在活的有机体内Antiplasmodial活动和毒理学分析乙醇叶及其树枝提取的Faurea叶Welw。(Proteaceae)

文摘

在非洲,药用植物通常用于治疗疟疾和其他病的条件。的乙醇叶及其树枝提取Faurea叶已被证明拥有承诺antiplasmodial属性。本研究旨在调查其antiplasmodial效果在活的有机体内。定性的植物化学成分进行筛选植物样品使用标准的方法。antiplasmodial效应对早期感染,对建立感染疗效,对残余感染预防作用进行了研究在活的有机体内在鼠体内来华的老鼠在小鸡carrageenan-induced水肿模型被用于抗炎试验。phosphomolybdenum和DPPH自由基清除化验使用的抗氧化潜力的评价。提取的急性毒性评价使用经济合作与发展组织(OECD)的指导方针。植物化学的筛选的植物样本显示黄酮类化合物的存在,香豆素类、单宁、皂苷和苷。Faurea叶树叶和树枝提取antiplasmodial活动在寄生虫的老鼠模型方面表现出显著的抑制率为66.63%,71.70%,和56.93%的抑制,治疗,分别和预防性试验。减少55.50%抗炎试验表明中度水肿的成功在减少炎症。总提取物的抗氧化能力是确定为65.4毫克AAE / g的提取,而在DPPH自由基清除实验,IC₅₀499.4价值被发现μ克/毫升。除了尿素水平不一致的上升,没有显著差异在其他生物化学参数急性毒性研究。半数致死量(LD₅₀)的提取超过2000毫克/公斤。这项研究的结果表明Faurea叶叶子和树枝提取有前途的抗疟功能和在低浓度时是相当安全的。

1。介绍

疟疾是世界上最致命的传染病之一。它是由属的一种原生动物寄生虫引起的疟原虫和大大有助于在许多发展中国家的死亡率和发病率。根据2020年世界疟疾报告》,在全球疟疾死亡病例2.29亿新病例的疟疾和409000注册了31个非洲国家(死亡率95%1]。在加纳,疟疾是一种公共卫生风险和死亡的最重要原因之一孕妇和5岁以下儿童。大多数人生病不能正统的药物,所以他们采取药用植物治疗疟疾的2]。从历史中可用的证据表明寄生虫抵抗电流疗法是不可避免的。抵抗奎宁,第一个记录的抗疟药物,被记录在1910年。仍然在1950年代发现了寄生虫而pyrimethamine-resistant疟原虫同年寄生虫观察药物引入到市场3]。耐药寄生虫的存在菌株的报道目前使用青蒿素及其衍生物呈现一个清晰的和艰巨的挑战4]。这需要一个需要发现新的疟疾铅化合物药物发现项目。药用植物已承诺目标寻找新的抗疟药物,其中大部分是富含次生活性代谢物(5]。最有效的antiplasmodial药物来自植物代谢产物就是明证的两个最成功的抗疟drugs-quinine和青蒿素(6]。

在疟疾感染,疟原虫寄生虫吃主人的血红蛋白的氨基酸和调节渗透压为经济增长是必要的(7]。喂养过程导致的生产活性氧(ROS) (8]。广泛研究和理解ROS包括超氧化物阴离子(O₂²)、氢氧自由基(哦^{- - - - - -})、过氧化氢(H₂O₂)和次氯酸(HOCl)。在高位,ROS能引起严重的损害宿主DNA和氧化细胞膜蛋白质和脂质(9]。ROS和宿主的抗氧化系统失衡导致氧化应激,这可能最终导致细胞损伤和死亡。抗氧化剂可以中和活性氧和活性氮物种(RNS),减少氧化应激而恢复氧化平衡。使用抗氧化剂的疟疾治疗以减轻氧化应激相关并发症在主持人一直在探索10]。已经表明,细胞外ROS能够诱导炎症ROS产生以来疟疾感染期间超过(11]。ROS在更高层次可以破坏细胞的存在,因此人体的免疫反应,通常会导致炎症。炎症是一种机制使用的身体对抗感染、毒素,和伤害,为了治疗本身。短期炎症反应时,它是一个有用的目的,保护身体免受进一步损害复苏和艾滋病12]。在疟疾感染,炎症反应的主机在疾病病理中发挥着关键作用11]。逮捕炎症和触发器的炎症response-such ROS和RNS-could潜在改善疾病的有害影响。

几个世纪以来,植物已经使用传统的治疗各种疾病。近年来,一些负面影响被观察到使用一些药用植物。药用植物已经光顾广泛但很少或根本没有科学证据的有效性和安全性。治疗植物成份在很大程度上被认为是安全无毒的,因为他们是“天然”,但他们可能会有毒13]。一些药用植物包括马樱丹属卡马拉,Pteleopsis hylodendron,Morinda最亮的星,Tetrapleura tetraptera,非洲桃花心木senegalensis(Desv)答:法律原则,麻疯树tanjorensis包含潜在的肝毒素的成分(14,15];因此,植物的毒性评估证明治疗使用是至关重要的。草药一般用来治疗疟疾感染在加纳(16,17]。的知识,一些植物可能有潜在毒性的治疗浓度,必须评估常用的毒性和潜在的药用植物。

