) and another significant difference between LC50s of mpt 1 and mpt 3 using tagpo extract with computed lethal ratio and confidence limits of 0.861 (0.782, 0.939, ). Taken together, the results point out that mpt generates accurate and reproducible lethal concentration values. Hence, mpt may be used as an alternative method to screen molluscicides that are active against schistosome snail vectors."> 一个新的方法来测试螺剂对菲律宾血吸虫病蜗牛向量gydF4y2Ba - raybet雷竞app,雷竞技官网下载,雷电竞下载苹果

寄生虫学研究期刊》的研究gydF4y2Ba

寄生虫学研究期刊》的研究gydF4y2Ba/gydF4y2Ba2020年gydF4y2Ba/gydF4y2Ba文章gydF4y2Ba

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体积gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba |gydF4y2Ba文章的IDgydF4y2Ba 3827125gydF4y2Ba |gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2020/3827125gydF4y2Ba

达尔文c·戈麦斯,尼尔AnactagydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2Ba一个新的方法来测试螺剂对菲律宾血吸虫病蜗牛向量gydF4y2Ba”,gydF4y2Ba寄生虫学研究期刊》的研究gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2020年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba3827125gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2020年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2020/3827125gydF4y2Ba

一个新的方法来测试螺剂对菲律宾血吸虫病蜗牛向量gydF4y2Ba

学术编辑器:gydF4y2Ba何塞́f .对峙gydF4y2Ba
收到了gydF4y2Ba 2019年4月19日gydF4y2Ba
修改后的gydF4y2Ba 2019年8月29日gydF4y2Ba
接受gydF4y2Ba 2019年10月04gydF4y2Ba
发表gydF4y2Ba 2020年1月29日gydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

加快新型螺剂在实验室的发现,本研究旨在评估新molluscicidal的性能试验。这个实验是基于gydF4y2Ba钉螺hupensis quadrasigydF4y2Ba蜗牛和被称为微型板试验或gydF4y2BamptgydF4y2Ba。执行此分析12-well板3每口井的蜗牛,和24小时曝光时间。的性能gydF4y2BamptgydF4y2Ba使用氯硝柳胺和评估gydF4y2Ba管理gydF4y2Ba植物提取物(tagpo提取)作为传统测试物质,而世卫组织的指南板测试(gydF4y2BacptgydF4y2Ba)作为标准。一个gydF4y2BacptgydF4y2Ba和四个gydF4y2BamptgydF4y2Ba独立试验进行了氯硝柳胺和tagpo提取。Probit剂量反应分析数据是在R生成致死浓度(LC中运行gydF4y2Ba50gydF4y2Ba和信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba),而致命的比值判别法进行检测配对LC之间的显著差异gydF4y2Ba50gydF4y2Bas(或信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba使用氯硝柳胺。,LC计算gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值分别为0.104,0.127,0.136,0.139,和0.140 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba为gydF4y2BacptgydF4y2Ba,gydF4y2BamptgydF4y2Ba1,gydF4y2BamptgydF4y2Ba2,gydF4y2BamptgydF4y2Ba3,gydF4y2BamptgydF4y2Ba4、分别,而信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba值分别为0.266,0.268,0.244,0.251,和0.261 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,分别使用相同的序列。tagpo提取的信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值分别为1.467,1.547,1.659,1.797,和1.659 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,因为gydF4y2BacptgydF4y2Ba,gydF4y2BamptgydF4y2Ba1,gydF4y2BamptgydF4y2Ba2,gydF4y2BamptgydF4y2Ba3,gydF4y2BamptgydF4y2Ba4、分别和LCgydF4y2Ba90年gydF4y2Ba年代是2.188,2.195,2.501,2.358,和2.501 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,分别。致命率试验表明LC之间存在显著差异gydF4y2Ba50gydF4y2Ba年代的gydF4y2BacptgydF4y2Ba和gydF4y2BamptgydF4y2Ba1当使用氯硝柳胺的致命率和置信区间0.820 (0.663,0.977,gydF4y2Ba )gydF4y2BaLC和另一个重要区别gydF4y2Ba50gydF4y2Ba年代的gydF4y2BamptgydF4y2Ba1,gydF4y2BamptgydF4y2Ba3使用tagpo提取计算致命率和置信区间为0.861 (0.782,0.939,gydF4y2Ba )。gydF4y2Ba综上所述,结果指出gydF4y2BamptgydF4y2Ba生成准确的和可再生的致死浓度的值。因此,gydF4y2BamptgydF4y2Ba可以用作屏幕螺剂,另一种方法是活跃的对血吸虫蜗牛向量。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

