毒理学杂志》

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毒理学杂志》/2018年/文章

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体积 2018年 |文章的ID 6086490 | https://doi.org/10.1155/2018/6086490

k . Yogeswara沙里河、Picheswara Rao Polu女性r·谢诺伊, 南瓜种子提取物的鉴定1,2-Dimethylhydrazine Wistar鼠诱导结肠癌”,毒理学杂志》, 卷。2018年, 文章的ID6086490, 12 页面, 2018年 https://doi.org/10.1155/2018/6086490

南瓜种子提取物的鉴定1,2-Dimethylhydrazine Wistar鼠诱导结肠癌

学术编辑器:安东尼DeCaprio
收到了 2018年5月31日
修改后的 2018年7月23日
接受 09年2018年8月
发表 02年9月2018年

文摘

背景。癌症是最重要的一个在发达国家和发展中国家的公共卫生负担。结肠癌(CC)是最常见的死因第六发达国家印度和第三最重要的原因。治疗癌症有几种合成药物,但它们会引起副作用。因此,有必要研究植物提取抗癌药物副作用较小。在这个方向,我们试图揭示潜在的南瓜种子提取物治疗结肠癌。客观的。本研究的目的是评估南瓜种子提取物预防和治疗1、2-dimethylhydrazine (DMH)诱导结肠癌Wistar鼠。材料和方法。雄性Wistar鼠被分成七个组,即控制,DMH(疾病控制),5-Flurouracil(标准),治疗组(100毫克/公斤和200毫克/公斤),和预处理组(100毫克/公斤和200毫克/公斤),南瓜种子提取物。研究动物的安乐死结束时和冒号被检查。结果。异常的地穴疫源地的显著差异(ACF)数量在所有治疗组相比,控制和DMH组。预处理组剂量为200毫克/公斤明显下降结肠长度/重量比。预处理组显示显著改变结肠谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平相比,控制和DMH控制。亚硝酸盐含量降低在治疗组200毫克/公斤5.203±0.852相比,DMH控制为8.506±3.866。所有治疗组显示减少增生和组织学的ACF。结论。南瓜子可以防止CC当在饮食消费比例的风险。

1。介绍

植物已经相关的人类药用来源和许多现代药物来源于次级代谢物。自古以来,人类一直依赖于植物的疗效。在全世界范围内,食物来自于植物的主要来源。大部分的蔬菜一起吃种子;然而,有一些被丢弃的种子如南瓜、sapota和苹果等种子萌发中发挥关键作用。换句话说,他们是生活的给予。其中一个是南瓜子(PS),这是在烹饪过程中被除去。南瓜或Cucurbita浆果原产于墨西哥和美国西南部和东部北部。这是一年一度的登山者和五个角度的茎和长大到15米长。根是支成熟的主根和成长。水果不同形状、颜色和大小。肉的水果是用不同的颜色如绿色、黄色和白色。水果的形状是椭圆形,扁平,圆柱状,球状,梭状回和贝壳。叶子很简单,互生,三角肌和阔卵形,掌浅裂的,20 - 30厘米,叶与5-25cm叶柄10 - 35厘米。南瓜是一种雌雄同株的植物,生产花蜜从其辐射对称的花1]。几位治疗活动,比如抗氧化剂2],王亚南[3],hypolipidaemic [3,抗糖尿病的4),伤口愈合5,抗炎6),抗菌7),抑制刺激单核细胞(8,抗高血压9],antiarthritis [10,抗抑郁活性11,抗癌12],antihyperlipidaemic [13],anticataract [14已报告。有趣的是,南瓜的种子已报告显示细胞毒性活动在特定癌症细胞系在体外(12]。然而,PS在hct - 116细胞系测试没有被调查在活的有机体内在实验模型的结肠癌。

结肠癌是第六个最常见的死亡原因在印度和第三个发达国家的重要原因。2017年,美国癌症协会表示,预计95520年将会有新实例的结肠恶性肿瘤,在47700年将是47820年男性和女性。40%死于直肠恶性肿瘤并被错误地归类为结肠肿瘤(15]。尽管先进的治疗儿童权利公约,包括5氟尿嘧啶,应承担的铂,和表皮生长因子受体VEGFR抑制剂,在印度CRC的绝对负担增加了,不成功的治疗方法和现有的疗法的局限性。

结肠癌的早期标志是异常的地穴焦点(ACF)。这些都是增大的,异常的,椭圆形隐窝,可以区分与对照组进行比较。在结肠癌的动物模型中,使用化学诱导代理人如1、2-dimethylhydrazine (DMH) 20毫克/公斤的剂量雄性Wistar鼠被认为是一个完善的模型。DMH是一个高度特定的结肠致癌物质和代谢激活肝脏中通过一系列中间体像azomethane azoxymethane, methylazoxymethanol醋酸(妈妈)。妈妈与葡萄糖醛酸结合在肝脏和排泄胆汁。直接进入到结肠上皮细胞从血液循环,在妈妈产生活性氧和重氮甲烷离子,负责DNA的甲基化和核酸和组蛋白的修饰。异常的墓穴在两周内可以观察到病灶(DMH行政16]。本研究的目的是评估南瓜种子提取物预防和治疗1、2-dimethylhydrazine (DMH)诱导结肠癌Wistar鼠。因此,研究提出了以下假设PS可以减弱结肠癌体内。

