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毒理学杂志》
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毒理学杂志》/2018年/文章

研究文章|开放获取

体积 2018年 |文章的ID 2069073 | https://doi.org/10.1155/2018/2069073

老鞋整天唾沫横飞Adi Prakoso、Puspitasari Chylen Setiyo里,Andika Aliviameita,西蒂Isrina Oktavia Salasia, Kurniasih, Ahmad Fadhli Dzil伊Baristha Walalangi, Kukuh Priya Utama,穆罕默德Fajar Al Huda Neneng香鱼'udiyah, ”的作用Sauropus androgynus(l)稳定。叶粉在肉仔鸡的饮食自然受到黄曲霉毒素的污染”,毒理学杂志》, 卷。2018年, 文章的ID2069073, 18 页面, 2018年。 https://doi.org/10.1155/2018/2069073

的作用Sauropus androgynus(l)稳定。叶粉在肉仔鸡的饮食自然受到黄曲霉毒素的污染

老鞋整天唾沫横飞Adi Prakoso,1 Puspitasari,2 Chylen Setiyo里,2 Andika Aliviameita,2 西蒂Isrina Oktavia Salasia,3 Kurniasih,4 Ahmad Fadhli Dzil伊,5 Baristha Walalangi,5 Kukuh Priya Utama,5 默罕默德Fajar Al Huda,5 和 Neneng香鱼苏'udiyah5

1大学兽医学院Wijaya魏仁芳泗水,印度尼西亚东爪哇

2大学学院综合实验室,穆罕默德协会Sidoarjo印度尼西亚东爪哇

3美国临床病理学,兽医学院,大学Gadjah马达思班,日惹,印尼

4病理学系,兽医学院,大学Gadjah马达思班,日惹,印尼

5医学实验室的本科生、程序技术,教师的健康,穆罕默迪亚大学Sidoarjo,印度尼西亚东爪哇

学术编辑器:You-Cheng Hseu
收到了 2018年5月30日
修改后的 2018年8月12日
接受 2018年9月10日
发表 2018年10月01

文摘

黄曲霉毒素(AF)的次生代谢物黄曲霉在存储和一般污染饲料。房颤引起降低增长速度、压力、家禽和死亡率增加,尤其是对肉用鸡产业。本研究的目的是确定的影响Sauropus androgynus(l)稳定。叶粉(SAP)鸡的饮食自然污染的AF。总共有108只鸡被分为6组:集团与基底我喂饮食(AF)无法察觉;第二组用基底饮食SAP (AF无法察觉)+ 5%;第三组与房颤(> 1磅的< 50磅);第四组与房颤(> 1磅的< SAP 50磅)+ 5%;十亿分之51 V房颤组(> < SAP 100磅)+ 5%;第六组与房颤(十亿分之> 101 < 150磅)+ 5% SAP。数据的体重,采食量和效率,相对体重的肝、肾、脾、法氏囊(BF),组织病理学,血液学的概要文件,血细胞凝集抑制(嗨)效价,房颤残渣,收集和免疫组织化学在天7日14日和21日。所有数据使用SPSS分析16。5%的补充SAP的鸡的饮食自然污染的AF显示体重的潜在影响性能,血液学的概要文件保护,增加细胞和体液免疫反应,减少房颤残留的器官,保护肝脏,肾脏,脾脏,和男朋友组织病理学,immune-expression增加CD4 + / CD8 +淋巴细胞比率(P < 0.05)。 It shows that 5% SAP can be used as the alternative herbal supplementation to depress the impacts of aflatoxicosis in the broiler chickens.

1。介绍

黄曲霉毒素(AF)的次生代谢物黄曲霉(1]。这鸡饲料中霉菌毒素是常见的。房颤污染水平饲料通常取决于饲料存储本身(2]。因素影响房颤水平的饲料如室温、湿度、存储和运输(3]。房颤导致家禽黄曲霉毒素中毒和污染成为一个严重的问题(4]。

先前的研究表明,家禽黄曲霉毒素中毒原因降低体重,降低采食量和效率(5),增加感染的风险(6)、压力、和死亡率(7]。黄曲霉毒素中毒导致血液病学的改变和血清生化概要文件(8),免疫抑郁、变性和坏死的肝、肾脏和淋巴器官9]。主要,房颤的影响在先前的研究获得的人工污染使用高剂量。然而,房颤的现实污染在家禽行业发生自然,不局限于一种类型的房颤也不同剂量的污染,也许更少或更高。因此,有必要探讨房颤的自然污染的影响家禽产业,如何处理它。

最重要的是房颤发现残留的鸡与房颤的饮食产品污染。残渣,房颤是抵抗食品加工和pos人类健康的风险10]。有必要开发新方法降低房颤的风险去面对这一公共卫生问题。传统医学是有效的。Sauropus androgynus是一个潜在的草药。前面的植物化学的研究表明美国androgynus叶中含有丹宁酸、甾醇、苯酚、糖苷类黄酮、多酚、生物碱(11]。这些组件被用作治疗糖尿病药(12),伤口愈合剂(13),抗炎剂(14),和抗氧化剂15]。抗氧化剂,如类黄酮和类胡萝卜素的干叶内美国androgynus作为抗氧化压力和抗癌药物,抑制诱变基因和酶(16]。类黄酮和类胡萝卜素都是负责解毒和可能被用作免疫调制剂和hepatoprotectant家禽黄曲霉毒素中毒。

先前的研究的局限性并不是评估的作用美国androgynus在家禽黄曲霉毒素中毒。因此,本研究的目的是评估的作用美国androgynus在肉鸡鸡的饮食自然污染的房颤等几个参数总值和组织病理学变化,血液学的概要文件,血细胞凝集抑制(嗨)效价,AF残渣,免疫组织化学。

2。材料和方法

2.1。的制备Sauropus androgynus(l)稳定。叶粉(SAP)

所有的实验过程进行综合实验室,大学教师的健康,穆罕默迪亚Sidoarjo从2017年11月到2018年4月。新鲜的叶子美国androgynus从草药商店获得Sidoarjo,印度尼西亚东爪哇。这是自来水清洗,在室温下干燥。干叶粉使用电动搅拌器。SAP在室温下是存储在了瓶子,直到所需的使用。

