从姜精油的效果(生姜)和姜黄(姜黄)的根状茎在某些炎症生物标记物在镉诱导大鼠的神经毒性

文摘

研究表明,抗炎剂可以提供有益的影响降低了发病率/神经系统疾病的进展。因此,本研究试图探讨精油的效果从尼日利亚姜和姜黄根茎在某些细胞因子在镉诱导神经毒性。结果显示,从生姜精油,姜黄根状茎产生抗炎效应通过阻止改变的一些细胞因子/炎症生物标记(il - 6、il - 10和tnf)水平和抑制海马和前额叶皮层乙酰胆碱酯酶(疼痛)和腺苷脱氨酶(ADA)活动(管理/预防的重要酶相关的神经退行性疾病)大鼠治疗的Cd。总之,从生姜精油,姜黄根茎发挥抗炎作用在Cd诱导神经毒性。观察到的效应可能是由于挥发性化合物,用气相色谱-质谱分析显示。

1。介绍

存在简单地称为神经组织的炎症是由各种各样的攻击大脑从感染、创伤性脑损伤,有毒的代谢产物,或自身免疫1]。最近,据报道为神经退行性疾病如阿尔茨海默病的发病机制、帕金森病、多发性硬化(1]。神经炎症过程与三种常见的激活细胞因子即;白细胞介素- 6 (il - 6), interleukin-1β(il - 1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF -α在中枢神经系统(1]。一些重金属已经涉及神经炎症的作用,阿尔茨海默病(AD)通过神经原纤维缠结和β-淀粉样蛋白斑块的形成(2,3]。

镉(Cd)是很出名的潜在神经毒性和构成严重的全球环境卫生挑战2]。人类暴露于Cd通过不同来源等主要金属行业,生产的电池,摄入受污染的食物或水,吸入烟草烟雾或被污染的空气2]。研究表明,Cd可以很容易地穿过血脑屏障(BBB),专业结构由星形胶质细胞和内皮细胞,诱导神经炎症过程(2- - - - - -4]。据报道,Ashok et al。2Cd建立在人体可以诱导神经毒性由于其高血脑屏障通透性。记忆障碍等神经系统疾病和儿童多动症可能发生在Cd接触(5]。干扰神经炎症过程中已经注意到Ashok et al。2]在暴露于Cd。据小王和杜6),Cd诱发的神经损伤的可能机制是通过氧化应激;然而,Cd的毒性作用是相当复杂的,仍然争论不休。其他机制,如改变炎症过程和蛋白质损伤提出了神经细胞(5]。因此,当前的研究主要集中在抗炎剂合成或食品的来源,可以帮助缓解重金属诱导神经退化。

生姜或称为的根源生姜罗斯科是常用的调味品,发现有多种药理作用,如抗炎,抗肿瘤,抗氧化性能7- - - - - -9]。根据Oboh et al。10),提取生姜根状茎抑制乙酰胆碱酯酶活性(关键调控酶参与神经退化)在体外。此外,据报道,姜的挥发油影响细胞介导的免疫反应和非特异性T淋巴细胞的增殖11]。

姜黄(姜黄Linn)的一个主要香料属于姜科的家庭,用作医药、调味品,全球化妆品和价值作为促进健康的功能性食品,因为潜力(12]。它是由一组三个curcuminoids:姜黄素(diferuloylmethane) demethoxycurcumin, bisdemethoxycurcumin,以及挥发油(tumerone atlantone, zingiberone),糖,蛋白质,和树脂。多项研究表明,从姜黄精油具有显著的生物活性,包括抗真菌杀虫剂,抗菌、抗诱变剂的,抗癌,抗氧化,抗炎,antinociceptive属性(13- - - - - -15]。