2。材料和方法

2.1。试剂和化学物质

1,2-Dimethylhydrazine (DMH)购买的TCI的化学物质,钦奈,印度。亚甲蓝从Himedia实验室购买,孟买,印度。所有使用的溶剂和化学品采购从Himedia实验室、表达载体,Sigma-Aldrich化学私人有限公司

2.2。植物材料

的种子Cucurbita浆果从印度麦利普收集在2017年9月,卡纳塔克邦,印度。物种的身份Usharani年代Suvarna博士证实了头,植物学,圣雄甘地纪念学院Udupi,卡纳塔克邦和验证登记号码MGMC / 2018 - 19所示。

2.3。南瓜种子提取做准备

大约,900克干南瓜种子收集和粗粉研钵和研杵的帮助。

提取器是由使用站和夹子支持索格利特和冷凝器。2.5升80%乙醇摄于圆底烧瓶,放在一个isomantle。索氏提取器和冷凝器isomantle。粗粉干南瓜种子被放置到顶针在索氏提取器。玻璃棉是放置在侧臂防止固体颗粒。乙醇在圆底烧瓶加热使用isomantle 78°C的沸点。溶剂蒸发,通过索氏提取器的侧臂移动到冷凝器。冷凝器是不断提供冷水。溶剂蒸发浓缩和下降到顶针下降。这是一个持续的过程,直到它达到了虹吸管。 Then the solvent present in siphon tube poured back into the round bottomed flask and the cycle began again. Standard time for running this process was a total of 36 hours.

一旦程序完成后,rotavapor被用来恢复80%的乙醇,留下一个小数量的提取在圆底烧瓶17]。

2.4。植物化学的研究(18]
2.4.1。定性试验

这个测试是用来识别有效成分的提取Cucurbita浆果。以下测试进行分析的粗提物。

2.4.2。Liebermann-Burchard的测试

解决方案是准备使用2毫克的干南瓜种子提取物乙酸酐,然后煮熟,冷却。冷却后,浓硫酸(1毫升)添加了慢慢的试管,直到一个棕色环两层交界处形成的。形成绿色表明类固醇。

2.5。Salkowski测试

2毫升氯仿是添加到测试解决方案,其次是几滴浓硫酸,动摇了。形成的红棕色底层表示常用药用的存在。

2.6。试验植物甾醇

乙酸酐(2毫升)被添加到提取。1或2滴浓硫酸慢慢添加上述解决方案通过试管。植物甾醇的存在被颜色变化的数组。

2.7。检测生物碱
2.7.1。苦味酸测试

1转基因苦味酸的称重和溶解在100毫升的水。适当数量的南瓜种子提取物添加到上述的解决方案。奶油沉淀形成的指示生物碱的存在。

2.7.2。测试类黄酮

南瓜种子提取过滤水的试管和5毫升的氨溶液是补充道。然后通过添加几滴浓硫酸的试管。黄酮类化合物的存在是由黄色标识在试管中形成。黄色的颜色有时后消失。

2.8。测试单宁

2.5通用的南瓜种子提取和蒸馏水(5毫升)被添加到测试管和过滤。滤液,适量的氯化铁溶解在蒸馏水补充道。单宁的存在被深蓝色的形成,绿色或蓝绿色沉淀。

2.9。测试皂甙

蒸馏水(20毫升)被用来稀释南瓜种子提取物。暂停被允许在试管中。泡沫的形成到2厘米表示皂苷的存在。

2.10。测试碳水化合物
2.10.1。本尼迪克特的测试

0.5毫升的本笃试剂添加到0.5毫升的滤液。混合物在热水浴加热2分钟。存在的碳水化合物显示了红色沉淀的形成。

2.10.2。定量测试(18]

估计的总酚含量。没食子酸是最常用的标准来确定总酚含量。100年的标准储备溶液μg / ml。不同浓度的标准准备从1 - 10μ克/毫升。提取制备的溶液溶解1毫克1毫升蒸馏水。100年μl提取的解决方案是在试管和0.75毫升的试剂是补充道。标准的解决方案也与试剂混合,所有的解决方案都孵化为5分钟。0.75毫升的6%碳酸钠添加和孵化在室温下为90分钟。使用紫外分光光度计吸光度测量在725海里。