人口控制疾病的向量是一个重要的战略管理血吸虫病、寄生虫病引起的血吸虫蠕虫和通过淡水螺[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。根据最近的一项研究中,建模质量化疗结合蜗牛人口控制是一种经济策略消灭血吸虫病(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。这个数学模型支持在中国最近发表的一项研究。纵向分析使用价值37年的研究数据在三联和Guifan血吸虫病,中国gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。在这个研究中,结合质量管理吡喹酮和蜗牛控制策略导致人类血吸虫病患病率显著减少(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。在中国,蜗牛控制策略包括灭螺剂应用,环境管理,土地流转gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。这些策略可能很难实现,如果蜗牛网站大小不同和地形或当使用灭螺剂是有毒的gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。例如,合成螺剂如氯硝柳胺的使用带来的环境和健康风险,需要发展绿色能源(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。氯硝柳胺的广泛的毒性等不属预定目标的生物主要涉及鱼类和两栖动物对其在大规模应用程序(使用gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。因此,有新的尝试开发新型螺剂通过优化已知的活性物质或利用不同化合物从自然资源(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

一个快速gydF4y2Ba在体外gydF4y2Bamolluscicidal试验可能会加速新型螺剂的发展。越来越多的植物化学物质的兴趣与强有力的molluscicidal活动成功使用后gydF4y2Ba商dodecandragydF4y2Ba在埃及血吸虫的蜗牛人口控制向量(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。新化合物的合成及构效关系与已知螺剂也流行[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。两个研究策略需要一个化验使用少量的测试物质,同时保持准确性和重现性。最近,它已被证明在24-well板2毫升的测试解决方案可用于屏幕螺剂活性gydF4y2BaBiomphalariagydF4y2Ba物种(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。这种新方法与传统的协议相比,一个方法,超过50毫升的测试解决方案用于每个技术复制。两种方法被证明产生统计上类似的结果(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。作者表明,缩小体积测试解决方案需要在他们的新试验,反过来,减少所需的测试物质产生剂量反应数据,使它适合天然产物研究中纯化的样品总是有限的数量(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

除了液浸法,螺剂可能使用板试验测试。它用于两栖蜗牛等gydF4y2Ba钉螺hupensis quadrasigydF4y2Ba。根据世界卫生组织的公开测试螺剂在实验室的指导方针,一盘测试使用一个150毫米Petridish,一个普通的滤纸作为地板,每板十(10)蜗牛,为期四天的曝光时间(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。这些指南是适应以不同的方式。其修改可能包括Petridish尺寸小,较短的曝光时间,公司的复苏阶段,蜗牛被允许恢复有利条件。即使板测试方法很简单,它遭受了大量的测试物质所需的测试和评估时间延长。这意味着板试验时可能会不切实际的用来测试获得分数的复杂混合物,可能很难繁殖蜗牛的早期发病死亡可能导致微生物生长和污染的盘子。板污染可以解决分离死蜗牛或转移那些活在一个新的板块。添加,世卫组织的测试指南,统计治疗剂量反应的数据没有明确描述。gydF4y2Ba

健壮的和适当的剂量反应数据的统计处理分析发展是很重要的。统计处理的数据用于模型的分布反应寻求试验(即。蜗牛死亡率)和一系列的测试物质的浓度。例如,Probit分析用于致死浓度计算实验要求派生的剂量反应数据安装在一个对数正态分布gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。剂量反应数据的拟合取决于所选择的模型和实验设计gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。根据罗伯逊et al。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba),生物测定必须使用至少五个浓度和大约250测试生物体。剂量反应评估使用拟合优度测试数据的质量和重要性测试执行使用致命率测试(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]。在这项研究中,健壮的统计数据处理来自提出小说molluscicidal执行分析以支持其在计算准确性和重现性致死浓度。gydF4y2Ba

