,是执行。期间发现任何异常病变/影响器官总值验尸记录。gydF4y2Ba
(2)器官重量。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba总验尸检查后,下面的器官从所有动物都修剪掉任何附着组织适当的和尽快重湿,避免干燥(肝脏、肾脏、肾上腺、脾脏、心脏、子宫和子宫颈,附睾,胸腺、脑、睾丸、卵巢和前列腺,精囊与凝固腺)。成对的器官一起重和相对器官重量计算对空腹体重。gydF4y2Ba
(3)组织收集。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba以下任何附着组织器官收集和修剪,适当的,保存在10%中性缓冲福尔马林固定剂(肝脏、肾脏、肾上腺、睾丸、附睾、胸腺、脾、脑、心脏、子宫和子宫颈,卵巢,前列腺,精囊与凝固腺、脊髓,眼睛与视神经,胃、食道、主动脉,小和大肠,派尔集合淋巴结补丁、甲状腺和甲状旁腺,气管,肺、阴道、膀胱,淋巴结(颌下和肠系膜)、唾液腺、胰腺、骨骼肌、坐骨神经,胸骨,垂体,与乳腺和皮肤)。眼睛和睾丸收集保存在戴维森和修改戴维森的固定剂分别为24 - 48小时,转移到10%中性缓冲福尔马林。gydF4y2Ba
(4)组织病理学检查。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba收集和处理组织嵌入石蜡,分段在5微米,与苏木精和伊红染色。组织病理学检查是进行组织的指定列表包括所有宏观异常组织所有的动物从车辆控制(G1)和高剂量组(G4)。观察治疗的相关变化,考试的靶器官是扩展到卫星组织(G1R & G4R),中期(G2)和低剂量(G3)主要学习小组。gydF4y2Ba
2.3.8。统计分析gydF4y2Ba
原始数据的验证后,体重,体重增加,身体的食物消费,神经系统检查,绝对和相对器官重量、验尿(适用的参数),血液学,和临床化学受到统计分析使用图垫Prism 5.03版本,软件图垫。单向方差分析与Dunnett后续测试进行不同治疗组与各自对照组数据进行比较。男性和女性的数据被认为是单独进行分析。学生的学习任务是分析所需的地方。分析和比较都是评估在95%置信水平(p < 0.05)。gydF4y2Ba
3所示。结果gydF4y2Ba
3.1。合成和稳定gydF4y2Ba
与高效液相色谱法测定醋酸合成泛醌是纯度(w / w)的99.1%。泛醇乙酸酯的结构如图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和证书的分析(见表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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稳定性测试在开始执行,1,3个月后在室温下合成显示,泛醇乙酸酯稳定在所有时间点。泛醇是不稳定,高效液相色谱纯度为98%,53%,和22%稳定在启动,1,3个月后存储在室温下(见下表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba由于氧化)。gydF4y2Ba
3.2。基因毒性的研究gydF4y2Ba
3.2.1之上。细菌回复突变试验gydF4y2Ba
预培养和板合并方法存在和缺乏S9活化系统,没有观察到降水或细胞毒性测试浓度gydF4y2Ba美国沙门氏菌感染gydF4y2BaTA100菌株。gydF4y2Ba
测试项目被认为是诱变,如果有增加了剂量相关的测试范围和/或增加可再生的一个或多个剂量回复突变的殖民地的数量至少在一个应变或者回复突变的殖民地在测试剂量水平的数量超过两到三倍相比,车辆控制。gydF4y2Ba
泛醇醋酸不是预孵化试验发现诱变的存在(图gydF4y2Ba2(一个)gydF4y2Ba)和(图gydF4y2Ba2 (b)gydF4y2Ba)S9代谢活化gydF4y2Ba美国沙门氏菌感染gydF4y2BaTA100菌株TA98, TA102 TA1535, TA1537at所有测试浓度(50.1,158.4,500.7,1582.3,5000gydF4y2BaμgydF4y2Bag /板)。泛醇乙酸酯是摘要浓度测试的存在(图gydF4y2Ba3(一个)gydF4y2Ba)和(图gydF4y2Ba3 (b)gydF4y2Ba)S9代谢激活当测试板合并方法测试菌株。的有效性研究证实了增加两倍多的回复突变的殖民地在积极控制盘相比,车辆控制。gydF4y2Ba
(一)预培养方法在S9的存在gydF4y2Ba
(b)在缺乏S9预培养方法gydF4y2Ba
(一)板合并方法S9的存在gydF4y2Ba
(b)板没有S9的合并方法gydF4y2Ba
3.2.2。体外染色体畸变试验gydF4y2Ba
