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a . l . El-Ansary n . s . Abdel-Kader a . m . Asran, ”光谱光度测量的研究与一些Sulfonphthalein Diaveridine染料的反应基于离子对/ Ion-Associate复合物的形成”,《光谱学, 卷。2018年, 文章的ID9269148, 10 页面, 2018年。 https://doi.org/10.1155/2018/9269148
光谱光度测量的研究与一些Sulfonphthalein Diaveridine染料的反应基于离子对/ Ion-Associate复合物的形成
文摘
的ion-associate复合物,研究spectrophotometrically diaveridine准备在一个解决方案。笨重的柜台等阴离子sulfonphthalein酸性染料,即溴甲酚绿(我),溴酚蓝(II),溴百里酚蓝(III),溴甲酚紫(IV),溴甲酚蓝色(V),邻甲酚红(VI), p-cresol蓝色(七)和间甲酚紫(八)被用于ion-associate复合物的形成。最优特征颜色形成和化学计量学的反应进行评估。形成离子的光谱特性和稳定常数同事讨论的供体和受体分子结构的性质。有色配合物的摩尔吸光系数和协会常数使用Benesi-Hildbrand方程进行了评估。符合比尔定律分析了药物的剂型。摩尔吸光系数、特定吸收率Sandell敏感性,相关系数,检测和量化的限制也被计算。方法验证的准确性、特异性、精度和线性度。同时,光度法测定纯药物和制剂进行了测试。
1。介绍
含嘧啶环化合物发挥重要作用在许多生物系统由于其协调属性。所以,取代2、4 diaminopyrimidines广泛用作代谢通路的抑制剂导致蛋白质和核酸的合成1]。在这些种类的化合物,diaveridine (5 - [(3 4-diethoxyphenyl)甲基]-pyrimidine-2 4-diamine)是一个众所周知的生物制剂,而且,它可以用作antiprotozoal剂在动物(2,3]。Diaveridine发现作为一个强大的抗菌药物由于两组甲氧基取代的苯环(4),除了两个芳香族氨基酸组的存在或酸性的氢分子使它作为一个强大的受体(5,6]。它有广泛的抗菌活性对许多革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌7]。它也有非凡的活动对coccidian;用于治疗鸡球虫病、禽霍乱,pullorum [8]。这方面的工作已经被观察到药物。随后,我们的目标是研究这种药物的反应与笨重的计数器等阴离子sulfonphthalein酸性染料。Sulfonphthaleins是最有趣的一个家庭的阴离子染料和吸引了科学界的关注;这是归因于他们的分子结构允许ion-associate复合物的形成与各种药物、离子对或离子协会复合物的复合体,其分析与电荷相反的离子物种associates形成中性化合物(9- - - - - -12]。离子对复合物的形成方法被用于各种药物的可见分光光度测定的文献通过与电荷相反的离子配对染料形成有色配合物(13]。
该方法应用于原料药的分析及其剂型。分析的结果验证了统计和恢复计算范围。官方的结果与方法。在拟议的方法,没有提取步骤是利用从而减少时间和误差估计。
2。实验
2.1。材料和试剂
这次调查中使用的所有化学物质是化学纯等级(BDH或奥尔德里奇)。他们包括溴甲酚绿、溴酚蓝、溴麝香草酚蓝,溴甲酚紫、溴甲酚红蓝、甲酚红、甲酚蓝色,甲酚紫(BDH化工有限公司,英国Poole);Diaverdine (Elnaser制药化学品埃及开罗);和New-Cox强大anticoccidial水溶性粉(Atco制药制药行业,开罗,埃及)。在这项研究中使用的溶剂氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氧六环、二甲基甲酰胺、二甲亚砜进一步纯化使用标准方法(14]。所有化学品、溶剂和试剂均为分析纯,准备他们的解决方案是,在高纯度溶剂稀释。
Diaverdine被用来准备1.0×10股票的解决方案−3mol / L,通过溶解适量(0.0260克)的药物1毫升的绝对乙醇,然后用氯仿稀释至100毫升。染料作为1.0×10−3mol / L,由溶解的准确称重数量最少的绝对乙醇,然后完成最后的体积与氯仿。