本研究旨在开发一个小型版本的板试验称为微型板测试(gydF4y2BamptgydF4y2Ba基于gydF4y2Ba钉螺hupensis quadrasigydF4y2Ba蜗牛。测试的假设没有致命浓度计算之间存在显著差异gydF4y2BamptgydF4y2Ba和传统的板试验(gydF4y2BacptgydF4y2Ba),参考灭螺剂氯硝柳胺和新奇的植物提取物被用作测试物质。然后,评估的再现性gydF4y2BamptgydF4y2Ba,多个试验进行。Probit分析用于致死浓度计算,而致命的比值判别法是用于假设检验(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

此外,本研究使用了原油的植物提取物gydF4y2Ba管理gydF4y2Ba物种目前被作者研究的潜在molluscicidal活动gydF4y2Ba钉螺hupensis quadrasigydF4y2Ba蜗牛(未发表的数据)。这种植物是菲律宾本地物种,俗称“tagpo”。许多gydF4y2Ba管理gydF4y2Ba物种研究的促进健康活动(gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。包括tagpo提取的目的是证明作为测试的物质gydF4y2BamptgydF4y2Ba可以用来测试天然植物提取物。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。氯硝柳胺的制备gydF4y2Ba

氯硝柳胺粉配方(50%重量)购买从当地经销商(NiclosM®, 50 wp,导致农产品corp .)。七氯硝柳胺含量测定中使用了从0.0617 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba0.2330 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba活性成分的使用水作为溶剂。准备氯硝柳胺的储备溶液,0.3530 g的50 wp氯硝柳胺重分析天平(日本岛津公司、日本)和溶解在使用容量瓶1升蒸馏水。解决方案是在1900×gydF4y2BaggydF4y2Ba4分钟的台式离心机(美国Labnet)。利用离心力分离是存储在50毫升离心管和储存在4 - 8°C到使用。gydF4y2Ba

2.2。植物提取物的制备gydF4y2Ba

Tagpo水果在Sta收集的样本。铁、莱特岛、菲律宾(11°11′52“N, 124°56′29”E, 43 m高度)在2018年11月和12月的月和被确定为一个gydF4y2Ba管理gydF4y2Ba物种在穆维拉纪念标本,菲律宾大学奎松市。二项式的物种名称并不是由于属的复杂性决定的。才tagpo水果被带到实验室,在运行自来水洗去除污垢。水果被切成两半,干24小时60°C。干果样本然后使用搅拌机粉碎。水果样本已筛粉和存储在50毫升离心管−21°C到使用。原油浸泡1.000 g tagpo提取制备的粉样品在100.0毫升蒸馏水。固液混合物搅拌连续1 h和是1900×gydF4y2BaggydF4y2Ba4分钟使用台式离心机(美国Labnet)在室温下。利用离心力分离是存储在50毫升离心管和下游molluscicidal生物分析中使用。tagpo提取物的浓度是用克可溶性固体每板面积(g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)和使用后的离心液的重量分析方法确定的美国公共卫生协会gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。tagpo提取物、5浓度(1.224到2.396 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)使用。gydF4y2Ba

2.3。适应环境的蜗牛gydF4y2Ba

蜗牛(gydF4y2Bao . h . quadrasigydF4y2Ba)收集Alang-alang莱特(11°11′19 N, 124°54′23“E, 49米高度)和适应于实验室条件下玻璃水族馆内墙壁内衬滤纸。Dechlorinated水用于适应环境。水族馆里的水保持在5毫米水深和水改变了每24 h。蜗牛的滤纸作为食物。蜗牛也会适应在12 h: 12 h:黑暗周期48 h。gydF4y2Ba

2.4。常规板试验(cpt)gydF4y2Ba

Molluscicidal试验进行了使用85毫米中板块安装板表面的圆形滤纸。适当的氯硝柳胺的体积或tagpo提取均匀分布在滤纸。然后,佩特里板块在烤箱干60°C 6 h和冷却到室温。十个蜗牛被放置在板的中心和分布均匀的测试物质重组2毫升蒸馏水。每个测试浓度是一个负面的控制配对。有尽可能多的消极控制板材的数量浓度,意义七个板块为tagpo提取氯硝柳胺和5。盘子后被检查1 h,蜗牛爬上板墙壁返回中心的板通过镊子。24小时后,蜗牛被评估死亡率。gydF4y2Ba