最近,有越来越多的关注自然抗炎剂能够减少或防止神经炎症,再加上这一事实很少有药理研究关于精油的使用从管理/姜和姜黄根茎神经退行性疾病的预防。因此,从姜精油的抗炎作用和姜黄根茎在镉诱导老鼠的神经毒性评价是评估他们对一些细胞因子和海马和前额叶皮层乙酰胆碱酯酶的影响(疼痛)和腺苷脱氨酶(ADA)活动(管理/预防的重要酶相关的神经退行性疾病)。

2。材料和方法

2.1。化学物质

氯化镉(CdCl₂)是获得牛津大学实验室,孟买,印度,随着生理盐水。Acetylthiocholine碘化腺苷5,5′-dithiobis, 2-nitrobenzoic酸(DTNB)和Tris-HCl从Sigma-Aldrich购买,圣路易斯,密苏里州,美国。在这项研究中使用的所有其他试剂均为分析纯,水是玻璃蒸馏。

2.2。样本收集和提取精油

尼日利亚新鲜生姜(生姜罗斯科)和姜黄(姜黄Linn)根茎从当地市场购买Ado-Ekiti,尼日利亚。根状茎被识别和凭证标本与标本存放的植物科学实验室,理学院,Ekiti州立大学Ado-Ekiti,尼日利亚。

此后,鲜姜、姜黄根茎(每100克)受到hydrodistillation Clevenger装置3 h。获得的油在无水硫酸钠干燥。油被储存在4°C在冰箱里,直到用于实验。

2.3。动物

成年男性白化大鼠(12周)从动物育种单位获得医学院Afe Babalola大学,尼日利亚。老鼠保持良好的通风和照明条件下和接收标准饮食和水随意。动物照顾据美国国家卫生研究所(NIH)的道德准则。治疗协议按照道德的要求动物使用和保健委员会Afe Babalola大学Ado-Ekiti,尼日利亚。

2.4。实验设计

在目前的研究中,Cd是管理根据Goncalves et al。16]虽然精油的选择剂量(50毫克/公斤)是基于初步急性毒性研究,我们获得有益的结果,这种化合物在大鼠大脑(数据没有显示)。驯化期后,六十(60)大鼠随机分为6组,每组十(10)的动物;也就是说,(我)组我作为控制和大鼠组日常管理0.3% DMSO(精油的车辆)口服+生理盐水(1毫升/公斤)通过腹腔内(i.p)。(2)第二组收到每日注射生理盐水(1毫升/公斤)ip +精油从口头姜黄(50毫克/公斤)。(3)第三组收到每日注射生理盐水(1毫升/公斤)ip +精油从口头姜(50毫克/公斤)。(iv)第四组,收到0.3% DMSO的日常管理(车辆的精油)口服+ Cd i.p(2.5毫克/公斤)。(v)集团V收到姜黄精油的日常管理(50毫克/公斤)口服+通过i.p Cd(2.5毫克/公斤)。(vi)第六组接到姜精油的日常管理(50毫克/公斤)口服+通过i.p Cd(2.5毫克/公斤)。

实验持续了14天;Cd和精油都是日常管理。精油是准备在DMSO(0.3%)和口服药物前30分钟Cd注入。在治疗的最后一天天),动物禁食过夜和安乐死根据批准的协议。整个大脑前额叶皮层和海马被孤立和均质在100毫米磷酸钾,pH值7.5。匀浆是离心机在14000 g×10分钟在4°C,和上层清液用于后续酶化验。

2.5。量化的使用ELISA-Marker炎症细胞因子水平

整个大脑组织细胞因子(TNF -α、il - 6和il - 10)水平ELISA测定使用Quantikine免疫测定试剂盒(研发系统)根据制造商的指示。简而言之,96孔酶标与初级抗体致敏在室温下30分钟。然后,增加了组织样本和孵化另一个30分钟,洗净。洗后,二次抗体与过氧化物酶共轭添加和孵化。此后,细胞因子浓度测定用ELISA板读者。

