的行为特征GCLM基因敲除小鼠,增强对氧化应激的典范

文摘

谷胱甘肽(GSH)是一个主要玩家在细胞对抗氧化应激。删除谷氨酸半胱氨酸修饰符单元的连接酶(GCLM),第一个和病原反应酶的合成谷胱甘肽,谷胱甘肽水平较低导致显著的组织包括大脑。GCLM击倒(Gclm^−−/)因此,老鼠可能代表一个模型破坏氧化应激反应服从在体外和在活的有机体内调查。为了确定是否减少谷胱甘肽含量本身会导致行为的改变,一系列行为测试进行了比较年轻的成年人Gclm^−−/与野生型老鼠。测试包括rotarod、声惊吓反射和前脉冲抑制惊吓反射,开放的领域行为,平台的逆转变体莫里斯水迷宫。结果显示没有差异Gclm^−−/和野生型小鼠的神经行为测试。然而,更微妙的变化,或者变化可能表现为动物的年龄,不能排除在外。

1。介绍

氧化应激是指细胞毒性的后果活性氧(ROS)生成副产品的正常和异常的使用分子氧的代谢过程。三肽谷胱甘肽(谷胱甘肽;γ-glutamyl-cysteinyl-glycine)是一种最丰富的细胞硫醇。谷胱甘肽是一个细胞防御活性氧的主要参与者,因为它nonenzymatically进行单线态氧和羟基自由基和使用谷胱甘肽氧化酵素,谷胱甘肽转移酶限制某些活性醛的含量和细胞内过氧化物(1,2]。当ROS生产超过细胞的抗氧化防御能力,氧化应激,导致损害的DNA,蛋白质和膜脂质。第一次和病原反应一步合成谷胱甘肽是由glutamate-cysteine连接酶(GCL;(1])。酶由两个亚基组成,更大(73 kD)催化亚基(GCLC)和一个较小的(31 kD)修饰符,或监管,亚基(GCLM),由独立的编码基因(3]。GCLC仅提供了催化活性,谷胱甘肽的反馈抑制。通过降低GCL的谷氨酸和提高谷胱甘肽,GCLM尽管惰性酶,扮演着一个重要的管理功能,为全酶(GCLholo)催化效率高于GCLC [3,4]。而中断Gclc基因在小鼠embryolethal [5),没有明显的表型观察的中断Gclm基因在小鼠4,6,7]。在缺乏GCLM,GCLC合成谷胱甘肽的能力急剧下降(8]。在组织Gclm^−−/老鼠,谷胱甘肽水平只有10 - 30%的发现Gclm^{+ / +}动物(6,7,9]。在大脑组织和细胞,谷胱甘肽的水平Gclm^−−/老鼠是17 - 35%的人出现在野生型小鼠(6,10,11]。

Gclm^−−/小鼠肝毒性更敏感的对乙酰氨基酚(7),和大脑的神经元和星形胶质细胞分离Gclm^−−/老鼠已经被证明是特别容易受到药剂的毒性增加氧化应激,如软骨藻酸(6),某些有机磷杀虫剂(12),甲基汞和多氯联苯13),还有聚溴二苯醚(10]。

相对普通C588T多态性已发现5′侧翼地区的人类GCLM基因(14]。个人携带T等位基因的启动子活性较低的荧光素酶报告基因检测对氧化剂和血浆谷胱甘肽水平明显降低14]。这些人也在心肌梗塞的风险和现在在硝酸oxide-mediated冠状血管舒缩功能障碍(14,15]。之间的关联GCLM多态性与精神分裂症也被建议(16]但仍是有争议的17,18]。

然而,个人GCLM多态性导致较低的谷胱甘肽水平预计将显示一个增强敏感性氧化压力的负面影响。的Gclm^−−/老鼠代表这样一个有用的模型GCLM多态性,可以在体外,以及在活的有机体内研究。为了扩展在体外观察到一个在活的有机体内情况下,一个初始的行为特征Gclm^−−/老鼠,来确定是否由基因决定减少谷胱甘肽水平本身会影响行为的结果。事实上,谷胱甘肽失调与一些疾病的病因和发展有关,包括神经毒性和神经退行性疾病(19,20.]。

