标志”src=

毒理学杂志》
PDF
毒理学杂志》/2017年/文章

研究文章|开放获取

体积 2017年 |文章的ID 3574840 | https://doi.org/10.1155/2017/3574840

Karen Suarez-Larios安娜玛利亚Salazar-Martinez, Regina Montero-Montoya, ”农药的筛选诱导连续双边带和重组修复的潜力”,毒理学杂志》, 卷。2017年, 文章的ID3574840, 9 页面, 2017年。 https://doi.org/10.1155/2017/3574840

农药的筛选诱导连续双边带和重组修复的潜力

凯伦Suarez-Larios,1 安娜玛利亚Salazar-Martinez,1 和 Regina Montero-Montoya1

1Departamento药物Genomica y Toxicologia环境,学院Investigaciones基于,大学根据墨西哥,Apartado邮政70228年,04510年墨西哥Ciudad de,墨西哥

学术编辑器:Orish Ebere Orisakwe
收到了 2017年5月11日
修改后的 05年8月2017年
接受 2017年8月15日
发表 2017年10月10日

文摘

实现了一项研究以确定八个选择农药是否会导致淋巴细胞(双边带)双链断裂文化和损伤是否会诱发Rad51参与更高层次的蛋白质同源重组或p-Ku80参与nonhomologous加入结束。发现只有五个农药诱导双边带的只有草甘膦和对氧磷诱导p-Ku80蛋白的显著增加,表明nonhomologous结束加入重组DNA修复系统将被激活。gamma-H2AX疫源地类型观察相媲美,依托泊苷诱导的浓度相似。这些结果是重要的,因为这些影响发生在微摩尔的低浓度范围内,细胞在急性治疗。效应在实际环境长时间曝光设置预计将产生累积伤害如果重复重组发生的事件。

1。介绍

农药构成异质群体的化学物质,特别是合成控制瘟疫,杂草,和不必要的各种各样的生物1]。2016年,美国环境保护署(2)有大约1140活性成分注册,有机或无机3]。授权有机农药包括几个化学团体或家庭(4]。他们开始使用到1948年在墨西哥与DDT和其他organochlorides,其次是有机磷、氨基甲酸盐,拟除虫菊酯,和除草剂百草枯和2,4 - d (5]。

这些化合物是广泛和显示不同程度的毒性,不仅为目标物种,但是对于其他人来说,意想不到的,包括人类6]。在农业、农药通常应用于混合物和暴露于这些化合物与慢性不良健康影响包括有关神经(认知问题和帕金森病)、生殖、呼吸(哮喘),代谢(糖尿病和肥胖)和发展问题和癌症(3,6),特别是婴儿和儿童白血病(7- - - - - -9]相对于他们被描述为促进剂(8,10)由于他们中的许多人不诱导基因损害。基因毒性效应,然而,在ecotoxicological记录(11和流行病学研究12- - - - - -16在动物模型中,17- - - - - -20.),以及在体外(21- - - - - -32]。生物标志物识别包括姊妹染色单体交换、染色体畸变、微核,和DNA彗星试验中观察到。此外,有研究表明农药产生易位与儿童白血病(33- - - - - -35]。它是可能的,这些化合物的一些可能诱发相互易位已确定与特定亚型的白血病,如t (4, 11)、t(8; 21)和t (12; 21) (10,36]。

这些改变可以起源于(双边带)和双链断裂这些病变的主要修复机制规范化nonhomologous结束加入(c-NHEJ)和同源重组(人力资源)37,38]。众所周知,电离辐射、苯和抗肿瘤的化学物质,被认为是引起白血病的,导致这种损害(39- - - - - -42]。随着农药与白血病(8,34),我们想确定他们是否会诱发这些病变的主要事件的形成染色体易位的描述(37]。

本研究的目的是确定是否选择杀虫剂能够诱导双边带的在体外随后的损伤模型和重组途径。

2。材料和方法

2.1。捐助者

健康的年轻男性捐赠者被要求参与的研究解释给他们,然后被要求捐3毫升的血液。他们21到35岁,不抽烟,不酗酒者。以前捐血,他们没有采取药物治疗或没有受到辐射用于医疗目的。血样用肝素化注射器(Monovette Sarstedt)。

2.2。试剂

农药硫丹、草甘膦、五氯苯酚、氯菊酯、残杀威、对氧磷和代谢物AMPA (aminomethylphosphonic酸,从草甘膦)和硫丹内酯(从硫丹)以及依托泊苷购买Sigma-Aldrich,墨西哥(表1)。从写明ATCC DMSO购买。CellTiter 96水一个解细胞增殖试剂从PROMEGA被用来确定细胞毒性。高性能化学发光电影设备和Amersham HyperFilmTM发射极耦合逻辑电影从通用电气医疗集团被用于蛋白质分析。
复合 浓度(µ米) 化学文摘号
DNA损伤 蛋白质的研究
硫丹 0,0.01,0.08,0.4,2 - - - - - - 115-29-7
草甘膦 0、0.4、2、10、50 1.25,2.5,5 1071-83-6
五氯苯酚 0、0.03、0.15、0.75、3.75 0.2、1、5 87-86-5
氯菊酯 0 8 40、200、1000 8,200 52645-53-1
残杀威 0、0.24、0.48、0.96、1.44 - - - - - - 114-26-1
AMPA 0,200,1000,5000 - - - - - - 1066-51-9
硫丹内酯 0,0.08,0.4,2,10 0.017,0.05,0.15 3868-61-9
对氧磷 0、0.2、1、5、25 1、5、25 311-45-5
依托泊苷 0、0.4、2、10、50 十、积极控制 33419-42-0
这些化合物被用于蛋白质研究; 50 microM作为积极的控制每个农药。
表1
治疗申请双边带和蛋白质的研究。
2.3。抗体