估计总类黄酮含量。总类黄酮含量测定采用氯化铝比色方法。提取的解决方案是由溶解1毫克1毫升蒸馏水。提取解决方案(0.5毫升),甲醇(1.5毫升),和1 M乙酸钾(0.1毫升)被添加到试管。在试管中溶液的体积是5毫升蒸馏水。那么解决方案是允许在室温下孵化20分钟。孵化后的吸光度测量415海里。标准校准情节决定利用槲皮素(标准)。

估计总单宁含量。丹宁酸是一种常用的标准来确定总单宁含量。浓度从1到10μ和10 g / ml的标准μg / ml提取解决方案做好准备的话。100 -μl标准/提取样本,9.3毫升的水,300人μl Folin-Denis试剂的添加和孵化为1小时在黑暗。吸光度测量在760海里。标准曲线绘制。总单宁含量出现在提取方面的决心,并表示鞣酸等价物。

估计皂甙。20克的南瓜种子提取称重和烧杯中。烧杯,200毫升的20%乙醇是补充道。烧杯保持水浴和温度维持在55°C,不断搅拌4 h。最终的解决方案出现在烧杯被绘画纸滤纸收集和过滤。残留再次reextracted加入200毫升20%的乙醇。这个过程被重复加热水浴上55°C和搅拌连续4 h。获得的提取物第一和第二萃取相结合,继续在90°C水浴。进一步,在水浴烧杯一直直到体积减少到40毫升的解决方案。集中的解决方案是在分液漏斗和20毫升的添加乙醚和动摇。 After shaking, diethyl ether layer and aqueous layer were separated in a separating funnel. The aqueous layer was collected by opening the knob and diethyl layer was discarded. The obtained aqueous layer was again washed with 60 ml of n-butanol and 10 ml of 5% aqueous sodium chloride was added. The n-butanol layer was collected and kept on a water bath for complete evaporation. The sample was allowed to dry completely in the oven into a constant weight. The percentage saponins was calculated using the following: W1是重量的空烧杯,W2是空烧杯样的重量。

2.11。动物采购

雄性Wistar鼠体重180 - 200 g是从中央采购的动物研究设施,印度麦利普高等教育学院,印度麦利普,卡纳塔克邦。动物适应实验房间轴承温度23±3°C,足够的湿度条件下,光明与黑暗和十四10小时的周期。动物的处理和关怀是按照指导方针提出的制度动物伦理委员会(IAEC),印度麦利普。委员会已经扫清了研究和发布了轴承的间隙证书号码,IAEC KMC / 45/2017。

2.12。急性毒性研究

我们称为经合组织指导方针。425年进行急性口服毒性。一夜之间,女性Wistar鼠被获得和保持药物管理局前禁食。PS提取被悬挂在0.25%羧甲基纤维素(CMC)和剂量计算基于Wistar鼠的体重。根据经合组织的准则,三位女性Wistar鼠剂量2000毫克/公斤。动物被观察到的时间4,8日,12日和24小时意识的变化,情绪,中枢神经系统活动,肌肉张力,反应能力和自主配置文件。此外,动物在观察15天发生的任何异常。

2.13。制备的致癌物质

1,2-Dimethylhydrazine准备的解决方案是使用1毫米EDTA和pH值调整到6.5,1 M氢氧化钠。感应阶段是20周的致癌物质是每周服用一次的剂量20毫克/公斤(i.p。)前10周和30毫克/公斤(i.p。)在接下来的10周16]。

2.14。实验设计

54岁的雄性Wistar鼠被用于这项研究。老鼠被随机分配到一组六个。南瓜种子提取物治疗和预处理口头测试。我:控制组2:疾病控制(DMH: 20毫克/公斤前10周和30毫克/公斤未来10周,i.p)。第三组:疾病+ 5 -氟尿嘧啶(10毫克/公斤,i.p。)第四组:疾病+南瓜种子提取物(100毫克/公斤,订单)。V:疾病+南瓜种子提取物(200毫克/公斤,订单)。第六组:南瓜种子提取物(100毫克/公斤,订单。)+疾病第七组:南瓜种子提取物(200毫克/公斤,订单。)+疾病

2.15。实验的程序

结肠癌,诱导后的标准药物5 -氟尿嘧啶(10毫克/公斤/i.p。一周一次)和南瓜种子提取物(100毫克/公斤和200毫克/公斤订单。日报)。

预处理组、老鼠只有南瓜种子提取物治疗8周的最初阶段。8周后,DMH管理每周一次20周(20毫克/公斤/i.p。前10周和30毫克/公斤/i.p。未来10周)[19]。

2.16。在活的有机体内方法(19]
2.16.1。ACF的确定

实验动物的安乐死之后,整个结肠解剖,以纵向的方式打开,用盐水洗净。一块结肠测量8厘米每个缓冲福尔马林固定的滤纸上10%为24小时。然后冒号沾0.1%亚甲蓝在磷酸缓冲盐20分钟和异常的地穴焦点(ACF)计算。ACF数字是由复合光显微镜下仔细检查标本40 x放大,粘膜侧朝上。彩色的ACF被深色染色和大尺寸,厚厚的上皮衬里和椭圆腔的开口,细长的长板基底表面的细胞。

