杀灭幼虫的有效性羽叶满江红对埃及伊蚊(双翅目蚊科)以其对幼虫形态和可视化的行为反应的影响

文摘

与3.9亿年登革热病媒传播疾病感染每年扩展世界120多个国家。埃及伊蚊(l)(双翅目蚊科):是一个主向量为登革热病毒感染人类。当前关注的自然产物,防止蚊子向量的应用一直是研究由于其eco-safety主要优先事项。化学杀虫剂的大量使用导致严重的健康问题,环境污染、有毒危害人类和不属预定目标的物种,和开发杀虫剂抗性的蚊子。羽叶满江红是一种水生蕨类植物和家禽行业主要用作饲料和肥料在农业领域加强稻田土壤的肥力。本研究进行探索的杀灭幼虫的疗效答:pinnata使用新鲜的和形式对三级后期幼虫粉(6天,幼虫体长5毫米)Ae。蚊(l)(双翅目蚊科)。的杀灭幼虫的生物进行使用世界卫生组织标准幼虫粉磁化率测试方法不同浓度和新鲜答:pinnata。粉答:pinnata期间使用杀灭幼虫的生物测定浓度范围从500 ppm到2000 ppm;与此同时,新鲜答:pinnata范围从500 ppm到9000000 ppm。死亡率最高的是粉的1853 ppm答:pinnata相比之下,新鲜答:pinnata在2521535 ppm,而信用证₅₀粉和新鲜答:pinnata分别记录在1262 ppm和1853 ppm。最后,方差分析显示显著差异(方差分析)Ae。蚊幼虫死亡率(F = 30.439, df = 1, p≤0.001)和浓度(F = 20.002, df = 1, p≤0.001)相比,粉和新鲜答:pinnata在24小时的生物测定试验。总之,粉答:pinnata作为良好的杀灭幼虫剂Ae。蚊(l)(双翅目:蚊科)和本研究提供的信息可能有潜在的致死浓度更环保伊蚊蚊子控制程序。

1。介绍

强烈的增加节肢动物传播的病毒(虫媒病毒)的疾病,如登革热、Zika病毒,Chikugunya主要是由主向量Ae。蚊。最近在马来西亚,从1月到2017年7月有55744例登革热病例和131人死亡(1]。以前的话,伊萨克(2)报道,5000万年全球媒介传播疾病病例由于登革热和马来西亚在2010年已报告46171例和134人死亡。除此之外,基础设施建设的规划和管理也在节肢动物传播的病毒(虫媒病毒)造成的疾病。世界卫生组织(3和穆罕默德·阿明4,5)表示,城市化与供水和固体废物管理的缺陷的主要贡献在arboviral由蚊子传播的疾病。目前,登革热病媒控制措施的马来西亚adulticiding有氯菊酯、溴氰菊酯、马拉松和均值用双硫磷和苏云金杆菌israelensis(发言)[2]。此外,马来西亚卫生部(卫生部)运营商,私营企业和家庭社区使用杀虫剂来控制登革热向量。然而激烈的风险敞口从所有这些使用了杀虫剂耐药性在马来西亚伊蚊人群。在马来西亚,阻力对氯菊酯和双硫磷的证据已经从两个记录Ae。蚊和Ae。蚊在吉隆坡和槟城地区(6,7]。申请(2)报道,杀虫剂耐药性是由两个主要因素由于杀虫剂代谢率的增加和改变其目标网站。此外,改变目标站点是由目标基因突变引起的如击倒(kdr)抗乙酰胆碱酯酶(Ace-1)基因,GABA受体(2]。

因此由于所有这些问题在控制登革热向量,替代方法是必需的。在这样的情况下,选择使用生物控制可以提供一个更合适的和可持续的解决方案Ae。蚊。这更安全,更环保的替代概念后,羽叶满江红工厂有可能因为bioinsecticide可能解决阻力和化学污染的问题。此外,这一概念也支持Ghosh [8),他提到bioinsecticide从植物起源是简单的和可持续的方法相比传统的杀虫剂。与传统的杀虫剂,植物杀虫剂的优点是由植物化合物的混合将行动一致的生理和行为过程8]。因此,会有非常分钟向量在发展中对这种物质的可能性。