主要抗体使用鼠标anti-phospho-histone H2AX (Ser 139)和兔anti-Rad51多克隆抗体,购买从微孔;从Abcam兔子anti-Ku80 (phosphoT714)多克隆抗体;山羊anti-Actin从圣克鲁斯(-)多克隆抗体。二次抗体使用Alexa-Fluor 555山羊anti-mouse表达载体,山羊anti-rabbit IgG-HRP,山羊anti-mouse IgG-HRP,抗体和驴IgG-HRP圣克鲁斯。安装介质与DAPI从Vectashield购买。

2.4。治疗评估双链断裂(双边带)

四个系列稀释农药或代谢物,对依托泊苷进行了测试(表1)。治疗是在重复进行如下:250毫升水中的全血被放置在2.25毫升的rpmi - 1640和接受相应的化合物和浓度为1.5 h在37°C,之后增加了3毫升的0.075米氯化钾和孵化持续了30分钟。淋巴细胞被固定根据Andrievski协议和威尔金斯(43与小修改);简而言之,通过分离细胞恢复 在室温下10分钟;上层的删除,添加甲醛的最终浓度为4%。十分钟后,1毫升PBS Triton x - 100增加了0.12%,和一个30分钟被允许在室温下孵化;此后样本用1毫升冷PBS补充4%胎牛血清的边后卫和离心机8分钟 在0°C。上层清液被丢弃,1毫升的冷50%甲醇在PBS补充道。样本在−20°C。管被离心机 8分钟在0°C,上层的丢弃,3毫升的冷甲醇添加,样本保存在−20°C到分析。

2.5。双边带识别

磷酸化组蛋白免疫荧光显微镜下H2AX疫源地进行检测(尼康Eclipse 80 i)。淋巴细胞细胞核的染色是根据继续萎缩等。44与一些细微的修改。幻灯片与PBS洗了三次在30分钟和阻塞KCMT缓冲12%的边后卫(120毫米氯化钾,20毫米氯化钠,10毫米Tris-HCl pH值8 1毫米EDTA,和0.2% Triton x - 100)在室温下1 h。主要anti-phospho-histone H2AX (Ser139)稀释1:200在堵塞的解决方案是添加和孵化一夜之间在4°C。三个洗KCMT,每15分钟。孵化与二级抗体完成:555年Alexa-Fluor山羊anti-mouse稀释1:500(在屏蔽解决方案)在室温下1 h。幻灯片是洗与主要抗体,在去离子水冲洗在安装之前DAPI安装介质。他们分析了gamma-H2AX焦点在荧光显微镜下与适当的过滤器。

评价的焦点是在2幻灯片/浓度。每张幻灯片50个细胞被评估在三个不同的地区和疫源地指望他们;总共300个细胞每治疗进行评估。当一个细胞核呈现1或更多的焦点,它被认为是积极的,根据Scarpato et al。45]。DNA损伤的程度分为三类:损坏细胞的百分比(没有gamma-H2AX疫源地),主持损伤(< 10 gamma-H2AX疫源地)和严重损害(> 10 gamma-H2AX焦点)。此外,损坏是表示作为gamma-H2AX阳性细胞核的平均百分比。

2.6。细胞毒性

细胞毒性测试使用CellTiter 96®水一个解试剂形成PROMEGA和制造商建议的通用协议。单核细胞从血液分离使用histopaque - 1077(σ)。细胞被镀在96 -孔板,每口井的100000个细胞,和化合物处理,每个浓度一式三份。治疗期间发生1.5 h 37°C,之后添加试剂是和孵化3 h在37°C和吸光度在490 nm记录读者使用96孔板(Synergy H4混合,Biotek)。生存的比例为每一个治疗是使用以下公式计算:治疗(Abs490海里/ Abs490 nm -控制)×100。

2.7。免疫印迹分析蛋白质参与DNA的重组

这个分析是只有化合物诱导gamma-H2AX疫源地(表1)。三个系列浓度在重复进行测试。单核细胞分离与histopaque - 1077。治疗方法被应用于细胞resuspended 1毫升rpmi - 1640(500000细胞/管)在1.5 h在37°C,之后细胞离心 5分钟在4°C。浮在表面的丢弃和600毫升的10% 0.5叠氮化钠添加了PBS和漩涡。再次离心了,上层的丢弃,和细胞颗粒保持在−70°C到使用。每个化合物两个分离进行了实验,每次都有两个捐助者。