Faurea叶(同义词:Faurea rochetiana)属于家庭Proteaceae,它主要是在西非次区域中找到。民族植物学的,叶和根用于治疗耳疾病(18]。在体外研究表明,Faurea叶有一个温和的抗疟活性和含有生物碱,单宁,香豆素类(19]。也没有研究是否工厂在活的有机体内在文学活动的存在。因此这项研究检查了工厂的antiplasmodial疟疾在啮齿动物模型并评估其抗炎和抗氧化活性。毒理学评估工厂也进行了。Antiplasmodial评估小鼠模型中进行使用鼠体内(ANKA株)感染。评价抗炎作用,小鸡的carrageen-induced脚水肿模型。进行了抗氧化活动使用phosphomolybdenum和2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl DPPH自由基清除化验。急性毒性、肝脏和肾脏功能测试被用于安全评估。

2。实验方法

2.1。化学物质

研究中使用的化学物质均为分析纯。乙醇(无水级99%)和2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH,纯度95%)来自Sigma-Aldrich(圣路易斯,美国)。青蒿琥酯和甲氟喹合成得到的纯粉(99%)欧内斯特化学家有限(加纳特马)。Milli-Q水是用于校准标准和所有其他试剂的准备。

2.2。植物材料收集和处理

植物材料的收集,从Adawso (5.9489^°N, 0.2127 W)在加纳的东部地区,2020年1月。草本植物样本验证部门Medicine-KNUST,标本的标本也一直保持(KNUST / HMI / 2020 / L / 006)。植物材料然后清洗去除任何碎片。树枝被切成小块,然后风干一起离开了21天,然后磨成粉。植物原料粉(600克)是由与绝对乙醇索氏提取溶剂。乙醇作为溶剂,因为植物的方式通常是准备用在加纳的药。收集到的乙醇提取真空集中(科尔parm旋转蒸发器n - 1110,中国)和水浴蒸发完成干燥,产生一种粘性的深绿色提取。这是保持在4°C存储直到进一步的使用。

2.3。植物化学的筛选

的Faurea叶乙醇提取是研究植物化学物质的存在如生物碱、皂甙、常用药用、丹宁酸、甾醇类、黄酮类、香豆素类、苷使用标准程序进行定性筛选的植物化学物质。为单宁测试,3毫升的10%醋酸铅溶液添加到3毫升的植物提取物。笨重的白色沉淀,当礼物,表明存在的单宁。在检测类固醇,5毫升的提取是CHCl重塑₃。集中H₂所以₄了仔细的测试管形成一个较低的层。红褐色/樱桃红色的界面显示与三萜类固醇核的存在。在测试中黄酮类化合物,一条滤纸浸入液体中被提取,然后晒干。滤纸被暴露在北半球₃解决方案,然后接着烟雾浓盐酸。在暴露于强烈的黄色颜色集中NH的烟雾₃解决方案和随后消失的颜色在暴露在烟雾浓盐酸表示积极的类黄酮测试。在测试生物碱,溶于氨醇提取,最终解决方案是过滤,然后蒸发干燥。残留是reextracted H为1%₂所以₄过滤,滤液用NH盐碱化₃(aq)。然后用CHCl动摇₃;氯仿层被分离和浓缩干燥。残渣溶解在1% H₂所以₄。形成一个orange-to-red沉淀后的Dragendorff为生物碱试剂显示积极的测试。在测试中香豆素类、植物提取物是乙醚溶解在5毫升,紧随其后的是蒸发完成干燥。残留物被再溶解在热水里。一段冷却后,10%的氨溶液(0.5毫升)添加到的一小部分溶解残渣。存在一个强烈blue-to-green荧光紫外线照射下显示一个积极的香豆素测试。测试苷的存在,植物提取物的盐酸溶解在稀(5毫升)。这是紧随其后的是水浴加热2分钟。温暖的解决方案是在过滤和盐碱化NH为20%₄哦。费林的A和B方案(1毫升)被添加到滤液加热2分钟。砖红色沉淀的存在表明苷在场(20.]。

2.4。在活的有机体内Antiplasmodial化验

(1)实验动物和寄生虫。Balb / c白化小鼠年龄在6到8周和23到30 g从动物获得的植物药物研究中心(CPMR)。老鼠关在笼子里的温度在27°C和12小时的日夜循环。总有食物和水可用于动物。鼠体内(ANKA株)获得Pharmacology-KNUST的部门。连续未感染小鼠血液从受感染的老鼠做每周保持寄生虫。使用的方法是基于使用的所有化验Nardos和Makonnen21和Ayisi和同事16]。

(2)寄生虫接种。每个鼠标使用腹腔注射感染血液包含约(0.2毫升) p .鼠寄生虫。这是由牺牲供体小鼠和血液通过心脏穿刺收集到肝素化包含0.5%柠檬酸三钠的真空采血管管。等渗盐水的血液稀释比例根据寄生虫血症水平(20 - 30%)。

2.4.1。抑制试验

鼠,感染Balb / c小鼠放入5组,每组三个基于体重。第一天(D0),在所有组小鼠接种p .鼠。三小时后接种,不同群体治疗动物开始。老鼠在组1、2和3收到100,200和400毫克/公斤Faurea叶分别提取,而集团4收到4毫克/公斤的青蒿琥酯(积极控制)和10毫升/公斤的磷酸盐(PBS)的pH值7.4给集团连续4天5(-控制)(D0-D3) 8点和9点之间。五天(D4) Giemsa-stained血液薄膜是由血液来自每个老鼠的尾巴。重复的薄膜。红细胞(红血球)的总数和感染的红细胞表面数(21]。寄生虫血症是获得

