文摘

背景。血涂片染色显微分析是最合适的疟疾诊断方法。然而,差距观察临床实验室专业人员中微观诊断疟疾。方法。2015年12月进行的一项横断面研究中46个专业实验室。通过现场测试评估和面板数据收集。幻灯片面板测试是由积极的和消极的幻灯片。kappa评分被用来估计和参与者之间的协议参考读者。结果。研究参与者之间的整体协议和参考读者疟疾检测是79% (k = 0.62)。参加进修培训疟疾显微镜(调整优势比(AOR = 7, CI = 1.5 - -36.3))和疟疾疫情调查(AOR CI = 1.1 - -14.5 = 4.1)与疟原虫检出率统计显著相关性。结论。实验室专业人员显示,疟疾显微镜低性能。大多数的研究参与者被评分“训练”的实验室诊断疟疾。

1。介绍

疟疾发病率和死亡率的主要原因是在发展中国家,80%的病例和90%的死亡驻留在非洲大陆1]。在埃塞俄比亚,大约68%的人口住在地区疟疾的风险。是列为主要的传染性疾病,约占总体的30%残疾调整生命年损失。在过去的几年中,它一直报道的三大原因之一,发病率和死亡率(2,3]。在其他领域的埃塞俄比亚,疟疾是不稳定的统治,使该地区容易流行高发病率和死亡率在所有年龄组。此外,随着疟疾传播罢工在种植和收割季节,它不利影响粮食安全并使和隔离受感染社区贫穷4]。

疟疾控制继电器的主要方法之一,早期诊断及时治疗。由于缺乏特异性症状和体征的疟疾、临床诊断的应用仅局限于地区疟疾诊断缺乏实验室设施(4,5]。染色染血涂片镜检是疟疾的主要诊断(6]。定量评估结果寄生虫血症间隙的程度可以达到这种诊断方法。这是一个简单、快速、低成本技术,使正确的诊断疟疾寄生虫和寄生虫密度的测定。然而,缺乏合格的专业人员正确诊断疟疾和缺乏质量控制实验室诊断过程中挑战目前的策略来控制疟疾在世界其他地方(4]。质量控制程序是主管显微镜的先决条件。世界卫生组织(WHO)推荐的反复观察血液幻灯片:在这样的程序,一个血液样本幻灯片是参考实验室检查的准确性,然后反馈发送到外围实验室(2]。

然而,小的努力到目前为止,精确确定和识别微小的寄生虫血症的诊断和量化误差的来源,为疟疾显微镜(安全质量控制计划7]。因此实验室物流现状的数据,程序,熟练实验室专业人员缺乏对微观调查疟疾寄生虫在埃塞俄比亚。

因此,本研究旨在评估的一般实验室物流和性能实验室专业人员在提格雷疟疾镜检,北埃塞俄比亚。

2。方法

2.1。研究设计

机构基于横断面研究中选择实验室服务提供者的提格雷从2015年12月到2016年8月。研究区位于586公里远从首都亚的斯亚贝巴。年平均温度范围从16°C到22°C和范围从1200到2400米的海拔高度。年雨量668毫米。在数据收集的时间,总共有61例实验室专业人员在32政府健康中心和三家医院工作。大部分的实验室提供尿液沉积物的显微镜检查,血涂片,凳子,抗酸杆菌染色法和革兰氏染色法经常。疟疾诊断主要是基于血涂片检查和快速诊断测试(RDTs)卫生所。疟疾实验室专业人员在选定的医疗机构微观诊断是研究人口。

2.2。样本容量和抽样

样本大小是决定使用单人口比例估计(2( )考虑95%置信水平0.5比例,假设疟疾医疗实验室的显微镜在50%以下标准和边际误差(5%)。因此,计算样本大小为384。然而,预期的总样本量选定目标区域小于计算样本大小( );我们调整我们的样本量的基础上修正公式; 。因此,总样本量22日计算,所有永久/稳定实验室专业人员从事疟疾显微镜在选定的医疗机构。

2.3。变量

熟练实验室专家对疟疾镜检是因变量,而年龄、性别、服务一年,资格,小吃培训,和可用性指导方针是独立的变量。

2.4。数据收集

2.4.1。现场评估

参与者的人口学特征和通用数据设置所选实验室收集通过自行使用结构化访谈和现场观察清单。

2.5。疟疾幻灯片面板测试

为目的的幻灯片面板准备,大约5毫升静脉血收集确诊疟疾Maytsebri健康中心的门诊病人。-幻灯片另一方面从看似健康的人也准备-疟疾。幻灯片的面板被疟疾显微镜化验员提格雷地区准备和验证实验室。厚和薄血膜准备。厚膜制备、三滴血是1厘米的分布在一个区域²。薄诽谤另一方面是由均匀分布的一滴血在油脂免费微观滑动。幻灯片标签,干、固定与甲醇酒精(仅薄涂片),和染色(使用3%吉姆沙染色剂解决方案30分钟)。血涂片染色用蒸馏水洗净,风干。探测和物种识别的疟原虫是通过厚和薄血电影,分别。