2.16.2。血液学的评价

血从retro-orbital丛麻醉动物收集之前安乐死。50μl 10% EDTA是每500用作抗凝血剂μ我的血液样本。收集的血液进行了分析通过兽医血细胞计数器血液参数。

2.17。结肠长度重量比

孤立的冒号测量厘米的长度和重量的克和比率计算

2.18。脾脏指数和肝指数

收集脾脏和肝脏指数计算

2.19。ACF发病率

ACF与癌症发病率的百分比表示动物感应所有DMH对待动物。这是计算的

2.20。生化估计

在研究结束时,血液生化参数的收集。安乐死后,肝脏和结肠都从每只动物分离后transcardial与冰冷的生理盐水灌注。冰冷的氯化钾(150毫米)的解决方案是用来准备10%组织匀浆使用均质器(雷米、孟买、马哈拉施特拉邦)。结肠匀浆用于估计谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(20.),丙二醛(MDA)含量和脂质过氧化(21)、亚硝酸盐、总蛋白(22)和超氧化物歧化酶(SOD) (23]。

2.21。组织病理学研究[24]

解剖结肠是放置在样品容器装满福尔马林的10%。后,部分结肠组织被安置在50毫升酒精等不同浓度的50%,70%,90%,100% 5 - 7个小时。此外,结肠样本放置在二甲苯获得一个明确的和透明的组织。之后,它将被放置在一个组织学嵌入四碗装满融化石蜡组成。石蜡是平均分配的组织。这个过程是在54-60°C 6 - 8小时。石蜡被允许在室温下冷却或块的浸在冷水凝固。组织块被放置在一个切片机生产相同厚度的薄片。光显微镜下观察的最佳厚度是5 - 10μm。组织的薄片放在热水沐浴在52°C,以避免皱纹的形成。组织的薄片,放入水浴,转由浸渍滑入浴缸。干燥后,幻灯片被保存在热板把石蜡在幻灯片上。部分是沾苏木精和伊红染色,光学显微镜下观察4,10,40 x放大来捕获图像。

2.22。统计分析

结果表示为均值±SEM和统计分析进行了使用单向方差分析(方差分析)其次是事后图基为对比组的测试,通过图垫棱镜软件版本5.0(美国圣地亚哥,CA)。p < 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。植物化学的研究
3.1.1。定性分析

南瓜种子提取类黄酮阳性,常用药用,类固醇,丹宁酸,植物甾醇和皂甙。生物碱和碳水化合物的缺席,如表所示1


植物成份 结果

生物碱
碳水化合物
类黄酮 + ve
常用药用 + ve
类固醇 + ve
丹宁酸 + ve
植物甾醇 + ve
皂苷 + ve

3.1.2。定量分析

定量分析进行量化的内容主要成分黄酮类、皂苷、酚类、单宁。

估计总类黄酮含量。氯化铝的方法主要是用来确定总服用富含内容和标准情节获得使用槲皮素作为标准。总类黄酮含量在给定的样本被发现槲皮素2.91毫克当量/ g。

估计的总酚含量。没食子酸的总酚含量表示为毫克当量/ g。南瓜种子提取物的总酚含量3.85毫克GAE / g。

单宁含量估计。丹宁酸作为标准获取标准的阴谋。南瓜种子提取物的总单宁含量0.814毫克TAE / g。

估计总皂甙的含量。总皂苷含量的百分比的南瓜种子提取74.1%被发现。

急性毒性研究。在急性口服毒性研究中,没有任何不良症状或死亡的迹象在女性Wistar鼠的剂量2000毫克/公斤。根据结果,南瓜种子提取剂100和200毫克/公斤的选择在活的有机体内研究。

ACF的确定。没有开发的ACF对照组收到车辆。观察的数量显著增加ACF DMH控制相比,控制和标准。治疗和预处理组,在100和200毫克的剂量,能够包含ACF明显在p < 0.05为给定的表2


治疗 ACF / 5厘米2

控制 0
DMH控制 151.83±9.24
标准 66.16±7.86
治疗- 100毫克/公斤 76.33±22.83
治疗- 200毫克/公斤 54±10.42
预处理- 100毫克/公斤 67.83±17.76
预处理- 200毫克/公斤 51.83±9.14

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。

血液学的参数。PS提取剂100和200毫克/公斤(预防和治疗),5-Flurouracil(10毫克/公斤),显示显著变化的白细胞,淋巴细胞、粒细胞、单核细胞相比,DMH组表中所描绘的一样3


