文摘
背景。围神经的入侵(句)是一种不良预后组织学发现,增加局部复发和转移的风险。客观的。我们旨在确定双免疫组织化学(包含IHC)和s - 100染色和句AE1/3会增加检测nonmelanoma皮肤癌(NMSCs)。方法。我们收集45标本的NMSCs临床怀疑有句。两个独立dermatopathologists回顾了肿瘤的存在句。结果。10日明确句在场的45个肿瘤)的染色和15日45肿瘤包含IHC染色。大神经(> 0.1毫米)参与3 10 15 IHC-stained H&E-stained例和3例,2 4例展示大神经的参与两种染色方法。只有包含IHC句发现的8例,7小神经(≤0.1毫米)。限制。所有病例选择因为他们临床怀疑为句,这可能被认为是选择性偏差。结论。句检测可能增加使用双s - 100和AE1/3染色,但大部分其他病例发现小神经。的临床意义,因为涉及到神经的体积小,尚不清楚。
1。介绍
围神经的入侵(句)是肿瘤生长的神经周的空间内神经或神经神经束内1- - - - - -3]。句,特别是对皮肤鳞状细胞癌(cSCC),被认为是不良预后组织学改变和增加局部复发和转移的风险4,5]。现行版的美国癌症联合委员会的分期手册包括句作为nonmelanoma皮肤癌的高风险特性(NMSCs)因为其预测价值的攻击行为(6]。
我们旨在确定双免疫组织化学(包含IHC)染色与s - 100和AE1/3将增加检测句NMSCs pathohistology。
2。材料和方法
我们综述了电子皮肤病理学记录使用电子snom检索系统对两种类型的NMSCs,基底细胞癌(bcc)和鳞状细胞癌(癌)的临床信息包括“围神经的”这个词从2003年6月到2008年6月。这些记录被评估,所有情况有临床关心的NMSC句都包括在内。综述了临床信息,在大多数情况下,临床医生担心的是句因为大小的肿瘤,疼痛,或怀疑基于摩氏冻结部分。
组织部分将在3 - 5微米和安装在带正电的幻灯片。在治疗之前,所有的部分都在60度滑烤箱干30分钟,以确保部分坚持幻灯片和完全干燥。部分被deparaffinized 4二甲苯5分钟然后水化变化通过一系列的分级醇与最后用蒸馏水冲洗干净。内源性过氧化物被浸泡淬火部分两个变化3%甲醇H2O2每5分钟。
与抗原检索包含IHC之前,部分治疗促进抗体与抗原结合。短暂、幻灯片在黑色和孵化Decker蔬菜蒸20分钟目标检索解决方案(Dako公司Carpinteria CA;猫。# S1699)预热到99°C。他们然后离开轮船和放置在一个开放的计数器冷却20分钟的解决方案。幻灯片被蒸馏水冲洗3变化并放在tris-buffered盐水的容器(图章病理系统,Inc . Dedham,马;猫。# 2380)5分钟幻灯片的降低表面张力,促进涂层由以下试剂。
幻灯片横向被装上Dako Autostainer每个以下步骤自动化。Tris-buffered使用生理盐水冲洗IHC每个步骤之间的部分。亲和素与生物素亲和素生物素阻断工具包(向量实验室,伯林盖姆,CA;猫。# SP2001)被稀释的抗体稀释剂(Dako)的比率1毫升亲和素、生物素5毫升稀释剂。
稀释抗生物素蛋白应用于部分和孵化7分钟。AE1/3(印号464 - 01)的浓度1:200年孵化30分钟。LSAB2部分被孵化,通用二次抗体(Dako) 15分钟,其次是LSAB2,标签(Dako) 15分钟;然后发色体液体涂(Dako)申请5分钟。幻灯片在autostainer然后再次运行使用的主要抗体s - 100的浓度(Dako Z0311) 1: 4000年30分钟。这里使用的三级试剂是streptavidin-alkaline磷酸酶共轭微孔(# 20841)。快速的红色作为发色体。幻灯片被起飞autostainer蒸馏水冲洗,手动与哈里斯苏木精复染色(费舍尔科学)1分钟,蒸馏水冲洗,之后0.25%氨水蓝色,然后最后用蒸馏水冲洗干净。他们然后通过分级一系列醇脱水,澄清了在四个变化的二甲苯和有机玻璃盖玻片Permount越来越多的媒体。
双重包含IHC染色显示红色色原体染色周围神经细胞核和细胞质的s - 100和布朗与AE1/3上皮细胞的胞质染色。