2.5。微型板测试(mpt)gydF4y2Ba

执行试验使用12-well板制成的聚乙烯材料。井被安装了21.5毫米圆形滤纸的光盘。12井的适当添加了大量的氯硝柳胺和使用micropipetor tagpo提取。包含测试物质的孔板在烤箱干60°C 6 h,然后冷却至室温。每口井的添加了三个蜗牛,总共36个蜗牛每板使用。九井被用于测试物质和其余三个井作为消极的控制。然后,130毫升蒸馏水是添加到每个重建测试物质或负控制。类似于gydF4y2BacptgydF4y2Ba后,孔板检查1 h和墙上的蜗牛坚持回到使用镊子的中心。蜗牛死亡率评估后24 h。gydF4y2Ba

2.6。蜗牛的评估死亡率gydF4y2Ba

24小时接触测试物质后,蜗牛中盘子或12-well盘子评估死亡率使用运动性标准。在这项研究中,蜗牛恢复步骤是跳过以来我们能够评估立体镜下蜗牛组织的能动性。除了运动性标准,分解的程度及其相关的气味也用于评估死亡率。确定计算的死蜗牛,蜗牛是单独放在一个干净的载玻片紧随其后的是一滴水蜗牛。蜗牛也会轻轻压碎与另一载玻片暴露蜗牛组织。公开的组织和一根针和缺乏刺激反应刺激后用作死亡率标准。作为验证,我们总是观察到明显的反应在蜗牛负控制在刺激针尖端,也就是说,在两个玻片之间的破碎。gydF4y2Ba

2.7。统计分析gydF4y2Ba

Probit分析或芬尼的方法被用来确定中位数和最大致死浓度(LCgydF4y2Ba50gydF4y2Ba和信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba分别),卡方值,致命的比率,和相应的95%可信限使用gydF4y2Ba刚果民主共和国gydF4y2Ba在R(包gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。显著差异发现致命的LC之间的比率gydF4y2Ba50gydF4y2Bas(或信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba当比例的置信区间gydF4y2Ba没有gydF4y2Ba包括1.000 [gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

在这项研究中,一个微缩版的常规板试验(gydF4y2BacptgydF4y2Ba)开发。这个新方法称为微型板测试或gydF4y2BamptgydF4y2Ba,执行与12-well板(21.5毫米直径),3每口井的蜗牛,24小时曝光时间剂量反应生成数据。一个试验gydF4y2BacptgydF4y2Ba和四个试验gydF4y2BamptgydF4y2Ba进行使用七个测试浓度的氯硝柳胺和5 tagpo提取。研究人员使用的常规板测试作为标准。gydF4y2Ba

初始浓度的氯硝柳胺和tagpo提取和使用的卷分析,计算使用的物质的量。板面积的减少gydF4y2BamptgydF4y2Ba导致一个更小的物质的量需要执行分析。氯硝柳胺的用量gydF4y2BamptgydF4y2Ba(0.0035克)低于5倍gydF4y2BacptgydF4y2Ba(表(0.0171 g)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。同样,对于tagpo提取,只用于0.0303 ggydF4y2BamptgydF4y2Ba和0.1459克gydF4y2BacptgydF4y2Ba。此外,使用较少的蜗牛gydF4y2BamptgydF4y2Ba比在gydF4y2BacptgydF4y2Ba252年:蜗牛gydF4y2BamptgydF4y2Ba与280年gydF4y2BacptgydF4y2Ba氯硝柳胺和180蜗牛gydF4y2BamptgydF4y2Ba和200的蜗牛gydF4y2BacptgydF4y2Ba与tagpo提取(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba


方法gydF4y2Ba 许多测试浓度gydF4y2Ba 使用的物质总量(克)gydF4y2Ba 蜗牛的总数gydF4y2Ba

氯硝柳胺gydF4y2Ba mptgydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 0.0035gydF4y2Ba 252年gydF4y2Ba
cptgydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 0.0171gydF4y2Ba 280年gydF4y2Ba