集团 白细胞 淋巴细胞 粒细胞 单核细胞

控制 77.6±14.76 65.96±11.54 43.33±17.91 23.98±21.5
DMH控制 80.2±9.96 65.7±11.01 40.53±17.02 27.05±20.77
5-Flurouracil 60.1±12.86 59.63±5.23 28.08±3.708 12.28±2.811
治疗100毫克/公斤 47.91±5.89 68.08±9.50 24.85±2.46 28.6±20.2
治疗200毫克/公斤 34.48±5.03 46.03±5.19 34.46±3.12 15.18±3.85
预处理- 100毫克/公斤 29.86±4.75 41.03±11.71 48.66±11.8 10.3±0.889
预处理200毫克/公斤 7.61±6.17 35.7±10.24 54.8±12.28 9.5±2.447

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。

结肠长度/重量比。发生机率的形成、腺瘤和腺癌减少结肠长度/重量比。有显著减少结肠长度/重量比DMH组与对照组相比。治疗组的比例与DMH对照组但并没有显著增加。预防组在200毫克/公斤显示显著增加的比率相比,疾病控制表4和图1


治疗 结肠L / W比率(cm / g)

控制 10.76±0.974
DMH控制 7.945±0.586
标准 9.929±1.364
治疗- 100毫克/公斤 8.715±0.834
治疗- 200毫克/公斤 8.234±1.015
预处理- 100毫克/公斤 9.796±0.676
预处理- 200毫克/公斤 10.559±1.379

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。

脾脏指数和肝指数。在脾脏指数,预处理在200毫克/公斤显示与对照组相比差异显著。与DMH控制相比,没有任何显著差异治疗组显示。在肝脏指数、治疗和预处理在200毫克/公斤显示与对照组相比差异显著。结果在表5


治疗 脾脏指数(意味着±SEM) 肝指数(意味着±SEM)

控制 0.0038±0.0005 0.0237±0.0041
DMH控制 0.00514±0.0004 0.0327±0.0016
标准 0.00452±0.0005 0.0279±0.002
治疗- 100毫克/公斤 0.00418±0.000387 0.0309±0.0016
治疗- 200毫克/公斤 0.008551±0.0058 0.0567±0.0283
预处理- 100毫克/公斤 0.00538±0.0007 0.0296±0.0037
预处理- 200毫克/公斤 0.00558±0.00026 0.0350±0.0024

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制。

生化估计

过氧化氢酶。过氧化氢酶水平明显下降的DMH集团被发现与对照组相比。另一方面,治疗剂量水平和预处理在100毫克/公斤表明过氧化氢酶含量显著增加(p < 0.05)相比,DMH组如表所示6和图2


治疗 过氧化氢酶单位/毫克的蛋白质(平均±SEM)

控制 685.158±101.94
DMH控制 249.51±38.96
标准 592.98±109.30
治疗- 100毫克/公斤 552.89±110.88
治疗- 200毫克/公斤 573.97±142.52
预处理- 100毫克/公斤 684.77±191.25
预处理- 200毫克/公斤 463.642±33.96

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。
3.1.3。减少谷胱甘肽

谷胱甘肽水平明显降低在DMH指出治疗大鼠与对照组相比。所有治疗和5 -氟尿嘧啶组显示显著增加谷胱甘肽含量相比DMH组。结果表中提供7和图3


治疗 谷胱甘肽 米/毫克的蛋白质(平均±SEM)

控制 47.252±6.877
DMH控制 25.042±1.199
标准 36.935±4.351
治疗- 100毫克/公斤 41.313±4.186
治疗- 200毫克/公斤 36.185±4.086
预处理- 100毫克/公斤 38.396±3.34
预处理- 200毫克/公斤 40.663±2.880

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。
3.1.4。脂质过氧化和MDA含量

是观察DMH管理老鼠的MDA含量显著增加,但与对照组相比并没有显著。所有治疗组和5 -氟尿嘧啶手臂显示显著差异比控制。治疗组能降低MDA含量比DMH控制但不明显,除了治疗200毫克/公斤。表中给出的结果8和图4


治疗 纳米摩尔的MDA /毫克的蛋白质(平均±SEM)

控制 374.029±61.11
DMH控制 260.79±26.233
标准 263.386±82.49
治疗- 100毫克/公斤 188.74±51.20
治疗- 200毫克/公斤 160.73±53.52
预处理- 100毫克/公斤 301.255±108.15
预处理- 200毫克/公斤 166.745±37.523

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。

超氧化物歧化酶。SOD含量明显减少DMH控制与对照组相比。所有治疗组显示显著增加SOD含量相比DMH控制除了5-Flurouracil组如表所示9和图5


治疗 SOD /毫克的蛋白质(平均±SEM)

控制 2.427±0.319
DMH控制 0.3008±0.0356
研究者用(标准) 1.4264±0.6080
治疗- 100毫克/公斤 2.0770±0.3134
治疗- 200毫克/公斤 2.561±0.4739
预处理- 100毫克/公斤 2.3046±0.8133
预处理- 200毫克/公斤 1.8991±0.7544