泛醇乙酸酯治疗文化评价细胞毒性剂量范围期间发现的研究。大约18.27%和16.00%的细胞毒性观察文化处理62.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL 4小时泛醇乙酸酯的存在和无代谢活化系统分别。没有大量的细胞毒性观察到所有其他测试浓度除了31.25gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL对待文化,15%的细胞毒性观察代谢激活系统的存在。文化与24小时的连续治疗没有任何细胞毒性。gydF4y2Ba
基于剂量的测距结果,62.5,31.25和15.625gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升的浓度选择和评价的主要研究诱导染色体畸变在代谢活化的缺失和存在。没有一个泛醇乙酸酯治疗文化显示大量的细胞毒性(见表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。异常细胞的百分比在4小时的对待文化缺乏代谢活化是0.67,1和0.67%,报15.63,31.25和62.5gydF4y2BaμgydF4y2Ba分别g / mL。观察到的细胞畸变在统计学上不重要的(p > 0.05),从车辆控制(1%丙酮处理文化)和在历史值的控制。在文化治疗4小时的代谢活化,观察细胞毒性最小。细胞的比例和结构畸变是1,2,和1.67%,报15.63,31.25和62.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL的治疗,分别观察到的值是无足轻重的车辆控制(p > 0.05)。没有观察到的细胞毒性治疗的24小时连续的文化。与结构畸变细胞中观察到24小时的治疗是1.33,0.67,1%,报15.63,31.25和62.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL,分别是统计学无意义的车辆控制(p > 0.05)。结构畸变的百分比中观察到车辆对待文化(1%丙酮)的存在和缺乏代谢激活没有显著的从历史中的媒体控制和控制的价值观。参考项目(积极控制)显示异常细胞百分比显著增加在充实积极的标准和观察到的结果在历史范围内积极控制。gydF4y2Ba
3.2.3。体外哺乳动物微核测试gydF4y2Ba
在剂量范围发现研究中,没有观察到任何8细胞毒性测试浓度的醋酸泛醌(62.5 - -0.488gydF4y2BaμgydF4y2BaCHO-K1细胞g / mL)车辆控制相比,存在治疗(4小时)和缺乏(4和24小时的治疗)的代谢活化系统。细胞毒性是通过测量估计cytokinesis-block增殖指数(CBPI)。gydF4y2Ba
在主要研究3泛醇乙酸酯的浓度为15.625,31.25和62.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL被测试为低,中,高剂量水平评估clastogenicity通过微核测试存在和无代谢活化系统。细胞培养对待媒体和车辆控制丙酮(1%)在无代谢活化4小时显示0.6和0.85%的微核频率;在相似的条件下测试项对待文化显示,0.70%,0.85%,和0.85%的微核频率低,中期,和高剂量水平。观察到的值从测试项治疗在统计学上的无意义的车辆控制(p > 0.05)。积极控制丝裂霉素C在0.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL显示,9.4%微核频率和从车辆控制显著(p < 0.05)。没有观察到大量的细胞毒性的测试项对待文化缺乏代谢活化的4个小时。文化对待媒体和车辆控制连续24小时无代谢活化微核频率显示0.8和0.45%;测验项目文化在对待类似的条件显示,0.70%,0.60%,和0.65%的微核频率低,中期,和高剂量水平,分别从车辆发现统计学无意义的控制(p > 0.05)。积极控制丝裂霉素C在0.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL显示,10.65%微核频率和从车辆控制显著(p < 0.05)。没有观察到大量的细胞毒性的测试项对待文化24小时无代谢活化。文化对待媒体和车辆控制4个小时在代谢激活显示,0.6%和0.5%的微核频率;测验项目文化在对待类似的条件显示,0.70%,0.85%,和0.85%的微核频率低,中期,和高剂量水平,分别从车辆发现统计学无意义的控制(p > 0.05)。积极控制环磷酰胺5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL显示,7.20%微核频率和从车辆控制显著(p < 0.05)。没有观察到大量的细胞毒性的测试项对待文化缺乏代谢活化的4个小时。微核频率观察车辆控制丙酮(1%)没有明显不同的媒体控制和观察到的值被发现在历史值控制-控制。体外微核研究的结果提出了在桌子上gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