2.2。定性的植物化学成分筛选

SAP为每个定性测量约0.5克植物化学的测试。SAP使用标准筛选测试几个组件(如单宁,苯酚、皂苷、生物碱、黄酮糖苷,类胡萝卜素。单宁均衡的SAP测试蒸馏水和过滤,滤液滴氯化铁为1%。苯酚是测试的丹宁酸相似的方法;然而氯化铁的浓度是5%。皂苷是演示的起泡后的滤液沸腾。类黄酮的含量测试信田的,梅尔的生物碱,Borntrager糖苷的方法。然而,类胡萝卜素含量测试的混合滤液与氯仿和85%硫酸。定性的结果植物化学的测试表(表所示1)。
变量
丹宁酸 苯酚 皂苷 生物碱 类黄酮 配糖体 类胡萝卜素
+ + + + + + +
+ =现在;- =缺席。
表1
SAP的定性的植物化学成分分析。
2.3。实验动物

所有动物程序在这个研究是经伦理委员会批准的兽医学院,大学Gadjah马达思班,印度尼西亚。108刚肉鸡(DOC)应变柯布被分为6组。鸡被24小时光安排(每天16小时后光强度降低),30°C温度(每周逐渐减少),和65 - 70%的湿度,水和饲料随意访问。

2.4。实验过程和设计

所有鸡喂养肉用鸡起动饲料粗蛋白23% 3200千卡能量代谢。饲料成分是如前所述17),免费检测房颤。然后,饲料存储在不同的房间温度、湿度、自然和时间增加房颤水平。肉用鸡起动器的AF水平饲料常规测试使用酶联免疫吸附测定(ELISA),直到获得数范围的AF级别(0磅,> 1 51 < 50磅,> < 100磅,> 101 < 150磅)。基于前面的研究,那些房颤的污染水平被用于这项研究[18]。接下来,提要与适当的房颤与SAP的5%(表涨跌互现2)。
一天 集团(AF)
我 二世 三世 四世 V 六世
0 - - - - - - - - - - - - 25.21 20.00 51.02 110.07
3 - - - - - - - - - - - - 27 29.08 63.77 129.82
6 - - - - - - - - - - - - 23 17.85 70.00 107.73
9 - - - - - - - - - - - - 27.12 23.19 74.30 126.25
12 - - - - - - - - - - - - 26.84 29.41 78.26 136.15
15 - - - - - - - - - - - - 33.01 35.24 78.26 144.52
18 - - - - - - - - - - - - 40.15 39.44 81.10 138.66
21 - - - - - - - - - - - - 42.87 44.98 84.16 141.00
的意思是 - - - - - - - - - - - - 30.65±7.30 29.89±9.53 72.60±10.84 129.27±13.87
饲料达到合适的房颤治疗水平
临时(°C)。 5 5 40 40 40 40
湿度(%) 50 50 90年 90年 90年 90年
潜伏期(天) - - - - - - - - - - - - 7 7 14 21
SAP (%) 0 5 0 5 5 5
- = AF /没有孵化无法察觉。
表2
房颤水平在鸡的饲料从天0到21 (ppb)在研究过程中。

在这项研究中,共有108名医生被分成6组,每个包含18个鸡。每一组放置在殖民地凯奇和组成的三个采样周期每段6只鸡。组我一个对照组和美联储与基底的饮食(AF)无法察觉。第二组用基底饮食SAP (AF无法察觉)+ 5%;第三组与房颤(> 1磅的< 50磅);第四组与房颤(> 1磅的< SAP 50磅)+ 5%;十亿分之51 V房颤组(> < SAP 100磅)+ 5%;第六组与房颤(十亿分之> 101 < 150磅)+ 5% SAP治疗进行了21天。六只鸡从每组实施安乐死在天7、14、21。本研究设计进行确定的保护限制SAP在房颤风险低,中间,和高水平的污染。

2.5。疫苗接种

岁的3天,所有组接种鸡新城疫(ND)使用Medivac ND Hitchner B1疫苗通过目镜路线根据制造商的建议。

2.6。体重、采食量、饲料转化率和相对器官重量测量

录音鸡的体重和采食量(FI)进行了7天,14和21。比较饲料效率确定饲料转化率(货代)使用以下公式:

从每组六只鸡是随机挑选的,安乐死颈椎脱位,尸体剖检7天,14和21。只有在21天,相对体重的肝、肾、脾、和男朋友称重和计算使用以下公式:

测量后,肝脏,肾脏,脾脏,男朋友被分为2部分。第一部分存储在10%中性缓冲福尔马林(NBF)的组织病理学和免疫组织化学和第二个无菌塑料和保存在冰箱使用ELISA AF残留测试。

2.7。血液和血清样本

每组六收集血液样本在天7日14日和21之前牺牲。通过对颈静脉血液收集使用1毫升注射器(26 g×1/2“(45 0×13毫米))。血液学的概要文件检查的血液是存储在管与乙二胺四乙酸(EDTA),在4°C保存在冰箱里。内的血液样本也收集管没有EDTA和保存在室温直到凝结的然后离心机在3.000 rpm 15分钟。血清是储存在-20°C到测试。

2.8。血液学的概要文件检查

血液学的的血液样本进行分析测试,如总红细胞/红细胞(RBC),白细胞总数/白细胞(WBC)、血红蛋白(Hgb),包装细胞体积(PCV),意思是血细胞比容(MCV),意思是微粒血红蛋白(妇幼保健),意思是微粒血红蛋白浓度(MCHC)和微分的白细胞计数。血涂片检查是由染色染色,光学显微镜下观察到1000×放大。血液学的测试都是使用标准的检查方法。

2.9。血细胞凝集抑制(你好)

嗨测试进行血清根据世界动物卫生组织手册标准诊断测试(19]。你好,测试的结果被表示为几何平均效价(GMT),按照公式计算20.]:

2.10。酶联免疫吸附试验(ELISA)