面板测试由六个样品。滑动板A, B, C和D恶性疟原虫+ + + +,间日疟原虫+,恶性疟原虫+,间日疟原虫+ + +薄血厚电影,分别。幻灯片面板E拥有两种恶性疟原虫和间日疟原虫。幻灯片面板G拥有疟疾-血液的电影。总共有276血的电影为每个参与者(6)分布。研究参与者被要求报告疟疾的检测(消极,积极),疟原虫物种识别(恶性疟原虫,间日疟原虫,或混合),年级寄生虫血症(半定量的)。

2.6。统计分析

数据输入和分析使用社会科学统计软件包(SPSS)版本20。描述性统计是用来得到总结措施。性能实验室专业人员疟疾显微镜测试通过计算特异性,敏感性,正面和负面的预测值的报告。协议确定的百分比卡巴得分。卡方和逻辑回归测试了比较专业的性能与人口统计变量和其他因素。价值< 0.05被认为是统计显著。

2.7。操作型定义

2.7.1。专家

它包括参与者得分≥90%的协议参考读者检测、物种形成、量化的疟疾寄生虫。

2.7.2。参考

它icludes参与者得分≥80%,但< 90%的协议参考读者检测、物种形成,和量化的疟疾寄生虫。

2.7.3。主管

它包括参与者得分≥70%,但< 80%的协议参考读者检测、物种形成,和量化的疟疾寄生虫。

第2.7.4。在训练中

它包括参与者得分< 70%的协议参考读者检测、物种形成,和量化的疟疾寄生虫根据世界卫生组织的建议(8]。

2.7.5。主要的错误

疟疾的主要错误包括(我)不正确的诊断,也就是说,报告假阳性或假阴性结果,(2)不提及的存在恶性疟原虫(报告非恶性疟原虫物种的情况恶性疟原虫或任何物种鉴定)。

2.7.6。轻微的错误

小错误包括(i)识别误差间日疟原虫感染和混合感染(报告单一混合寄生虫)和(2)报告寄生虫密度不同的参考结果的一个“+”(9]。

3所示。道德的间隙

伦理是伦理审查委员会的寻求Mekelle大学健康科学学院的参考号码(ERC055/2015)。通知书面同意从参与者和安全小组准备幻灯片的献血者。保密编码提供了参与者的疟疾报告幻灯片。

4所示。结果

4.1。研究参与者的人口特征

共有46名临床实验室专业人士参加了这项研究。参与者的平均年龄是28.9岁。男性占32(69.6%)的参与者。大多数参与者服役不到五年在诊断中心(50%)。大约39%的参与者带点心培训疟疾显微镜而超过半数(58.7%)的参与者参与疟疾疫情调查(表1)。

4.2。现场评估

总22的实验室检查,7例(30.4%),10例(43.5%),5例(22.7%)有一个,两个,分别和三个功能的显微镜。多数(52.2%)的实验室使用双目与外部光线类型的显微镜。

大多数(87%)的实验室指导了试剂的准备工作。吉姆沙染色剂是唯一的污点被用于疟疾镜检。同样,所有的临床实验室利用新的病人个体(即微观幻灯片。,没有重用幻灯片)。大部分的实验室检查(91.3%)使用半定量的(+系统)的量化计算寄生虫(表2)。干燥架陪同所有疟疾实验室。

4.3。板测试

总体敏感性,特异性,PPV和NPV实验室专业人员检测,和物种的识别疟疾寄生虫分别为63%和95.7%,93.6%,72.1%,78.3%,95.7%,94.4%,和81.5%,分别为(表3)。的总46实验室人员参与这项研究,仅1例(2.2%),2例(4.3%),和7(15.2%)的参与者正确报道所有的六个,五个,分别和四个幻灯片(表3)。

百分之六十三的参与者正确报告幻灯片的物种,但只有10.9%的人正确地报道了寄生虫密度(+ + + +)。同样有30.4%的参与者正确报告幻灯片B的物种;然而,只有15.2%的人能够报告寄生虫密度。幻灯片C包含恶性疟原虫(+),只有6.5%和2.2%的参与者正确报道物种和寄生虫密度,分别。混合感染Pf和光伏(幻灯片E)是正确的报道只有15.2%的参与者。大约10%的实验室专家报告-幻灯片(幻灯片G)为假阳性恶性疟原虫。近35%的参与者犯了重大错误的错误报告间日疟原虫物种的情况恶性疟原虫感染。同样,大约一半的参与者在我们的研究中犯了小错误在报道混合感染(表3)。

