t细胞和单核细胞表型的变化在体外通过曼氏裂体吸虫抗原在皮肤利什曼病的病人

文摘

高水平的促炎细胞因子,如干扰素-γ和肿瘤坏死因子与组织病变皮肤利什曼病(CL)。我们之前证明曼氏裂体吸虫抗原downmodulate在体外细胞因子反应CL。在当前的研究中,我们评估是否美国曼在利什曼病抗原改变单核细胞和早期表型。CL患者的外周血单核细胞培养原虫抗原的存在与否美国曼抗原rSm29 rSmTSP-2,旧机器。细胞被染色和荧光染料结合抗体和流式细胞术分析。增加rSm29文化HLA-DR模(CD14的表达下降⁺CD16^{+ +})单核细胞,而新增的PIII减弱这种分子在古典(CD14的表达^{+ +}CD16^{- - - - - -})和中间(CD14^{+ +}CD16⁺单核细胞。旧机器和rSmTSP-2导致downmodulation中间模言论CD80和CD86表达的单核细胞,分别。这两个抗原CTLA-4在CD4的表达增加⁺T细胞,他们还扩大CD4的频率⁺CD25^高Foxp3⁺T细胞。综上所述,我们证明美国曼抗原,主要rSmTSP-2和旧机器,能够减少单核细胞的激活状态以及移植在T淋巴细胞调节分子的表达。

1。介绍

美国外皮的利什曼病是一种由寄生虫引起的疾病的属利什曼虫。这种疾病代表一个有意义的全球公共卫生问题的发病率近年来150万例新病例(1]。外皮的利什曼病提供了广泛的临床表现,从局部皮肤黏膜与皮肤的病变广泛取决于物种的寄生虫(2)和宿主免疫反应(3,4]。T细胞介导免疫对主机保护至关重要利什曼虫sp.感染;然而皮肤和粘膜病变发生由于管制辅助1 (Th1) T细胞反应生产高促炎细胞因子如干扰素-γ和肿瘤坏死因子(3,4]。

实验研究表明,曼氏裂体吸虫寄生虫感染或产品,通过诱导监管细胞和细胞因子,能够防止一些Th1-mediated小鼠自身免疫性疾病,如1型糖尿病实验性自身免疫性脑脊髓炎,牛皮癣(5- - - - - -7]。最近,我们证明了重组美国曼抗原Sm29 SmTSP-2, PIII down-modulated干扰素的生产γ和TNF一群皮肤利什曼病(CL)患者(8]。在目前的研究中,这些抗原检测对他们改变单核细胞和淋巴细胞的能力。研究表明,Sm29和SmTSP-2抗原分泌的膜和/或外皮美国曼成人的蠕虫。表面的蛋白质分泌或本地化裂体吸虫属spp。,与宿主组织亲密接触,可能会更有效地触发免疫调节过程(9]。Sm29是膜结合糖蛋白位于外皮的成年蠕虫和肺阶段schistosomula [10]。SmTSP-2重组蛋白(tetraspanin)美国曼外皮。在小鼠模型中,接种SmTSP-2导致成人蠕虫的负担减少了57%,减少了64%在肝脏蛋负担与对照组相比11]。机器是一种多价抗原获得美国曼成虫,调节小鼠肉芽肿大小感染了寄生虫(12,13]。这些抗原已经被我们组关于评估其潜在诱导il - 10生产和抑制Th2反应在体外在哮喘的个体细胞(14]。

一起Th1免疫反应,单核细胞和巨噬细胞是关键在控制细胞利什曼虫sp.感染。单核细胞被分类成不同的亚种在小鼠模型中,也在人类身上。一个新的命名法是最近出版的定义人类单核细胞分为三个亚型。人类单核细胞的主要人口(90%)呈现高表达的CD14和缺乏CD16 (CD14的表情^{+ +}CD16⁻)。他们被称为古典单核细胞。中间单核细胞是那些CD16表达式(CD14表达CD14和低^{+ +}CD16⁺),而模单核细胞表达CD16和CD14 (CD14相对较低⁺CD16^{+ +})[15]。在一项由黄等。16古典的特点,中间值和模单核细胞通过基因表达分析进行评估。他们观察到古典单核细胞表达基因参与血管生成,伤口愈合,和凝固,参与组织修复功能除了高促炎基因的表达(16];中间单核细胞高表达MHC II级表明抗原呈递细胞功能和T细胞刺激属性。模单核细胞表达基因参与细胞骨架重排,这可能是负责其高运动性在活的有机体内(17]。

CD16的高频⁺单核细胞已经证明在子集结核分枝杆菌等病毒感染的感染和乙型肝炎病毒(HBV) (18],丙型肝炎(丙肝)[19],艾滋病毒[20.),登革热(21]。在CL患者中,CD14的频率⁺CD16⁺单核细胞明显高于健康对照组相比,他们与病灶大小呈正相关,22]。这种亚型的单核细胞作为抗原呈递细胞(16),产生细胞因子和可能是最重要的亚型激活T细胞反应。