2.7.1。蛋白质的提取和量化

里帕溶解溶液含有磷酸酯酶和蛋白酶抑制剂被添加到每个细胞颗粒。样本然后用一个脉冲,在冰孵化了15分钟,离心机,享年13800岁 15分钟。上层清液回收在0.5毫升管。5毫升的每个样本被放置在一个96孔板蛋白质量化。洛瑞与直流试验进行蛋白质分析工具包(Bio-Rad);板是激动在黑暗中在室温下15分钟。浓度是确定一个盘子读者(VersaMax可调)750海里。样品被储存在−70°C到使用。

2.7.2。电泳和转让

蛋白质磷酸化Ku80 (phospho-T714)和Rad51评估。Beta-actin作为内部控制。35微克的总蛋白质分离SDS-polyacrylamide凝胶10%,转移到硝酸纤维素(0.45微米,通用电气医疗集团)Trans-Blot®SD半干转移细胞(Bio-Rad)。膜是孵化与屏蔽解决方案(TBS blotting-grade阻滞剂牛奶2%)在4°C一夜之间和温和的风潮。两个洗然后用渐变TBS - 1%, 10分钟,一个与TBS 5分钟。膜被切断在适当的级别和孵化主要抗体是分别设置在4°C隔夜温和搅拌:兔子anti-Rad51(屏蔽解决方案1:500)或兔子anti-phosphorylated Ku80 (p-Ku80)在屏蔽解决方案(1:1000)。孵化与初级抗体山羊anti-actin(屏蔽解决方案1:1000)做了1小时的28°C。然后洗膜和TBS - 1%渐变三次,10分钟,在室温下和TBS 5分钟。孵化完成二次抗体:山羊anti-rabbit IgG-HRP 1: 3000(在屏蔽解决方案)前两个抗体和抗体驴IgG-HRP 1: 3000(在屏蔽解决方案),后者,1 h在28°C和风潮。清洗是与主要的抗体,和膜接触和与发光显示设备(通用电气医疗集团)。 Acquisition of optical densities was done with Quantity One software (Bio-Rad), version 4.1.1. Values obtained for each protein (Rad51 or p-Ku80) were normalized with respect to beta-actin and the mean of normalized negative controls; results are presented as the % with respect to normalized negative controls [46]。两个膜每与每个化合物分离实验测试完成;四个数据项,得到每个化合物浓度分析。

2.8。统计分析

统计计算与GraphPad棱镜实现6软件包:结果gamma-H2AX疫源地和光学密度与克鲁斯卡尔-沃利斯检验免疫印迹进行评估和邓恩的事后多重比较测试;依托泊苷的价值作为一个积极的控制与Mann-Whitney 50 microM的浓度进行了分析 测试对消极的控制,建立一个 所有测试值< 0.05的意义。细胞毒性治疗效果与线性回归分析,建立一个 值< 0.05的重要性。