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05与控制; P < 0.05对DMH控制。

亚硝酸盐含量。亚硝酸盐含量的增加在DMH对照组但相比并没有显著的控制。治疗组200毫克/公斤,5 -氟尿嘧啶显著降低亚硝酸盐含量比DMH控制。其他治疗组降低了亚硝酸盐水平不显著但比控制和DMH治疗(在表10和图6)。


治疗 μ米/毫克的蛋白质
(平均±SEM)

控制 6.874±2.356
DMH控制 8.506±3.866
研究者用(标准) 5.867±1.739
治疗- 100毫克/公斤 6.461±1.093
治疗- 200毫克/公斤 5.203±0.852
预处理- 100毫克/公斤 6.971±0.9477
预处理- 200毫克/公斤 7.199±1.7439

所有值都意味着±SEM的六个样品; P < 0.05对DMH控制。

组织病理学检查。结肠的组织病理学检查不同的治疗组如图7

数据7(一),7(c),7(e),7(g),7(我),7(k)7(m)在10倍放大和数字7(b),7(d),7(f),7(h),7(j),7(左)7(n)是40岁以下的x放大。在对照组(数字7(一)和7细胞(b)),定期安排观察显示正常肌层外,黏膜下层,粘膜,固有层,Lieberkuhn隐窝。在DMH对照组(数字7(c)和7(d)),是一个细胞的增生,黏膜下层和粘膜受损。此外,隐窝脓肿的Lieberkuhn,高异常的地穴疫源地,扩大已报告的细胞核和细胞增殖。少数量的hyperproliferative接近对照组细胞和正常的结构如图7(e)和7为5 -氟尿嘧啶组(f)。数据7(g)和7(h) hyperproliferative细胞数量较少,类似于控制即治疗组为100毫克/公斤。在治疗组(200毫克/公斤),数据明显7(我),7附近(j),黏膜的组织学正常还表示几hyperproliferative细胞。数据7(k)和7(l)的预处理组(100毫克/公斤),这表明数量较小的hyperproliferative细胞疾病和对照组相比。最少的hyperproliferative细胞相比,疾病和控制观察预处理(200毫克/公斤)(数据7(m)和7(n))。

4所示。讨论

癌症是一种疾病,其特征是不受控制的部门和异常细胞的生存。发生的异常生长在结肠或直肠结肠直肠癌。结肠癌通常为良性增长开始被称为息肉在结肠或直肠的内壁。这种息肉生长缓慢,发展成一个腺瘤性息肉和腺瘤10到20年的时期。结肠癌是一个多级的过程,其中包括起始,推广和发展。DMH是化学致癌物,这对诱导结肠癌是行之有效的体内。DMH时腹腔内接种是由肝脏代谢等一系列中间体azoxymethane, methylazoxymethanol醋酸(妈妈)和甲基重氮离子。的妈妈进入结肠上皮细胞,导致烷基化的DNA。结肠癌的早期标志是异常的地穴焦点(ACF)。这些都是增大的,异常的,椭圆形隐窝,可以区分与对照组进行比较。在我们的研究中,DMH管理动物显示ACF起始和腺瘤发展显示不仅发病,而且结肠癌的发展(16]。

小和大腺瘤发展由于k - ras基因突变,hypo-Met-DNA [25]。这些腺瘤是进一步发展为腺癌p53基因的突变和错配修复基因突变(26,27]。

黄酮类化合物的存在和常用药用的促成因素之一的抗癌作用机制从这样一个flavonoid-cucurbitacin闻名抗癌效果。脾脏和肝脏指数是重要的特征检测转移的结肠癌,脾肿大,肝肿大。然而,没有显著差异在肝脏和脾脏指数的所有治疗组,这意味着没有损害肝脏和脾脏。在肿瘤组织中,过氧化氢酶水平降低了。使用的酶过氧化氢酶主要是细胞抵御过氧化氢,这是所产生的各种反应。谷胱甘肽含量更DMH控制由于氧化应激参与了肿瘤发展的过程。多不饱和脂肪酸存在于细胞膜是由活性氧氧化。上述反应引发脂质过氧化,引起连锁反应,产生自由基和氢过氧化物等物质,有毒的醛,丙二醛和时。丙二醛作为信号传感器导致细胞增殖,最后导致结肠癌。结肠癌的起始,其发展主要取决于活性氧代谢产物。 Superoxide dismutase plays an important role in decreasing the free radicals in colon cancer. Pumpkin seed extract at a dose of 200 mg/kg as preventive measure decreased the colon length/weight ratio. Nitric oxide (NO) is a free radical which is responsible for cell signaling and cell damage. It reacts with superoxide (O2 -过氧硝酸盐)和形式。这过氧亚硝基与DNA相互作用、蛋白质和脂质,是一种癌症的潜在机制。在我们的研究中,亚硝酸盐含量显著增强DMH组与对照组相比。