Tagpo提取gydF4y2Ba mptgydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 0.0303gydF4y2Ba 180年gydF4y2Ba
cptgydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 0.1459gydF4y2Ba 200年gydF4y2Ba

所有十组剂量反应数据展示在表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。氯硝柳胺的molluscicidal活动tagpo提取与巧克力摄入量有关这意味着更多的蜗牛都算作死在更高的浓度。没有观察蜗牛死亡率-对氯硝柳胺的控制和tagpo提取物,这暗示蜗牛是主管和死亡率记录测试物质是由于他们molluscicidal行动。这些结果也支持我们蜗牛蜗牛的死亡率评价破碎的方法生成准确的和可再生的剂量反应数据。值得注意的是,我们发现,更多的蜗牛爬出petriplate或孔板在氯硝柳胺特别是在测试浓度(即低。,0.1235,0.0926,和0.0617 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba氯硝柳胺)。相对于氯硝柳胺,有更少的蜗牛爬出来tagpo提取。gydF4y2Ba


浓度(g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)gydF4y2Ba cptgydF4y2Ba一个gydF4y2Ba 浓度(g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba)gydF4y2Ba mptgydF4y2Ba1gydF4y2BabgydF4y2Ba mptgydF4y2Ba2gydF4y2BabgydF4y2Ba mptgydF4y2Ba3gydF4y2BabgydF4y2Ba mptgydF4y2Ba4gydF4y2BabgydF4y2Ba

氯硝柳胺gydF4y2Ba 0.2131gydF4y2Ba 28gydF4y2Ba 0.2330gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba 26gydF4y2Ba 26gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba
0.1852gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba 0.2000gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba
0.1698gydF4y2Ba 23gydF4y2Ba 0.1833gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 19gydF4y2Ba
0.1543gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 0.1667gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 18gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 13gydF4y2Ba
0.1235gydF4y2Ba 14gydF4y2Ba 0.1333gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba
0.0926gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba 0.1000gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba
0.0617gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 0.0667gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba
0.0000gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0gydF4y2BacgydF4y2Ba 0.0000gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0gydF4y2BadgydF4y2Ba 0gydF4y2BadgydF4y2Ba 0gydF4y2BadgydF4y2Ba 0gydF4y2BadgydF4y2Ba

Tagpo提取gydF4y2Ba 2.2192gydF4y2Ba 30.gydF4y2Ba 2.3963gydF4y2Ba 26gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba 25gydF4y2Ba
1.9514gydF4y2Ba 22gydF4y2Ba 2.1072gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 19gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba
1.7218gydF4y2Ba 19gydF4y2Ba 1.8593gydF4y2Ba 20.gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba
1.4540gydF4y2Ba 17gydF4y2Ba 1.5700gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba
1.2244gydF4y2Ba 11gydF4y2Ba 1.3221gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba 1gydF4y2Ba 7gydF4y2Ba
0.0000gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0gydF4y2BaegydF4y2Ba 0.0000gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0gydF4y2BafgydF4y2Ba 0gydF4y2BafgydF4y2Ba 0gydF4y2BafgydF4y2Ba 0gydF4y2BafgydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba在30个蜗牛;gydF4y2BabgydF4y2Ba27个蜗牛;gydF4y2BacgydF4y2Ba70年的蜗牛;gydF4y2BadgydF4y2Ba63年的蜗牛;gydF4y2BaegydF4y2Ba50蜗牛;gydF4y2BafgydF4y2Ba45的蜗牛;gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba消极的控制(水)。gydF4y2Ba

致命的浓度是用来比较不同的测试物质在生物的活动。这些值计算使用芬尼方法(概率元分析)或任何其他适当的统计工具(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。拟合优度检验,也被称为卡方测试,初步统计处理,验证剂量反应数据的逻辑回归模型(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。如果没有发现显著差异之间的实验数据和模型,然后Probit分析成为一个有效的工具使用在计算致死浓度。拟合优度检验的结果展示在表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。的gydF4y2Ba 测试显示,所有十剂量反应数据拟合与所有相应的对数正态分布gydF4y2Ba - - - - - -gydF4y2Ba值高于0.05。gydF4y2Ba