两个独立dermatopathologists回顾了)部分和包含IHC部分明确的存在句。句被定义为恶性上皮细胞周围出现超过50%的神经和肿瘤内神经束膜或神经神经束内1- - - - - -3]。大神经被定义为> 0.1毫米,和小神经被定义为≤0.1毫米(1]。
3所示。结果
表1礼物的发现45 NMSCs (17 bcc和癌28日)进行了研究。双重染色结果见图的例子1。
(一)
(b)
总的来说,18例(40%;7 bcc和11癌)的证据在常规检查或对偶句包含IHC染色。在大多数情况下(34例,75.6%)发现)和双IHC-stained组织部分与句的存在与否。这包括27例(60%),句没有通过两种方法和7例(15.6%)在这句被确定使用这两种方法。在8例(44.4%;1 BCC和7癌)双重包含IHC句的唯一方法是证明相比,3例(16.7%;1 BCC和2癌))仅取得了积极的结果(图2)。
其中3例发现仅仅通过他走时,1对应的包含IHC示例不足是由于组织的损失。句第二个案例不存在双重包含IHC染色,因为包含IHC染色显示肿瘤周围神经束膜的神经没有入侵。
这句被发现8例的双只包含IHC染色,7例(87.5%)涉及小神经(≤0.1毫米)(图3)。7 8(87.5%)鳞状细胞癌病例,和1 8例(12.5%)是一个BCC的情况。大神经(> 0.1毫米)被确定在3 H&E-stained病例10例(30%)和3 IHC-stained 15(20%)的情况下,与2 4大神经的情况下识别出两种类型的染色。
的7例中句被确认通过这两种方法中有1例)染色确定句在一个大的神经,但包含IHC染色确定句在小神经。在剩下的6例涉及神经的直径上发现)考试仍在同一神经大小类别包含IHC染色。
有0例的dermatopathologists不同诊断是否存在句。
4所示。讨论
NMSC句,特别是(cSCC),被认为有更激进的预后复发和转移的增加率(4,5]。在罗等人的研究。5皮肤鳞状细胞癌,耳朵,嘴唇与组织学句当地47.2%的复发率和转移率为47.3%。在一项由Goepfert et al。4)与句cSCC区域淋巴结转移患者(35%的患者)和远处转移(15%的患者)明显比那些没有句更频繁。
句千差万别的发病率之间的研究根据许多潜在的变量,包括数量的组织学检查,部分污渍,和诊断标准。Leibovitch et al。7,810035年)在283年发现句基底细胞癌(bcc) 1177年70年(2.74%)和癌(5.95%),治疗莫氏手术在1993年和2002年之间。句是更常见的在癌基底细胞癌,鳞状细胞癌患者和句有一个糟糕的预后比与BCC句(7- - - - - -9]。句也更常见的而不是以前未经治疗的恶性肿瘤,复发和预后更差的那些句复发(2,4,9]。患者的预后也差广泛而不是本地句(9]。
句分为临床和偶然的类型。临床句描述患者临床症状或体征,如颅神经病变和/或肿瘤的影像学证据神经的参与(1,10]。句的最常见症状是感觉异常,如蚁走感,可以随后发展成的感觉疼痛,麻木,和/或弱点10]。三叉神经(CN V)和面部(CN七世)神经最常涉及(2,4]。成像的证据句与预后差(11]。即使有句的临床症状,诊断可以推迟了6个月到一年多如果怀疑低(2]。附带句描述无症状患者没有影像学证据但病理证据的句1,10]。大约30%到40%的患者句临床证据,大多数情况下它是一个偶然的发现2]。患者临床句有一个糟糕的预后比偶然句(2,10]。
检测句与圆)经常进行组织学染色,但准确的识别句是很困难的。句的组织学证据是存在神经周的空间内的恶性肿瘤细胞内的神经或神经神经束(1- - - - - -3]。然而,目前还没有标准的定义句,和一些研究包括肿瘤附近或对接外神经束膜(12]。围神经的炎症和神经纤维变性附近可以作为线索句(13]。肿瘤细胞很难区分正常神经束膜和基质12]。肿瘤细胞在神经周的空间可能会出现组织学与产生它们不同的肿瘤,可能只显示微妙的迹象,异型性(13]。至少有四句的良性模拟时,需要考虑和排除诊断句:瘤旁纤维化reexcision句,修缮的句,和上皮鞘神经瘤14]。一些研究说围神经的传播可以跳过区域,相邻的上句是不可见的部分组织(12]。其他的研究并不支持跳过领域的想法。例如,Panizza et al。15)在他们的研究中没有发现跳过病变和怀疑跳过区域加工工件。包含IHC染色cSCC已经研究了凯尔索等。16应用s - 100和包含IHC染色cSCC案件,发现增加句的检测使用。标准化病理协议严格句定义为肿瘤细胞内围神经的神经束之间的空间或染色的模棱两可的情况下,和文档的大小涉及神经可以帮助增加句诊断和预后估计的准确性(1- - - - - -3,12]。