房颤的ELISA进行计算总水平在肉鸡饲料和器官。样品重量大约2 g,与70%甲醇提取,在室温下,单一化,离心机。的上层清液中加入了磷酸盐缓冲剂的盘子和稀释,然后一个整除(50µL)与AF-peroxidase共轭反应(50µ(50 L)和鼠标抗体解决方案µL)对房颤。样本在30分钟孵化室温度。磷酸盐缓冲剂的盘子洗,tetramethylbenzidine (50µL)和过氧化脲(50µL)被添加,在30分钟在黑暗中孵化。停止试剂(100µL)添加和溶液的吸光度测定波长450纳米。房颤的总水平使用标准曲线计算。

2.11。组织病理学和免疫组织化学

器官(肝、肾、脾和BF)从每一组固定,脱水,石蜡和嵌入。薄片(5µ米)被安装在载玻片,用苏木精和伊红染色())。脾免疫组织化学、薄片和男朋友在载玻片上涂上了赖氨酸。幻灯片CD4 +与单克隆抗体染色(anti-rat CD4 +、Novocastra RTU-CD4-1F6,猫。PA0427数量)和CD8 + (anti-rat CD8 +、Novocastra rtu - CD8 - 295只猫。PA0183)参加这个产品的标准协议。

2.12。形态测量学

两个histopathologists眼罩条件下分析了组织病理学幻灯片避免偏见。使用半定量的评估进行了评分系统从0到4,如下:(无(0);(1)最小;轻度(2);中(3);严重(4))。每个幻灯片对几个参数(表进行了分析3)。
器官 参数
肝 坏死,perilobular和炎症、水肿的和/或脂肪变性,胆管增生
肾脏 坏死、炎症、变性
脾 损耗的纸浆、炎症、充血
男朋友 损耗的淋巴滤泡、炎症、充血
表3
半定量的评分系统对家禽黄曲霉毒素中毒。

脾脏的免疫组织化学幻灯片和男朋友被ImageJ检查软件对面积的百分比表达CD4 +和CD8 +淋巴细胞。然后,百分比区域immune-expression CD4 +和CD8 +测量CD4 + / CD8 +淋巴细胞的比例。

2.13。分析数据

16通过SPSS对数据进行分析和提出的平均值±标准偏差(SD)。体重,血液病学的概要文件,血细胞凝集抑制(嗨)效价,和AF残留分析双向方差分析和事后测试;相对器官重量分析一维方差分析和事后测试;手,克鲁斯卡尔-沃利斯的组织病理学和免疫组织化学数据进行分析测试和Man-Whitney U测试。一个概率值(P0.05被认为是重要的。

3所示。结果

3.1。体重、采食量(FI)、饲料转化率(货代)

结果表明,5% SAP有潜在影响肉鸡的体重的饮食与污染的自然AF (P< 0.05)。5%的补充液显示更好的增加体重在第二组中,IV, V,尽管与房颤组IV和V的饮食喂养自然污染(> 1磅的< 50磅> 51磅< 100)水平。令人惊讶的是,第六组没有显著不同的体重与集团。然而,第三组显示了关于体重比其他人低性能(P< 0.05)。房颤污染的最低水平(> 1磅的< 50磅)在第三组影响肉鸡的体重增加。这是支持的最低FI和货代在第三组比其他人。另一方面,5%的补充SAP在第六组最高的AF污染没有显示与控制有关的差异FI和货代。证明5% SAP有潜在影响肉鸡的体重在增加房颤的风险敞口(> 101磅的< 150)水平(表4)。
参数 集团 一天
7 14 21
体重(g) 我 120.27±2.70 338.67±14.49 683.38±13.32
二世 127.13±3.03 353.40±5.95 695.89±12.45
三世 108.95±5.51 309.83±7.26 641.19±22.50
四世 125.44±3.43 355.71±4.79 695.80±8.73
V 127.13±2.23 353.22±4.97 690.13±16.55
六世 120.16±2.44 337.22±11.25 682.53±14.11
FI
(克)		 我 171.00±0.89 562.33±2.33 1217.33±11.69
二世 171.00±0.89 563.00±1.67 1213.00±7.69
三世 164.83±4.07 539.83±15.06 1155.16±51.80
四世 170.83±1.47 562.33±1.86 1215.33±14.50
V 169.33±1.50 562.50±1.51 1213.33±4.30
六世 172.00±2.00 564.17±3.54 1226.00±6.75
货物收据 我 1.42±0.03 1.66±0.07 1.78±0.03
二世 1.34±0.03 1.59±0.02 1.74±0.04
三世 1.51±0.09 1.74±0.03 1.80±0.06
四世 1.36±0.03 1.58±0.02 1.74±0.02
V 1.33±0.02 1.59±0.02 1.75±0.04
六世 1.43±0.03 1.67±0.05 1.79±0.03
/ 不同的上标在同一列显示显著不同的值(P< 0.05)。
表4
SAP 5%体重的影响,FI,和货代的肉仔鸡的饮食自然污染的AF 7点14和21天的年龄。
3.2。相对器官重量

宏观上,没有显著差异的相对重量肝组(P > 0.05)。然而,改变总值(肿胀和苍白)被发现在肝脏V组样本(2/6);黄颜色的肝组六世(1/6样品),类似于第三组(图1)。它是由高曝光的房颤的影响鸡的肝脏组织V和VI。AF的高积累在肝脏改变其外观,经组织病理学变化,显示了在第六组脂肪变性和胆管增生。然而,它不发生大规模。上的显著差异存在相对体重组的肾脏和脾脏三世和VI (P < 0.05)。相对器官重量的显著的增加发生在鸡的肾和脾组第三和第六。类似的结果是显示在男朋友;不过是它的标志显著减少这个器官的相对体重组第三和第六。然而,相对体重严重下降的男朋友被第三组显示,而且由于淋巴滤泡损耗(表怀疑5)。
集团 相对器官重量(克/ 100克体重)
肝 肾脏 脾 男朋友
我 2.26±0.06 0.64±0.03 0.14±0.03 0.30±0.01
二世 2.29±0.01 0.64±0.02 0.14±0.02 0.31±0.02
三世 2.31±0.02 0.71±0.01 0.22±0 0.18±0.02
四世 2.25±0.04 0.65±0.02 0.14±0.02 0.30±0.01
V 2.26±0.38 0.64±0.03 0.15±0.02 0.30±0.05
六世 2.29±0.05 0.70±0.01 0.20±0.01 0.23±0.05
/ 不同的上标在同一列显示显著不同的值(P< 0.05)。
表5
影响5%的SAP相关器官重量的肉仔鸡的饮食自然污染的房颤在21天的年龄。
(一)”name=
(一)
(b)”name=
(b)
(c)”name=
(c)
(d)”name=
(d)
图1
宏观检验鸡的肝脏在21天。鸡肝的第二组显示正常和棕色的颜色和外观表面光滑(6/6样品)(a);第三组显示增大,钝角,苍白,表面和出血(6/6样品)(b);集团V显示增大、钝角和苍白的样本(2/6)(c);第六组显示淡黄色的颜色,它被怀疑由于脂肪变性(1/6)样品(d)。
3.3。血液学的概要文件