对于每一个样本,chemosuppression是来自

,““代表平均负对照组和寄生虫血症”“测试组的寄生虫血症。

平均生存时间(MST)成立的30天每组使用

2.4.2。治疗试验

第一天(0),十五小鼠腹腔注射接种物的标准 p .鼠,被感染的红细胞。七十二小时后(3天),3老鼠的老鼠被分成5组,根据体重。组1、2和3收到100,200和400毫克/公斤提取,分别每一天,和组4收到PBS(10毫升/公斤),而集团5还每天收到青蒿琥酯(4毫克/公斤)。所有提取、PBS或标准药物口服5天连续的。薄膜是由血液从每个老鼠的尾巴与甲醇和固定,在重复沾染色,寄生虫血症显微镜下3天和第七天来决定。寄生虫血症和chemosuppression来源于方程(1)和(2),分别。每组的平均生存时间为从方程(3)。

2.4.3。预防或库测试

测试老鼠放入5组3老鼠都基于他们的体重。通过口服,组1、2和3有100,200,和400毫克/公斤/天的提取,分别;组4和5,分别收到4毫克/公斤/天甲氟喹(积极控制)和10毫升/公斤PBS(负控制)。连续治疗持续了三天之后提取/药品管理局(D0-D2)。然后老鼠接种p .鼠四天(D3)。72小时的护理后,复制Giemsa-stained薄喷尾巴血液样本准备测试寄生虫血症的程度。寄生虫血症和chemosuppression来源于方程(1)和(2),分别。每组的平均生存时间为从方程(3)。

2.5。抗氧化活动

2.5.1。DPPH方法

乙醇提取物的自由基清除作用是衡量DPPH (1, 1-diphenyl-2 picrylhydrazyl)测定。少量的methanolic DPPH试剂(0.1毫米;100年μL)被添加到100μ不同浓度的LFaurea叶提取和抗坏血酸(作为标准药物)。相同体积的甲醇溶液和DPPH作为控制混合物。最终的解决方案是大力混合和保存在一个黑暗的房间在环境温度为30分钟。每一个混合物的吸光度为517 nm (PerkinElmerλ35)。吸光度测试之间的差异和控制样本计算和表达为%清除DPPH自由基的使用 在哪里是提取液的吸光度/药物混合物和吗是空白的吸光度控制。

的集成电路₅₀值,定义为提取或药物的浓度需要清除DPPH的50%,来自图%清除效果与提取或药物浓度(22,23]。

2.5.2。总抗氧化能力测定

测试是基于减少钼(密苏里州^{+ 6}在密苏里州^{+ 5}钼酸磷酸)和随后的形成一个绿色(密苏里州^{+ 5})复杂的各种浓度的酸性博士一毫升Faurea叶提取或标准抗坏血酸添加到管包含3毫升的试剂溶液(28 mM Na₂HPO₄,0.6 H₂所以₄,(NH 4毫米₄)₆莫₇O₂₄在95°C)和孵化90分钟。允许混合物冷却至室温和吸光度测定695海里(PerkinElmerλ35)。一个空白的解决方案包含所有其他解决方案除了提取或标准药物早些时候作为描述。每个实验进行了3次,和总抗氧化能力表示为等价物的抗坏血酸(22,24]。

2.6。抗炎活性

2.6.1。动物

一天老小鸡(背带;应变剃须刀579)被用于这项研究。只鸡养在 不锈钢笼子与15个小鸡在每个笼子里一天12小时/光周期动物屋的药理学系KNUST。饲料和水可用在任何时候在喂食器和水槽。小鸡被用于研究经过7天的驯化。

2.6.2。在小鸡Carrageenan-Induced脚水肿

角叉菜胶足部水肿模型被用来评估的抗炎作用Faurea叶在小鸡。七天posthatched小鸡(48 - 60 g)被分成7个不同的组,每组有5小鸡( )。每只小鸡的脚卷是用游标卡尺测量。卡拉胶(0.1毫升,准备1% 在正常生理盐水)管理subplantar成正确的小鸡贼。脚卷角叉菜胶后政府又测量了一个小时。提取的口服药物在小鸡在10组1到4,30岁,100年,分别和300毫克/公斤。5和6组收到0.3毫克/公斤地塞米松和双氯芬酸,分别经腹腔内注射,然后,7组(对照组),而不是给予生理盐水。脚卷被测量每小时6小时。

2.6.3。分析

足量的差异在卡拉胶管理和政府量化后的不同时间间隔评估炎症水肿组件。脚卷被计算成比例的改变他们的价值观在时间为零,然后为每个治疗组平均。足量的变化,表示为一个百分比,是派生的

在哪里是脚体积时, ,治疗后,脚是初始体积测量 角叉菜胶之前管理。

脚总额是主观测量单位对任何治疗,治疗组的水肿抑制百分比估计曲线下作为一个地区(AUC)使用

为了分析不同数据集,单向方差分析(方差分析)和Dunnett事后测试使用。GraphPad Prism 6.0版本(GraphPad软件,圣地亚哥,CA)和Microsoft Excel中使用数据分析(25,26]。