3所示。结果

3.1。双边带识别

在检测的化合物中,四个显示显著的影响与双边带(表细胞的数量2),而硫丹、残杀威和AMPA对这个参数没有影响。五氯苯酚有激效行为,诱导gamma-H2AX疫源地的最低浓度,而最高(表的效果减弱2)。在材料和方法,解释与焦点是枚举:三类核( )没有gamma-H2AX疫源地,( ),一到十疫源地,( )与十多个焦点或那些聚集焦点,无法列举。硫丹内酯、氯菊酯、五氯苯酚、草甘膦、对氧磷主要生产细胞显示1到10点,没有关系但显示类似的浓度增加,每个浓度测试,对氧磷是唯一一个显示一致的双边带随着浓度的增加(R2= 0.1236, )(表2)。然而,草甘膦对氧磷显示,增加细胞有超过10个病灶(表2浓度(相关),线性回归,R2= 0.2, 草甘膦;R2= 0.35, 对氧磷)。结果低依托泊苷浓度测试(0.4,2,10 microM)并不在这个表但在讨论中给出的图;与剂量被发现显著相关,R2= 0.82, 与10多个病灶细胞。
复合 剂量(microM) 意思是%细胞(其中) 的中值%与总伤害细胞 (卡方值)
没有焦点 1到10疫源地 有超过10个病灶 总损坏
草甘膦 0 48.33 (2.94) 51.33 (3.33) 0.33 (0.52) 51.67 (2.94) 51.50 0.0107 (13.13)
0.4 31.17 (3.76) 67.17 (3.66) 1.67 (1.37) 68.83 (3.76) 69.00一个
2 33.17 (4.07) 57.50 (10.62) 9.33 (7.94) 66.83 (4.07) 65.50
10 30.17 (13.21) 61.00 (10.18) 8.83 (4.36) 69.83 (13.21) 75.00一个
50 33.67 (4.50) 63.17 (4.71) 3.17 (3.71) 66.33 (4.50) 67.50
依托泊苷 50 3.50 (1.42) 6.83 (4.71) 89.67 (5.20) 96.50 (1.52) 96.50一个
对氧磷 0 78.00 (10.12) 21.00 (8.92) 1.00 (1.67) 22.00 (10.12) 21.00 0.0054 (14.68)
0.2 57.33 (17.28) 40.67 (15.93) 2.00 (1.79) 42.67 (17.28) 41.00
1 43.33 (13.31) 52.33 (12.23) 4.33 (3.67) 56.67 (13.31) 56.00一个
5 52.00 (5.22) 43.33 (5.47) 4.67 (3.72) 48.00 (5.22) 48.00
25 42.33 (15.92) 43.67 (24.57) 14.00 (12.71) 57.67 (15.92) 60.00一个
依托泊苷 50 7.00 (4.86) 4.33 (2.34) 88.67 (5.32) 93.00 (4.86) 91.00b
氯菊酯 0 55.33 (6.15) 42.67 (6.15) 2.00 (0.00) 44.67 (6.15) 47.00 0.0092 (13.46)
8 29.00 (16.19) 65.67 (13.65) 5.33 (5.75) 71.00 (16.19) 73.00一个
40 36.00 (6.33) 61.00 (5.90) 3.00 (2.10) 64.00 (6.33) 64.00
200年 24.33 (11.13) 70.33 (7.31) 5.33 (6.02) 75.67 (11.13) 76.00一个
1000年 36.33 (18.82) 60.00 (16.44) 3.67 (2.94) 63.67 (18.82) 64.00
依托泊苷 50 0.33 (0.82) 7.00 (3.29) 92.67 (3.01) 99.67 (0.82) 100.00b
硫丹内酯 0 55.33 (6.15) 42.67 (6.15) 2.00 (0.00) 44.67 (6.15) 47.00 0.0001 (23.30)
0.08 32.67 (5.61) 62.33 (7.31) 5.00 (4.52) 67.33 (5.61) 66.00
0.4 27.00 (5.33) 70.33 (4.46) 2.67 (2.42) 73.00 (5.33) 74.00一个
2 27.00 (5.33) 73.67 (3.88) 3.33 (2.73) 77.00 (3.03) 77.00一个
10 47.00 (8.08) 51.67 (4.53) 1.33 (1.63) 53.00 (8.07) 53.00
依托泊苷 50 0.33 (0.82) 7.00 (3.27) 92.67 (3.01) 99.67 (0.82) 100.00b
卡式肺囊虫肺炎 0 78.00 (10.12) 21.00 (8.92) 1.00 (1.67) 22.00 (10.12) 21.00 0.0259 (11.06)
0.03 48.33 (14.11) 49.00 (13.19) 2.67 (1.63) 51.67 (14.11) 52.00
0.15 39.67 (16.71) 56.33 (17.45) 4.00 (2.83) 60.33 (16.71) 60.00一个
0.75 62.67 (23.31) 34.00 (22.52) 3.33 (2.73) 37.33 (23.31) 30.00
3.75 68.67 (23.45) 29.00 (23.07) 2.33 (2.34) 31.33 (23.45) 31.00
依托泊苷 50 7.00 (4.86) 4.33 (2.34) 88.67 (5.32) 93.00 (4.86) 91.00b
克鲁斯卡尔-沃利斯检验考虑所有受损细胞;d.f。4在所有测试; 显著的剂量比消极的控制;事后Dunn的测试, 。 依托泊苷结果总是显著:Mann-Whitney测试, 。卡式肺囊虫肺炎:五氯苯酚;这里只提出了化合物与一个积极的结果考虑 值< 0.05的意义。看到文本。
表2
细胞的百分比 由于治疗-H2AX疫源地。
3.2。细胞毒性

同一浓度用于确定双边带被用来评估五个化合物的细胞毒性效应产生双边带,发现草甘膦和硫丹内酯减少剂量依赖性的方式可行的细胞的数量(表3),从100%可行性与草甘膦70%,从100%提高到60%,硫丹内酯。五氯苯酚、氯菊酯、对氧磷没有显示浓度的细胞毒性效应。
复合 生存范围(%) R2 F p价值
农药 草甘膦 100年到70年 0.252 9.431 0.0047
氯菊酯 100年到100年 0.006386 0.06427 0.8050
五氯苯酚 100年到78年 0.007 0.092 0.7669
代谢物 硫丹内酯 100 - 60 0.6787 25.35 0.0003
对氧磷 98年到90年 0.1473 2.246 0.1579
积极的控制 依托泊苷 100年到96年 0.9934
线性回归;积极的控制没有细胞毒性浓度测试,50µM。
表3
细胞毒性杀虫剂和代谢产物诱导双链断裂的影响。
3.3。量化p-Ku80和Rad51蛋白质