2.6。对神经毒性生物标志物

2.6.1。乙酰胆碱酯酶的酶测定(疼痛)活动

疼痛活动测量使用96孔酶标读者基于Ellman et al。17]。在96孔板,25岁µL组织匀浆,紧随其后的是125µDTNB 25 L(3毫米µL的缓冲区,是补充道。结果混合是在30°C的环境,持续15分钟。最后,25µL(15毫米衬底的解决方案是添加和吸光度测量405海里每30年代2分钟使用一个微型板块分光光度计(分子器件、桑尼维尔CA)。吸光度是策划与时间和酶活性进行了计算。

2.6.2。腺苷脱氨酶(ADA)活性测定

ADA活性测定进行所述Guisti和Galanti [18]。总之,50μL组织匀浆,紧随其后的是50µL 21 mM的腺苷,pH值6.5,在37°C孵化了60分钟。吸光度测量使用微型板块在630 nm分光光度计(分子器件、桑尼维尔CA)。酶活力单位计算每升(U / L)。

2.7。气相色谱分析-质谱法(GC / MS)分析

挥发性化合物的样品进行了分析使用7820气相色谱仪耦合到5975 c惰性质谱仪(三轴探测器)与电子轰击源(安捷伦科技)。分离的化合物的固定相是HP-5毛细管柱涂以5%苯基甲基硅氧烷(30米长0.25 x 0.32毫米直径µ膜厚度)(安捷伦科技)。载气氦(他)用恒定流量的1.6毫升/分钟2.84 psi的初始公称压力和46厘米/秒的平均速度。1µL胸腔内注入的样品少分割模式在注射温度为260°C。清洗流量为21.5毫升/分钟0.50分钟总流25.8毫升/分钟;气体保护模式开启。烤箱最初设定在60°C(1分钟),然后在4°C /分钟增加到110°C(3分钟),然后8°C /分钟到260°C(5分钟),和10°C /分钟到300°C(12分钟)。运行时间为56.25分钟,3分钟溶剂延迟。在电子轰击电离质谱仪的操作模式在70 eV离子源温度为230°C,四极温度达到150°C,传输线温度为280°C。

鉴定化合物的保留时间的基础上,实现了Kovats指数,文献报道保留指数使用同源系列的正烷烃(C8-C25碳氢化合物,Polyscience Corp .)、奈尔斯,IL), coinjection与标准(西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州)和质谱库搜索(NIST,威利和国家统计局),通过比较文学与质谱数据。

2.8。总蛋白浓度

蛋白质浓度测定根据布拉德福德(1976)使用白蛋白的方法作为标准。这样做是为了获得的结果正常化。

2.9。统计分析

所有的结果都表示为均值±SEM进行一式三份。使用统计分析软件4.0 GraphPad棱镜(GraphPad软件公司,圣地亚哥,CA)。单向方差分析(方差分析),紧随其后的是邓肯的多个范围的测试,和使用的概率P < 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。细胞因子生物标志物

姜精油的效果从尼日利亚和姜黄根茎在某些细胞因子白介素1 (il - 10)、白介素6 (il - 6)和肿瘤坏死因子-α(TNF -α镉对大鼠)水平的数据所示1- - - - - -3。镉政府引起了il - 10水平显著降低(P < 0.05)和il - 6和TNF -相应增加α水平相比,控制。然而,cotreatment与生姜精油和姜黄粉末改变这些细胞因子的水平,防止降低il - 10和导致减少il - 6和TNF -α水平与Cd相比治疗组(数字1- - - - - -3)。

3.2。乙酰胆碱酯酶活性

图4代表从尼日利亚生姜精油的效果和姜黄根茎镉对大鼠海马和前额叶皮层疼痛活动(数据4(一)和4 (b))。我们观察到显著(P < 0.05),抑制作用海马和前额叶皮层疼痛活动的精油与Cd相比暴露组。

3.3。腺苷脱氨酶活性

此外,镉政府造成显著增加(P < 0.05)海马和前额叶皮层ADA活性相比,控制。然而,从生姜精油治疗和姜黄粉末,分别,防止ADA活性的增加与Cd相比治疗组(数字5(一个)和5 (b))。