2.7。安全性评价

2.7.1。急性毒性

急性毒性是评估使用经济合作与发展组织(OECD)化学品测试指南(27]。这个测试中使用的啮齿动物是女性纯种白化病老鼠重125至170克,大约8 - 10周大。动物们被分成4组,每组5个动物。动物被关在笼子里的7天前与实验室条件下适应实验进行。维斯拓白化病老鼠否认食品实验开始前一夜之间;然而,有水可用。生理盐水管理动物在1组,对照组,而动物组2,3和4有50毫克/公斤,300毫克/公斤,剂量2000毫克/公斤Faurea叶分别提取。接收到的动物饲料和水是必要的在整个实验过程。所有动物都检查30分钟、60分钟和4小时后提取和车辆管理,这监控每天继续接下来的14天死亡检测和任何态度,自主或神经的变化。饲料和饮水也被监控。身体的重量记录1天7和15。在15^th天,动物麻醉和2 - 3毫升血液样本被收集的心脏穿刺进小管中不含抗凝血剂。收集血液样本用于化学分析。

2.7.2。肝脏和肾脏功能测试

收集血液样本被用于监测肝和肾功能。研究的关键参数包括尿素和肌酐肾功能然后丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、间接胆红素(IB)和直接胆红素(DB)肝功能。自动分析仪(自动生化分析仪)早些时候使用标准协议用于血液化学分析报告(20.]。

2.8。统计分析

值表示为 。单向方差分析是用来分析在95%置信水平比较的结果。的值 被认为是重要的。

3所示。结果

3.1。提取和植物化学的测试

600克的提取Faurea叶样品用乙醇给了收益率为14.5%。提取是一个黑暗、绿色粘糊。植物化学的筛查的结果表明,植物成份如皂苷、丹宁酸、黄酮类、香豆素类、苷(表1)。生物碱、常用药用植物固醇但是没有发现在实验条件下。

3.2。Antiplasmodial活动

3.2.1之上。彼得的为期四天的抑制试验

在评估的schizontocidal活动ethanolic提取的f .叶对小鼠感染p .鼠,为期4天的抑制的测试工作。提取显示剂量依赖性抑制寄生虫。这些影响,在剂量测试,都是统计学意义相对于消极的控制( )。的寄生虫血症水平extract-treated团体包括31 77%而vehicle-treated组为93.72%。抑制寄生虫血症是17.55,37.08,100年为66.63%,200年和400毫克/公斤的提取。青蒿琥酯相比,提取的效果是温和的(表2)。在所有剂量的提取,显著增加MST的动物(程度天)相对于vehicle-treated集团(8.80天)。29.20天的MST artesunate-treated集团被记录,这是高于MST extract-treated组(表的2)。

疟疾感染通常与体重有关损失,但是标准的药物(青蒿素4.0毫克/公斤)以及提取接种剂量,100年,200年和400毫克/公斤,阻止特征体重损失p .鼠来华的老鼠。轻微下降,体重的动物vehicle-treated组(表中记录3)。vehicle-treated组记录的平均体重1.42%的损失。extract-treated组的4.21%、5.08%、和1.09%收益在动物体重观察100年,200年和400毫克/公斤提取,分别。所有提取剂,除了400毫克/公斤,是比artesunate-treated集团记录体重的增加4.02%。直肠温度轻微下降,观察车辆-和extract-treated组。提取是不成功的在预防减少小鼠的体温。artesunate-treated组小鼠的直肠温度保持在实验的持续时间。无显著差异在老鼠的直肠温度的各种治疗组(表3)。

3.2.2。治疗试验

治疗测试评估药物根除寄生虫的能力处于建立阶段的疾病。提取产生剂量依赖性降低寄生虫数量在这两天(表3和74)。提取的意思是寄生虫血症-和artesunate-treated组相比低得多的7天到第三天。7天,平均寄生虫血症为41.95,22.79和21.83%,100年,200年和400毫克/公斤治疗组,分别。管理4毫克/公斤青蒿琥酯减少意味着寄生虫血症5.33%在7天。为治疗组,寄生虫血症水平增加从66.17天7天3到77.14%。百分比chemosuppression 7天< 50%为100毫克/公斤治疗组但≥70%团体接受200毫克/公斤和400毫克/公斤的提取。artesunate-treated组93.09% chemosuppression 7天(表4)。提取剂量也影响了小鼠的生存时间。小鼠接种100和200毫克/公斤提取存活13和16天,分别,但那些服用400毫克/公斤存活了20天。老鼠用青蒿琥酯治疗幸存下来后28天政府明显( )比汽车——或者extract-treated组(表4)。增加体重观察dgteconnect.spi-global.comday 3为所有动物提取物,第七天artesunate-treated组(表5)。然而,动物vehicle-treated组显示,平均体重略有下降(-2.88%)从第三天到第七天。增加边际直肠温度0.17°C vehicle-treated组的观察。另一方面,提取和artesunate-treated组记录直肠温度下降从第三天到第七天。之间没有显著改变体温检测车辆,青蒿琥酯,实验期间和extract-treated组(表5)。

3.2.3。预防性试验(库测试)

预防性试验评估药物的预防能力。有一个重要的( )和剂量依赖性降低寄生虫extract-treated组数。chemosuppression比例的平均值为47.82,47.86,和56.93在100年,200年和400毫克/公斤提取,分别在mefloquine chemosuppression 4毫克/公斤产生一个83.82%。寄生虫水平也大大减少与增加剂量的提取与负控制相比。的平均百分比寄生虫血症在100、200和400毫克/公斤提取为31.90,31.88,61.14和26.33,而阴性对照组。然而,mefloquine-administered组记录意味着寄生虫血症9.90%(表6)。负控制的老鼠和100毫克/公斤extract-treated组观察到显著减少体重的6.83%和1.21%,分别。然而,200 mg / kg - 400毫克/公斤,和mefloquine-treated组记录体重的增加。直肠温度降低在治疗组100毫克/公斤体重,甲氟喹合成,消极的控制。同时,治疗组与200和400毫克/公斤体重记录的直肠温度增加0.17°C和0.33°C,分别(表7)。

