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Joanna Krasowska, Monika Olasek, Agnieszka Bzowska, Patricia L. Clark, Beata wielgas - kutrowska, "用光谱法比较增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的聚集和折叠特性",《光谱学, 卷。24, 文章的ID186903, 6 页面, 2010. https://doi.org/10.3233/SPE-2010-0445
用光谱法比较增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的聚集和折叠特性
摘要
GFP (Green Fluorescent Protein,绿色荧光蛋白)以其独特的发色团而闻名,它是由Ser65、Tyr66和Gly67的多肽骨干自催化环化而形成的,并能发出绿色可见光。由于GFP及其突变体(如EGFP)具有不同寻常的发色体,因此在分子生物学和生物技术中已成为广泛应用的报告蛋白。GFP可以很容易地与任何感兴趣的蛋白融合并在细胞中共同表达;然后用GFP荧光来观察蛋白质在细胞中的分布、运输和聚集。然而,GFP有自身聚集的倾向,其发色团的形成也严重依赖于还原剂的存在。因此,我们进行了EGFP在pH作用下的折叠和聚集的光谱动力学研究,以及在各种还原剂的存在下,研究这两个过程之间的竞争。EGFP的最佳折叠条件是BME作为还原剂。EGFP的聚集强烈依赖于pH值和蛋白质浓度。因此,在研究与EGFP融合的蛋白质时必须进行仔细的控制实验,特别是在pH低于7的情况下。
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