2.2。的设备
吸光度测量是在1601年日本岛津公司电脑,紫外可见分光光度计(日本岛津公司、东京、日本)和PYE-UNICAM SP 1750紫外可见光谱仪记录使用匹配细胞1厘米的路径长度。
一个techne循环器thermost模型c - 100(英国剑桥)是用来控制温度的测试解决方案。
2.3。Ion-Associate复合物的制备
ion-associate复合物的解决方案是由加1毫升1.0×10的标准解决方案−3mol / L的药物一系列10毫升校准烧瓶2.0毫升1.0×10紧随其后−3mol / L sulfonphthalein染料溶液。混合物与氯仿然后完成标志。为安全起见,所有操作涉及氯仿处理必须在正确操作进行化学通风柜减少过度曝光,整个实验室和广泛的污染最小化所有接触氯仿戴着手套的手。
2.4。测定药物的药物制剂
分析diaveridine New-Cox是由权重(0.0573 g) New-Cox药物对应1.0×10−3mol / L,然后在1毫升的绝对乙醇溶解,稀释后为100毫升的合适的溶剂。这个解决方案的不同整除受到分析报道。
3所示。结果与讨论
药物复合物的重要性源于这样一个事实,当药物成为ion-associate复杂的一部分,它获得新的属性可能完全不同于原来的药物。
Sulfonphthaleins(计划1)阴离子染料;其结构有两种互变异构体在平衡。但由于磺酸集团的强酸性性质lactoid环被打开和醌型必须占主导地位(15]。
一般Sulfonphthalein染料的分子结构,所示方案1,不同的取代基,所以他们可能会影响试剂的离解和ion-associate复合物的形成。电子的存在吸引组织sulfonphthalein骨架如溴原子增加的价值K一个的酸性染料,这使得它更加的电负性,和由于诱导效应,它将提取电子,从而减少碳排放α电子密度诱发积极的诱导效应和结构有一个相对较高的能量,将不稳定的酸性染料对阴离子形式(共轭碱);溴的存在是电子吸引,这将分散电荷和稳定阴离子形式,从而产生更强的酸性染料,因此分离将会更大。因此,染料I, II, III和V包含四个溴原子或和第四两个溴原子将更稳定阴离子形式。
当取代基如甲基或异丙基电子给体的结合,将会有一个诱导效应发生在分子,即提升反过来破坏阴离子的电荷密度的形式,因此酸会“喜欢”不分离。因此,K一个将小,使得弱酸性染料。它发生在第六、第七和第八染料。
多胺与这些染料容易形成复合物。氯仿是最好的溶剂,以实现最高的吸光度值。序列reagent-drug-solvent是最好的在所有情况下都形成的复合物。当染料溶液在氯仿中添加大量过量药物方案,立即产生强烈的颜色。这是由于染料的转换成一个开放quinonoidal阴离子导数,形成一个ion-associate药物。染料的颜色是由于开放lactoid环和随后形成醌型组织为代表的计划2,阴离子染料sulfonphthalein集团目前主要在阴离子形式;这有助于ion-associates复合物的形成。可能的反应机制给出了方案3。
参数影响ion-associate复合物的形成,如选择合适的波长,试剂浓度的影响,序列的影响,溶剂的影响,影响的时间,温度,和干扰效果的影响进行了研究。
ion-associate形成复合物形成的瞬间,超过48小时保持稳定。这意味着形成复合物是相当稳定的。
形成复合物的吸收光谱被记录在可见区域范围400 - 550 nm。对应于每个ion-associate的最大吸收波长和列在表决定1。
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一个检测极限。b量化的限制。c摩尔吸光系数(L摩尔−1厘米−1)。dSandell敏感度。e回归方程一个=一个公元前+ C浓度的地方μg·毫升−1。 |
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对学习效果的各种有机溶剂氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氧六环、二甲基甲酰胺、二甲亚砜和吸光度的ion-associates调查,发现氯仿是最好的溶剂,以实现最高的吸光度值。