3.3。抗氧化活性

phosphomolybdenum (PM)和DPPH分析被用来评估乙醇叶及其树枝提取物的抗氧化能力Faurea叶提出了表和数据8。总抗氧化能力(TAC)获得的点分析 。的集成电路₅₀的价值Faurea叶在DPPH自由基清除实验估计 。相比之下, 需要抗坏血酸的清除DPPH自由基的50%。

3.4。抗炎活性

在抗炎试验,Faurea叶提取显示显著抗炎活动( )相比标准的药物。注射角叉菜胶小鸡诱导累进的爪子水肿达到其最大在90年^th分钟extract-treated组但持续到2^nd小时的小组只有汽车。双氯芬酸提取后,或地塞米松管理,大幅减少脚卷观察到6^th小时。最大的脚水肿是记录达到2^nd小时vehicle-treated集团。观察到的剂量依赖性关系Faurea叶提取组,同样是明显的水肿,抑制百分比计算提取,41.01,49.96,和55.50%的禁忌水肿观察10,30和100毫克/公斤治疗组,分别为(表9)。组接受双氯芬酸和地塞米松抑制百分比计算为47.61%和60.03%,分别。

3.5。急性毒性和行为变化

纯种雌性白化病老鼠服用50,300和2000毫克/公斤Faurea叶提取的急性毒性评价提取。对照组只接受车辆(生理盐水),然后所有治疗组都研究了14天。在整个研究期间,所有行为和形态特征被认为是正常的。没有死亡,震动,腹泻,痉挛,或唾液分泌信号观察大鼠的治疗或对照组。因此,之间没有差异治疗组在临床发现和控制。在研究过程中,逐渐增加的体重观察老鼠。为对照组,实验期间体重增加约28%。治疗组体重的增加为10.61,8.54和16.12%,分别为团体收到50,300和2000毫克/公斤的提取(表10)。没有显著变化 )在动物体重50毫克/公斤治疗组相对于对照组。然而,一个重要的( )中可观察到体重增加300和2000毫克/公斤治疗组。致死量(LD₅₀)估计超过2000毫克/公斤。

评估的影响Faurea叶肝(图上提取1)和肾(图2)函数,主要酶活动相关的肝脏和肾脏的正常运行。尿素和肌酐的水平是用来标记肾功能而活动的丙氨酸转氨酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、间接胆红素(IB)和直接胆红素(DB)被用来评估肝功能。平均尿素水平在50和2000毫克/公斤治疗组约49%和38%,分别高于对照组,这代表一个重要( )增加尿素水平(图2)。然而,对于所有其他参数测量值之间没有显著差异存在获得治疗组相对于对照组(那些获得 )。

4所示。讨论

本研究试图评估在活的有机体内有效性和安全性的Faurea叶树叶和树枝提取常用的加纳草药治疗疟疾。初始植物化学的检测表明,香豆素类、类黄酮苷、丹宁酸、皂甙在场的乙醇提取的树叶及其植物(表的树枝1)。前一个工作的粗提物Faurea叶树叶和树枝显示生物碱的存在,单宁,香豆素类(19]。通过冷浸渍提取从以前的工作得到索格利特虽然当前研究使用。植物在这项研究中收集样品在1月8月早些时候的研究人员收集了他们,从不同的地理位置。的差异提取技术,采样时间、采样位置可能占报告的植物化学物质之间的差距。植物化学物质和生物碱类、萜烯类黄酮、香豆素和柠檬苦素类似物已被公认为可能的抗疟药物。这些植物化学物质可能函数本身单独或与他人合作为了证明生物活性观察(28]。

当感染p .鼠啮齿动物模型产生疾病特性类似于人类plasmodial感染(29日]。的在活的有机体内这项工作的结果表明,乙醇提取物Faurea叶树叶和树枝拥有大量抑制、治疗和预防对寄生虫在安全剂量的影响。这证实了早些时候的报告显示,从原油中提取Faurea叶树叶和树枝显示承诺antiplasmodial效果在体外(19]。提取展出大量chemosuppression存在剂量依赖的相关性在所有测试组在3化验使用。抑制和治疗的标准药物测试,青蒿琥酯,管理4毫克/公斤体重,记录chemosuppression约93%。的Faurea叶提取物表现出更好的antiplasmodial效果的治疗试验比抑制试验。chemosuppression寄生虫血症在最高剂量(400毫克/公斤)是治疗和抑制测试的71.70%和66.63%,分别。预防性试验,提取chemosuppression为56.93%的最高剂量400毫克/公斤,而标准药物甲氟喹(4毫克/公斤)记录chemosuppression 83.82%。的具体作用方式Faurea叶提取不是澄清;然而,antiplasmodial属性的植物产品已被证明是依赖于活性植物成份(21]。antiplasmodial属性表现出的乙醇叶及其树枝提取Faurea叶因此可能是由于植物成份单独或者通过结合协同行动。事实上,许多抗疟药函数通过多种机制。青蒿素为例,提出了对疟原虫函数通过三个途径。青蒿素与PfATP6和蛋白质产生不可逆的损害。它也表明,青蒿素发挥作用的抑制疟原虫色素形成。最后,这种寄生虫线粒体激活青蒿素,导致生产自由基损害的重要分子寄生虫(30.]。