本研究表明,房颤有潜力对肉鸡的血液学的剖面变化的影响。团体第三和第六显示显著差异与另一组关于血红蛋白和妇幼保健(P< 0.05)。它证明房颤与低水平(50磅,少)提要中影响鸡与更高层次的血液学和互惠(100磅甚至更多)。第三组的总红细胞显著降低(P< 0.05);否则,总红细胞组间我和VI没有表现出任何差异(P> 0.05)。然而,有一个关于血红蛋白显著减少和妇幼保健共同在VI表明normocytic-hypochromic贫血组(21]。协同的结果显示在血涂片评价表明normocytic-hypochromic贫血在VI(图组2)。报道了不同贫血血液学的概要指出macrocytic-hypochromic在第三组,贫血。它证明了增加的MCV值和减少MCHC III(组P< 0.05)。红细胞上的另一个显著差异显示了第二组治疗SAP没有房颤污染(5%P< 0.05)。这些结果显示,5%的SAP应用作为鸡的天然饲料添加剂。总红细胞SAP补充可以增加5%的鸡。鸡红细胞总量的增加支持的新陈代谢和血液学资料保护在黄曲霉毒素中毒(表6)。
参数 集团 一天
7 14 21
加拿大皇家银行
(×106/µL)		 我 2.17±0.08 2.40±0.03 2.74±0.06
二世 2.25±0.04 2.50±0.06 2.85±0.05
三世 2.10±0.17 2.09±0.05 2.18±0.09
四世 2.23±0.03 2.39±0.19 2.81±0.07
V 2.13±0.07 2.40±0.08 2.64±0.07
六世 2.24±0.05 2.40±0.08 2.63±0.14
PCV (%) 我 26.92±0.48 27.41±0.34 28.74±0.41
二世 27.31±0.40 28.23±0.35 28.72±0.32
三世 27.27±0.30 27.87±0.19 27.25±0.34
四世 27.26±0.29 28.04±0.45 28.46±0.39
V 27.07±0.28 28.21±0.39 28.58±0.30
六世 27.21±0.33 28.08±0.33 27.05±0.84
血红蛋白(g / dl) 我 10.36±0.27 10.72±0.18 11.22±0.09
二世 10.52±0.23 10.80±0.08 11.33±0.07
三世 10.22±0.13 10.25±0.17 10.40±0.30
四世 10.52±0.24 10.77±0.02 11.29±0.15
V 10.52±0.31 10.69±0.31 11.16±0.24
六世 10.36±0.34 10.40±0.26 10.90±0.22
MCV (fl) 我 124.16±5.57 113.86±1.79 104.96±3.02
二世 121.44±3.82 112.92±3.79 100.84±2.75
三世 129.67±9.97 133.28±4.30 125.09±4.82
四世 122.20±2.89 117.87±11.57 101.18±3.32
V 126.98±5.84 117.64±4.86 108.12±3.10
六世 121.16±2.59 117.16±4.54 102.88±5.16
妇幼保健(Pg) 我 47.76±2.01 44.52±0.69 40.97±0.95
二世 46.78±1.22 43.21±1.35 39.76±0.93
三世 48.80±4.04 49.00±1.70 47.74±2.31
四世 47.16±1.31 45.25±3.72 40.13±0.96
V 49.35±2.15 44.58±1.40 42.24±1.54
六世 46.15±1.68 43.39±1.86 41.47±1.76
MCHC (%) 我 38.47±0.82 39.11±0.50 39.04±0.40
二世 38.54±1.24 38.27±0.47 39.44±0.46
三世 37.62±0.46 36.76±0.46 38.16±1.02
四世 38.60±0.85 38.44±0.68 39.67±1.00
V 38.88±1.19 37.94±1.57 39.06±0.62
六世 38.09±0.96 37.03±0.56 40.34±1.53
/ 不同的上标在同一列和参数显示显著不同的值(P< 0.05)。
表6
影响5%的SAP在血液学的概要文件(PCV红细胞,血红蛋白,MCV、妇幼保健、MCHC)污染的自然饮食的肉鸡AF 7点14和21天的年龄。
(一)”name=
(一)
(b)”name=
(b)
(c)”name=
(c)
图2
显微照片鸡红细胞的饮食自然污染的AF 21天。红细胞的正常外观均匀大小的组我(a);第二组(b);苍白的颜色和主要小红细胞的大小在VI表明normocytic-hypochromic贫血组(c),染色,1000×。