方法gydF4y2Ba dfgydF4y2Ba - - - - - -gydF4y2Ba价值gydF4y2Ba 解释gydF4y2Ba

氯硝柳胺gydF4y2Ba cptgydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 6.9962gydF4y2Ba 0.2209gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 4.0881gydF4y2Ba 0.5368gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba2gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 6.9711gydF4y2Ba 0.2228gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba3gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 2.9620gydF4y2Ba 0.7059gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 5gydF4y2Ba 8.8165gydF4y2Ba 0.1166gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba

Tagpo提取gydF4y2Ba cptgydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 6.4780gydF4y2Ba 0.0905gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 1.0881gydF4y2Ba 0.7799gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba2gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 1.5552gydF4y2Ba 0.6696gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba3gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 2.4043gydF4y2Ba 0.4928gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba 1.0881gydF4y2Ba 0.7799gydF4y2Ba 不重要gydF4y2Ba

cptgydF4y2Ba——常规板试验;gydF4y2BamptgydF4y2Ba——小型板测试。gydF4y2Ba

计算致命的氯硝柳胺的浓度和tagpo提取展示在表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。LCgydF4y2Ba50gydF4y2Ba氯硝柳胺值计算为0.104 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba与gydF4y2BacptgydF4y2Ba和0.127 - -0.140 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba与gydF4y2BamptgydF4y2Ba。的信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba,氯硝柳胺值为0.266 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba使用gydF4y2BacptgydF4y2Ba和0.244 - -0.268 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba使用gydF4y2BamptgydF4y2Ba。tagpo提取的信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值为1.467 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba计算使用gydF4y2BacptgydF4y2Ba。最低的信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba值计算gydF4y2BamptgydF4y2Ba为1.547 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba而最高为1.797 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba。LCgydF4y2Ba90年gydF4y2Batagpo提取值为2.188 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba和2.195 - -2.501 g / mgydF4y2Ba2gydF4y2Ba确定使用gydF4y2BacptgydF4y2Ba和gydF4y2BamptgydF4y2Ba,分别。gydF4y2Ba


氯硝柳胺gydF4y2Ba Tagpo提取gydF4y2Ba
信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba

cptgydF4y2Ba 0.104 (0.088,0.120)gydF4y2Ba 0.266 (0.191,0.341)gydF4y2Ba 1.467 (1.356,1.577)gydF4y2Ba 2.188 (1.892,2.484)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1gydF4y2Ba 0.127 (0.112,0.143)gydF4y2Ba 0.268 (0.207,0.330)gydF4y2Ba 1.547 (1.433,1.661)gydF4y2Ba 2.195 (1.934,2.454)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba2gydF4y2Ba 0.136 (0.122,0.149)gydF4y2Ba 0.244 (0.202,0.285)gydF4y2Ba 1.659 (1.532,1.786)gydF4y2Ba 2.501 (2.117,2.885)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba3gydF4y2Ba 0.139 (0.125,0.153)gydF4y2Ba 0.251 (0.207,0.296)gydF4y2Ba 1.797 (1.700,1.893)gydF4y2Ba 2.358 (2.127,2.590)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 0.140 (0.125,0.154)gydF4y2Ba 0.261 (0.211,0.312)gydF4y2Ba 1.659 (1.532,1.786)gydF4y2Ba 2.501 (2.117,2.886)gydF4y2Ba

致命率测试执行来确定成对LC之间的区别gydF4y2Ba50gydF4y2Bas(或信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba只是由于随机误差。如果致命的可信限率1.000,包括致死浓度的区别是解释为不显著。致命的比率和相应的置信区间在95%置信水平展示在表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。值得注意的是,LC之间发现显著差异gydF4y2Ba50gydF4y2Ba年代的gydF4y2BacptgydF4y2Ba和gydF4y2BamptgydF4y2Ba1、0.820(0.663,0.977)和信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba年代的一对gydF4y2BamptgydF4y2Ba1,gydF4y2BamptgydF4y2Ba3、0.861 (0.782,0.939)。这意味着改变板直径从85毫米到21.5毫米计算信用证上有显著的影响gydF4y2Ba50gydF4y2Ba年代。gydF4y2Ba


