文摘

Quinalphos (QP)是常用的害虫防治农田周围的淡水水库。这项研究进行了评估的慢性毒性农药银barb血液参数和一些器官,Barbonymus gonionotus。鱼被暴露于两个亚致死浓度,0.47 ppm, 0.94 ppm, QP一段28天。所有血液参数(红细胞、红细胞比容和血红蛋白)和血糖除了白细胞减少有毒物的浓度增加,成为显著降低(在较高的浓度与控制相比)。派生的血液指标均值的微粒体积,平均微粒血红蛋白,和平均微粒血红蛋白浓度控制相比也同样改变。Histoarchitectural肝脏和肾脏的变化观察接触QP之后。轻微到严重坏死肝细胞肥大,中央静脉破裂,空泡形成观察肝的治疗组。高度退化的造血组织,肾小管和肾小体的变性,空泡形成,坏死明显的肾脏治疗组。总之,长期暴露在亚致死浓度诱导血液QP,组织学改变银barb和提供了一个简单的工具来评估毒性派生的改变。

1。介绍

合成杀虫剂用于控制农业害虫是水生污染的主要原因之一。有时农药直接应用于水体控制害虫和向量但他们残留物主要是通过表面流失进入水生生态系统和影响不属预定目标的生物包括鱼的健康。在合成农药、有机磷广泛应用于农业和健康与卫生项目由于其高有效性杀虫剂更少环境中的持久性。他们青睐有机氯长期持久性并因此轻松地在食物链中生物蓄积。有机氯和有机磷的转变导致了成有机磷的发生增加水体引起急性和慢性中毒鱼类动物(1]。

Quinalphos 25 ec (QP)是一种有机磷广泛用作农药(2]。列为一个黄色标签(剧毒)农药在印度次大陆和广泛应用在农业保护各种作物,如小麦、水稻、咖啡、甘蔗、棉花。这是一个艰难的农药,已成为一种担忧,因为其潜在的和有害的影响。quinalphos对组织病理学改变的影响进行了研究重要器官如脑、鳃、肝(3),在呼吸速率和食品消费4),在神经行为反应5的鲤属carpio,等等。

通常情况下,大多数水生动物包括鱼类的帮助下通过鳃呼吸,有时皮肤。这些呼吸器官经常遇到危险污染物以不同形式存在于水和这些污染物可能导致正常区域的变更导致减少耗氧量和生理不平衡的有机体。今天组织病理学的作用得到了很大兴趣作为一个端点在水生生物内分泌干扰化学物质的研究中,因为组织病理学改变通常的结果集成大量互动的生理过程。频繁发生有机磷农药被认为是一个严重的全球公共卫生问题和重大环境问题。因此,将相关的研究影响慢性有机磷杀虫剂对长期接触的研究确定残留毒性。鱼银刺(Barbonymus gonionotus)被选为实验模型由于其广泛的可用性在当地坦克和池塘。

因此,本调查旨在研究histoarchitectural QP诱导毒性变化的一些重要器官和血液参数的硬骨鱼鱼银barb,以便评估功能的损害和得到一个洞察力的后果。

2。材料和方法

健康和预期的大小银刺(b . gonionotus)从当地获得养鱼场饲养和巩固了坦克。个人的体重平均体重g和标准长度cm选择并允许适应实验室条件消除怀疑不健康的受试者在两周24.0 - -25.0°C。实验过程进行的动物保健委员会的指导下孟加拉农业大学。总共有380个人被随机分配。他们被安置在大水箱装有自来水提供曝气系统。鱼一天喂两次与商业干球(Krishibid鱼饲料有限公司)含有38%的蛋白质。喂养实验前24小时停止运行,期间的实验。水箱里的水是每两天改变一次。鱼被接受以及适应实验室条件下驯化期间死亡率低于1%时记录的14天。鱼没有歧视的男女使用。

有机磷农药的Quinalphos 25 ec (O, O-diethyl O-quinoxaline-2-yl phosphorothioate, QP)收集的授权经销商从Mymensingh农药在原来的密封容器,孟加拉国。测试的截止日期物质检查治疗开始之前被发现适合曝光。股票的解决方案是准备根据欧共体%活性成分和所需浓度的农药把小心翼翼地倒进25 L dechlorinated自来水在测试水族馆(厘米³微量吸液管),与玻璃棒轻轻地搅拌,确保完整的混合。

在开始测试之前,所有实验水族缸清洗和充满dechlorinated自来水。与所选农药急性毒性测试银barb跟着经合组织203号指令”鱼,急性毒性试验。“实验是在水槽前24小时QP是补充道。后进行测距生物测定20 ppm(0.002),显示一个静态急性毒性进行了生物测定标准方法来确定致死浓度值(QP)。实验设计包含8组(七个测试组和对照组),复制也准备了基本的测试。每组暴露于不同浓度是1.5,2.5,4.0,5.5,7.0,8.5,和10 ppm 96 h。控制鱼保持无农药dechlorinated自来水在单独的坦克在这个实验。超过曝气是应用于水族馆为2 h,以获得均匀的浓度有毒化合物,然后随机十鱼没有压力传送到每个测试水族馆后适当的适应环境。24小时前在毒性实验和测试,喂养的鱼了。死鱼被立即和死亡率被记录。鱼被认为是死当可见运动(如盖动作)停止,没有反应温和尾花梗的探索。LC₀,信用证₅₀,信用证_{One hundred.}值的时间间隔测定probit分析。