积极的双边带生产五个化合物被用于一组治疗来确定是否会诱导DNA重组;五氯苯酚,尽管它诱导双边带只在最低浓度测试,也包括在这些分析。P-Ku80被用来评估NHEJ Rad51,评估人力资源(表4)。草甘膦被发现显著诱导p-Ku80的存在剂量依赖性的方式( ,图1),而Rad51没有明显影响。对氧磷诱导p-Ku80,然而,并非在剂量依赖性的方式(图2)。其余的化合物测试没有显示蛋白质的影响也进行了研究。依托泊苷、积极控制、持续诱导p-Ku80,尽管测试之间的巨大差异,在浓度用于分析(10 microM)(数据1和2)。
复合 剂量
(µ米)		 P-Ku80 Rad51
意味着OD
(SD)		 中位数
OD		 (卡方值) 意味着OD
(SD)		 中位数
OD		 (卡方值)
草甘膦 0 100.00 (34.48) 104.05 0.0297 (7.985) 100.00 (47.93) 104.17 0.4955 (2.559)
1.25 200.0 (63.99) 206.20 134.4 (34.57) 122.89
2。5 227.3 (98.69) 190.91 140.8 (41.92) 158.29
5 253.9 (130.40) 205.2 107.5 (49.28) 113.41
依托泊苷 214.2 (48.55) 198.21 0.028 119.3 (11.74) 84.26 0.6571
对氧磷 0 100.0 (22.11) 102.55 0.0077 (9.551) 100.0 (50.54) 96.74 0.3812 (3.243)
1 186.64 (39.72) 196.4 178.8 (73.36) 171.4
5 155.32 (17.06) 159.1 115.9 (6.84) 113.0
25 154.58 (8.76) 157.7 180.6 (95.02) 147.7
依托泊苷 155.4 (63.53) 167.30 0.1044 109.5 (25.86) 98.03 0.6571
克鲁斯卡尔-沃利斯检验:P-Ku80是重要的在草甘膦和对氧磷; ;d.f。3在所有测试; 显著的剂量比消极的控制;事后Dunn的测试: ; Mann-Whitney测试: ;OD:光密度。提出了对应于两个独立的实验结果;只有化合物是积极的。看到文本。
表4
检测Ku80磷酸化和Rad51蛋白治疗的单核细胞诱导的杀虫剂和代谢物 -H2AX疫源地。

图1
图:p-Ku80蛋白质增加由于草甘膦治疗剂量依赖性的方式(线性回归, )。个体浓度被克鲁斯卡尔-沃利斯和邓恩的多重比较分析测试;星号显示,5 microM明显不同于消极的控制。底部显示了一个代表膜:巷1 -控制;通道2 - 4,五氯苯酚(0.2、1.0和5 microM);道5 - 7,草甘膦(1.25、2.5和5 microM,见图);依托泊苷巷8日(10 microM)。

图2
p-Ku80蛋白质的数量增加细胞对氧磷处理:巷1 -控制;通道2 - 4,对氧磷(1、5、25 microM);巷5,依托泊苷(10 microM)。Rad51处理间差异不显著,显示在图。 显著不同的剂量;克鲁斯卡尔-沃利斯;邓恩的事后考验, 。

4所示。讨论

搜索是为了评估八是否知道我国农药仍在使用可能引起双边带,相关病变的形成染色体重组和白血病的风险。

四个测试的化合物表现出一种诱导的DNA损伤的能力,认识到形式的磷酸化H2AX焦点在正常的人类淋巴细胞的细胞核,至少在两个浓度的测试。

值得注意的是,依托泊苷、抗肿瘤药的浓度作为积极控制50μM,诱导细胞85%以上有超过10疫源地;然而,在低浓度依托泊苷诱导疫源地以类似的方式,观察与草甘膦对氧磷(图3)。这么多伤害似乎相关性的关系像p-Ku80修复蛋白的增加,因为只有草甘膦对氧磷显著增加产生这种蛋白质,而其余的化合物诱导大量gamma-H2AX焦点不低。在这组实验中评价蛋白质参与DNA重组,与草甘膦被修改以避免细胞毒性治疗,5 microM最高浓度测试。应该说,我们的结果不同于汤森et al。47Raji]发现草甘膦造成的细胞毒性细胞只有在较高的浓度(10毫米);这种差异表明,正常的人类细胞的毒性作用更敏感。依托泊苷浓度是一个积极的控制也降低到10 microM更类似与杀虫剂进行治疗。正如所料,Rad51不是给nonproliferating治疗诱导的淋巴细胞。这与先前的报道是一致的表明人力资源修复机制不参与双边带修复细胞G0 / G1 [48- - - - - -52]。


图3
细胞的百分比超过10 gamma-H2AX疫源地和依托泊苷诱导治疗,草甘膦,对氧磷。这三个化合物诱导增加剂量相关;看到统计值的线性回归分析的结果。

这里给出的结果指出,对氧磷和草甘膦,有机磷杀虫剂和除草剂,双边带在人类细胞的诱导物。对氧磷代谢物的对硫磷,复合毒性分类(分类的53Ia],极其危险,都是胆碱酯酶抑制剂,而草甘膦的毒性是在许多论坛讨论。治疗的细胞不仅nonproliferative状态诱导DNA的断裂,但也Ku80磷酸化的蛋白质,参与c-NHEJ修复途径。这些结果与研究报道同意外周血单核细胞与双边带感应辐射,Frasca et al。54之前]发现Ku80磷酸化Ku70 / Ku80二聚体的形成所需的启动修复,而Shelke和Das (55检测到一个upregulation Ku80和其他蛋白质参与c-NHEJ修复机制。这c-NHEJ修复通路著称的容易出错,介绍微小缺失或microinsertions可诱变和改变细胞行为是否发生在编码或监管序列(56]。这是一个可能的结果的争端解决机构nonproliferating细胞。另一个可能性是损害观察到足够广泛的作为替代的诱导干预NHEJ (a-NHEJ),通过磷酸化Plk-3 CtIP,必要的激活a-NHEJ G0 / G1巴顿等人提出来的。57]。这个途径已被证明是唯一一个负责染色体易位的形成、发展的十分关注的白血病,淋巴瘤,和二次癌症(51,56]。依托泊苷,我们积极的控制,也称为威尼斯平底渔船II抑制剂能产生复杂的双边带(定义为许多双边带附近,57在G0],以类似的方式扮演电离辐射和生产染色体重组在细胞周期的所有阶段40,58];这种化合物诱导的损害在这个研究是与对氧磷诱导的损害和草甘膦(双边带和Ku80感应),所以从这些结果的问题是细胞受到对氧磷和草甘膦的结果将类似于依托泊苷细胞受损的结果,他们也会诱发染色体重组。