致命的比率gydF4y2Ba 氯硝柳胺gydF4y2Ba Tagpo提取gydF4y2Ba
信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba 信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba

cpt / mptgydF4y2Ba1gydF4y2Ba 0.820 (0.663,0.977)gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0.991 (0.632,1.351)gydF4y2Ba 0.948 (0.848,1.048)gydF4y2Ba 0.997 (0.818,1.177)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba2gydF4y2Ba 0.939 (0.793,1.084)gydF4y2Ba 1.101 (0.787,1.416)gydF4y2Ba 0.932 (0.833,1.031)gydF4y2Ba 0.877 (0.707,1.048)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba3gydF4y2Ba 0.916 (0.774,1.057)gydF4y2Ba 1.068 (0.758,1.377)gydF4y2Ba 0.861 (0.782,0.939)gydF4y2Ba∗gydF4y2Ba 0.931 (0.787,1.074)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba1 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 0.912 (0.769,1.056)gydF4y2Ba 1.026 (0.719,1.333)gydF4y2Ba 0.932 (0.833,1.031)gydF4y2Ba 0.877 (0.707,1.048)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba2 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba3gydF4y2Ba 0.976 (0.841,1.110)gydF4y2Ba 0.969 (0.729,1.209)gydF4y2Ba 0.923 (0.837,1.010)gydF4y2Ba 1.061 (0.867,1.254)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba2 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 0.972 (0.835,1.109)gydF4y2Ba 0.931 (0.690,1.172)gydF4y2Ba 1.000 (0.892,1.108)gydF4y2Ba 1.000 (0.783,1.217)gydF4y2Ba
mptgydF4y2Ba3 /gydF4y2BamptgydF4y2Ba4gydF4y2Ba 0.996 (0.857,1.136)gydF4y2Ba 0.961 (0.708,1.213)gydF4y2Ba 1.083 (0.982,1.184)gydF4y2Ba 0.943 (0.771,1.115)gydF4y2Ba

∗gydF4y2Ba区别是解释为显著。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

本研究报告新molluscicidal分析基于的性能gydF4y2Bao . h . quadrasigydF4y2Ba蜗牛用12-well板3每口井的蜗牛,和一个24小时曝光时间。这个试验被称为小型板测试或gydF4y2BamptgydF4y2Ba这是一个修改的常规板试验(gydF4y2BacptgydF4y2Ba)。的性能gydF4y2BamptgydF4y2Ba评估使用致命的氯硝柳胺的浓度计算和tagpo提取(一种植物提取物)。该方法gydF4y2BamptgydF4y2Ba使用一个小数量的测试物质和较少的蜗牛gydF4y2BacptgydF4y2Ba(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。这意味着新方法可用于测试的molluscicidal活动物质来源,如合成产品非常有限。此外,这种新方法可以用来增加的吞吐量测试天然植物提取物。gydF4y2Ba

菲律宾是一个生物多样性热点,因此生物勘探molluscicidal特有植物和其他来源的物质是一个值得努力。小说从菲律宾螺剂发现天然产物活性gydF4y2Bao . h . quadrasigydF4y2Ba蜗牛tagpo提取等也可以测试其他医学上重要的蜗牛的物种,属于属gydF4y2Ba钉螺gydF4y2Ba,gydF4y2BaBiomphalariagydF4y2Ba,gydF4y2BaPomaceagydF4y2Ba,gydF4y2Ba椎实螺属gydF4y2Ba,gydF4y2BaBulinusgydF4y2Ba。例如,tagpo提取也积极反对臭名昭著的水稻害虫,金苹果蜗牛或gydF4y2BaPomaceagydF4y2BacanaliculatagydF4y2Ba拉马克,1819(未发表的数据)。Tagpo是通过生物勘探发现的各种菲律宾植物molluscicidal活动。gydF4y2Ba