基于96 h LC的结果₅₀QP, 200条鱼的银barb暴露了28天的名义浓度10%和20%信用证₅₀(LC₅₀QP = 4.70 ppm)。每个浓度复制两次。有一个为每个实验对照组。除了控制坦克,适当的卷毒物被添加到每个柜。鱼喂3%体重38%粗蛋白水平颗粒状的饮食。保持一个相对恒定的毒物浓度和溶解氧水平以及减少氨的水平在实验期间,毒物和测试水域再度在为期两天的间隔。五鱼采样控制和浓度每隔7天到28天。

血液分析由Blaxhall和Daisley提出的标准方法6]。获得血液样本,鱼被发现在一个小勺轻轻净,然后迅速从水中取出,坚定地在板凳上布覆盖每个鱼的头和血液样本被微量吸液管退出尾静脉没有麻醉。全血撤军过程花了不到一分钟/鱼,被认为是重要的,以避免应力影响正常血液中为了减少一个错误值。收集血液轻轻推到消毒埃普多夫管含有抗凝剂(乙二胺tetra-acetic酸、乙二胺四乙酸)给最后一个每厘米5毫克EDTA的浓度³血。血液样本混合轻轻地和丢弃如果在带他们遇见任何困难或凝块被认为在瓶在实验室检验。

血糖测定采用数字血糖工具包(GLUCOLAB)。血液样本在1、2、3、4、7、14、21日和28天从3鱼随机选择从每个治疗,一滴血液样本被放置在带连接到GLUCOLAB自动编码血糖测试仪表和结果记录下来。更易表达的价值观/ L。血红蛋白(Hb)估计是由使用数字EasyLife Hb米。表达的价值观g / dL。

Snieszko microhematocrit方法(7)是用来确定比容(PVC)。红细胞(RBC)、白细胞(WBC)计数测量在光学显微镜和一种改进的纽鲍尔血细胞计数器(8]。派生的血液指标均值的微粒体积(MCV)、平均微粒血红蛋白(MCH)和平均微粒血红蛋白浓度(MCHC)使用标准的计算公式如耆那教徒所述9]: μ米³, pg, 毫升。复制都是用于计算平均值。统计数据进行SPSS 16.0计算机程序(SPSS Inc .,芝加哥,伊利诺斯州,美国)。死亡率的差异之间的价值观和血液参数在不同浓度和暴露时间处理统计通过方差分析(ANOVA)。致死浓度的QP值计算使用概率元分析方法。致命浓度计算置信区间为95%。

3所示。结果

测距测试进行了集中的QP 0.002 ppm和20 ppm之间一段96 h没有死亡率高达2 ppm的浓度在20 ppm 100%死亡率。因此,得出的结论是,半数致死浓度(LC₅₀)银barb QP 2至20 ppm。执行测距测试后,半数致死毒性研究确定QP的浓度从1.5到10.0 ppm。鱼96 h的接触,在浓度为2.5 ppm显示10%的死亡率,在浓度为10.0 ppm 100%死亡率的注意。概率单位分析显示鱼的致死浓度为50%的死亡率在96 h为4.70 ppm。

在目前的研究中,血液生化和血液参数测量开始后28天QP的接触不同的亚致死的剂量。我们的研究结果表明,血糖水平显著增加1,2,3,4天,7点下降,14日,21日和28天的曝光时间与对照组相比(图1)。

Hb,意味着PCV红细胞,白细胞,红细胞指数(MCV、妇幼保健、MCHC)银barb暴露于慢性毒性的QP展示在表1。血液参数的变化观察到显著()与控制。显著差异()也被观察到各种血液参数之间具有不同的毒物浓度。

组织学研究表明,控制鱼的肝脏部分显示正常histoarchitecture;肝脏的特点是多边形形状的肝细胞和细粒度的细胞质。肝细胞在组织良好的肝索排列,由狭窄的血液正弦曲线(图2(一个))。鱼类肝脏暴露于0.47和0.94 ppm QP 7天导致变性肝细胞的细胞质,在血管破裂,肝细胞肥大和血管内出血(数字2 (b)和2 (c)在28天)导致细胞质空泡形成肝组织的肝细胞和灶性坏死。死红细胞也出现坏死区域(数据2 (d)和2 (e))。

肾脏肾小体的控制鱼是由众多成熟的肾小球和肾小管系统(图3(一个))。慢性亚致死的QP暴露肾部分显示等改变肾小体的退化,液泡化,高度退化和肾小管的膨胀和造血组织,细胞核结构的变化,轻微到严重坏死和出血(数字3 (b)- - - - - -3 (e))。