2。材料和方法

2.1。代Gclm-Null小鼠和基因分型

所有动物都使用协议机构批准的动物保健和使用委员会华盛顿大学,和实验进行了按照国家研究委员会指导实验室动物保健和使用的,采用美国国立卫生研究院的。野生型和Gclm零(Gclm^−−/)小鼠backcrossed C57Bl / 6 j (B6.129)应变背景6,7)被安置在一个集中的、AAALAC-accredited和特定的华盛顿大学的无菌设施。老鼠维持在12 h与随意光暗周期获得食物(标准鼠标chow)和水。雄性和雌性老鼠的半合Gclm删除(Gclm赫兹)intercrossed,生成野生型,Gclm^−−/,Gclm赫兹老鼠,在预期的孟德尔比率(21]。

基因型幼崽,基因组DNA是隔绝的耳朵穿孔组织使用试剂盒DNeasy装备,和老鼠的基因野生型的PCR扩增和破坏Gclm等位基因(即。,amplification ofβgeo),如前所述6,7]。

正如前面看到的,所有的幼崽发育正常,表现出比野生型表型地标的同胞没有差异。在断奶,老鼠都被转移到神经行为测试设施和居住期间每笼两到四个测试。

2.2。神经行为评估

一个野生型(总= 12)或Gclm^−−/(总= 13)雄性老鼠,每个来自不同的垃圾,被用于神经行为测试。测试选择调查可能差异两个老鼠基因型在感官功能,运动活动和协调,以及学习和记忆。

听觉惊吓和前脉冲抑制惊吓在12周的年龄进行了测试使用一个自动化的听觉惊吓室(圣地亚哥仪器)。在15分钟测试会话,老鼠被放置在惊吓室和提供30刺激随机间隔。120分贝的刺激包括语气,120 dB语气之前70 dB前脉冲,或“零”刺激涉及没有语气。每种类型的刺激了10次。刺激的顺序表示第一次决定使用随机数字表,之后每个鼠标收到相同的刺激顺序。惊吓室使用压电传感器测量最大振幅()后的惊吓反应每个刺激和延迟的最大惊吓反应()。前脉冲抑制惊吓的抑制百分比计算70分贝的声音惊吓反应前脉冲,在减去零刺激的惊吓反应(22,23]。

rotarod (Coulbourn仪器)是用来测试运动协调和小脑学习(24,25在13周的年龄)。老鼠放在rotarod缸,加速从基线率5转/分钟3 rpm。延迟脱落四缸被记录为每个连续试验,5分钟intertrial间隔。

开放田地行为和运动活动在20周的年龄进行了测试使用Tru-Scan照片波束跟踪系统(Coulbourn仪器,白厅PA)。老鼠被放置在一个开放田地竞技场,宽是25.4厘米,25.4厘米,40.64厘米高,动作和行为记录15分钟利用双传感器环测量红外光束在水平或垂直平面。梁间距为1.52厘米,0.76厘米的空间分辨率。在30秒垃圾箱收集数据,总计15分钟测试期间被计算成30个人价值的总和。数据也被单独分析第一5分钟时间,第二个5分钟期间,第三个5分钟。具体措施包括运动总数、总运动时间,休息时间,动态移动时间,延迟第一运动,延迟第一动态运动,总运动距离,走动的距离、平均速度、流动的速度,距离在舞台边缘和舞台中心,时间在舞台边缘和舞台中心,数量的条目到舞台中心,后一半,前一半的时间领域,数量的条目到一半,前一半的领域,数量的条目为垂直面,时间在垂直平面,从地板上飞机,垂直面的运动,许多刻板动作,刻板的情节,总时间的刻板行为,顺时针逆时针方向和中心点旋转。数据是自动收集使用Tru-Scan 2.0软件,原始数据被Microsoft Excel导出进行分析。