如表中所描绘的一样3,研究参与者之间的整个协议的参考读者检测、物种形成、量化的疟疾寄生虫为79% ( ),87% ( )和65% ( ),分别。最低的敏感性(59%)(21.7%)和协议在混合感染。实验室专业人员更好的检出率间日疟原虫(63%)比恶性疟原虫(56.5%)。

4.4。多变量分析疟疾镜检的熟练程度

回归分析,在疟疾显微镜和复习训练参与疟疾疫情调查重大协会与熟练的实验室人员疟疾镜检。实验室人员进修培训了7倍的探测和识别疟疾寄生虫相比那些不需要复习训练(AOR = 7, CI = 1.5 - -36.3)。同样那些参与的实验室人员疟疾疫情调查是4.1倍比那些没有参与流行病调查的探测和识别疟疾寄生虫(优势比= 4.1,CI = 1.1 - -14.5)(表4)。

5。讨论

在埃塞俄比亚的诊断和治疗卫生设施使用使用吉姆沙染色剂微观诊断疟疾。然而,检出率有差距和物种形成的疟疾寄生虫在不同医疗机构与医疗实验室的资质和经验的专业人员。因此,该研究显示第一个实验室专业人员绩效评估在疟疾镜检诊断中心的提格雷和需要考虑联邦卫生部未来的国家学习和行动。

本研究显示适当的染色试剂的存在,显微镜幻灯片,干燥架、试剂的准备和指导方针的。然而,只有58%和39.1%的参与者参与流行调查及进修培训。这一发现与先前的研究是鲜明的对比在埃塞俄比亚西北部[10]。

实验室专业报告的总体敏感性和特异性检测疟原虫分别为63%和95.7%,分别。的敏感性低于发现Hawassa (82%) (11],亚的斯亚贝巴(65.7%)[12),和赞比亚(88%)(13]。低灵敏度的寄生虫检测在这项研究意味着高比例的假阴性结果,因此低估真正的感染。特异性(95.7%)在同意本研究报告Hawassa(96.5%)、埃塞俄比亚(11]。然而,这是高于其它报道(12,13]。

在这项研究中,错误消极的比例更高恶性疟原虫积极的幻灯片(43.5%)比间日疟原虫积极的幻灯片(37%)。这与研究Hawassa、埃塞俄比亚、假消极更高的地方间日疟原虫(12]。在识别错误率恶性疟原虫在这项研究中(43.5%)高于来自埃塞俄比亚的一份报告(40.4%)11)、加拿大(27%)(14)和美国(39%)(15]。这个更高的失败率恶性疟原虫识别可能的优势间日疟原虫在该地区。整个协议参与者和参考读者检测( ),物种识别( )和量化的疟原虫( ),本研究从埃塞俄比亚南部与先前的报道不一致11],亚的斯亚贝巴[12)和香港(16]。

将近一半的参与者在当下研究报告错误为混合感染间日疟原虫monoinfection。与先前的研究(这是鲜明的对比11,12),参与者报告混合感染恶性疟原虫monoinfection。失败在报道率较高的混合感染可能是由于大多数研究参与者没有采取足够的点心培训疟疾镜检,类似报道其他地方在埃塞俄比亚(11,12]。hypoendemic传播疟疾的地区也可能导致的低性能实验室专业人员疟疾诊断(4]。

在这项研究中较低的协议寄生虫寄生密度和较低的探测和识别的幻灯片混合感染被观察到。此外,实验室人员的性能恶性疟原虫识别更擅长高密度寄生虫血症(66.7%)幻灯片比低密度(50%)。这是一致的与先前的研究在埃塞俄比亚的其他部分(11,12]。然而,整个协议的检测恶性疟原虫高密度的寄生虫寄生虫血症低于先前的报道(其他地方11,12,14,16]。

参与疟疾疫情调查和复习训练对疟疾显微镜分别与更好的性能有关疟疾的微观诊断在我们的研究中。它符合研究从刚果(9]。

当前的研究解决疟疾临床实验室专业显微镜的性能使用彩色疟疾幻灯片。因此专业染色的程度疟疾血液电影没有评估,作为本研究的主要限制。

6。结论

尽管可用性疟疾镜检的耗材,专业人士在疟疾镜检显示低性能。根据世卫组织建议大部分都在本研究分级“训练”在检测和物种识别疟疾寄生虫。参与者更好的在物种鉴定寄生虫检测。他们最贫穷的协议显示混合感染和低密度的检测恶性疟原虫寄生虫血症。因此刷新培训应该定期交付的专业人士在疟疾镜检。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢研究参与者和病人捐献的血液。他们的感激之情也趋于数据收集器。