贫血、体重下降和温度升高是疟疾感染动物的特征31日]。任何有效antiplasmodial代理应该可以避免身体减肥并保持体温在疟疾治疗方案。的Faurea叶提取这三个测试用例能够防止减肥,除了100毫克/公斤的预防性试验治疗组1.21%的体重被记录。所有saline-treated组(负控制)的抑制,治疗,和预防性试验记录百分之一体重的1.42,2.88,和6.83,分别。在人类疟疾感染的症状,体温升高。的体温,阴性对照组小鼠的抑制和治疗测试了在整个测试周期一般体温下降。抑制和治疗试验中,受感染的老鼠发达轻微下降直肠温度的最大0.53°C。这个老鼠长期降低温度可以与疟疾寄生虫对宿主的影响可能导致身体的热量损失,最终死亡的老鼠(32]。还报道说,疟疾寄生虫也影响碳水化合物、脂质和蛋白质的新陈代谢。此外,减少代谢率p .鼠来华的主机加上减少内部体温一直引用(33]。因此,积极抗疟潜力有望避免直肠温度的下降。因此,Faurea叶粗提物预防直肠温度的下降与对照组的老鼠。在标准筛选试验、抗疟代理> 30%对寄生虫血症抑制的影响,可以扩展治疗小鼠的生存时间相对于对照组小鼠主要分为有效标准筛选试验(34]。在当前在活的有机体内抑制抗疟评估,治疗和预防性试验结果表明,Faurea叶活跃在治疗疟疾。

由于生产过剩的无功species-ROS RNS-by疟原虫疟疾感染过程中,氧化应激在宿主细胞通常是观察到的11]。当离开不受控制,氧化应激可能会破坏蛋白质,核酸,脂质,从而导致严重的组织损伤。因此,植物提取物,可以清除RNS和ROS除了antiplasmodial能力可能是非常有用的。代替,提取物的抗氧化活性评价。的能力Faurea叶提取物清除自由基DPPH实验研究,集成电路₅₀提取的价值决定 。标准的抗坏血酸 。在phosphomolybdenum (PM)测定,TAC 被记录。都指向一个温和的抗氧化作用的结果Faurea叶提取。在另一个类似的研究中,水提物Haematostaphis barteri被证明具有良好的治疗和预防antiplasmodial活动但相对较低的总抗氧化能力(42毫克AAE / g(提取)(35]。RNS和ROS涉及炎症级联。因为疟疾是一种inflammatory-driven细胞因子的疾病和导致各种炎症介质的释放11),提取的Faurea叶还追究其减少炎症的能力。ethanolic提取显示温和的抗炎效果。剂量依赖性降低观察水肿。的最大剂量100毫克/公斤,观察水肿减少55.89%。综上所述,抗氧化和抗炎试验的结果表明,提取的Faurea叶可以清除和中和活性物种可能导致氧化应激,诱发炎症。此外,提取可能干扰生产和/或释放炎症介质,从而发挥抗炎作用。这些,加上在体外和在活的有机体内antiplasmodial提取的活动,为其使用的医学治疗疟疾和像症状。

安全性评价的Faurea叶提取进行确定它对老鼠的正常生长模式的影响。最后14天观察提取管理后,所有动物的体重治疗和控制组织逐步增加整个时期的研究(表10)。动物的平均体重百分比对照组为27.91。老鼠的平均体重管理50毫克/公斤,300毫克/公斤,和2000毫克/公斤剂量的提取是10.61,8.54和16.13%,分别。提取似乎没有对老鼠的体重产生负面影响,这就是为什么它的食物和水消费没有明显改变。食物和水的使用说明正常动物的新陈代谢(36),这个前提的提取Faurea叶没有改变老鼠的新陈代谢。14天期的急性毒性评价、老鼠Faurea叶提取在剂量50、300和2000毫克/公斤记录没有死亡率和发病率的老鼠没有产生任何症状的毒性。因此,平均急性致死剂量值(LD₅₀估计超过2000毫克/公斤27]。肝脏是一个重要的器官参与新陈代谢。肝损伤时,转氨酶升高的活动,这个活动还将上升时,伤害增加(37]。此外,大量的酶通常发现在胞质释放入血肝细胞膜时受伤。一个有用的工具来评估肝脏功能的测量活动的血清标志物酶ALT, AST,高山和血清总胆红素(38]。血清标志物研究工作、总胆红素、间接胆红素、直接胆红素、总蛋白质,高山,ALT, AST,表现出相对于对照组没有显著的变化(图1)。因为这意味着ethanolic提取Faurea叶树叶和树枝并不是在大鼠肝毒素的。肾脏也是一个重要器官,帮助维持一个稳定的身体状态。它排泄代谢废物,包括药物及其代谢物。尽管如此,肾脏的接触一些有毒物质可能损坏肾小管(39]。尽管有其局限性,高血清肌酐、血尿素氮、尿液和低输出目前用于诊断急性肾损伤(40]。尿素是蛋白质分解代谢的代谢产物,增加血清尿素可能阻碍肾脏功能如果没有相应的控制(41]。在现在的研究中,没有显著差异的血清肌酐水平extract-treated组比对照组。然而,有高浓度的尿素在50和2000毫克/公斤体重治疗组(图2)。尿素水平升高可能归因于动物的年龄或由于老鼠的饮食成分的饲料。而尿素可能不是肾衰竭的主要毒素,所表示的巴克尔et al。42),还需要进一步的研究来建立这个发生的原因。