先前的报道,60% ethanolic提取南瓜种子抑制结肠癌体外对结肠癌细胞系。原油南瓜种子提取物功效测试(LNCap)对雄激素敏感,雄激素不敏感(du - 145), MCF-7(乳腺癌细胞株)和Caco-2(结直肠恶性腺瘤细胞株)。在Caco-2细胞系,有增生的细胞的抑制作用。研究人员报道,cucurbitacin的抗癌效果并不是因为,这是南瓜种子中提取的有效成分之一。这个证据毫无失败,还有其他机制负责抗癌活动。进一步,隔离研究需要阐明抗癌效果的可能原因(12]。

结肠损伤的程度由DMH评估增加ACF计数和息肉计数。在DMH控制,有大量的ACF,腺瘤、息肉。5 -氟尿嘧啶治疗,南瓜种子提取显示良好的抗癌活动通过维持低ACF计数,息肉DMH对照组相比。治疗组也显著增加抗氧化酶的水平相比,DMH控制。南瓜种子提取显示类似或更低功效与标准5 -氟尿嘧啶治疗在这个模型中,增加内源性抗氧化水平。组织病理学结果显示脓肿Lieberkuhn地穴,高异常的地穴疫源地,扩大核和细胞增殖DMH组。较小数量的异常病灶的洞口,增生的细胞,而且没有观察到在粘膜隐窝脓肿治疗组。

Cucurbitacins南瓜子中负责诱导细胞凋亡和有能力修改基因转录活动,激活和抑制pro -或凋亡蛋白。Cucurbitacins主要行动JAK / STAT通路的抑制和其他机制相关的凋亡效应如PARP乳沟,MAPK通路,激活caspase-3, JAK3, pSTAT3水平下降。他们还减少目标STAT3such细胞周期素D3、bcl - 2, mcl1, Bcl-xL,扮演主要角色在细胞周期控制28]。

基于我们的研究结果,这是由ACF数较少,增加抗氧化剂的水平,和恢复组织病理学发现,我们可以得出结论,PS治疗和预处理在200毫克/公斤显示更好的抗癌活动相比,低剂量。南瓜子可以是一个有前途的候选人为治疗结肠癌正常化的抗氧化酶水平,抑制增生的细胞,增加结肠长度/重量比,减少ACF计数。

5。结论

最后,本研究为保护作用提供证据的南瓜种子在二甲肼(DMH)诱导结肠癌。其行为与衰减结肠粘膜增生的细胞,调制的抗氧化剂,并恢复正常的组织学特性。进一步的研究是必要的破译南瓜籽发挥抗癌作用的可能机制。然而,南瓜的种子在饮食消费比例将有利于患有结肠癌,而不是伤害它们。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者承认印度麦利普制药科学学院,印度麦利普高等教育学院(马希),提供必要的设施和基础设施来执行这项研究。