类似于gydF4y2BacptgydF4y2Ba结果,获得的剂量反应数据使用gydF4y2BamptgydF4y2Ba是经得起严格的统计处理的生物测定的理想特征。适当的剂量反应数据的统计分析可以用来检测系统错误,这意味着怀疑坏数据由于不称职的蜗牛或可能被正式排除污染的盘子gydF4y2BamptgydF4y2Ba与氯硝柳胺生物测定。值得注意的是,计算出信用证gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba氯硝柳胺的使用gydF4y2BacptgydF4y2Ba和gydF4y2BamptgydF4y2Ba是在良好的协议与魏et al。gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。这验证这一研究获得的结果。另一个有趣的应用程序gydF4y2BamptgydF4y2Ba的探索gydF4y2Bao . h . quadrasigydF4y2Ba蜗牛耐螺剂广泛使用。例如,gydF4y2BamptgydF4y2Ba可以用来评估蜗牛耐氯硝柳胺在不同地理隔离的蜗牛,在做什么gydF4y2BamptgydF4y2Ba有价值的在血吸虫病的研究。综上所述,这些提供的更广泛应用这种新方法。gydF4y2Ba

致命率的显著差异发现信用证gydF4y2Ba50gydF4y2Ba见表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba是蜗牛逃避倾向的结果对氯硝柳胺和板面积的减少了吗gydF4y2BamptgydF4y2Ba。这种机制已经观察到gydF4y2Bao . hupensisgydF4y2Ba蜗牛和其他物种其他地方特别是在亚致死浓度的氯硝柳胺(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba钉螺gydF4y2Ba蜗牛倾向于逃避氯硝柳胺存在的地方。这种行为可能被认为蜗牛的防御机制和潜在的致命物质。添加,即使没有化学刺激,蜗牛可以逃脱的板快gydF4y2BamptgydF4y2Ba比在gydF4y2BacptgydF4y2Ba由于小板区域。然而,这并不能否定结果因为信用证中没有显著差异gydF4y2Ba90年gydF4y2Ba年代发现了这两种方法对氯硝柳胺或tagpo提取(表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

与谁是原创gydF4y2BacptgydF4y2Ba在生物测定数据得到4天后,gydF4y2BamptgydF4y2Ba24小时后生成结果只(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。一方面,为期四天的曝光时间可能会引入污染等不可控因素在测试板的分解蜗牛的尸体,另一方面,快速评估的死亡率将确保只有那些快速行动螺剂筛选和进一步发展。在一个被控制的环境中(例如,gydF4y2BamptgydF4y2Ba)优化暴露于蜗牛的活性成分和立即出现snail-killing预计的影响。土壤吸收能力等条件,微生物降解,温度波动,降雨水平可能稀释一个活跃的化合物的效果,这样快速的螺剂可能更喜欢在现场应用。molluscicidal活动的时空变化可能是最好的评价在田间试验的平均效应考虑到这些因素。gydF4y2Ba

此外,这些结果也表明了,tagpo提取潜在molluscicidal展出活动。这是第一次报告的molluscicidal活动gydF4y2Ba管理gydF4y2Ba物种。试图进一步发展这种植物提取目前正在进行中。我们未来的工作将包括综合评价不同变量的影响(例如,曝光时间和恢复步骤)的准确性和重现性gydF4y2BamptgydF4y2Ba派生的剂量反应数据。gydF4y2Ba

5。结论gydF4y2Ba

本研究显示,微型板试验,试验的基础上gydF4y2Ba钉螺hupensis quadrasigydF4y2Ba蜗牛,是另一种molluscicidal测定的常规板测试。这种新方法提供精确的和可再生的致死浓度的计算。它还使用少量的测试物质和剂量反应数据生成可以接受各种统计测试(即。拟合优度检验,Probit分析和致命率测试)。进一步优化gydF4y2BamptgydF4y2Ba是一个值得努力。其未来可能包括使用天然产品的高通量测试(例如,天然植物提取物)和测试潜在的阻力gydF4y2Bao . h . quadrasigydF4y2Ba蜗牛从不同的地理隔离到常用的螺剂。gydF4y2Ba

数据可用性gydF4y2Ba

数据请求。请联系相应的作者,达尔文戈麦斯先生。请在darwin.gomez@evsu.edu.ph电子邮件。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

我们要感谢菲教授t Piedad东维萨亚斯州立大学的塔克洛班市城市和Mac凯文先生“Pogi”大肠Braza研究所的化学,大学菲律宾Diliman奎松城深刻的讨论。这项研究的部分资金由东维萨亚斯州立大学塔克洛班市城市,菲律宾。gydF4y2Ba

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