5。结论

本研究证实Faurea叶拥有antiplasmodial活动在活的有机体内模型。此外,提取具有温和的抗炎活性。然而,提取物的抗氧化能力是平均水平。在提取浓度高于2000毫克/公斤,似乎是安全的。然而,尿素水平升高可能是一个问题,需要进一步调查。因此,这一研究获得的结果支持传统的使用Faurea叶用于管理疟疾和像的条件。隔离的积极原则可以提供化合物可以用于药物发现。

数据可用性

本研究中所有生成的数据或分析包括在发表的这篇文章。

伦理批准

项目建议书和程序审查和批准的机构伦理审查委员会对动物用夸梅•恩克鲁玛科技大学,加纳库马西,。

的利益冲突

所有作者声明没有金融竞争、专业或个人利益可能影响性能或演示本手稿中描述的工作。

作者的贡献

这项研究是由LSB和足总。实验设计的LSB、FA和CNM。植物材料被足总收集。FA和CNM进行实验。数据分析是FA、CNM和LSB。手稿被足总准备,CNM和LSB。所有作者阅读和批准最终的手稿。

确认

作者承认的化学、药理、理论和应用生物学、和中央实验室,所有KNUST使用的设施。使用的一些设备都是从资金买从一个国际科学基金会(IFS)合作研究格兰特LSB。

引用

1. 谁,2020年世界疟疾报告》:20年的全球进展和挑战,2020年。
2. s . h . Nyarko和a . Cobblah疟疾在5岁以下儿童儿童社会人口因素在加纳,”疟疾研究和治疗卷。2014年,6页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. g . t . Edwin m . Korsik, m·h·托德“过去、现在和未来的抗疟疾药物,”《疟疾杂志》上,18卷,不。1、21、2019页。视图:谷歌学术搜索
4. h . Noedl y, k . Schaecher b·l·史密斯,d . Socheat和m . m .福田“出现青蒿素耐药性疟疾在柬埔寨西部的证据,”新英格兰医学杂志》上,卷359,不。24日,第2620 - 2619页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. W.-H。锅,X.-Y。徐,施n, s . w .曾荫权,周宏儒。张“抗疟活性的植物代谢产物”,国际分子科学杂志》上,19卷,不。5,1382年,页2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. n Tajuddeen和f·r·范”Antiplasmodial天然产品:更新”,《疟疾杂志》上,18卷,不。1、1 - 62、2019页。视图:谷歌学术搜索
7. v . l .卢·l·麦克唐纳,h·金斯伯格,m . Krugliak和t . Tiffert”血红蛋白消化过剩的疟疾寄生虫:策略防止过早宿主细胞裂解,”血液细胞、分子和疾病,32卷,不。3、353 - 359年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. j . Noyola-Martinez c·肖,b .基督教et al .,“氧化应激基因在恶性疟原虫的时序基因表达,”V微阵列数据分析的方法页,45-58施普林格,2007年。视图:谷歌学术搜索
9. m·米塔尔·m·r·西迪基k . Tran s . p . Reddy和a·b·马利克“活性氧在炎症和组织损伤,”抗氧化剂和氧化还原信号,20卷,不。7,1126 - 1167年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. m . b . Isah m·a·易卜拉欣,“抗氧化剂的作用治疗疟疾感染的发病机理:复习一下,”寄生虫学研究,卷113,不。3、801 - 809年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. m·c·泰·m·祖尼加a Gotz et al .,“疟疾炎症由黄嘌呤oxidase-produced活性氧物种,”EMBO分子医学,11卷,不。8篇文章e9903 2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. 大肠Ricciotti和g·a·菲茨杰拉德“前列腺素和炎症。”动脉硬化、血栓和血管生物学没有,卷。31日。5,986 - 1000年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. a . Ghorani-Azam s Sepahi Riahi-Zanjani, a . a . Ghamsari s . a . Mohajeri和m . Balali-Mood“植物毒素和儿童急性药用植物中毒:一个系统的文献回顾,“在医学科学杂志》上的研究,23卷,不。1,p。26日,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. f·p·t·Manfo e·a·Nantia诉Kuete,“肝毒性,王亚南非洲药用植物的影响。”非洲药用植物毒性的调查,第355 - 323页,2014年。视图:谷歌学术搜索
15. 共和党沙玛,沙玛,诉Pattabhi, s . b .多个p·d·沙玛,“肝毒素的植物马缨丹卡马拉的审查。”关键在毒理学评论,37卷,不。4、313 - 352年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. f . Ayisi c . n . Mensah和l . s . Borquaye Antiplasmodial潜力和ethanolic干树皮提取物的安全性评价Distemonanthus benthamianus Baill。(豆科),“科学的非洲e00809条,卷。12日,2021年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. m . k . Laryea和l . s . Borquaye抗疟、抗氧化剂和毒理学评价提取Celtis非洲,Grosseria vignei,酸浆属micrantha,和Stachytarpheta angustifolia,”生物化学研究国际文章ID e9971857卷。2021年,2021年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. h . m . Burkill西非洲热带的有用的植物艾德,公元家庭,1卷,皇家植物园,1985年。
19. m . k . Laryea和l . s . Borquaye抗疟疗效和毒性评估一些加纳药用植物提取物,”寄生虫学研究期刊》的研究卷,2019篇文章ID e1630405 9页,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. g . Afu m . k . Laryea和l . s . Borquaye”生物有效性和毒性评价ethanolic提取的肉桂nodosa Buch.-Ham(豆科)。”化学杂志,2020卷,2020年。视图:谷歌学术搜索