SAP补充5%鸡肉的提要显示显著影响总白细胞在第二组中,IV和V (P< 0.05)。所示的类似的效应对总白细胞第六组,甚至没有任何明显的差异与对照组相比P> 0.05)。第三组有显著减少关于白细胞,揭露房颤不SAP补充(P< 0.05)。然而,有关于血液异嗜性的显著差异在第四组,V和VI,类似于组II相比,组我P< 0.05)。手,第三组显示了显著下降有关循环与别人相比异嗜性的(P< 0.05)。有减少循环淋巴细胞在第三组(P< 0.05)和增加循环淋巴细胞在第二组中,IV, V与群体相比我和六世(P< 0.05)。证明SAP可以用来增加5%的细胞反应的肉鸡和没有房颤风险。作为细胞反应H / L的比例显著增加一组V和VI (P< 0.05);它显示,5% SAP支持鸡的免疫学反应在黄曲霉毒素中毒预防严重的器官损伤。在第四组II和单核细胞明显减少(P< 0.05),淋巴细胞的反应增加。有显著下降有关团体第三和第六的嗜酸性粒细胞(P< 0.05),嗜碱粒细胞与别人相比在第三组显著增加(P< 0.05)(表7)。
参数 集团 一天
7 14 21
白细胞(×103/µL) 我 20.96±6.24 22.70±1.74 24.11±3.92
二世 22.47±3.13 24.00±2.96 25.35±3.72
三世 19.39±48.40 20.70±42.89 21.36±43.66
四世 22.37±3.43 24.03±3.55 25.40±5.25
V 22.05±7.06 24.05±2.42 24.98±4.70
六世 21.20±4.97 22.45±1.33 24.11±5.84
异嗜性的(×103/µL) 我 4.37±2.55 5.07±2.96 5.58±4.91
二世 4.98±3.06 5.59±3.32 5.99±2.15
三世 4.10±4.54 4.51±2.85 4.94±3.09
四世 4.73±2.57 5.48±2.99 6.09±1.40
V 4.81±2.08 5.73±1.18 5.58±4.11
六世 4.55±3.36 5.65±1.57 6.62±9.17
淋巴细胞(×103/µL) 我 12.47±3.22 13.73±4.02 14.23±4.57
二世 14.15±3.50 14.96±4.09 15.79±3.31
三世 11.25±3.96 12.34±2.38 12.78±4.23
四世 13.98±6.24 14.90±3.07 15.87±5.01
V 12.61±7.71 14.54±1.34 15.24±5.19
六世 12.37±5.54 13.66±2.95 14.90±2.98
比H / L 我 0.35±0.01 0.36±0.02 0.39±0.03
二世 0.35±0.02 0.37±0.01 0.37±0.01
三世 0.36±0.03 0.36±0.02 0.38±0.03
四世 0.33±0.02 0.36±0.01 0.38±0.01
V 0.38±0.02 0.39±0.00 0.36±0.03
六世 0.36±0.03 0.41±0.01 0.44±0.02
单核细胞(×103/µL) 我 2.09±1.77 2.11±1.15 2.41±2.22
二世 1.94±1.07 1.91±4.80 1.56±0.96
三世 1.97±1.36 2.37±2.30 2.17±0.94
四世 1.56±3.24 1.76±1.25 1.60±1.35
V 2.16±2.23 2.04±1.46 2.16±3.98
六世 2.08±1.93 2.28±2.24 2.09±4.06
嗜酸性粒细胞(×103/µL) 我 1.77±1.52 1.55±2.25 1.76±4.92
二世 1.23±3.92 1.43±2.11 1.73±2.01
三世 1.70±4.40 1.03±2.41 0.99±3.98
四世 1.71±2.61 1.80±2.78 1.61±3.96
V 2.05±1.51 1.60±3.01 1.74±2.74
六世 1.90±3.09 0.86±1.67 0.48±3.47
嗜碱粒细胞(×103/µL) 我 0.24±2.09 0.22±2.04 1.12±2.03
二世 0.14±1.15 0.08±1.25 0.25±2.30
三世 3.56±2.83 4.17±2.65 4.63±3.66
四世 0.36±5.83 0.08±1.25 0.21±3.02
V 0.40±2.43 0.11±1.31 0.24±2.21
六世 0.28±2.88 0±0 0±0
/ / 不同的上标在同一列和参数显示显著不同的值(P< 0.05)。
表7
影响5%的SAP在血液学的概要文件(WBC和微分白细胞计数)污染的自然饮食的肉鸡房颤,14日和21天的年龄。
3.4。血细胞凝集抑制

7天,鸡在第二组中显示最大限度地增加对ND疫苗的格林尼治时间与其他组相比。其次是团体IV和V,尽管增长慢于格林尼治时间组II。令人惊讶的是,格林尼治时间对ND疫苗在第六组我和组不显示任何差异。这个结果证明5% SAP潜在影响对效价ND postvaccination生产保持稳定。手,第三组显示的最低响应postvaccination格林尼治时间有关。怀疑是由于房颤的影响在烤焙用具的淋巴器官,损害第三组(图产生抗体3)。


图3
5%的SAP几何平均效价的影响(格林尼治时间)值对ND疫苗的肉用仔鸡的饮食与自然污染的房颤。
3.5。黄曲霉毒素残留

AF残留的器官(肝、肾、脾和BF)在组我,二,四没有检测到7天,14和21。房颤的类似结果残留组织器官的三世,V,和VI没有检测到7天,14日和21日,除了肝脏在21天。有一个检测残留物的房颤组肝脏三世,V和VI在21天。它可能因为房颤的累积效应在这些组。然而,发现房颤水平V组的肝是十亿分之0.10±0.09(4/6样品),并在第六组是十亿分之0.24±0.09(6/6样品)。手,第三组显示最高的AF残渣十亿分之0.28±0.58(6/6样品)。5%的补充液对鸡的饲料可能导致减少房颤残留在肝脏及其他器官。