第一个字段属的研究之一红萍植物对其影响蚊子繁殖是Bao-Lin, L (9],来自湖南、中国红萍filiculoides这减少了幼虫的密度库蚊tritaeniorhynchus平均69%的3个月在75%覆盖率的水面800公顷稻田的土地。此外,减少按蚊sinensis在他的观察幼虫密度还不清楚,但这两种幼虫蛹的密度减少物种(9]。另一方面,另一个领域研究报告答:pinnata蚊子繁殖控制是Pandey [10从拉特),印度。这是提到答:pinnata有影响的产卵按蚊culicifacies和一个。subpictus蚊子在稻田10]。

同样,Pandey [10)基于实验室的研究报道答:pinnata产卵的影响这种致倦库蚊和残雪。culicifacies蚊子。实验室容器的50%覆盖着答:pinnata导致抑制产蛋性能明显的行为改变残雪。quinquefasciatus和残雪。culicifacies蚊子(10]。此外,在坦桑尼亚的稻田,非洲,Mwingira, v . S [11)发现项圈藻azollae降低了幼虫生产力和幼虫密度的一个。冈比亚按蚊的。funestus,残雪。quinquefasciatus。Mwingira, v . S [11)的研究结果表明,蚊子生产力低当水蕨覆盖率高(> 80%)的稻田。

尽管许多研究红萍植物,蚊子,没有一个人提到过植物的清新粉的使用形式和它的直接应用Ae。蚊。然而,理解这些未来的潜力,基于论文评审,似乎答:pinnatabioinsecticides势对行为改变的改变在蚊子向量。除此之外,所有的论文调查了杀灭幼虫,形态,药效和行为Ae。蚊。

因此,本研究将专注于答:pinnata新鲜和粉末的形式作为生物防治剂Ae。蚊幼虫。到目前为止,还没有进行其他研究答:pinnata植物对其杀灭幼虫的功效和形态和行为反应Ae。蚊幼虫。

2。材料和方法

2.1。研究领域和设计

本研究遵循世界卫生组织,(3)指南蚊子杀灭幼虫的生物测定。总共有50公斤新鲜答:pinnata从河口采样Krai,吉兰丹(5°31′N 102°12′E),和它的物种被发现基于叶序叶子形态模式(12]。

2.2。样品制备

2.2.1。粉末样品

共有30公斤,答:pinnata新鲜的示例是使用晒干技术2天准备的。然后干样本与磨床电粉,Faber光纤光栅- 460 k和渗细粉。接下来,答:pinnata粉被存储在拉链袋和保持在室温(图1)。

2.2.2。新的样品

新鲜的答:pinnata植物杀灭幼虫进行了测试与20公斤的新鲜植物。新鲜的样品免费然后用氯洗水之前删除任何杂质从其他来源用于杀灭幼虫的生物测定(图1)。

2.3。伊蚊幼虫饲养

敏感的实验室毒株的鸡蛋Ae。蚊从矢量控制研究中心(VCRU)马来西亚理科大学(),马来西亚槟城,。然后,鸡蛋孵化在经验丰富的水24小时。0.2 g的孵化过程触发幼虫食物(食品比例;2:1:1的猫饼干、牛肝、酵母和奶粉)。鸡蛋被维持在25°C到30°C(室温),pH值为6.95至7.03,相对湿度80±10%和溶解氧从5.5到6.1 mg / L在实验室。6天之后,变成了第三龄幼虫阶段。

2.4。杀灭幼虫的生物测定

杀灭幼虫的生物进行按照世界卫生组织的标准(1,3)幼虫磁化率测试方法(蒸馏水和工厂解决方案)。四个复制的生物测定测试完成Ae。蚊末三级幼虫(6天,幼虫体长5毫米)。塑料容器(每个包含;500毫升蒸馏水,答:Pinnata粉和20蚊子幼虫)被用于这个测试(1]。24小时后的死亡率Ae。蚊幼虫测定(1]。幼虫总缺乏运动,即使联系,被认为是死亡。

