不同的光谱光度测量的方法操纵率光谱申请Aclidinium的分析Duaklir®Genuair®吸入粉末

文摘

两个简单的、准确的和有选择性的光谱光度测量的方法是确定aclidinium formoterol的存在,干扰物质复合Duaklir Genuair吸入粉末。研究以下比例导数的方法和比例减法光谱光度测量的方法。这些方法都是基于不同的数学处理得到比光谱。的方法是线性5-50的浓度范围µg / mL aclidinium和验证根据我的指导方针。准确度和精密度都发现是在可接受的范围内通过应用标准和评估技术。该方法的特异性测试使用laboratory-prepared混合物。此外,该方法统计报告rp方法相比,取得了较好的效果。

1。介绍

Duaklir Genuair是最近批准了双组分混合吸入aclidinium formoterol用于缓解症状在成人慢性阻塞性肺疾病患者(1]。Aclidinium(图1(一))通过其行为绑定M3受体位于支气管平滑肌和血管内皮肺部从而导致bronchodilation [2,3]。Formoterol(图1 (b))展示其支气管扩张剂活动通过其长,选择性支气管平滑肌(拟交感的行动4]。

(一)

(b)

文献调查表明,几种方法开发的决心formoterol单独(5- - - - - -8)或其他组合(9- - - - - -13),且只有一个测定的液相色谱测定方法开发aclidinium和formoterol结合剂型(14]。

节约时间、成本效率和能力解决重叠的二进制和多组分没有预处理的样本特征的优点是使用不同的光谱光度测量的技术比其他技术,如高效液相色谱在药物分析和电化学技术(15- - - - - -17]。因此,本工作的目的是发展两个准确和精确的操纵比光谱光谱光度测量的方法,即比例导数(18和比例减19,20.]。aclidinium测定的方法应用在干扰物质复合的formoterol Duaklir Genuair和laboratory-prepared混合物。

2。实验

2.1。材料和试剂

Aclidinium溴化(99.84%)和formoterol延胡索酸酯二水合物(99.94)请提供的全国毒品控制和研究组织(NODCAR),埃及吉萨金字塔。Duaklir Genuair吸入粉末(批号208 k)被NODCAR请提供,埃及吉萨金字塔。据称每剂含有396微克的aclidinium溴化和11.8微克的formoterol延胡索酸酯二水合物。甲醇,高效液相色谱的成绩(Sigma-Aldrich,德国)。

2.2。仪器

日本岛津公司双光束紫外可见分光光度计(日本京都)模型uv - 1800电脑连接到一个IBM和惠普1020激光喷墨打印机兼容。捆绑软件,UV-Probe个人光谱软件2.43版本(日本岛津公司),是使用。

2.3。软件

捆绑软件,UV-Probe个人光谱软件2.43版本(日本岛津公司),是使用。比值导数和减法比方法是在Matlab中实现8.2.0.701 (R2013b)使用我们自己写脚本。的t以及,F以及,单向方差分析进行使用Microsoft Excel。

2.4。标准的解决方案

股票的标准解决方案aclidinium溴化和formoterol延胡索酸酯二水合物(100µg / mL)是由各药物的溶解10毫克75毫升甲醇,和100毫升的成交完成相同的溶剂。

2.5。过程

2.5.1。一般程序

在一系列的10毫升容量的玻璃瓶,aclidinium整除(100μ相当于50 - 500 g / mL)μg被转移和稀释与甲醇体积。吸收光谱(从200年到400海里)这些解决方案记录使用甲醇作为空白,然后除以formoterol解决方案的频谱(8µg / mL)。(我)比值导数方法:一阶导数光谱相应比例被记录,使用Δλ= 8海里和比例因子= 5。在229 nm振幅值测量。(2)比减法的方法:在290 nm振幅值比值光谱的比值光谱相减时,紧随其后的是获得的光谱的乘法因子(8µg / mL formoterol)。在238 nm振幅值测量。

2.5.2。应用程序Laboratory-Prepared混合物

整除aclidinium溴和formoterol延胡索酸酯二水合物以不同的比例混合。吸收光谱的混合物准备记录,和aclidinium溴的浓度计算方法提到使用下面描述的过程。

2.5.3。应用于药物制剂

aclidinium溴的量相当于10毫克准确称重和转移,那么成交了75毫升的甲醇。解决方案大力动摇了15分钟,然后用近30分钟,完成100毫升溶剂获得相同的标记包含100的解决方案μ克/毫升aclidinium溴离子。解决方案是过滤。进一步稀释溶剂进行获得相同的工作描述解决方案被指评估过程在提到的方法。

3所示。结果与讨论

Aclidinium溴化和formoterol延胡索酸酯的活性成分是二水合物Duaklir Genuair吸入粉末。零级这两种药物的吸收光谱严重重叠,如图2,在他们的分析造成困难。提到几种方法都是值得注意的专门分析formoterol单独或在其他组合。此外,作者认为样品浓缩技术的应用来确定formoterol作为次要组件会产生假阳性的结果,它将很难准确确定formoterol制药剂型。因此,这项工作的主题是确定aclidinium溴的formoterol延胡索酸酯二水物,使用两种方法操作比光谱干扰物质,即比例导数和比率减法。比值光谱得到aclidinium谱除以一个明确的formoterol的浓度。不同浓度的因子被试(6、8、10μg / mL)和因子的浓度(8μg / mL)被发现是最好的选择关于信噪比,可重复性,灵敏度,平均采收率当用于预测的aclidinium提出方法如图3。