句,务必考虑另一个因素是神经的大小。目前不清楚神经的大小在句中起着预后的作用。一个变量导致这是模棱两可的单词“神经”和“小神经。“一些研究大型神经定义为> 0.1毫米,而其他人将它定义为≥0.1毫米。有调用正式定义小神经≤0.1毫米和大神经> 0.1毫米,因此将0.1毫米神经进入小神经组(1]。罗斯et al。12)表明,在鳞状细胞癌患者,句的大口径神经(≥0.1毫米)结果比句细口径的神经(< 0.1毫米)。麦考德et al。17)也发现了一个低利率的局部控制的参与一个命名的神经通路,虽然神经直径并没有明确地定义。卡特et al。18]显示淋巴结的转移和死亡的风险增加与大神经疾病(≥0.1毫米)参与。另一方面,林等。9)演示了结果没有差异的大小与鳞状细胞癌患者的神经或BCC当定义大神经> 0.1毫米。许多研究表明,大型神经句与其他危险因素如复发性肿瘤,肿瘤直径大,更大的肿瘤,最大深度入侵除了皮下脂肪,多个神经介入,渗透性的增长,lymphovascular入侵(12,18]。它被假定这些相关的危险因素,而不是大神经句,导致贫困患者的结果18]。真的还需要进一步的研究来确定意义,和普遍指导神经大小的标签需要这个领域的研究进展。
没有普遍的治疗指南NMSC句和当前建议不要使用句神经大小决定治疗方法(12]。大多数人接受放疗有或没有通过标准或莫氏手术切除手术(1,17,19]。林业局et al。2)建议用句切除,术后放疗治疗NMSC如果癌症是可切除的和明确的放射治疗和治疗不可切除的情况下不考虑句神经大小。罗斯et al。12)建议辅助放射治疗只有当句涉及大神经大于或等于0.1毫米。目前,没有明确的以证据为基础的治疗指南,和医生和病人之间面临着选择手术,放疗,或两者兼而有之。
美国癌症联合委员会第七版的癌症分期手册(AJCC-7) cSCC包括神经周的入侵高风险特性,和存在两个或两个以上的高风险特性在任何肿瘤大小增加了从T1到T2阶段20.]。其他高风险特性包括低分化或未分化的肿瘤,主要解剖网站在耳朵或nonhair轴承唇厚度大于2毫米,和克拉克的水平至少四世(20.]。有提议由Jambusaria-Pahlajani et al。21)分类的一个高危因素T2a的阶段,两到三阶段T2b、高危因素和四个高危因素阶段T3。他们的研究结果显示更糟糕的结果(从cSCC淋巴结转移和死亡)相比,T2b肿瘤T2a肿瘤(21]。在施密特的研究等。22)结果表明,T2肿瘤大于2厘米的AJCC-7标准和T2b肿瘤的替代标准Jambusaria-Phlajani等人有积极的前哨淋巴结活检(SLNB),从而保证SLNB率超过10%。
我们同时利用独特的染色质量为目的的两种不同的抗体检测在NMSCs句。在这个初步研究,我们增加检测句相比单独)。双重包含IHC分析使用s - 100和AE1/3增强抗体检测可疑病灶周围神经通过提供独特的染色模式和恶性上皮细胞出现,分别。双重包含IHC染色是特别有用的解决perineurial核扩散和瘤旁纤维化的诊断困境。大多数这些额外的检测在鳞状细胞癌病例(87.5%)和涉及小神经(87.5%)。然而,目前还不清楚如果增加检测所涉及的小神经临床意义(9,12]。所有病例选择因为他们临床怀疑为句,这可能被认为是一种选择性偏差,因此研究的缺陷。
与句例,双包含IHC不会大幅改变神经直径测量。双重包含IHC染色的成本也会增加诊断。因此,额外的双重包含IHC染色可能不会被批准的情况下在这句显然是确定初始)部分。
双重包含IHC染色与s - 100和AE1/3可能有用的情况下句怀疑但不清楚)的分析,特别是在瘤旁神经束膜的纤维化和扩散。
信息披露
数据在本文中提出了以海报形式在美国皮肤病理学学会2010年年会,发表在抽象形式的皮肤病理学杂志》2011;38 (1):171。
利益冲突
作者没有利益冲突声明。