3.6。组织病理学和免疫组织化学

在这项研究中,第三组与房颤(> 1磅的< 50磅)显示严重肝坏死和变性与他人相比(P< 0.05)。肝坏死和变性在第三组开始7和增加14天、21天在房颤风险(P< 0.05)。根据结果,没有组织我和其他人之间的差异,除了第三组对肝坏死和变性(P> 0.05)。类似的结果对于perilobular和小叶间炎症和胆管增生明显显示在第三组相比其他人(P< 0.05)。甚至证明了最小剂量的AF污染采取肝脏组织病理学变化的影响(表8)。没有差异对肝脏组织病理学(炎症和胆管增生)天7和14组间我,二世,IV, V和VI (P> 0.05)。肝脏炎症(perilobular和小叶间)和胆管增生组V增加21天;然而不像第三组严重。5%的SAP有潜在影响肝脏保护在房颤风险(表8)。肝脏的显微照片如图所示4。
参数 集团 一天
7 14 21
坏死 我 0±0 1.00±1.09 0.50±0.54
二世 0±0 0.66±0.51 0.50±0.54
三世 0.33±0.51 0.83±0.98 2.16±1.83
四世 0±0 1.00±0.89 0.50±0.54
V 0±0 0.50±0.54 0.50±0.54
六世 0±0 0.50±0.54 1.33±1.62
Perilobular炎症 我 0±0 0.33±0.51 0.16±0.40
二世 0±0 0.16±0.40 0.16±0.40
三世 0±0 0.83±0.75 2.33±1.86
四世 0±0 0.33±0.51 0.16±0.40
V 0±0 0.33±0.51 1.16±1.47
六世 0±0 0.33±0.51 1.50±1.37
小叶间的炎症 我 0±0 0±0 0±0
二世 0±0 0±0 0±0
三世 0±0 0.50±0.54 1.66±1.96
四世 0±0 0±0 0±0
V 0±0 0±0 0.83±1.60
六世 0±0 0±0 1.16±1.47
Hydrophic和/或脂肪变性 我 0.50±1.22 0.66±1.63 0.33±0.51
二世 0±0 0.16±0.40 0.33±0.51
三世 0.50±0.54 1.00±0.89 2.00±1.09
四世 0.16±0.40 0.16±0.40 0.66±0.81
V 0.16±0.40 0.16±0.40 1.33±1.50
六世 0.16±0.40 0.16±0.40 1.33±1.50
胆管增生 我 0±0 0±0 0.33±0.81
二世 0±0 0±0 0.16±0.40
三世 0±0 0.66±1.03 3.50±0.83
四世 0±0 0±0 0.16±0.40
V 0±0 0±0 0.83±0.98
六世 0±0 0±0 2.00±1.67
/ / 不同的上标在同一列和参数显示显著不同的值(P< 0.05)。
表8
5% SAP对肝脏组织病理学的影响污染的自然饮食的肉鸡AF 7点14和21天的年龄。
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图4
5% SAP对肝脏组织病理学的影响在肉用仔鸡的饮食与自然污染的AF 21天。肝脏肝细胞的正常组2 (a);严重的脂质变性与单核细胞浸润在第三组样本(6/6)(b);脂滴(箭头所指)肝细胞的细胞质内由于脂质变性在第四组样本(1/6)(c);脂质变性(箭头)和正弦信号拥堵(c)在V组样本(2/6)(d);脂质变性(箭头)和疏水变性(箭头)和单核细胞浸润(m) V组样本(2/6)(e);胆管增生(p)和单核细胞浸润(m)在门户三地区在第六组样本(3/6)(f);当地的单核细胞浸润(m)在第六组(3/6)样品(g),他走时,10×(b, f);40×(e);100×(c、g); 1000× (a, d).

第三组显示了最严重的肾脏组织病理学变化(坏死、变性和炎症),而与其他国家(P< 0.05)。炎症细胞浸润所示群体的增加V和VI在14天、21日(P< 0.05)。然而,肾小管的坏死和变性组V和VI没有任何显著差异与组织我相比,二和四世(P>(表0.05)9)。脾和男朋友组织病理学检查显示,所有组没有差异(P> 0.05),只有五(四个来自第三组,一个组(六)共108个样本的脾在这项研究中显示的严重损耗纸浆和伴随着交通拥堵和炎症;只有七(六组三世和一个来自组(六)共108个样本的男朋友显示淋巴滤泡的损耗,炎症,充血。脾脏和男朋友样本显示了严重的组织病理学改变是来自集团第三和第六天21(图5)。这个结果表明,5%的SAP补充肉鸡饲料可以用来抑制房颤的影响,增加肉用鸡表演。
参数 集团 一天
7 14 21
坏死 我 0±0 0.16±0.40 0.50±0.54
二世 0±0 0.16±0.40 0.33±0.51
三世 0±0 1.00±0.89 2.16±0.75
四世 0±0 0.16±0.40 0.50±0.54
四世 0±0 0.16±0.40 0.66±0.81
六世 0±0 0.16±0.40 0.66±0.81
变性 我 0±0 0.33±0.51 0.50±0.54
二世 0±0 0.16±0.40 0.33±0.51
三世 0±0 0.83±0.75 1.50±1.04
四世 0±0 0.50±0.83 0.66±1.21
V 0±0 0.33±0.51 0.50±0.83
六世 0±0 0.33±0.51 0.50±0.83
炎症 我 0±0 0±0 0±0
二世 0±0 0±0 0±0
三世 0.16±0.40 1.00±0.89 1.33±1.21
四世 0±0 0±0 0.16±0.40
V 0±0 0.50±0.83 0.50±0.83
六世 0±0 0.50±0.54 0.50±0.54
/ 不同的上标在同一列和参数显示显著不同的值(P< 0.05)。
表9
5% SAP的肾脏组织病理学的影响肉仔鸡的饮食自然污染的AF 7点14和21天的年龄。
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图5
影响5%的SAP在肾、脾、和男朋友组织病理学在肉用仔鸡的饮食与自然污染的AF 21天。肾脏的正常组二(一);在间质单核细胞浸润(m)坏死(箭头)的肾小管上皮的第三组(b);和组V (c);坏死(箭头)和变性(箭头)的肾小管上皮的第六组(d);严重的损耗(箭头)脾白髓的第三组(e);大规模拥堵(c),损耗的淋巴细胞(箭头),多形核细胞浸润(p)脾白髓的第六组(f);损耗的淋巴滤泡(箭头),大量的单核细胞浸润(m),和拥堵(c)的男朋友在第三组(g);不规则的淋巴滤泡的大小由于损耗多形核细胞浸润的淋巴细胞(箭头所指)(p)在第六组(h)的男朋友。他走时,40×(b);100×(d, e, g); 1000× (a, c).