21. a . Nardos和大肠Makonnen体内antiplasmodial活动和毒理学评估hydroethanolic粗提物的一种草本植物remota,”《疟疾杂志》上,16卷,不。1,p。25日,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. l . s . Borquaye m . k . Laryea e . n . Gasu et al .,“提取物的抗炎和抗氧化活动Reissantia籼稻,白粉藤属cornifolia和Grosseria vignei,”有说服力的生物学》第六卷,没有。1,1785755条,2020。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 主机,d . Nartey e . d . Accorley r . g .达尔和l . s . Borquaye“精油从Averrhoa杨桃l .(酢浆草料):化学成分、抗氧化、抗菌和anti-biofilm潜力,”化学非洲,2021年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. d . Nartey j . n . Gyesi和l . s . Borquaye“精油的化学成分和生物活性Chrysophyllum albidum g .唐(非洲星苹果),“生物化学研究国际文章ID e9911713卷。2021年,2021年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. j . Amo-Mensah g·达尔,l . s . Borquaye“根和树皮提取物的抗炎和抗氧化活动的_Vitex grandifolia_ (Verbanaceae)”科学的非洲e00586条,卷。10日,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. l . s . Borquaye g .达尔·m·k . Laryea诉罗伯茨,r·博阿滕和e . n . Gasu”奥利瓦提取物的抑菌抗炎活动sp,黄花髌骨,和Littorina littorea收集从加纳沿海海岸线”有说服力的生物学,3卷,不。1,1364063条,2017。视图:谷歌学术搜索
27. 425年经合组织,”经合组织测试没有:急性口服毒性:上下过程中,“经合组织指导化学品的测试部分4卷,1-27,2008页。视图:谷歌学术搜索
28. h·考尔·h·m·穆赫塔尔a·辛格和a . Mahajan”功效Antiplasmodial药用植物:一个文献综述,选择性和粗糙的植物提取物、植物化学”从自然生物活性产品杂志》上,8卷,不。5,272 - 294年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. a . m .托马斯a . m . Van Der嗯,a·w·托马斯·c·j . Janse和a . p .水域,“疟疾的动物模型,转染系统”寄生虫学今天,14卷,不。6,245 - 249年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. j·李和b .周”,青蒿素的生物行为:从药物化学研究中,“分子,15卷,不。3、1378 - 1397年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. j .蓝鸿恩s . j .五胞胎,l . a . Sanni”blood-stage疟疾感染的小鼠模型:免疫反应和细胞因子参与保护和病理学,”化学免疫学,卷80,不。80年,第228 - 204页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. l . Bantie s Assefa、t . Teklehaimanot和e . Engidawork”体内的抗疟活性粗叶提取和溶剂的分数巴豆macrostachyus Hocsht。(大戟科)对小鼠鼠,”BMC补充和替代医学,14卷,不。1、1 - 10,2014页。视图:谷歌学术搜索
33. h . Briand和w·彼得,“急性疟疾:p .鼠对老鼠的代谢率的影响,“俄亥俄的科学》杂志上,第189 - 77页,1977年。视图:谷歌学术搜索
34. m . Adugna t . Feyera w . Taddese, p . Admasu”体内抗疟活性的粗提物的地上部分艾abyssinica对老鼠,鼠”全球药理学杂志》上的报告,8卷,不。3、460 - 468年,2014页。视图:谷歌学术搜索
35. j . n . Boampong a . a . Karikari和e . o . Ameyaw”_In vivo_ antiplasmodial和_In vitro_干树皮提取物的抗氧化性能_Haematostaphis barteri_,”亚洲太平洋热带生物医学杂志》上,5卷,不。6,446 - 450年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. j . t . Mukinda和j·a . Syce“水提物的急性和慢性毒性_Artemisia afra_在啮齿动物,”民族药物学杂志,卷112,不。1,第144 - 138页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 服务贸易总协定,r·阿利尤古萨乌j . r . Kuiate et al .,“毒理学评价大蒜水提物的灯泡在实验室小鼠和大鼠,”喀麦隆实验生物学杂志》上,1卷,不。1,39-45,2005页。视图:谷歌学术搜索
38. 大肠Porchezhian和s·h·安萨里”,王亚南活动_Abutilon indicum_在大鼠实验性肝损伤,”植物学期刊,12卷,不。1 - 2、62 - 64年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. n . a . Bayomy r·h·Elbakary m·a·a·易卜拉欣和大肠z作为礼尚往来,“番茄红素和rosmarinic酸对庆大霉素引起肾皮质氧化应激、细胞凋亡、自噬在成年雄性白鼠”解剖记录,卷300,不。6,1137 - 1149年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. a . Akcay k .土库曼d . w . Lee和c·l·埃德尔斯坦,”更新的诊断和管理急性肾损伤,”国际肾脏病学会和肾血管性疾病杂志》上,3卷,129页,2010年。视图:谷歌学术搜索
41. g . s . Nguenang a . s . m . Ntyam诉Kuete,“急性和亚急性毒性资料的甲醇提取Lycopersicon esculentum l .叶子(番茄),植物和有前途的体外抗癌潜力,”以证据为基础的补充和替代医学卷,2020篇文章ID 8935897, 2020。视图:谷歌学术搜索
42. a·巴克尔r·h·威廉姆斯,m . Shaykh g . Dunea和a·杜宾“生化尿毒症综合症”,临床化学的进步,29卷,第120 - 61页,1992年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2021 Felix Ayisi et al。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。