文摘
抗氧化能力之间的相关性和银纳米粒子形成的石榴(石榴)、贴梗海棠(干尼亚oblonga)、栗子(齿栗叶的可能)、图(无花果)、核桃(胡桃灰质),黑桑(桑属黑质),白桑(桑属阿尔巴)叶提取物研究固定照明。银纳米粒子形成的所有植物叶提取物具有圆形状与平均粒径的15到25纳米,而相应的表面等离子体共振峰值波长422 nm和451 nm之间的不同。减少铜抗氧化能力技术作为参考方法确定植物叶子提取物的总抗氧化能力。集成在等离子体共振峰吸光度展品更好的线性关系与各种植物叶子提取物的抗氧化能力比峰吸光度值,用相关系数值分别为0.9333和0.7221。
1。介绍
在广泛的纳米颗粒(NPs),表现出独特的性质与大小,银纳米粒子(AgNPs)发现广泛的医学应用,因为他们表现出抗菌(1- - - - - -8],抗病毒[9),和抗真菌10)的影响。AgNPs的合成是一个多级的过程(11包括先减少Ag)+对Ag)0通过捕获一个电子从周围分子容易捐赠电子。成核过程中,减少了银原子聚合种子生长过程,然后在最后阶段形成稳定稳定AgNPs [12]。
AgNPs可以使用合成[大规模生产13)或生物(1- - - - - -11,14- - - - - -17)技术。在前者,特定的试剂,如硼氢化钠,柠檬酸钠,抗坏血酸用于减少Ag)的严格的协议+AgNPs这样AgNPs的稳定和明确的形状和大小。在生物技术结合使用的细菌(14)、真菌(15),酵母(16],藻类[17)和植物(1- - - - - -11),然而,降低和稳定过程成功的生物分子的混合物,其内容取决于最初的生物材料。使用植物叶片AgNPs的合成一直是受欢迎的,因为它提供了一个灵巧的和负担得起的替代合成技术,因为它可以产生良好的纳米颗粒(7]。尽管它的优势,这种方法的主要缺点是缺乏一个清晰的理解的过程持续的在AgNPs的形成和稳定。尽管还在争论中,各种生物分子中存在水植物叶子中提取如类固醇、多酚、多糖,萜类,硬脂酸,硫醇,提出了抗坏血酸、黄酮类化合物在AgNP作用形成(5,6]。大多数这样的生物分子被称为抗氧化剂(18,19),事实上,成功地用于AgNPs的化学合成。
利用上述生物分子的化学合成AgNPs并不奇怪,因为抗氧化剂有能力改变金属离子的氧化水平通过提供电子。大多数植物含有大量分子具有不同的抗氧化能力18,20.,21]。虽然相对量的植物和生物分子之间的不同部分显示季节性变化(5,6),树叶是已知的抗氧化剂(包括相当高的浓度18,19]。不同的光谱方法基于氢原子或电子转换反应(22,23)已经开发出来,用于确定总抗氧化能力(TAC)的生物材料,如食品,饮料,和植物提取物24,25]。可靠,但简单,参考方法需要开发TAC的测量生物材料。TAC的水植物叶子中提取简单定义的电子供应能力提取并可能与AgNP形成率,具体提取自AgNP形成依赖Ag)的减少+电子的分子提供的提取。
使用NPs TAC测量的开创性工作推迟到Scampicchio et al。26)采用金纳米粒子。AgNP-based技术,采用改进的敏感性和可靠性,指峰吸光度值的表面等离子体共振(SPR)乐队后来提出了TAC测量多酚(24]。分析基于CeO2纳米颗粒的形成率也提出了快速检测食品抗氧化剂(27]。尽管Ag)++ e−↔Ag)0反应是光敏感,照明在上述作品似乎是不受控制的。另一方面,最近表明,辐照AgNP形成率显著影响植物叶子提取物(6]。因此,植物叶提取物的抗氧化能力之间的关系和AgNP形成率恒照明需要解决下保持其恒久的影响。
经常采用的实践时间跟踪在特定波长的吸光度值,例如,在SPR峰值波长,证明是可行的对许多目的(5,6),尽管它可能是误导,因为它没有反映出纳米粒子的反应在整个尺寸范围。事实上,正如SPR峰值波长的吸光度保持不变或减少,长波长的吸光度增强是由于发展中形状各向异性,聚合和/或增加粒度特别是在长时间的接触时间(5]。因此,综合吸光度覆盖整个SPR乐队,而不是一个特定的波长可以更好的代表。