3.3。Subchronic毒性研究gydF4y2Ba
3.3.1。同质性和剂量构象分析gydF4y2Ba
验证的高效液相色谱法量化的泛醇乙酸酯剂量配方。gydF4y2Ba
浓度从10.020到120.234的校准曲线gydF4y2BaμgydF4y2Bag / mL被发现线性相关系数(rgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)大于0.98。gydF4y2Ba
准备配方中的活性成分被认为是均匀分布在车里。车辆控制样本分析的剂量确认分析的间隔没有显示任何峰干扰在主峰的保留时间,这表明没有污染的车辆测试项目。剂量确认分析的结果在不同的区间分析治疗期间是在接受范围内变化的名义浓度(±15%)(见表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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注意:%复苏的可接受范围:从85年的115%。gydF4y2Ba |
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CHO-K1细胞处理车辆/控制/测试项目在37°C。gydF4y2Ba 细胞毒性(%)决定通过比较的相对增加,细胞计数对文化载体的文化。gydF4y2Ba 细胞只有差距视为正常细胞。gydF4y2Ba 1%丙酮,MMC:丝裂霉素C和CP:环磷酰胺。gydF4y2Ba 从车辆控制显著p < 0.05确切概率法。gydF4y2Ba |
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”gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba的不溶性浓度;gydF4y2Ba%微核统计增加车辆控制相比,p < 0.05。gydF4y2Ba |
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3.3.2。生存,临床观察,身体重量,饲料消费gydF4y2Ba
动物管理与车辆和测试项配方被发现没有不良临床毒性和死亡率和发病率的迹象,直到预定的牺牲。体重和体重百分比涨幅没有不利影响两性在整个实验周期,并与各自的对照组。没有统计上显著的治疗相关的身体重量的变化(见图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba和gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)和两性身体体重百分比(见表gydF4y2Ba6gydF4y2Ba)。每周平均食品消费(g /鼠/天)没有显示出治疗相关副作用两性和被发现与各自对照组(数据没有显示)。每周饲料消费获得的结果在统计学上不重要的和被北野(按照报告的结果gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R)。gydF4y2Ba |
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3.3.3。神经系统/功能&眼科检查gydF4y2Ba
神经系统/功能检查和眼科检查中进行gydF4y2Ba(G1 & G4)gydF4y2Ba周的研究(G1R & G4R)被发现与对照组并发车可比。没有治疗相关的神经系统和眼部异常观察;因此,考试并不是延伸到低剂量(G2)和中剂量组(G3)的主要研究。gydF4y2Ba
3.3.4。临床病理学gydF4y2Ba
(1)血液学。gydF4y2Ba没有治疗相关的不良反应观察血液学参数的任何治疗组相比,并发控制车辆。然而,显著降低血红蛋白(G4M)、红细胞比容(G3F, G4F G4M), MCV (G2F, G3F G4F)和显著增加MCHC (G2F、G3F G4F)和血液凝固时间(G4RF)观察相比,并发对照组(见表gydF4y2Ba7gydF4y2Ba和gydF4y2Ba8gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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(2)临床化学。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba有治疗相关显著增加AST (G4F)和ALT (G3F、G4F G4RF)在90年底天高剂量治疗的女性也增加ALT复苏高剂量组的女性。观察到的变化与肝脏组织学变化,这被认为是治疗相关,可以认为是不利的。gydF4y2Ba