3.4。gc - ms分析

为了证明精油的功效,我们为挥发油成分的精油使用气相色谱法分析根据他们的保留指数(RI) HP-5MS列和观察到的结果列在表中1。结果显示,主要从姜黄根状茎精油桉油精(76.46%),α萜品烯(4.41%)、γ萜品烯(3.32%)、p-Cymene(1.31%),和α松油醇(0.62%)α-Zingiberene (17.43%),β-Sesquiphellandrene(3.10%)、桉油精(2.75%)、Furfaral (1.76%),α松油醇(1.35%)、endo-Borneol(1.31%)、柠檬烯(1.21%)、Thunbergol(0.84%)、柠檬醛(0.56%)、环氧乙烷(0.45%)、石竹烯氧化物(0.42%)、橙花叔醇(0.31%)、exo-Norborneol (0.27%)、cis-Verbenol (0.12%)、Linaloloxide(0.06%),和角鲨烯(0.02%)是主要的精油化合物中发现生姜根茎。

4所示。讨论

淀粉样β蛋白的生产β分泌酶(环境)和γ分泌酶在额叶皮层和海马与AD的发病机制(2]。几项研究已经建立了神经炎症之间的关系和广告链接的参与重金属(2,3,19,20.]。

在目前的研究中,Cd政府造成降低il - 10(抗炎细胞因子),随之而来的il - 6和TNF -α(促炎细胞因子)相比,控制水平。以前的研究已经表明Cd可以诱导神经炎症病理机制涉及漏血脑屏障,小胶质细胞激活和免疫细胞的渗透进入大脑2,19,20.]。有趣的是,cotreatment从生姜精油,姜黄根茎防止这些细胞因子水平的改变(数字1- - - - - -3)。这是一个迹象表明,精油对炎症过程发挥免疫调节活动和提供神经保护和神经退化有关。这个活动可以归因于挥发性化合物(表1),都已经被广泛地研究过了的抗炎作用和抑制炎症介质的能力(9,14,21,22]。

完善,大脑动态交互与免疫系统通过神经通路调节炎症否则称为胆碱能抗炎通路(23]。这个途径包括迷走神经、乙酰胆碱(ACh)和α7亚基的烟碱乙酰胆碱受体23]。研究表明,一种神经递质,变弱生产TNF、il - 6,由人类巨噬细胞转录后的阶段的地震和改变释放il - 10,这表明这些内在的直接抑制作用促炎细胞因子的生产(23- - - - - -26]。

乙酰胆碱(ACh)迅速水解乙酰胆碱酯酶(疼痛)在神经突触26]。考虑的抗炎效果,可以表明疼痛活动是炎症的一个内在调节器。在目前的研究中,治疗两生姜精油和姜黄根茎疼痛抑制海马和前额叶皮层的活动与Cd相比暴露组(图4)。这个结果强调了在炎症和乙酰胆碱的关键作用提供了姜精油的功效和姜黄的乙酰胆碱酯酶抑制剂治疗与炎症反应相关的广告。以前的研究已经表明腹膜注射乙酰胆碱酯酶抑制剂降低大脑和血液中血清促炎细胞因子水平和降低小鼠血清乙酰胆碱酯酶活性27,28]。

有趣的是,这两个乙酰胆碱(ACh)和三磷酸腺苷(ATP)是智库相同的运动神经末梢在中枢神经系统和已经被认定为一个重要的神经递质参与neuroimmunomodulation[的过程29日- - - - - -31日]。ATP作为快速兴奋性神经递质和突触前神经调质(32]。其分解产物、腺苷在神经活动起着重要的调节作用和神经保护行动在病理条件下32,33]。在目前的研究中,腺苷脱氨酶(ADA)活性(一个重要的酶包括腺苷水平)的规定增加Cd-treated海马和前额叶皮层的老鼠相比,控制。然而,分别从生姜精油和姜黄粉末治疗防止ADA活性的增加与Cd相比治疗组(图5)。这一行动可能导致增加细胞外腺苷水平和炎症反应期间提供神经保护。