脾和男朋友是重要的免疫器官。在脾脏和男朋友实质可以发现,t细胞亚群如CD4 +和CD8 +淋巴细胞。最小剂量的AF(> 1磅的< 50磅)暴露影响immune-expression CD4 +和CD8 +淋巴细胞。这是证明了这项研究的结果表明减少CD4 +和CD8 +淋巴细胞在脾脏和法氏囊(P< 0.05)。这项研究显示,5%的肉鸡增加immune-expression SAP补充CD4 +淋巴细胞在脾脏组织二世(P< 0.05)(图6(一))和增加CD4 +淋巴细胞在男朋友的immune-expression在第二组中,IV和V (P< 0.05)(图7(一))。然而,并没有显著差异的immune-expression CD8 +淋巴细胞在组织我男朋友,二世,IV, V和VI (P>(图0.05)7 (b))。所有集团处理5% SAP有更好的比CD4 + / CD8 +淋巴细胞在脾脏和男朋友而组织我和III (P< 0.05)(数据8(一个)和8 (b))。这个结果证明5% SAP补充保护对黄曲霉毒素中毒的免疫器官的影响。高immune-expression CD4 +和CD8 +淋巴细胞在脾脏和男朋友发生在白髓和淋巴滤泡(图的中心9)。

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(b)
图6
影响5%的SAP的immune-expression CD4 + (a)和(b) CD8 +淋巴细胞在脾脏的肉仔鸡的饮食自然污染的AF 7点14和21天的年龄。 / 不同的上标显示显著不同的值(P< 0.05)。
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(b)
图7
影响5%的SAP的immune-expression CD4 + (a)和(b) CD8 +淋巴细胞的男朋友肉鸡的饮食自然污染的AF 7点14和21天的年龄。 / 不同的上标显示显著不同的值(P< 0.05)。
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图8
影响SAP 5%的比例在脾脏CD4 + / CD8 +淋巴细胞(a)和男朋友(b)污染的自然饮食的肉鸡AF 7点14和21天的年龄。 不同的上标显示显著不同的值(P< 0.05)。
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(d)
图9
影响5%的SAP的immune-expression CD4 +和CD8 +淋巴细胞在脾脏和男朋友肉用仔鸡联储饮食自然污染的AF 21天。高immune-expression CD4 +淋巴细胞(箭头)(a);低immune-expression CD8 +淋巴细胞(b)鸡的脾白髓的V组;高immune-expression CD4 +淋巴细胞(箭头)(a);低immune-expression CD8 +淋巴细胞(b)的鸡淋巴滤泡的男朋友在集团诉包含IHC抗体anti-CD4 +,轻拍,100×(a), 1000×(b);包含IHC抗体anti-CD8 +,轻拍,100×(c), 1000×(d)。

4所示。讨论

房颤是一种真菌毒素产生的答:flavus并且可以污染广泛的商品。绝大多数房颤污染的基于组件的鸡饲料生产和影响的采食量和增长22];减少鸡蛋和肉类生产(23]。减少房颤的影响鸡需要补充新的基于草药配方,如美国androgynus。本研究证明5% SAP提高肉鸡的体重组中有或没有房颤污染。肉鸡的体重的增加美联储饮食补充5% SAP显示更好的生长性能,表明高肌肉,减少FI和货代与对照组相比。它表明高鸡肌肉形成的性能。这个发现支持了先前的研究显示SAP内部的生物营养价值影响抵抗疾病和增强非特异性免疫反应和生长性能(24),提高肉鸡肉质(25]。

房颤的潜在影响是诱变,产生畸形的,hepatocarcinogenic [26]。组织病理学的改变在宏观上也可以发现黄曲霉毒素中毒的相对重量检查肝脏和其他内部器官如肾脏和淋巴器官。肝脏、肾脏和淋巴器官被认为是家禽黄曲霉毒素中毒的靶器官(27]。房颤是等宏观损伤增加肝脏和肾脏的相对权重,减少淋巴器官(28]。本研究表明,显著增加肾脏和脾脏的相对重量和减少的男朋友发生在第三组和VI在21天;然而,它没有其他组(表5)。本研究证明了SAP有潜在影响的保护内脏器官在黄曲霉毒素中毒。它显示的最小的宏观变化对肝、肾、脾、和男朋友在第六组暴露在高水平的AF污染(十亿分之> 101 < 150含量5% SAP补充。

每一个营养通过代谢过程产生红细胞流传。在家禽黄曲霉毒素中毒,房颤压低haemopoietic组织可能导致减少红细胞生产(29日]。红细胞的异常引起的等离子体渗透性的变化。在这项研究中,房颤的最低水平(> 1磅的< 50磅)在第三组鸡的血液病学的状况变化,比如macrocytic-hypochromic贫血。这可能是由于越来越多的循环网织红细胞在血液中作为补偿响应组织营养需求。另一方面,SAP补充增加了5%的总红细胞显著和维护的总红细胞组的饮食自然房颤与污染控制。鸡的红细胞总量的增加有可能影响免疫形成因为鸟类红细胞可以参与免疫应答通过生产cytokine-like因素(30.]。加拿大皇家银行以突出的作用为输送氧气到全身;因此,大量的红细胞是协同的高氧等离子体。氧气就像一个三明治,高度支持的红细胞和血红蛋白。房颤(100和150含量可以减少血红蛋白浓度在烤焙用具,它是前面提到的研究(8]。然而,肉用鸡SAP补充5%的饲料保持稳定的血红蛋白在房颤风险因为它的铁(铁)内容支持血红蛋白的形成31日]。关于血红蛋白的差异和妇幼保健是减少在第六组由于受损的铁的吸收32];然而,normocytic-hypochromic贫血是一种生理保护期间造成的慢性接触在肝脏毒素(尤其是房颤)以及寄生肝脏感染(33]。激活细胞因子在慢性感染,中毒,和网状内皮系统诱导铁稳态和红细胞寿命的变化导致normocytic-hypochromic贫血的发病机制(34,35]。