然而,显著增加计算球蛋白(G4M)胆红素(G4M)、总蛋白(G3M G4M)和肌酸酐(G2M G4RF)和统计显著减少钠(G4RM)和白蛋白(G4RF)观察发现要么non-dose-dependent,观察到的只有性,没有相关不良组织学变化,变化中,并未观察到经济复苏组。因此,这些变化被认为是偶然的,而不是治疗相关(见表gydF4y2Ba9gydF4y2Ba和gydF4y2Ba10gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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(3)尿分析。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba尿分析参数分析主要研究(91天)和复苏组(105天)的男女被发现没有可比与治疗相关的不良反应和并发控制。gydF4y2Ba
3.3.5。器官重量gydF4y2Ba
没有治疗相关毒理学地显著变化的绝对和相对器官重量并发车辆相比,对照组。然而,在绝对和相对重量显著增加胸腺(G4M),与凝结前列腺,精囊腺和肾脏(G4RM)中观察到的男性相比,并发车辆对照组。没有观察到任何重大改变器官的治疗女性相比,并发控制。男性的器官重量的变化被认为是偶然由于缺乏dose-dependency,性别特定的和缺乏相关的组织病理学变化(见表gydF4y2Ba11gydF4y2Ba和gydF4y2Ba12gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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均数±10大鼠/性/组(G1、G2、G3、G4)和5大鼠/性/组(G1R G4R);gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba对照组相比显著(p < 0.05)。gydF4y2Ba |
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3.3.6。病理学gydF4y2Ba
治疗相关的严重病变的小白黄色不规则焦斑点中观察到肝脏(G4F-2/10)和黄色小焦点在肺(G4M-2/10、G4F-3/10 G4RF-1/5)高剂量治疗组与对照组并发车辆相比(见表gydF4y2Ba13gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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注意:数值表示观察代表动物的数量和无损伤;M:男性;F:女性;TS:终端牺牲。gydF4y2Ba |
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组织病理学评价、治疗相关的变化观察到肺、肝脏和肠系膜淋巴结的女性的高剂量组(表gydF4y2Ba14gydF4y2Ba)。在高剂量组(G4)的显微镜检查,治疗相关的组织学结果,即焦点多病灶的慢性炎性肺的变化(males-7/10 & 5/10-females),焦点,多病灶的单一细胞灶状坏死肝(females-5/10 males-1/10)和多焦点的巨噬细胞聚集,观察肠系膜淋巴结(10/10-females)分别。自上述治疗相关的变化组织观察在高剂量组(G4)的评估肺(男性和女性),肝脏和肠系膜淋巴结(雌性)扩展到低剂量组(G2和G3)和恢复组(G1R & G4R)。gydF4y2Ba
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注意:数值表示观察代表动物的数量和无损伤;M:男性;F:女性;TS:终端牺牲,gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba评估靶器官病变的基础上观察到高剂量主要研究小组。gydF4y2Ba |
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两性的肺高剂量复苏(males-2/5 females-3/5)、中剂量(males-2/10 females-3/10),低剂量组(females-1/10)显示焦点多病灶的慢性炎性病变。然而,治疗相关的肝脏的变化(多病灶的单个细胞坏死)仅限于中期剂量(females-1/10)和高剂量复苏组(females-3/5)和肠系膜淋巴结的变化(在皮层和副皮质区多病灶的巨噬细胞的聚集)低剂量(females-2/10)、中剂量(females-9/10)和高剂量恢复(females-5/5)组。gydF4y2Ba
4所示。讨论gydF4y2Ba