莫里斯的platform-reversal变体水迷宫是用来测试学习和记忆26- - - - - -28在14周的年龄)开始。这个测试利用polytrack系统上面。迷宫由一个165加仑(624.6升),圆形,镀锌浆槽,直径4英尺(1.22米)和2英尺(0.61米)高,充满了室温水。10平方厘米的有机玻璃被站在坦克略低于水位作为逃避平台。圣地亚哥Polytrack系统(仪器)是用来跟踪的位置老鼠在迷宫中。静止的物体周围的坦克被用作空间线索。老鼠训练七天,每天三个试验,每隔30分钟intertrial,获得任务。在第一个试验中,老鼠在一个随机的四个位置和允许探索坦克和熟悉游泳。老鼠然后引导越狱平台,在这个平台上举行了30秒,然后他们的坦克,干,放在热灯下。在随后的试验中,老鼠掉进水箱和60秒的时间来找到一个平台。 Once the mice found and climbed onto the platform, the test was stopped and the latency to find the platform was recorded. After the 21-trial acquisition phase, the platform was moved to the opposite quadrant, and mice were tested for an additional 21 trials, with 3 trials per day separated by a 30 min intertrial interval. Latency to find the platform was measured as above. One month following the last reversal trial, mice were tested for retention using a probe test. The platform was removed, and mice were placed into the tank at a random drop location and allowed to swim for 2 minutes. Dwell time in each quadrant, average distance from target (previous location of platform), and number of target crossings were recorded.

2.3。统计分析

与微软Excel数据进行了分析。不同基因型进行了测试,供学生的统计学意义以及,在某些情况下通过Bonferroni调整为多个测试。结果报告为±SE ()。

3所示。结果

正如之前报道的(6,7),Gclm^−−/小鼠和野生型老鼠出生在预期的孟德尔比率和展出产后发育期间没有明显的发展差异。成年男性和女性Gclm^−−/老鼠查阅略低于野生型小鼠(表1)。只有雄性老鼠用于行为测试。

在13周的年龄、运动协调和小脑学习测试使用rotarod(图1)。野生型和Gclm^−−/老鼠都学会了任务,和延迟脱落rotarod增加每个连续试验(实验1和实验2、3和4:野生型,;Gclm^−−/,)。之间的延迟没有明显差异Gclm^−−/和野生型老鼠试验(),两个()、三(),或四(),也当平均延迟在所有四个试验()。

听觉惊吓和前脉冲抑制惊吓被测试(图12周的年龄2)。没有听觉惊吓振幅的差异()与野生型Gclm^−−/老鼠。当120分贝听觉刺激之前是70分贝前脉冲,惊吓振幅显著降低(在野生型和Gclm^−−/老鼠(图2)。与野生型之间没有差异Gclm^−−/老鼠在这前脉冲抑制惊吓的大小()。延迟在野生型和最大惊吓也类似Gclm^−−/老鼠的听觉惊吓(22.6±1.8 msec和20.8±1.5微秒,分别地;)和前脉冲抑制惊吓(31.9±4.2 msec和25.9±1.8微秒,分别地;)。

运动活动和行为在一个开放的领域进行了测试在20周的年纪,把一只小老鼠在舞台上和记录运动和行为15分钟(图3)。Gclm^−−/和野生型老鼠几乎相同的措施(),包括运动活动,总运动时间,走动的距离,时间在舞台上的不同区域,刻板动作,垂直面(图中的条目的数量3)。

学习和记忆的测试使用platform-reversal变体莫里斯水迷宫,开始在14周的年龄。Gclm^−−/小鼠获得同样的任务以及野生型老鼠;延迟找到隐藏的水下平台下降()在七个日常测试会话对小鼠基因型(图4)。平台在第八天开始逆转,当平台搬到相反的象限。野生型和Gclm^−−/老鼠很难找到新平台位置的第一天,反映在他们的延迟增加找到平台在会话8但能够学习新平台的位置在随后的训练(图4;)。与野生型之间没有明显差异Gclm^−−/老鼠在收购或逆转的任务()。在野生型小鼠显示出倾向增加平台延迟会议10,相比Gclm^−−/老鼠,这种差异无统计学意义()。结束后一个月platform-reversal测试,保留每测试一次鼠标,使用探测试验。老鼠被放置在莫里斯水迷宫和被允许搜索两分钟没有一个平台。没有基因型之间的差异()在平台象限停留时间百分比(野生型:23.9±1.9%;Gclm^−−/:19.7±1.8%),逆转象限停留时间百分比(野生型:27.8±1.5%;Gclm^−−/:34.0±3.4%),或在平均距离目标(野生型:38.7±1.6厘米;Gclm^−−/:35.7±1.6厘米)。游泳速度也相同的野生型和(19.2±0.4厘米/秒)Gclm^−−/(18.5±0.4厘米/秒)的老鼠。