这项工作的目的是探讨相关性TAC和SPR群下的面积AgNPs合成在不同的植物叶子提取物在恒定照明解决SPR乐队能否被利用作为一种估算TAC复杂的植物提取物。结果表明一个更明显的相关性TAC和面积SPR乐队相比,峰吸光度。
2。实验的细节
石榴(石榴)、贴梗海棠(干尼亚oblonga)、栗子(齿栗叶的可能)、图(无花果)、核桃(胡桃灰质),黑桑(桑属黑质),白桑(桑属阿尔巴)收集树叶Uludag大学校园面积的囊,土耳其,海拔117米。叶子shadow-dried、磨和已筛前使用。1.0克渗叶样品混在250毫升蒸馏水和在室温下搅拌一个小时在过滤前电磁搅拌器。相同体积的2毫米AgNO3解决方案和过滤叶提取物混合的照明下7 W(295流明)白色荧光光源(Megaman 4 u108i),这是选择低热辐射,在室温下。紫外可见光谱(紫外)混合物每隔15分钟记录总共120分钟使用日立U3900H双光束分光光度计在200 - 800纳米的分辨率范围0.5海里。
减少铜抗氧化能力(CUPRAC)方法,这是一个electron-transfer-based技术最初开发测量TAC的自然生物样本,例如,人类血浆(25),选择确定的TAC植物叶子提取物。CUPRAC选为参考方法测量TAC的植物叶子中提取其他electron-transfer-based技术(因为它有着独特的优势28]。它是简单的,可再生的浓度范围宽,适用于pH值7左右,因为它是如此的植物叶子提取物、快速为最常见的类黄酮,抗氧化化合物在哪里有选择地氧化而不影响糖和柠檬酸通常包含在食物的东西,而使用试剂是稳定的(24,25,28]。依靠减少铜的方法+ 2对铜+neocuproine (2 9-dimethyl-1 10-phenanthroline)复杂的抗氧化剂和测量铜(I)的吸光度峰neocuproine在450纳米25]。
确定TAC的植物叶提取物,等于1.0×10卷(1毫升)−2M氯化铜(II)解决方案,乙酸铵缓冲(pH值7),1.0米和7.5×10−3M neocuproine溶液混合在一起之前添加1.1毫升的稀释样品(0.2毫升或0.3毫升水植物叶子提取物是由包含为1.1毫升蒸馏水)获得4.1毫升的总量。然后混合物在室温下保持在一个密封的容器前30分钟测量其吸光度在450 nm的参考解决方案,其中包含相同的原料样品溶液除了提取被替换为相同体积的蒸馏水。平均三个测量两个稀释率。
提出了不同样本作为trolox TAC (C14H18O4弗兰克-威廉姆斯:250年,26克/摩尔)每干叶重(即等价物。trolox /干叶重)。Trolox是电子转移的参考材料抗氧化能力的方法由米勒等人在1993年首次提出(29日]。是常用的抗氧化能力测量和结构兼容大多数的天然抗氧化剂。校准曲线是通过上述程序对不同卷后,例如,25岁μL, 50μL, 100μL, 200μL, 300μL, 1.0×10−3M标准trolox溶液(0.25026 g / L)作为样本。吸光度的trolox解决方案以450海里然后对trolox体重在图绘制1和曲线是用来确定trolox当量TAC的每个植物叶子提取物。
一个莫尔文Zetasizer NanoZS粒度分析仪是用来确定的大小分布AgNPs准备。的比例biosynthesized AgNPs离心机在10000 rpm 15分钟。沉淀AgNPs然后洗了三次与去离子水超声波浴中去除的有机成分。少量的这种triple-washed AgNPs传输在Formvar-coated铜网格形态调查蔡司狮子座906 e透射电子显微镜(TEM)。
3所示。结果和讨论
TEM的所有样品准备的调查表明AgNPs圆形状,大约15海里的平均粒径。TEM显微图和粒度分布AgNPs合成提出了使用桑叶提取数据2(一个)和2 (b)分别作为典型的。粒度分布揭示一个峰值在大约15 nm长尾30 nm表明AgNPs单分散的尽管几个集群图可见2(一个)。