实验结果从体外基因毒性研究中,细菌回复突变试验、染色体畸变和微核测试表明,泛醇乙酸酯与没有致染色体断裂的或aneugenic nongenotoxic效果在测试剂量水平。同样,nongenotoxic结果观察到泛醌的基因毒性研究三和木(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
剂量确认和同质性分析泛醇乙酸酯的配方治疗前(0)和7周和13周的研究揭示了准备配方是同质的三层(上面,中间,和底部)和浓度的活性成分配方是在可接受的范围内。因此,准备制定过程是足够的和确认测试的准确浓度在制定项目管理各自的组织研究。gydF4y2Ba
Subchronic重复剂量毒性研究泛醇醋酸每日一次90天连续口服填喂法在雄性sd大鼠中未表现出不良临床毒性和死亡率和发病率的迹象。没有统计学意义,治疗相关副作用体重,身体体重增加,饲料消费、眼科检查、神经系统/功能检查,尿液参数分析。类似的发现被傅报道(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba和畠山直哉gydF4y2Ba16gydF4y2Ba在口服亚急性毒性研究。gydF4y2Ba
统计显著变化血红蛋白比容、MCV、MCHC,观察凝血时间。然而,发现non-dose-dependent了重大的变化,观察到的只有性,而且没有观察到变化的相关参数(血红蛋白,红细胞比容),也没有任何组织学变化。因此,这些变化被认为是偶然的,而不是治疗相关。所有其他参数分析了男性和女性与并发对照组比较。一般情况的结果和外观的动物、临床症状、体重,饲料消耗,神经系统或功能的观察,发现本研究检眼镜检查和血液学依照畠山直哉和北野gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
临床化学参数分析显示显著增加(1.5 - 2折)在AST和ALT在高剂量(600毫克/公斤体重)的主要研究和恢复组雌性进一步与总值,组织学变化。因此变化可以被认为是治疗相关副作用观察到只有女性。增加肝酶(ALT, AST)也报道了畠山直哉与泛醌雌老鼠服用300毫克/公斤体重以上13周(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。然而,保护或有益的辅酶Q10对肝脏的影响被Jimenez-Santos报道(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba)和Esfahani et al。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba)在大鼠低剂量水平。显著增加计算球蛋白(G4M)胆红素(G4M)、总蛋白(G3M G4M)和肌酸酐(G2M G4RF)和统计显著减少钠(G4RM)和白蛋白(G4RF)要么non-dose-dependent,观察到的只有性,没有相关性与组织学变化或变化观察复苏组。因此,这些变化被认为是偶然的,而不是治疗相关。gydF4y2Ba
绝对和相对重量显著增加胸腺、肾脏、前列腺、精囊、凝固腺被视为偶然由于缺乏dose-dependency和缺乏相关的组织学变化。总值病理病变在肺组织学上与焦黄色小焦点被关联的多焦点的慢性炎症。细胞渗透主要是单核与多焦点的焦点在分布范围和严重程度从最小到严重的肺。组织病理学损伤观察是与黄色小焦点在总值验尸检查。炎性病变也出现在男性和女性的高剂量年底复苏组14天的恢复期也评估低剂量组病变虽然发生率不显示相似。gydF4y2Ba
早些时候报道了类似的炎性病变三和木(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba和畠山直哉gydF4y2Ba16gydF4y2Ba)表示,肺部慢性炎症可能是由于测试项到肺的愿望在管理。威廉姆斯(gydF4y2Ba19gydF4y2Ba)报告了类似的不寻常的重复剂量和剂量相关的呼吸道症状泛醌口头52周的老鼠当玉米油作为车辆和得出结论,发现鼻甲骨和肺没有系统介导的毒性对测验项目的反应。威廉的发现受到Siegrid[支持gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba)也报道的理化性能测试项目的风险可能会增加呼吸系统影响口服后由于填喂法反射。对待动物的肺部慢性炎症改变目前的研究被认为是由于填喂法反射有关,而不是直接毒性侮辱的试验项目。gydF4y2Ba
白色到黄色不规则的焦点在肝脏的女性高剂量组与局灶性坏死区组织学评价。治疗相关的不良肝细胞坏死(单细胞或多细胞)高剂量雌性是最小的温和程度和焦点多病灶的分布。肝脏损伤女性很好与小白黄色不规则区域总验尸结果和在AST和ALT水平也显著增加。类似的研究结果报道三和木(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]microgranuloma,温和在肝脏局灶性坏死治疗泛醌在300毫克/公斤以上,和这些变化被认为是吸收过剩的结果泛醌在肝脏超过适应性反应的能力。肝脏的复苏组雌性显示单个细胞坏死的持久性与显著的高水平的ALT恢复期结束时。然而,从中期剂量和一男一女高集团显示出类似的损伤与肝酶无显著变化,因此被认为是偶然的。肝脏病变在600毫克/公斤显著增加肝酶及其持久性恢复期结束时被认为是不利的。gydF4y2Ba