5。结论

八农药检测的能力产生双边带nonproliferating淋巴细胞和评估古典重组DNA修复机制是否会采取行动。他们两个,对氧磷和草甘膦,被发现产生双边带的磷酸化Ku80蛋白质参与c-NHEJ重组修复途径。

这些结果是重要的,因为这些影响发生在低浓度细胞在急性治疗。效应在实际环境长时间曝光设置预计将产生累积伤害如果重复重组发生的事件。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关这篇文章的出版。

确认

这项工作实现由Universitary基金项目支持科技(PAPIIT,项目没有。IN203011-3)和奖学金由Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologia(没有。凯伦Suarez-Larios 220284),硕士,一个student at the Ph.D. Program of Biological Science, UNAM. The authors acknowledge the valuable comments of Chemist Guillermina Vázquez and Biologist Juan Pablo Pánico.

引用

  1. 世界卫生组织。2016年,www.who.int /主题/农药/ en /。
  2. 环境保护署,EPA。2016年,https://www.epa.gov/pesticide-reevaluation/registration-review-process。
  3. k金、大肠Kabir和s . a .贾汗”接触杀虫剂和相关的人类健康的影响,”科学的环境卷,575年,第535 - 525页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  4. CICLOPLAFEST。,“Catálogo de Plaguicidas,”Cofepris,2004,http://www.cofepris.gob.mx/AZ/Paginas/Plaguicidas%20y%20Fertilizantes/CatalogoPlaguicidas.aspx。视图:谷歌学术搜索
  5. 洛杉矶。艾伯特,”de los plaguicidas全景在墨西哥。航空杂志上toxicologia en线。”Retel,8卷,1,p。17日,2005年,www.sertox.com.ar retel。视图:谷歌学术搜索
  6. c . Bolognesi a幅、p . Ostrosky-Wegman和r·马科斯”微核和农药接触。”诱变,26卷,不。1,19-26,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  7. 马x p . a .水牛r . b . Gunier et al .,“关键的窗户接触家用杀虫剂和儿童白血病的风险,”环境健康展望,卷110,不。9日,第960 - 955页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  8. m . Belson b·金斯利,a .福尔摩斯”的风险因素在儿童急性白血病:复习一下,”环境健康展望,卷115,不。1,第145 - 138页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  9. c . Infante-Rivard和s . Weichenthal“杀虫剂和儿童癌症:更新Zahm和沃德1998审查,”《毒理学和环境健康- B部分:关键的评论,10卷,不。1 - 2、81 - 99年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  10. 学术界。十三区,m . v . rel和j·r·唐宁”机制的疾病:急性淋巴细胞白血病”《新英格兰医学杂志》上,卷350,不。15日,第1548 - 1535页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  11. d . j . Gonzalez-Mille c . a . Ilizaliturri-Hernandez g . Espinosa-Reyes et al .,“暴露于持久性有机污染物(pop)和DNA损伤作为鱼类的环境压力指标不同食性的Coatzacoalcos,韦拉克鲁斯州,墨西哥,”生态毒理学,19卷,不。7,1238 - 1248年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  12. s . Gomez-Arroyo y Diaz-Sanchez, m . a . Meneses-Perez r . Villalobos-Pietrini和j . De Leon-Rodriguez”细胞遗传学生物监测在墨西哥花卉栽培的工人组织暴露于杀虫剂,”突变的研究——遗传毒理学和环境诱变,卷466,不。1,第124 - 117页,2000。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  13. c . Bolognesi”基因毒性的杀虫剂:回顾人类生物监测的研究,“突变的研究,卷543,不。3、251 - 272年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  14. 美国牛,k·弗莱彻,A . r . Boobis和j·m·Battershill”证据的基因毒性杀虫剂农药涂抹器:一个评论,”诱变,21卷,不。2、93 - 103年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  15. c . Martinez-Valenzuela s Gomez-Arroyo r . Villalobos-Pietrini et al .,“基因毒性的生物监测农业工人暴露于杀虫剂北部的锡那罗亚州,墨西哥,”国际环境,35卷,不。8,1155 - 1159年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  16. c . Bolognesi g . Carrasquilla沃尔皮,k·r·所罗门·e·j·p·马歇尔,“生物监测的基因毒性风险在哥伦比亚地区农业工人从五:协会职业暴露于草甘膦,”《毒理学和环境健康——一个部分:当前的问题,卷72,不。15 - 16岁,986 - 997年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  17. a . Dzwonkowska和h大,“感应chromosmal畸变的叙利亚仓鼠杀虫剂检测体内,”档案的毒理学,卷。58岁的没有。3、152 - 156年,1986页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  18. m·a·法拉,b . Ateeq和w·艾哈迈德”淡水鱼楝树叶提取物的抗诱变剂的影响,鲤鱼各评价细胞遗传学测试,”科学的环境,卷364,不。1 - 3、200 - 214年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  19. 