与红细胞,白细胞不表现出循环系统的寿命,而是离开循环系统和渗透到组织在应对随机次化学引诱物刺激(36]。黄曲霉毒素中毒期间,有一些在第三组白细胞总数的减少,类似于之前的研究37];然而,显著增加组白细胞总数的5%的SAP补充表明有一个细胞反应的经纪人感染,炎症,黄曲霉毒素中毒和ND疫苗接种在这项研究。它表明,SAP支持身体的防御机制的严重伤害在房颤曝光和ND疫苗通过激活血液中的细胞反应。异嗜性的是主要的白细胞,首先增加在宿主体内病理机制。异嗜性的调解期间opsonisation吞噬作用[38]。增加血液的异嗜性的炎症的重要角色,因为异嗜性的颗粒含有抗菌蛋白质,多肽,有毒介质(39]。然而,长期循环异嗜性的增加影响ROS (40),如果它增加而不增加淋巴细胞所抵消。淋巴细胞的增加,主人的身体能产生记忆和抗体阻止第二次感染同一代理(41,42]。在这项研究中,产生抗体的淋巴细胞显著增加和不影响房颤风险。一般来说,家禽黄曲霉毒素中毒影响淋巴细胞和抗体效价的降低生产疫苗接种后(43]。这表明5%的SAP补充饲料有突出的作用在调节淋巴细胞支持抗体生产和证明格林尼治时间价值对ND疫苗的稳定性。

肝脏是主要的器官在黄曲霉毒素中毒的解毒。在肝脏,毒素尤其是房颤被吸收和转化为其代谢产物的形式。房颤的代谢物形式结合的核酸和蛋白质肝细胞,导致肝残渣(44]。房颤的长期接触低水平会增加房颤的残留的风险45]。是类似于本研究的结果表明,最小的AF残留检测肉鸡肝脏的第三组(十亿分之0.28±0.58),V(十亿分之0.10±0.09),和VI(十亿分之0.24±0.09)21天。房颤的最小剩余肝脏可能是由于AF暴露在这个研究水平和能力的SAP作为抗氧化剂,用于减少房颤的生物利用度的解毒剂。甚至没有先前的研究提到SAP的活动作为抗毒素家禽黄曲霉毒素中毒,然而酚醛含量SAP作为铜离子螯合活动有一个突出的作用和自由基解毒46]。另一项研究表明,SAP可以用来减少食物中毒(47]。

房颤污染饲料的低水平(50 - 100磅)和慢性接触被报道的肝脏组织病理学改变(18]。然而,5%的SAP补充肉仔鸡饮食在这项研究中保护这些器官在房颤风险受到严重损失。显微镜检查,肝坏死和严重退化在所有组除了第三组没有发现;然而,炎症和胆管增生被观察到最低限度。类似的结果在肾脏和淋巴器官的组织病理学观察。它表明,SAP有重要作用的抗氧化剂,能抑制活性氧(ROS)。ROS是细胞坏死和变性的重要中介(48]。ROS受损的Na +和K +钠泵和离子交换(49]。它会导致细胞脂滴的保留和增加细胞的细胞质在肝脏等器官50),脾脏,男朋友,和肾脏51]。抑制ROS的SAP可能会增加细胞内的抗氧化代谢,再生,在房颤风险敞口和解毒。这些积极作用引起的类黄酮和酚SAP(表的内容1)。类黄酮和酚都是天然抗氧化剂在SAP (52,53]。

CD4 +和CD8 +淋巴细胞的激活免疫的重要角色复杂的通过主要组织相容性复合体(MHC) II类和i类在黄曲霉毒素中毒,t细胞亚群的改变主要有淋巴组织(胸腺和BF) (54];然而,二级淋巴组织这样的脾脏也受到影响。类似于传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染,黄曲霉毒素中毒引起的改变CD4 +和CD8 +淋巴细胞浸润。通常,CD4 +和CD8 +淋巴细胞的成熟胸腺(55];然而,在房颤风险有一个剧烈的改变T细胞渗透和损耗B细胞上增殖的男朋友。家禽黄曲霉毒素中毒减少体液和细胞免疫反应和疫苗接种反应不佳。表示对CD4 +和CD8 +淋巴细胞作为细胞免疫指标(CMI) [56]。突出的淋巴细胞CD4 +淋巴细胞产生一个信号BF促进抗体生产的B细胞(57]。补充本研究的结果显示,5% SAP有积极影响对ND疫苗和高生产格林尼治时间是协同immune-expression CD4 +淋巴细胞高。另一方面,CD4 +淋巴细胞在脾脏的族群有防御作用维持脾脏纸浆的完整性。不同于CD4 +淋巴细胞产生的信号,CD8 +淋巴细胞的细胞毒性细胞控制监管,促进溶菌作用的细胞和组织的有效性58,59]。CD4 + / CD8 +淋巴细胞的比例增加最大组中5%的SAP补充作为响应保护器官从房颤的破坏性影响。SAP的叶绿素是一个著名的组件除了黄酮类和酚,起到突出的机制来抑制氧化应激(15]。另一项研究表明,叶绿素作为螯合剂对氧化和分解氢过氧化物(60]。在某些情况下,叶绿素被用来使白细胞减少白细胞生产(61年)和治疗肠胃问题,贫血,和羟基自由基清除62年]。这项研究表明,5%的SAP补充鸡的饮食有潜在的免疫调制剂作用激活immune-expression CD4 +和CD8 +淋巴细胞在脾脏和男朋友。SAP的利用率5%饲料补充增加CD4 +、CD8 +、CD4 + / CD8 +淋巴细胞比率以及相关战略发展家禽行业面对房颤问题。

5。结论

这项研究清楚地表明,5%Sauropus androgynus叶粉(SAP)的潜在影响是增加体重性能、血液学的概要文件保护、细胞和体液免疫反应,减少房颤残渣的器官,保护肝脏,肾脏,脾脏,和男朋友组织病理学,immune-expression增加CD4 + / CD8 +淋巴细胞比率(P< 0.05)。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

信息披露

这项研究没有由第三方,这个工作是一个作者的学术项目的一部分。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

滨醉酒驾车Nurhayati太太(美国临床病理学),戴维·Pratamasari博士和Soetopo先生(病理学系)疾病调查中心(DIC),日惹,印尼,承认他们的助理在这学习。

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