(一)
(b)
紫外可见光谱的植物叶提取物和AgNO的混合物3解决方案显示强劲的SPR乐队约430海里,是球形AgNPs特点,人物3(一个)(30.]。SPR峰值最大值为研究植物叶片发生在422.0 nm, 430.5 nm, 440.0 nm, 442.5 nm, 442.5 nm, 445.0 nm,石榴和451海里,海棠,栗色、无花果、核桃,黑桑,和白色的桑叶提取物,分别图3 (b)。尽管时间SPR峰吸光度的变化,如图3 (c)显示峰值加大随着时间的推移,他们的位置相对固定,人物3 (b)。SPR乐队出现在600 - 700海里长时间石榴和栗叶提取物在图3(一个)可以是由于大与球形纳米颗粒或纳米粒子与可观的形状各向异性和/或聚合物(5,30.]。TEM调查和粒度分布分析不支持的存在或大型球面AgNPs AgNPs强劲的形状各向异性(图2);他们,而表明SPR乐队在600 nm数字3(一个)可能是由于小球形AgNPs的总量。
(一)
(b)
(c)
图3 (c)显示了AgNPs的成核和生长过程的多样性在不同植物叶子提取物。尽管在120分钟图峰吸光度达到饱和和栗叶提取物,是没有达到的石榴、核桃、柑橘,和桑叶提取物在同一时期,人物3 (c)。植物叶片中研究,在桑叶提取物AgNP形成过程似乎是最慢的。他们几乎揭示随时间线性变化,表明成核后仍将继续一段时间120分钟。虽然在桑叶提取物AgNP成核过程中在30分钟,成核似乎是完成别人AgNPs的增长的栗色和无花果叶提取物几乎完成。
峰值波长在图3 (b),这反映了平均AgNP大小(6),随着时间的推移,423 nm和454.5 nm)之间的不同。石榴叶提取显示最强的峰图3(一个)和最高的AgNP形成(图3 (c))最小的SPR峰值波长422 nm数字3 (b)。SPR桑叶提取物然而出现在最高峰值波长,在图452 nm和455 nm3 (b),而表现出弱的峰(图3(一个)),最慢AgNPs形成率(图3 (c))。核桃叶提取物显示最稳定时间SPR峰值标准差为0.38,石榴、柑橘、无花果、黑桑,白桑椹和栗叶提取物有标准差为2.00,1.66,1.45,1.35,1.17,和1.12,分别。
峰值和集成的吸光度值SPR的植物叶提取物和AgNO的混合物3解决方案策划与相应的植物叶提取物的抗氧化能力4(一)和4 (b),分别。综合吸光度在300 nm和800 nm之间的SPR乐队录制120分钟成分混合后显示更好的线性相关(图4 (b))与trolox等价的植物叶子提取物确定系数(比相应的SPR) 0.9333峰吸光度(图4(一))。石榴叶提取物明显差异显示的数字3和4实际上,与报道,石榴叶表现出较高的抗氧化能力比类似的物种由于其较高的总酚含量(31日,32)这是集中在它的叶子的(而不是种子和花33]。
(一)
(b)
吸光度在长波长区域图3(一个)增加可能是由于AgNP大小、聚合和/或增加在形状各向异性AgNP形成进步峰吸光度是固定或减少(30.]。确定TAC的植物叶子提取物通过测量吸光度值后在一个固定的时间以固定波长和混合成分如(24)可能会造成误导,因为AgNPs的成核和生长过程AgNO的混合物3解决方案和植物叶子上提取时间过程(图3 (c))。尽管在特定波长的吸光度值,也就是说,在峰值波长,可以作为一个指标,它将不足以反映总体现象发生在整个SPR峰值的波长范围。此外,确定TAC的植物叶子中提取使用集成的吸光度的SPR乐队峰值达到饱和后可能是一个更好的选择。
4所示。结论
抗氧化能力之间的相关性和AgNP形成石榴、柑橘、栗色、无花果、核桃、黑桑,和白色的桑叶提取物研究在295流明的照明。结果表明,综合吸收在整个SPR乐队而不是高峰值应该是合并CUPRAC总抗氧化能力测量的方法。也指出,进行集成后抗氧化能力测量吸光度的SPR乐队达到饱和植物提取物会更好。
相互竞争的利益
作者宣称没有利益冲突。