巨噬细胞的聚集在肠系膜淋巴结中观察到的所有女性主要研究和恢复高剂量组以最小的温和和多病灶的分布在皮层和副皮质区。病变也观察到在低,中剂量组能降低女性严重程度比高剂量组。早些时候报道了类似病变为泡沫的研究人员聚集。这一发现被认为是适应性反应和nonadverse不大可能进展到一个不利条件随时间造成功能障碍(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。在组织病理学检查、肺、肝脏和肠系膜淋巴结被认为是作为靶器官。所有其他组织病理学发现零星在自然界中,与对照组并发可比,因此被认为是偶然的岁的雄性sd大鼠中用于这项研究。gydF4y2Ba
然而,本田等人报道关于体重没有变化,食品消费,检眼镜检查、血液学、血液生化学、尸体剖检,器官重量、或组织病理学最高剂量为1200毫克/公斤体重/天13周口服辅酶q10政府在大鼠(gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
总之,基因毒性的研究泛醇醋酸细菌回复突变试验gydF4y2Ba鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2Ba菌株,体外微核和CHO-K1细胞株体外染色体畸变,揭示了测试项与没有致染色体断裂的或aneugenic nongenotoxic效果。No-Observed-Adverse-Effect水平(科学)的泛醇乙酸时由口服填喂法连续90天的雄性sd大鼠中可以确定为600毫克/公斤体重的男性和300毫克/公斤体重的女性在实验条件下和剂量使用。泛醇乙酸酯,科学的雌性老鼠低于雄性老鼠这可能是由于高灵敏度泛醌的积累在肝脏的雌性老鼠,这一趋势可能从性别差异结果肝酶的表达。肝脏的变化可能是由于过度吸收管理泛醌超过了肝脏的适应能力。gydF4y2Ba
人类的推荐剂量的辅酶q 100 - 300毫克/天。考虑到人类的最高剂量300毫克/天(5毫克/公斤体重)作为膳食补充剂,60 - 120倍的安全系数被发现在人类安全。基于目前subchronic和基因毒性研究的结果,长期使用醋酸泛醌作为膳食补充剂在人类将是安全的。gydF4y2Ba
缩写gydF4y2Ba
| 高山:gydF4y2Ba | 碱性磷酸酶gydF4y2Ba |
| ALT:gydF4y2Ba | 丙氨酸转氨酶gydF4y2Ba |
| AST:gydF4y2Ba | 天冬氨酸转氨酶gydF4y2Ba |
| ATP:gydF4y2Ba | 三磷酸腺苷gydF4y2Ba |
| 按:gydF4y2Ba | 良好实验室规范gydF4y2Ba |
| GGT:gydF4y2Ba | Gamma-glutamyl转移酶gydF4y2Ba |
| 包子:gydF4y2Ba | 血尿素氮gydF4y2Ba |
| 科学:gydF4y2Ba | No-Observed-Adverse-Effect水平gydF4y2Ba |
| 经合组织:gydF4y2Ba | 经济合作与发展组织。gydF4y2Ba |
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的利益冲突gydF4y2Ba
Gajanan R德斯穆克,Suresh Babu Venkataramaiah Chandrashekar M Doreswamy Mohan C Umesh Rajesh B Subbanna Bikram Kumar Pradhan斯Seekallu, Rajan Sekar, Karthick您正在,Sathish萨达高潘,先生Natrajan Arumugam, Satish沙玛,登顶Rajulu Gavara,身边Balaraman, Ganesh Sambasivam, Ravindra k . Chandrappa和Prasad Shivarudraiah国歌生物科学公司的雇员,班加罗尔,印度,进行研究。美国莎拉·弗林是受雇于Glanbia营养品,并协助准备手稿和宣布没有利益冲突发表这篇文章。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者感谢化学系,国歌生物科学pvt Ltd .)班加罗尔,印度,提供测试项目,泛醇乙酸酯是用于研究中的安全性评价。我们也愿意承认国歌生物科学的管理分公司,班加罗尔,印度为为本研究提供所需的资金和资源。gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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