4所示。讨论

基因的删除GCLM导致低的谷胱甘肽水平在所有组织包括大脑(6,9- - - - - -11]。神经元和星形胶质细胞Gclm^−−/老鼠已经被证明是特别容易受到各种化学物质的神经毒性影响,如软骨藻酸,多氯联苯,甲基汞,某些有机磷杀虫剂,和多溴化阻燃剂,以引起氧化应激(6,10,12,13,初步在活的有机体内实验与阻燃BDE-47 (2, 2′, 4, 4′-tetrabromodiphenyl醚)支持这些发现(佐丹奴科斯塔,未发表)。为了执行在活的有机体内与这些化合物暴露研究,确定其潜在能力扰乱正常行为,行为特征Gclm^−−/老鼠是第一需要。

本研究的结果表明Gclm^−−/老鼠没有不同于野生型小鼠的行为旨在测试自发运动活动,运动协调、学习和记忆、感觉功能。这些测试通常用于行为毒理学评估不利影响神经系统的化学物质在成人或发展暴露在化学物质(29日]。缺乏之间的差异Gclm^−−/和野生型老鼠在这些测试表明,谷胱甘肽缺乏不会导致改变神经系统功能重要的足以被检测到。然而,显著差异预计将在挑战与外源性化合物,特别是那些引起氧化应激。因此,Gclm^−−/老鼠将是一个好的模型来评估这些基因-环境交互作用的重要性导致神经毒性。

两个额外的解释缺乏观察之间的差异Gclm^−−/小鼠和野生型老鼠在当下研究可能躺在行为测试使用的类型和时代的动物。虽然这项工作在进步,另一项研究调查行为改变Gclm^−−/老鼠发表(11]。这些调查人员不仅证实了我们的一些结果,但也证明额外的微妙的变化。在我们的研究中,没有发现差异在空间工作记忆、空间参考和学习记忆和空间逆转学习。然而,在其他的测试中,Gclm^−−/老鼠(4 - 6个月)显示增加novelty-induced探索,改变行为在一个对象识别任务,减少压力下的行为抑制和降低响应延迟恐惧条件反射(11]。这些微妙的行为改变是由氧化腹侧海马的变化,没有背侧海马的变化,提出了在精神分裂症(潜在的相关11]。然而,尽管一个之间的联系Gclm多态性与精神分裂症先前建议(16),更多的最近的研究挑战了这一假设17,18]。

此外,有可能这两个之间有细微的差别Gclm^−−/模型,因为基因缺失的策略是不同的。模型中首次发表的道尔顿et al。5)和使用Steullet et al。11),的第一个外显子Gclm基因取代新霉素磷酸转移酶(neo在相反的方向。在模型中我们使用这里,第一外显子/取代β-半乳糖新霉素磷酸转移酶(β-geo)融合基因的方向前进。虽然这两个Gclm^−−/模型似乎本质上相同的谷胱甘肽水平的变化,仍然是有可能的,两种不同的方法用于构造这些模型可能会导致其他不可预见的生物学差异。

老鼠测试在这个研究是年轻人,在13和20周之间的年龄。已经提出,氧化应激可能导致衰老通过逐步增加氧化剂对细胞的损伤(30.,31日]。此外,氧化应激已经建议参与神经退行性疾病,如帕金森症和阿尔茨海默病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症19,20.,32]。它最近表明,成纤维细胞Gclm^−−/老鼠接受过早衰老,通过改变细胞形态、生长速率下降,senescence-associated增加β牛乳糖活动(33]。因此,它似乎是合理的Gclm^−−/将显示改变行为,与野生型同行相比,随着年龄的增长,从而成为一个有用的模型,研究改变抗氧化能力的影响神经系统的衰老。