振幅的比值导数法、比率的一阶导数光谱在229 nm的浓度成正比aclidinium没有干扰formoterol(因子)如图4。

在减法的方法,比laboratory-prepared混合物除以formoterol得到比值光谱的谱图所示5高原地区,然后减法的吸光度值在290 nm(常数)如图6,其次是乘法的获得光谱的谱因子图所示7。在238 nm最后光谱峰值振幅成正比的浓度aclidinium formoterol没有干涉。

3.1。方法验证

验证所提出的方法是根据我的指导方针(21]。所有方法的线性5-50浓度范围的确定μ对溴化aclidinium g / mL。检测极限(LOD)和定量的限制(定量限)计算根据我的指导方针。的低价值的钟表和定量限表明发达的敏感性的方法。

方法的准确性取决于计算的平均回收率三溴化三种不同浓度的测定纯aclidinium(20、30和40μg / mL)。良好的复苏得到百分比如表示1。发达的精度检查方法通过测量百分比相对标准偏差(%相对标准偏差)的三个浓度aclidinium溴化(20、30和40μg / mL)重复三次在同一天(重复性)和三天(中间精密度)。%的获得价值相对标准偏差< 2%,确认开发的高精度方法。验证和回归参数方法的总结如表所示1。


参数		比值导数	比减

波长(nm)		229年	238年
线性范围(μg / mL)		5─50
(我)的回归方程		y^一个=bx^b+一个	y^一个=bx^b+一个
(2)坡(b)		0.0380	0.0230
(3)拦截(a)		−0.0007	0.0032
确定系数(r²)		0.9997	0.9996
LOD (μg / mL)		0.9681	1.1428
(定量限μg / mL)		2.9336	3.4630
精度(%R)^c		101.55	100.82
精度(%相对标准偏差)^c	可重复性	1.237	1.149
	中间精密度	1.707	1.520

y ^一个是每个方法的响应;x ^baclidinium的浓度在吗μ在每个方法g / mL;^c值3 3不同浓度的决定。

开发方法的特异性是由分析laboratory-prepared混合物aclidinium溴和formoterol延胡索酸酯二水合物,在良好的复苏aclidinium溴化得到证实的特异性开发方法如表所示2。此外,标准的除了技术应用,纯aclidinium溴化已经被添加到药物制剂分析。纯标准的良好复苏药物得到确认的也可能采用提出的方法测定溴化aclidinium没有任何可能干扰formoterol延胡索酸酯二水合物,辅料或添加剂。结果如表所示3。


Aclidinium (μg / mL)	Formoterol (μg / mL)	%的复苏
Aclidinium (μg / mL)	Formoterol (μg / mL)	比值导数	比减

5	5	97.77	98.12
10	5	100.08	99.81
20.	10	100.28	101.10
30.	10	101.76	101.32
40	5	102.48	98.73
均值±%相对标准偏差		100.47±1.806	99.82±1.415


制药浓缩的。(µg / mL)	制药(µg / mL)	纯说(µg / mL)	%的复苏
			比值导数	比减

35	35.073^一个	6	101.26	100.29
		8	100.23	101.28
	9.955^b
		10	98.25	99.67
均值±%相对标准偏差			99.91±1.531	100.41±0.809

^一个平均五决定的比例导数方法;^b平均比例减五决定的方法。

3.2。应用程序的开发方法

发达的化验方法申请aclidinium溴在其商业制药配方(Duaklir Genuair吸入粉末)。结果报告的开发方法与高效液相色谱法(14)如表所示4。计算t和F值小于列表的表明这两种方法之间没有显著差异和报告方法。


参数	比值导数	比减	报道的方法(14]

n^一个	5	5	5
平均恢复(%)	99.23	100.22	99.65
SD	1.462	1.599	1.717
%相对标准偏差	1.474	1.595	1.724
T(2.306)^b	0.949	0.030	- - - - - -
F(6.388)^b	1.400	1.171	- - - - - -

^一个数量的测量;^b括号中的值列表的值”t”和“F“在()。

另一个统计结果的比较提出了方法和报告方法进行测定的溴化aclidinium制药产品使用单向方差分析测试如表所示5。通过应用这些方法获得的结果显示他们之间没有显著差异。


	源	DF	平方和	均方	F价值

Aclidinium	之间的实验	2	3.186	1.593	0.622 (3.885)
Aclidinium	在实验	12	30.744	2.562	0.622 (3.885)

括号之间的值理论F值;人口意味着没有显著的不同。

4所示。结论

两个光谱光度测量的方法操纵率光谱的选择性测定申请aclidinium溴的formoterol延胡索酸酯二水合物的干扰物质未经分离或预处理。提出的方法简单、敏感、准确、精确操纵率光谱。它不需要任何复杂的装置,可以很容易地应用于质量控制实验室。此外,该方法不需要多个步骤或复杂的处理与色谱方法。没有比衍生化步骤减法的方法提高信噪比。然而,特殊的软件Matlab等需要做的数据分析方法。开发方法相比,统计报告高效液相色谱方法,使用不同的方法分析其均值和方差。结果表明,没有发现意义差异对于发达光谱光度测量的方法和报告的高效液相色谱方法。

数据可用性

脚本用于计算比例导数和比率减法在Matlab方法以及数据格式是可用的要求从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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