时间的影响的形成和稳定复合物通过测量研究了复合物的吸光度增加时间间隔48小时(5分钟)。结果表明,形成ion-associate复合物形成瞬间超过48小时并保持稳定。这意味着形成复合物是相当稳定的。
同时,温度的影响复合物的形成和稳定性进行了研究通过测量ion-associates复合物在不同温度下的吸光度范围20°C-35°C。结果表明,温度对ion-associate复合物的形成没有影响。从这,我们可以推断出该方法非常适合常规分析纯药物和制剂,和温度控制和提取步骤是必需的。
试剂的影响进行了研究;发现的最大颜色强度复合物达到2.0×10−4mol / L的试剂的解决方案。
稀释剂的影响,辅料和添加剂,常常伴随diaveridine剂型进行了研究。没有吸收最大的转变(λ马克斯复合物)由于辅料的存在。这表明,没有可能从辅料干扰预期。
形成复合物的化学计量学是由工作的连续变异方法(16)和摩尔比率方法(MRM) (17]。结果表明,1:1和1:2(药物:染料)ion-associates形成(数字1和2)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(一)
(b)
(c)
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3.1。Obeyance朗伯比尔定律和Ringbom最佳范围
测试obeyance朗伯比尔定律,试剂的浓度在2.0×10保持不变−4mol / L的药物经常变化时从1.0×10−58.0×10−5mol / L。由此产生的吸光度测量他们的解决方案λ马克斯对一个空白的解决方案包含相同数量的试剂对浓度在同一条件和策划。测定药物浓度范围和摩尔吸光系数值(ε)在L·摩尔表示−1·厘米−1,如表所示1。摩尔吸光系数的值表示方法的高灵敏度。此外,Ringbom [18)地块(图3)。也位于表的结果1。
(一)
(b)
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3.2。验证Diaveridine测定的分析方法
分析方法的验证是一个过程,确定给定方法的适用性提供有用的分析数据。执行验证的方法识别潜在错误的来源和量化潜在错误的方法(19]。
的线性方法是通过测量吸光度检查的函数优化条件下的药物的浓度。应用最小二乘法absorbance-concentration数据,发现线路几乎通过附近的原点。相关性系数非常接近团结和显示良好的线性。更方便表达和比较的敏感光谱光度测量的方法的特定吸收率(一个)(L·g−1·厘米−1)[20.对应的吸光度µg / mL的试管1厘米的光学路径长度。相对标准偏差值计算(表1)。低标准偏差值表明,提出的方法是准确和精确的,因此他们可以很容易地用于日常工作药物控制实验室。
灵敏度的方法可以确定通过Sandell灵敏度的计算(SS) [21),代表的数量微克每毫升的分析物的解决方案有一个0.001的吸光度的路径长度为1厘米。表达的敏感性µ克/厘米2: 在哪里一个是特定的吸收率。
Sandell灵敏度低(SS)值(表1)表明提出的高灵敏度的方法。
提出了方法的检出限(DL)计算(表1使用以下方程()22]: 在哪里年代是平行测定的标准偏差值在相同条件下的样本分析在缺乏分析物和(k)是特定吸收率(校准曲线的斜率)。
测定的结果表明,diaveridine使用IV试剂给最小的检测极限(0.62μg / mL)。
量化限制QL可以由以下方程计算(22]:
QL第四对试剂的价值是2.07μ克/毫升。所以,这是最好的试剂diaveridine(表的决心1)。
比例相对标准偏差(RSD %)精度和比例相对误差(RE %)建议方法计算(表的准确性1)。精度是由五个不同浓度的决定这些光谱光度测量的方法。相对误差百分比计算使用以下方程(23]:
使用试剂三世给最小的相对误差(0.1%)测定药物在调查之中。
同时,强度测试通过应用该方法测定使用相同的操作条件但使用两种不同的工具在两个不同的实验室和不同的运行时间。结果从实验室之间和日常变化是可再生的,相对标准偏差不超过1%(表2)。表现方法的重复性也评估了四个重复测量使用试剂在最佳条件下,低的标准偏差值(表2),表明该方法是准确和精确。
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3.3。Ion-Associate配合物的稳定常数