美国普拉萨德,斯利瓦斯塔瓦,m·辛格和y舒克拉,“致染色体断裂的影响草甘膦在瑞士白化小鼠的骨髓细胞,”毒理学杂志》卷。2009年,6页,2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  20. p . Martinez-Paz m·莫拉莱斯j·l·Martinez-Guitarte和g . Morcillo”不会影响环境内分泌干扰物对水生昆虫摇蚊属riparius评估使用彗星试验,”突变的研究——遗传毒理学和环境诱变,卷758,不。1 - 2,41-47,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  21. m . Gonzalez-Cid d·洛里亚,e·马托斯”基因毒性的杀虫剂残杀威和亚硝基的导数,NO-propoxur,人类淋巴细胞体外,”突变的研究,卷232,不。1,45-48,1990页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  22. s戈麦斯高阿罗约在m .埃琳娜·卡尔德龙Segura量和维拉波斯r比德瑞尼,“人类淋巴细胞姐妹染色单体交换由蚕豆根尖诱导植物活化后通过残杀威”环境和分子诱变,26卷,不。4、324 - 330年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  23. m·蒂施p . Schmezer m . Faulde a . Groh h·迈尔,“基因毒性研究氯菊酯,避蚊胺和二嗪农主要人类鼻粘膜细胞,”欧洲Oto-Rhino-Laryngology档案,卷259,不。3、150 - 153年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  24. m . Tisch m . k . Faulde, h·迈尔“基因毒性效应的五氯苯酚、林丹、transfluthrin cyfluthrin,和天然除虫菊的人体粘膜细胞低等和中等鼻半圆屋顶,“美国鼻科学杂志》,19卷,不。2、141 - 151年,2005页。视图:谷歌学术搜索
  25. U。Undeğer和n . Başaran”杀虫剂对人外周淋巴细胞的影响在体外:诱导的DNA损伤。”档案的毒理学,卷79,不。3、169 - 176年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  26. m . Bajpayee a . k . Pandey s Zaidi et al .,”引起的DNA损伤和诱变硫丹及其代谢物,”环境和分子诱变卷,47号9日,第692 - 682页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  27. C.-M。林、l . y . Wei和苏耿赋。王,“推迟基因毒性效应的N-nitroso N-propoxur杀虫剂在哺乳动物细胞中,“食品和化学毒物学,45卷,不。6,928 - 934年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  28. f .玛纳斯l·佩拉尔塔j . Raviolo et al .,“基因毒性AMPA,草甘膦的环境代谢物,彗星试验和细胞遗传学测试评估,”生态毒理学和环境安全,卷72,不。3、834 - 837年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  29. a . e . Rojas-Garcia m . Sordo l .织女星b . Quintanilla-Vega m . Solis-Heredia和p . Ostrosky-Wegman”的角色paraoxonase多态性在paraoxon-treated人类淋巴细胞微核的诱导,“环境和分子诱变,50卷,不。9日,第829 - 823页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  30. h . Turkez和b . Toğar橄榄(齐墩果欧洲公司l .)叶提取物抵消人类淋巴细胞,基因毒性和氧化应激的氯菊酯”毒理学杂志》的科学,36卷,不。5,531 - 537年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  31. 诉j·科勒,m . Furhacker a . Nersesyan m . Mišik m . Eisenbauer和s . Knasmueller“细胞毒性和抗能损伤dna的草甘膦的性质和在来自人体的口腔上皮细胞,”档案的毒理学,卷86,不。5,805 - 813年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  32. c . Alvarez-Moya m·r·席尔瓦·c·瓦尔迪兹拉米雷斯et al .,“比较体内和体外基因毒性的草甘膦异丙胺盐在三个不同的生物,”遗传学和分子生物学,37卷,不。1,第110 - 105页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  33. f·e·亚历山大·s·l·Patheal a他满et al .,“经胎盘的化学暴露和风险的婴儿白血病MLL基因融合,“癌症研究,51卷,第2546 - 2542页,2001年。视图:谷歌学术搜索
  34. d . a . a . s . Kim Eastmond, r·j·普雷斯顿”儿童急性淋巴细胞性白血病和观点暴露风险评估的早期阶段,“突变突变研究研究——评论,卷613,不。2 - 3、138 - 160年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  35. k . m . LaFiura d . m . Bielawski n c Posecion jr . et al .,“产前农药风险之间的关联、代leukemia-associated t (8; 21),“儿科血液和癌症卷,49号5,624 - 628年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  36. m·f·格里夫斯和j . Wiemels”在儿童白血病染色体易位的起源,”自然评论癌症,3卷,不。9日,第649 - 639页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  37. p·d·Aplan“致癌染色体易位的原因。”遗传学趋势,22卷,不。1,46-55,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  38. 张y和j·d·罗利”在白血病染色质结构元素和染色体易位,”DNA修复,5卷,不。9 - 10,1282 - 1297年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  39. c·a·费利克斯“topoisomerase-targeted药物引起的继发性白血病”Biochimica et Biophysica学报——基因结构和表达,卷1400,不。1 - 3、233 - 255年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  40. a . p . m . s . Brassesco Montaldi, e . t . Sakamoto-Hojo”优惠诱导MLL(混合血统白血病)重组人类淋巴细胞文化依托泊苷处理,”遗传学和分子生物学,32卷,不。