4所示。讨论

血液提供了重要资料研究对动物组织毒性影响。不同的血液参数往往受到变化取决于应力条件和各种其他环境因素。减少或增加某些血液参数与物种和毒物的性质不同的研究。减少血液变量(PCV、Hb和红细胞)的暴露鱼可能是由于溶血和红细胞的收缩QP导致显著降低血细胞比容导致鱼贫血。红细胞的破裂率增加或减少红血球的生成率也可能负责减少红细胞计数。类似的观察报告claria gariepinus硫丹杀虫剂处理(10]。这也可能是由于血液稀释造成整个鳃上皮细胞渗透调节受损(11]。减少血液指标也可能是由于造血作用明显的下降。类似的报道红细胞减少氯氰菊酯治疗Labeo rohita(12),非洲猫的鱼c . gariepinus)接受二嗪农13),和淡水鲤鱼(鲤属carpio)接受阿特拉津14]。在目前的研究中,PCV值显著降低增加QP的毒性在28天的暴露时间。由于主要减少红细胞,PCV降低了。类似于现在的发现,Chindah et al。15)发现Hct的价值下降罗非鱼guineensis氯氰菊酯和毒死蜱不同亚致死的水平。类似的观察也报道了Koprucu et al。16],Jayaprakash和Shettu [17],Jeyapriya et al。18]。

白细胞计数增加发生在病理反应,因为这些白细胞发挥巨大的作用在侵扰和刺激造血组织的免疫系统产生抗体和化学物质作为防御感染(19]。白细胞细胞免疫系统很重要,因为他们的主要防御功能。白细胞立即响应的变化中由于毒物。毒素暴露期间QP,白细胞数量提高。它表明,鱼可以开发一个防御机制来克服不良的压力。

乙肝治疗的内容减少银barb Hb下降可能表明合成以及减少携氧能力也许是由于QP的干涉与血红素或球蛋白合成途径。明显降低()在比容、红细胞计数的值和Hb内容与对照组相比已经报道了鲶鱼在急性暴露于二嗪农13]。获得血液参数值的减少对鱼的研究表明,对鱼的生理活动受到影响。

测量血液生化参数作为重要的诊断工具用于异常检测的肝脏和其他组织(20.]。血糖已被证明是一个敏感指标,环境压力对任何化学污染物包括杀虫剂(21]。葡萄糖的增加价值相比控制表明,银barb生成更多的葡萄糖产生的能量用于对抗压力诱导QP的鱼。增加血糖水平,观察可能导致增加葡萄糖生成和肝糖分解以及抑制肝糖分解和糖原生成压力(22]。呼吸代谢是抑郁,存储细胞内糖原等条件下使用;高血糖的激素释放糖原的降解,因此葡萄糖泄露进入血液引起高血糖(23]。在目前的调查,亚致死的暴露在0.47和0.94 ppm QP导致血浆葡萄糖浓度显著增加,表明暴露鱼代谢性应激的反应。类似的观察也报道了et al .(伽马安基丁酸24在银鲶鱼(Rhamdia quelen),Velisek et al。25在鲤鱼,Adedeji [13在猫的鱼(c . gariepinus)。

组织的组织学是暴露于污染物的指标,是一个有用的工具来评估污染程度,特别是对于亚致死的和慢性影响26]。本研究中观察到的常见的肝脏异常肝细胞肥大,轻微到严重坏死,血溢出,中央静脉破裂,脂滴空泡形成。和肝脏的变化是时间和浓度依赖性。肝脏组织学的变化可以归因于这样一个事实:肝脏是解毒的主要网站(27];预计的有毒的杀虫剂会达到丰富解毒和处置(28]。鱼无法重新生成新的肝细胞也可能导致肝细胞坏死的正弦曲线。本协议与其他研究结果或多或少的坏死和脂沉积症液泡化,增加巨噬细胞聚集和嗜酸性颗粒细胞被记录在鱼用杀虫剂处理百草枯和马拉松,分别为(29日,30.]。

鱼的肾脏接受血液后鳃的最大比例,因此肾损伤可能是良好的环境污染指标。已经发现,QP的亚致死剂量诱导肾脏结构的改变银刺。这些结果显示,组织病理学变化剂量和持续时间相关的。近端小管是最先受到影响导致减少一些细胞的核材料。然后,通过肾小球损伤逐渐蔓延,造血组织和细胞远端和收集管的秩序。相似的变化在鱼暴露于杀虫剂(已报告31日- - - - - -33]。认为或多或少类似的病理变化引起的肾脏不同鱼不同的毒物,但损害的程度取决于不同剂量的毒物,曝光时间,化学毒性,易感性的鱼。

5。结论

的血液和组织学的变化发生在当前的研究中,作为初始时期暴露在鱼的器官接触QP毒性,可能是一种防御机制的一部分。进一步积累QP在鱼的器官长期接触引起显著的血液器官结构的改变和破坏。这些变化可能是潜在的破坏性的生存能力银刺在他们的自然环境。这个事实时应该考虑周围农田的用于防治害虫自然淡水水库。

免责声明

作者仅负责内容和论文的写作。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

承认

这项工作是由格兰特的水产养殖药物和化学物质对水生生态的影响和生产力项目(IADCAEPP)提供的孟加拉国渔业研究所(BFRI) Mymensingh 2201年,孟加拉国。