总之,本研究文档处理与生姜精油和姜黄根茎施加在Cd暴露大鼠免疫调节效果。疼痛和ADA活动的抑制这些油可以建议可能的作用机制的抗炎作用。因此,从生姜精油,姜黄根茎可以利用作为管理/抗炎补充剂预防与炎症相关的神经退行性疾病。

数据可用性

复制这些结果所需的原始/处理数据是可用的,但不能被共享。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

相应的作者是感激世界科学院(TWAS)对金融支持通过个人TWAS研究批准号FR3240293337及时完成这项研究。

引用

1. d·j·埃里森和d s Ditor抑郁症和认知障碍的常见炎症病因:治疗目标,“《神经炎症,11卷,不。1,第155 - 151页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. A . Ashok n . k . Rai s .特里帕西和s Bandyopadhyay”接触到、Cd, Pb-mixture诱发β,amyloidogenic应用处理和认知障碍通过氧化stress-dependent神经炎症在年轻的老鼠,”毒物学的科学,卷143,不。1,第80 - 64页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. a . Justin-Thenmozhi m . Dhivya Bharathi, r . Kiruthika t . Manivasagam a·博拉和m·m·艾萨”衰减铝chloride-induced神经炎症,通过一种蛋白激酶/ GSK-3半胱天冬酶的激活β通路的橘皮苷wistar鼠。”神经毒性的研究,34卷,不。8,463 - 476年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. m . e . Gerlofs-Nijland d . van Berlo f·r·Cassee r·p·f·Schins k . Wang和a·坎贝尔,“长期接触柴油机排气对促炎的影响在老鼠大脑的不同区域标记,”粒子和纤维毒理学卷,17日,广州2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. o . h . El-Habit和a·e·阿卜杜勒•穆纳姆”测试基因毒性、细胞毒性、氧化应激和镍镉及其添加剂的效果在雄性老鼠,”生物微量元素研究,卷159,不。1 - 3、364 - 372年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. b . Wang和y Du,“镉及其神经毒性作用,”氧化医学和细胞寿命文章ID 898034卷,2013年,12页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. h·刘和y周”,酒精提取的效果生姜玫瑰对小鼠肿瘤,免疫功能”卫生研究期刊》的研究31卷,第209 - 208页,2002年。视图:谷歌学术搜索
8. y .此外,h . Kikuzaki m . Hisamoto, n . Nakatani”从姜姜辣素相关化合物的抗氧化性能,”BioFactors,21卷,不。1 - 4、293 - 296年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. H.-L。周,Y.-M。邓,Q.-M。谢,“姜的挥发油的调节影响细胞免疫反应在体外和体内小鼠,”民族药物学杂志,卷105,不。1 - 2、301 - 305年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. g . Oboh a . o . Ademiluyi和a·j·Akinyemi氧化剂诱导脂质过氧化抑制乙酰胆碱酯酶的活动和一些老鼠大脑的两个品种的姜(生姜),“实验和毒素的病理,卷64,不。4、315 - 319年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. j·西迪基,c . Wilasrusmee Kittur s·d·布鲁赫,s . Wilasrusmee Kittur和d s .,”在体外十个常用草药对小鼠淋巴细胞免疫调节的影响,“《替代和补充医学杂志》上,8卷,不。4、467 - 475年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. g·k . Jayaprakasha l . j . m . Rao, k . k . Sakariah”的化学和生物活性C.longa”,食品科学与技术的趋势,16卷,不。12日,第548 - 533页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. k . Hastak n . Lubri s d Jakhi et al .,“石油和姜黄姜黄精油对细胞遗传学损伤患者口腔黏膜下纤维化”癌症的信,卷116,不。2、265 - 269年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. v . b . Liju k . Jeena和r . Kuttan”评估的抗氧化、抗炎和antinociceptive活动的精油姜黄。L。”印度药理学杂志》上的报告,43卷,不。5,526 - 531年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. k . Norajit: Laohakunjit, o . Kerdchoechuen“五姜科精油的抗菌效果,”分子》12卷,第2060 - 2047页,2012年。视图:谷歌学术搜索