承认

这项研究的部分资金支持的环境和职业健康科学,华盛顿大学西雅图,佤邦,美国,赠款T32ES07032并从NIEHS P30ES07033。

引用

1. r . Dringen“谷胱甘肽的代谢和功能的大脑,”神经生物学的进展,卷62,不。6,649 - 671年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. o . j . r . Franco Schoneweld, a .爸爸和m . i Panayiotidis”中央谷胱甘肽的作用在人类疾病的病理生理学,”生理学和生物化学的档案,卷113,不。4 - 5,234 - 258年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. c·c·富兰克林d s Backos莫豪尔,c . c .白色,h·j·福尔曼和t·j·卡文纳,”结构、功能和翻译后调节谷氨酸半胱氨酸连接酶的催化和修饰符的子单元,“分子医学方面,30卷,不。1 - 2、86 - 98年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. y . Chen h . g . Shertzer施耐德、d . w . Nebert t·p·道尔顿,“谷氨酸半胱氨酸连接酶催化:依赖ATP和修改器单元的监管组织谷胱甘肽水平,”生物化学杂志,卷280,不。40岁,33766 - 33774年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. t·p·道尔顿m z Dieter, y, h . g . Shertzer和d . w . Nebert“基因敲除的小鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(Gclc)基因:胚胎致命的纯合子,并提出模型中谷胱甘肽缺乏当杂合的,”生物化学和生物物理研究通信,卷279,不。2、324 - 329年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. g .佐丹奴,c . c .白色,洛杉矶McConnachie, c·费尔南德斯,t·j·卡文纳和l·g·科斯塔,”神经毒性软骨藻酸的小脑颗粒神经元缺乏谷胱甘肽的基因模型,”分子药理学,卷70,不。6,2116 - 2126年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. l . a . McConnachie莫豪尔,f·n·哈德逊et al .,“谷氨酸半胱氨酸缺连接酶修饰符单元和性别的决定因素acetaminophen-Induced小鼠的肝毒性,”毒物学的科学,卷99,不。2、628 - 636年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. t·p·道尔顿y . Chen施耐德、d . w . Nebert和h . g . Shertzer“转基因老鼠在健康和疾病评估谷胱甘肽体内平衡,”自由基生物学和医学,37卷,不。10日,1511 - 1526年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. 易。杨,m . z . Dieter y . Chen h . g . Shertzer d . w . Nebert和t·p·道尔顿glutamate-cysteine连接酶修饰符单元的初始特征Gclm(- / -)基因敲除老鼠。小说模型系统严重破坏氧化应激反应,”生物化学杂志,卷277,不。51岁,49446 - 49452年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. g .佐丹奴、t·j·卡文纳和l·g·科斯塔”神经毒性的多溴二苯醚混合物(de - 71)在小鼠神经元和星形胶质细胞是由细胞内谷胱甘肽水平,调节”毒理学和药理学应用,卷232,不。2、161 - 168年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. p . Steullet黄永发。Cabungcal Kulak et al。,“氧化还原失调影响腹侧而不是背海马:小清蛋白的损伤神经元,伽马振荡,以及相关的行为,”神经科学杂志》上,30卷,不。7,2547 - 2558年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. g .佐丹奴z Afsharinejad, m . Guizzetti a . Vitalone t·j·卡文纳和l·g·科斯塔“有机磷杀虫剂毒死蜱和二嗪农和氧化应激在神经细胞缺乏谷胱甘肽的基因模型,”毒理学和药理学应用,卷219,不。2 - 3、181 - 189年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. l·g·科斯塔诉Fattori g .佐丹奴和a . Vitalone”的体外方法评估某些食品污染物的毒性:甲基汞和多氯联苯,”毒理学,卷237,不。1 - 3、65 - 76年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. 机票的。中村,k . Kugiyama s Sugiyama et al .,“多态性$5^{\prime }$侧翼地区人类glutamate-cysteine连接酶修饰符的亚基基因与心肌梗死有关,”循环,卷105,不。25日,第2973 - 2968页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. s . i中村s Sugiyama d . Fujioka k . i川端康成h .小川和k . Kugiyama”glutamate-cysteine连接酶修饰符亚基基因的多态性与氮oxide-mediated冠状血管舒缩功能障碍,”循环,卷108,不。12日,第1427 - 1425页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. m .