引用

  1. r·m·佩雷斯·古铁雷斯,”回顾Cucurbita浆果(南瓜)其植物化学和药理,”药物化学》第六卷,没有。1,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  2. c . z .恩,a . r .主机和s e . Terblanche“抗氧化效果的南瓜种子(Cucurbita瓠果)分离蛋白在CCl4-induced低蛋白喂大鼠肝损伤,”植物疗法的研究,20卷,不。11日,第940 - 935页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  3. m . Makni h . Fetoui n . k . Gargouri et al .,“降血脂药和王亚南的影响亚麻和南瓜种子丰富的混合物ω3和ω6脂肪酸hypercholesterolemic老鼠。”食品和化学毒物学,46卷,不。12日,第3720 - 3714页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  4. s . k . Bharti a·库马尔n . k . Sharma et al .,“生育酚的种子Cucurbita浆果预防糖尿病:验证通过体内实验计算对接,支持“台湾的医学协会杂志》上,卷112,不。11日,第690 - 676页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  5. s . Bardaa n . Ben Halima f·罗伊et al .,“油南瓜(Cucurbita瓠果l .)种子:评价其功能性质在大鼠伤口愈合,”脂质在健康和疾病,15卷,不。1,2016。视图:谷歌学术搜索
  6. m·l·m·奥利维拉d . c . s . Nunes-Pinheiro和b . m . o . Bezerra局部抗炎的潜在南瓜(Cucurbita瓠果l .)籽油对小鼠急性和慢性皮肤炎症,”Acta Scientiae Veterinariae,41卷,p。1168年,2013年。视图:谷歌学术搜索
  7. l . s .传单”,表征和抗菌研究南瓜子油(cucurbita瓠果,”表征和抗菌研究南瓜子油(cucurbita瓠果)4297,页4297 - 2013。视图:谷歌学术搜索
  8. c·温克勒b . Wirleitner k . Schroecksn h . Schennach和d·福克斯”提取南瓜(Cucurbita瓠果l .)种子抑制外周血单核细胞体外刺激,”美国免疫学杂志》,1卷,不。1,6尺11寸,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  9. h·a·Zuhair a . a . Abd El-Fattah和m . i El-Sayed”南瓜子油调节非洛地平的作用和卡托普利在自发性高血压大鼠,”药理研究第41卷。。5,555 - 563年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  10. a·t·法西姆a . a . Abd-El Fattah a . m .大官和m . z迦得,“南瓜子油对自由基水平的影响在adjuvant-arthritis拾荒者诱导大鼠,”药理研究没有,卷。31日。1,第79 - 73页,1995。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  11. 美国乔治和p . Nazni“抗抑郁的活动的南瓜(cucurbita最大值)种子处理老鼠,”1.2,第231 - 225页,2012年。视图:谷歌学术搜索
  12. s . Medjakovic s Hobiger k . Ardjomand-Woelkart f . Bucar和a . Jungbauer“南瓜种子精华:细胞生长抑制增生性和癌症细胞,独立于类固醇激素受体,”Fitoterapia卷,110年,第156 - 150页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  13. m . Gossell-Williams c·海德t .猎人et al .,“提高高密度脂蛋白胆固醇与南瓜子油:绝经后妇女补充试点研究,“更年期,14卷,不。5,558 - 564年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  14. a·克莱门特·g·Koffuor, d .珍贵的“Cucumis的影响巨大,Cucurbita瓠果l .(葫芦科)水溶液制剂在Sprague-Dawley Galactose-Induced白内障大鼠,”国际研究药房和药理学杂志》上,第180 - 174页,2012年。视图:谷歌学术搜索
  15. 美国癌症协会,结直肠癌事实和数字2017 - 2019美国,美国癌症协会,亚特兰大,乔治亚州,2017年。
  16. r . Pathakota药理评价aeglemarmelos anticolon癌症活动1,2-dimethylhydrazine诱导小鼠结肠癌5,2016年。视图:出版商的网站
  17. r .亚太区n . Jain和a·k·帕沙克”的标准化ethanolic提取的Cucurbita最大值种子。”应用制药科学杂志》上,卷2,不。8,92 - 95年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  18. s . Ganapaty m . Ramaiah k Yasaswini, v . k . Nuthakki“量化植物化学的估计和评价王亚南Methanolic提取物的活性,石斛兰ovatum (l)Kraenzl。整个植物对CCl 4”引起的肝毒性,2卷,第118 - 113页,2013年。视图:谷歌学术搜索
  19. 普拉萨德诉:Reddy, A·弗朗西斯et al。”印度菜水鹿防止二甲hydrazine-induced结肠癌的发展:一个临床前研究中,“生药学杂志,12卷,不。47,第441页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  20. a·克莱本“过氧化氢酶的活动,”手册的方法为氧自由基的研究方法,页283 - 284,CRC出版公司,1989年美国佛罗里达州博卡拉顿的。视图:谷歌学术搜索
  21. t . p . a . Devasagayam k . k . Boloor, t . Ramasarma”方法估计脂质过氧化作用:优缺点的分析,“印度生物化学和生物物理学杂志》上,40卷,不。5,300 - 308年,2003页。视图:谷歌学术搜索
  22. j . Sedlak和r·h·林赛”总量的估计、蛋白结合的和非蛋白巯基团体组织与Ellman试剂,”分析生物化学25卷,第205 - 192页,1968年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  23. a . Satomi村上,t .桥本,k .石田m . Matsuki和m . Sonoda”意义的超氧化物歧化酶(SOD)在人类大肠癌组织:相关性恶性强度,”胃肠病学杂志》上,30卷,不。2、177 - 182年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  24. W3.marietta.edu,”玛丽埃塔大学:事实和数据”,http://w3.marietta.edu/ ~ spilatrs / biol309 / labexercises / Histology.pdf视图:谷歌学术搜索
  25. j . M.-K。Ng和j . Yu”启动子甲基化的肿瘤抑制基因作为潜在生物标志物在结直肠癌,”国际分子科学杂志》上,16卷,不。2、2472 - 2496年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  26. m . Jakubowski x Liu和j·l·亨特,“KRAS基因突变在结直肠癌与扩散和自发性细胞凋亡增加,”美国临床病理学杂志》上,卷135,不。2、245 - 252年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  27. 美国纳·d·罗伊,“APC和DNA错配修复基因的作用在结肠直肠癌的发展,“分子癌症,卷2,货号。41岁,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  28. i, j·l·里奥斯安杜哈尔,j . m . Escandell r . m .杜松子酒和m . c . Recio”Cucurbitacins诱导的细胞死亡和潜在的抗癌化合物的丰富来源,”当前的药物设计,18卷,不。12日,第1676 - 1663页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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