16. f·t·j·f·冈卡尔维斯Nicoloso, p . da Costa et al .,”行为和大脑酶的变化与镉污染土豆盐或长期中毒后,“食品和化学毒物学,50卷,不。10日,3709 - 3718年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. g . l . Ellman k·d·考特尼诉Andres Jr .)和r·m·费瑟斯通”一个新的和快速比色测定乙酰胆碱酯酶的活动,“生化药理学,7卷,不。2、88 - 95年,1961页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. g . Guisti和b . Galanti”,比色法,”的酶分析方法艾德,h . Bergmeyer,页315 - 23日-化学,德国,1984年。魏因海姆视图:谷歌学术搜索
19. j·t·罗杰斯和d . k . Lahiri“金属和阿尔茨海默病、炎症的目标”目前的药物靶点,5卷,不。6,535 - 551年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 诉Venkataramani j·t·罗杰斯,c·沃什伯恩et al .,”一个角色为淀粉样前体蛋白翻译铁恢复体内平衡和改善铅神经毒性(Pb)”神经化学杂志,第494 - 479页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. j . s . Jurenka“姜黄素的抗炎特性,姜黄的主要组成部分:回顾临床前和临床研究,“替代医学检查,14卷,不。2、141 - 153年,2009页。视图:谷歌学术搜索
22. a . s . Bagad j·a·约瑟夫:Bhaskaran)和a·阿加瓦尔”turmerones curcuminoids比较评价抗炎活动,和水提物姜黄”,药理科学的进步ID 805756条,卷。2013年,7页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. v . a .巴甫洛夫w·r·帕里什m . Rosas-Ballina et al .,“大脑乙酰胆碱酯酶活性控制系统通过胆碱能抗炎通路、细胞因子水平”大脑、行为和免疫力,23卷,不。1,41 - 45页,2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. m . m . h . Wang Yu Ochani et al .,“烟碱乙酰胆碱受体α7亚基是一个重要的监管机构的炎症。”自然,卷421,不。6921年,第388 - 384页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. r·p·a·Gaykema S.-M。公园、c·r·麦基宾和l . e . Goehler“脂多糖抑制活化的tuberomammillary类系统伴随的行为:一种新型的目标immune-sensory途径,”神经科学,卷152,不。1,第287 - 273页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. m . Rosas-Ballina和k·j·特蕾西,“胆碱能控制炎症,”内科医学杂志,卷265,不。6,663 - 679年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. y Pollak,基利波山a、o . Ben-Menachem t .驻h . Soreq和r . Yirmiya乙酰胆碱酯酶抑制剂降低大脑和血液interleukin-1β生产。”神经病学年鉴卷,57号5,741 - 745年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. k . Ofek k . s . Krabbe t系统et al .,“胆碱能在人类志愿者在急性炎症状态调节,”分子医学杂志,卷85,不。11日,第1251 - 1239页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. Searl和e . m . Silinsky,”老切割使用的神经调节机制^{2 +}在运动神经末梢,”神经生理学杂志,卷99,不。6,2779 - 2788年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. h·齐默尔曼,“ATP和乙酰胆碱、平等的弟兄。”国际神经化学,52卷,不。4 - 5,634 - 648年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. g . Burnstock”P2X受体离子通道和炎症,”Purinergic信号,12卷,不。1,59 - 67年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. g . Burnstock”Purinergic信号和神经系统疾病:更新”,中枢神经系统和神经系统疾病药物靶点,16卷,不。3、257 - 265年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. d .里亚尔,d . r . Lara, r·a·达“腺苷在精神分裂症神经调节系统”,国际的神经生物学卷,119年,第449 - 395页,2014年。视图:谷歌学术搜索

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