除了j .奥特s Barral·波维表p . Deppen f . Gheorghita et al .,“精神分裂症和氧化应激:谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰符易感性基因,”美国人类遗传学杂志》上,卷79,不。3、586 - 592年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. c . Butticaz t . Werge j·s·贝克曼,m . Cuenod k .问:做什么,和c . Rivolta”突变筛查的谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰符(GCLM)基因在精神分裂症患者,”精神病遗传学,19卷,不。4、201 - 208年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. r . j .妈,d . m . Li Zhang et al .,”谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰符的遗传分析(GCLM)在汉族基因和精神分裂症精神分裂症的研究,卷119,不。1 - 3、273 - 274年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 塞尔·l·m·g·佩里,m·a·史密斯,“氧化应激和神经毒性,”化学毒物学研究,21卷,不。1,第188 - 172页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. n . Ballatori s·m·Krance s Notenboom史,k .越南计量和c·l·哈蒙德,“谷胱甘肽失调和人类疾病的病因和发展,“生物化学,卷390,不。3、191 - 214年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. d·博塔携手,c . c .白色,p . Vliet-Gregg et al .,“调制谷胱甘肽合成使用谷氨酸半胱氨酸连接酶转基因和基因的老鼠,”药物代谢的评论,40卷,不。3、465 - 477年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. s . f .罗格·e·h·欧文,d·l·拉斯穆森和j·m·韦娜”运动活动的评估,听觉和触觉惊吓,和前脉冲抑制stratle近交品系小鼠和F1杂交:单基因的遗传背景和影响数量性状位点分析,“神经科学,卷80,不。4、1075 - 1086年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. r . Paylor和j·n·克劳利近交品系差异前脉冲抑制鼠标惊吓反应,”精神药理学,卷132,不。2、169 - 180年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. j·奥尔特曼和k·苏达山,“产后运动的发展在实验室老鼠,”动物行为,23卷,不。4、896 - 920年,1975页。视图:谷歌学术搜索
25. v . j .莫泽“啮齿动物神经行为检测,”当前协议毒理学l·g·科斯塔·霍奇森和d·j·里德,Eds。约翰•威利& Sons Inc ., 1999年。视图:谷歌学术搜索
26. r·莫里斯“水迷宫的发展过程为研究大鼠的空间学习,”神经科学杂志》上的方法,11卷,不。1,47-60,1984页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. g·l·温克“空间记忆的评估,”当前协议毒理学l·g·科斯塔·霍奇森和d·j·里德,Eds。,pp. 11.3.1–11.3.18, John Wiley & Sons, Inc., 1999.视图:谷歌学术搜索
28. 诉Voikar, s角、大肠Vasar和h . Rauvala“应变和性别差异在鼠标线常用的行为在转基因研究中,“生理和行为,卷72,不。1 - 2、271 - 281年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. k·c·拉斐尔·w·p·Weisenburgen,“神经毒理学测试”毒理学测试手册。原理、应用程序和数据解释d . Jacobson-Kram和k·a·凯勒,Eds。,chapter 4, pp. 357–390, Informa Healthcare, New York, NY, USA, 2006.视图:谷歌学术搜索
30. t·芬克尔和n·j·霍尔布鲁克氧化剂,氧化应激和老化的生物学,”自然,卷408,不。6809年,第247 - 239页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. r . s . Sohal r . j . Mockett和w·c·奥尔”衰老的机制:一个评价氧化应激假说,”自由基生物学和医学,33卷,不。5,575 - 586年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. m·李,t·曹n . Jantaratnotai y . t . Wang e·麦基和p·l·麦基,“神经胶质细胞中谷胱甘肽的耗竭诱发神经毒性:与衰老和退化性神经疾病,”美国实验生物学学会联合会杂志,24卷,不。7 - 8,2533 - 2545年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. e . y . Chen约翰逊,y风扇et al .,“早发性衰老发生在成纤维细胞缺乏glutamate-cyteine连接酶修饰符单元,“自由基生物学和医学卷,47号4、410 - 418年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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