2.5。形态视图和可视化

Ae。蚊末三级幼虫在光学显微镜下观察到美国(莱卡),放大40 - 400 x。可视化是由三星ES80相机。

2.6。数据分析

死亡的百分比受到log-probit分析计算LC₅₀和信用证_90年使用SPSS 20.0与95%置信上限(社会科学统计软件包)软件。方差分析(方差分析)进行了使用浓度和死亡率之间的粉和新鲜的在24小时的生物测定试验。方差齐性测试使用前(Shapiro-Wilk)分析根据指南提供的安迪(13]。24小时的实验时间作为自变量和浓度和死亡率被视为相关的因素。

3所示。结果

生物测定测试对临界范围粉5%到95%的死亡率答:pinnata在500 ppm, 750, 1000, 1250, 1500, 1750, 2000 ppm和新鲜答:pinnata组成的500 ppm, 2500, 5000, 10000, 20000, 30000, 40000, 50000, 60000, 500000, 4000000, 9000000浓度(数字2和3)。结果显示死亡率显著增加百分比随着浓度的增加在这两种情况下。死亡率最高的是粉在1853 ppm答:pinnata相比之下,新鲜答:pinnata在2521535 ppm(表1)。与此同时,信用证₅₀粉和新鲜答:pinnata分别记录在1262 ppm和1853 ppm(表吗1)。表2显示的annova结果Ae。蚊幼虫死亡率之间的粉和新鲜答:pinnata24小时。

数据4和5节目形态畸形、melanisation和行为的影响Ae。蚊幼虫的生物测定试验;与此同时,附加补充视频(可用在这里)文件可以理解他们的行为反应。因此,可以自信,新鲜和粉答:pinnata作为生物防治Ae。蚊。

4所示。讨论

本研究表明生物防除清新粉的功效答:pinnata对Ae。蚊末三级幼虫。此外,Ae。蚊末三级幼虫表现出一些形态畸形和异常行为在这些生物的反应。有趣的是,在24小时内的物理形态观察幼虫的暴露腹部段显示褐色的颜色变成白色的颜色(图4)。如图5和可视化视频,它可以进一步讨论身体影响的有毒的积累答:pinnata应用程序。这些都是由于适应新环境,即幼虫具有被动运动和游泳在底部,显示缓慢和摆动行为反应。除此之外,幼虫弯曲清洁他们的虹吸式口器导致高毒性积累在身体的可能性。

拉克希米·纳(14)报道,工厂生产范围广泛的生物活性化合物组成二次代谢物如类黄酮、单宁、萜类、生物碱将大大产生生物活性和化学防御昆虫。因此,答:pinnata可能会造成体内幼虫的影响,由于其天然生物活性化合物和次生代谢物。从当前的研究结果表明的潜在应用答:pinnata植物为蚊虫杀灭幼虫的代理。这是,因为即使在低浓度,我们可以观察幼虫死亡率。Mogi [15和宝华9显示的效果红萍覆盖整个水面影响蚊子繁殖,障碍在产卵,和蛹的出现,进一步减少稻田的幼虫密度。

比较清新粉之间的功效答:pinnata工厂从这个研究表明,应用粉是最好的在实验室规模的实验。同样,拉奥(16)应用楝蛋糕粉导致大幅减少late-instar幼虫和蛹的库蚊的蚊子从稻田相比新鲜植物应用程序。因此,当前的研究将是一个重要的框架bioinsecticidal未来的调查答:pinnata植物用于杀灭幼虫的测试。

总之,发现环保杀虫剂来控制蚊子向量被认为是至关重要的作用,减少了化学杀虫剂造成的负面影响我们的环境。因此,当前的研究提供了证据框架答:pinnata作为潜在的杀灭幼虫的代理。此外,它的应用程序可能改变的形态和行为过程Ae。蚊幼虫。因此,可以得出结论答:pinnata在杀灭幼虫的生物分析和未来计划所需的化合物是必要的调查其生物活性化合物。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

由所有作者没有利益冲突。

确认

本研究支持高等教育、马来西亚、通过基础研究资助计划(R /德意志联邦共和国/ A08.00/00425A / 002/2017/000440)。

补充材料

可视化视频行为反应的影响Ae。蚊末三级幼虫后24小时的生物测定试验在粉和新鲜羽叶满江红。幼虫的运动是不活跃的从观察与白色色素表皮的存在。(补充材料)

引用

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