1,第150 - 144页,2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  41. c . m .麦克海尔l . Zhang和m·t·史密斯,”当前的理解人类benzene-induced白血病的机制:对风险评估的影响,“致癌作用,33卷,不。2、240 - 252年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  42. e .鼠尾草和n . Shikazono”辐射诱导聚集DNA损伤修复和诱变,”自由基生物学和医学卷,107年,第135 - 125页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  43. a . Andrievski和r·c·威尔金斯”的反应γ-H2AX人类淋巴细胞和淋巴细胞的子集以全血培养,“国际放射生物学杂志》上,卷85,不。4、369 - 376年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  44. g . p .继续萎缩,d . j .聪明,j·s·哈维和c·a·奥斯汀“H2AX磷酸化作为基因毒性端点,”突变的研究——遗传毒理学和环境诱变,卷679,不。1 - 2、58、2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  45. r . Scarpato c . Verola b . Fabiani诉比安奇,g . Saggese和g .费德里科•核子损害淋巴细胞外围的肥胖和超重的意大利儿童的评估γ-H2AX集中分析和微核测试”,美国实验生物学学会联合会杂志,25卷,不。2、685 - 693年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  46. Hernandez-Resendiz, a . Roman-Rosales大肠Garcia-Villa et al .,“双重调节能量代谢在人类宫颈癌和乳腺癌细胞p53,”Biochimica et Biophysica学报-分子细胞研究,卷1853,不。12日,第3278 - 3266页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  47. m·汤森c·派克w·孟m·希顿r·罗宾逊和k . O ' neill“评价不同浓度草甘膦在人类Raji细胞DNA损伤及其对细胞毒性的影响,“监管毒理学和药理学卷,85年,第85 - 79页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  48. f·陈,a . Nastasi z沈,m . Brenneman h . Crissman d·j·陈,“细胞随周期变动的酵母蛋白表达的哺乳动物同源染色体DNA双链断裂修复基因Rad51 Rad52,”变异研究——DNA修复,卷384,不。3、205 - 211年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  49. k . Bishay k . Ory M.-F。奥利弗,j . Lebeau c Levalois, s . Chevillard”DNA的伤害RNA表达来评估个体对电离辐射的敏感性,”致癌作用,22卷,不。8,1179 - 1183年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  50. m . Shrivastav l·p·德·哈罗德,j . a . Nickoloff”调节DNA双链断裂修复途径的选择,”细胞研究,18卷,不。1,第147 - 134页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  51. r . Ceccaldi b Rondinelli,公元D 'Andrea,“双链断裂修复途径的选择和后果,”细胞生物学的趋势,26卷,不。1、52 - 64年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  52. z, k . Kostyrko美国博斯哈德城市,n . Mermod“同源重组蛋白在细胞周期调控的作用,“细胞周期,14卷,不。17日,第2861 - 2853页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  53. 谁。,“The WHO recommended classification of pesticides by hazard and guidelines to classification,” in《2009年世界卫生组织及国际化学品安全规划,78年,页2010。视图:谷歌学术搜索
  54. d . Frasca p . Barattini g . Tocchi l . Guidi l . Pierelli g·多利亚,“依赖DNA的蛋白激酶在辐射诱导的DNA损伤的识别在人类外周血单核细胞,”国际免疫学,13卷,不。6,791 - 797年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  55. Shelke和b Das,“剂量反应和适应性反应的异源端加入修复基因和蛋白质在人类外周血单核细胞暴露于休息γ辐射。”诱变,30卷,不。3、365 - 379年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  56. r . Hromas e·威廉姆森SH。李,和j . Nickoloff“防止染色体易位引起癌症,”反式是中国Climatol Assoc卷,127年,第195 - 176页,2016年。视图:谷歌学术搜索
  57. o·巴顿,s c·瑙曼r . Diemer-Biehs et al .,“Polo-like激酶3调节CtIP在G1 DNA双链断裂修复期间,“细胞生物学杂志,卷206,不。7,877 - 894年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
  58. p . Mosesso g·佩佩,a . Ottavianelli a . Schinoppi和s . Cinelli”细胞遗传学证据表明,DNA拓扑异构酶II没有参与辐射诱导chromsome-type畸变,”突变的研究——遗传毒理学和环境诱变卷。793年,14 - 18,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权©2017凯伦Suarez-Larios et al。这是一个开放分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。

更多相关文章

对本文没有相关内容可用。
PDF 下载引用 引用
下载其他格式更多的
ePub
XML
订单打印副本订单
的观点2041年
下载816年
引用

相关文章

对本文没有相关内容可用。

文章奖:2020年杰出的研究贡献,选择由我们的首席编辑。获奖的文章阅读。