条件稳定常数(Kf)ion-associate复合物的研究药物使用哈维摩尔比率的计算数据和曼宁公式24]。形成复合物是相当稳定的整体稳定常数的比较高的值(表3)。
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络合的标准自由能变化(∆G°)(表3)是由以下方程计算25]: (∆G°)是标准自由能变化的复杂(kJ·摩尔−1),R1.987卡尔·摩尔气体常数(−1·C−1),T在开尔文温度,然后呢Kf是ion-associate复合物的缔合常数(L·摩尔−1)。
一般标准自由能变化变得更加消极作为分子复杂的协会常数增加,因为组件之间的联系变得更强壮,因此组件受更多的物理压力或失去自由,所以的值ΔG°更消极。此外,负的标准自由能变化表明,该反应是自发的。
4所示。应用程序的方法
4.1。光度法测定Diaveridine纯准备
方法的使用分析纯态的diaveridine检查使用该过程通过分析样本。获得的结果在表4。方法的精密度和准确度进行了测试,分析五个比尔定律范围内复制的药物。低的值标准偏差表示方法的精度和重现性好。
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一个发现浓度是五个值的平均值。b理论价值t- - -F以及五自由度和95%置信区间是2.57和5.05,分别。 |
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4.2。光度法测定Diaveridine药物制剂
使用该方法的测试也通过测定药物剂型研究下在当地制造公司在埃及市场,如New-Cox强大anticoccidial水溶性粉末是获得(Atco制药制药行业,开罗,埃及)。药物剂型的浓度计算从适当的校准图表。
的试剂选择研究分析应用程序的方法是我V由于摩尔吸光系数高。没有转变吸收最大由于存在的其他成分的剂型(表5)。
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一个发现浓度是五个值的平均值。b理论价值t- - -F以及五自由度和95%置信区间是2.57和5.05,分别。 |
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提出了测定方法的结果diaveridine比较与参考方法获得的来自英国药典(26)(水滴定方法使用0.1 mol / L高氯酸滴定剂在紫水晶的解决方案作为一个指标)。结果显示,该方法的性能之间没有显著差异和官方或参考方法准确度和精密度,所以开发方法可能推荐程序和质量控制的分析研究药物。
4.3。数据的统计处理的决心Diaveridine在纯和制药形式
的t以及(27)是应用于调查平均值之间的协议从决心获得纯和制药研究药物的形式。的F以及(27]表明是否有两个方法根据他们的标准偏差的区别。提出的性能计算评估的方法t- - -F值与参考方法相比,由英国药典。计算t值和F值在95%置信区间和四个自由度的决心研究药物的纯和医药制剂提出了表4和5。
5。结论
ion-associate复合物diaveridine使用八sulfonphthalein spectrophotometrically染料都准备在一个解决方案和研究。提出的方法简单、快速、经济和提供敏感的程序与其他报道相比光谱光度测量的方法。反应产物的化学计量比的药物与试剂1:1和1:2(药物:试剂)。结果表明,三世试剂给最高的摩尔吸光系数值(2.89×104L·摩尔−1·厘米−1)因为ion-associate的敏感性和吸光度的稳定系统,包括电子吸引组比其他系统包括电子捐赠。方法验证线性、灵敏度、检测和资格限制,精度,精度、强度和可重复性。最后,光度法测定diaveridine在纯和制药等形式进行。结果显示,没有转变吸收最大,由于剂型的其他成分的存在。目前的方法是在良好的协议与官方的方法。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
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版权
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