T细胞的活化需要MHC抗原识别的背景和信号由co-stimulatory分子与相应配体抗原呈递细胞(APC)。最重要的一个co-stimulatory在T细胞CD28分子,这是既定的表达并结合CD80和CD86 APC。CD86是在低水平表达起来从而迅速调节后主要抗原识别,而CD80展览推迟表达式动力学[23]。其他配体CD80和CD86 CTLA-4。这个分子的表达后迅速调节T细胞激活和提供了一个消极信号限制免疫反应(24- - - - - -26]。在体外研究表明,添加CTLA-4-Ig阻止CD28-B7交互在CL患者PBMC文化刺激利什曼虫抗原导致downmodulation干扰素-γ和TNF分泌27]。其他类似的研究表明,阻止co-stimulatory分子CD80和CD86在人类巨噬细胞利什曼虫天真的捐助者感染l .主要导致显著减少干扰素-γ、IL-5和白介素生产(28]。

在这项研究中,我们评估是否美国曼抗原改变CD80和CD86的表达单核细胞CL的病人也CTLA-4在T淋巴细胞的表达。此外,我们访问引起的调节性T细胞的频率美国曼抗原当他们添加到细胞培养刺激利什曼虫抗原。

CD4⁺CD25⁺调节性T细胞都进行了广泛的研究由于其维持自我耐受性的重要功能。这些细胞可以表达高低CD25水平在小鼠模型;然而,只有CD4细胞⁺CD25^高在人类人口展览一个强有力的监管功能。这些CD4⁺CD25^高T细胞也表达FOXP3,分子与监管职能(29日]。这个人类T细胞子集包含~ 1.5循环CD4的-3%⁺T细胞。他们引起的抑制增殖和细胞因子分泌细胞CD4的交联⁺CD25⁻T细胞应答contact-dependent的方式(30.)和完全废除IL-2-dependent NK细胞的增殖31日]。此外,调节性T细胞能够表达下调Th1、Th2免疫反应的强度和持续时间的传染病限制损害组织(32,33]。

本研究我们的假设是,皮肤利什曼病的病理结果从单核细胞和T细胞过敏由于受损的监管机制。在这种情况下,使用美国曼抗原诱导调控细胞和分子会防止炎症过程。为了测试这个假说我们评估是否增加美国曼抗原细胞培养的利什曼病病人会修改单核细胞和淋巴细胞的表型和激活状态。具体来说,我们评估HLA-DR的表达,CD80、CD86古典,中间,和模单核细胞和CD28、CTLA-4 CD25和Foxp3在CL患者T淋巴细胞的可溶性利什曼虫braziliensis抗原(SLA)的存在与否美国曼抗原rSm29 rSmTSP-2,旧机器。

2。材料和方法

2.1。病人和流行区

研究包括第一个30皮肤利什曼病病人生活在外皮的利什曼病的流行区,科尔特大学岩石,巴伊亚,巴西、参加当地的健康从2010年3月至2012年3月,同意参加。科尔特大学德岩石坐落在东南地区的巴伊亚,巴西是众所周知的高速率原虫传播。

皮肤利什曼病的诊断是考虑临床征象特点CL,寄生虫隔离或积极的DTH反应(DTH)利什曼虫抗原和CL的组织学特征。

本研究入选标准为5至60岁的患者诊断的CL活跃皮肤损伤的存在。排除标准是怀孕,慢性疾病如糖尿病和哮喘,也感染艾滋病毒和htlv 1。

免疫分析在所有病人的具体治疗利什曼病。没有足够的细胞来执行整个实验每次,因为他们需要更多的细胞多获得一些病人。

寄生虫感染利什曼病流行地区的频率的科尔特大学德岩石和88.3%美国曼感染了16.7%的皮肤利什曼病的病人。

伦理委员会Maternidade Climerio de Oliveira巴伊亚联邦大学的批准了本研究,从所有参与者获得一个知情同意或其法定监护人。

2.2。抗原制备

可溶的利什曼虫抗原用于本研究获得的利什曼虫溶菌产物(粗抗原)。这是准备从一个原虫应变(MHOM / BR / 2001)如前所述[34]。

的美国曼抗原用于这个研究包括Sm29,曼氏裂体吸虫重组蛋白(10];SmTSP-2,重组蛋白(tetraspanin)美国曼皮(11];的一小部分美国曼可溶性成人虫抗原(交换)通过阴离子色谱法(FPLC),称为旧机器。Sm29被克隆大肠杆菌测试和脂多糖(LPS)污染使用商用LAL生色工具包(CAMBREX)。有限合伙人的水平Sm29低于0.25 ng / mL。然而为了中和有限合伙人在低水平的潜在影响美国曼重组抗原,多粘菌素B加入细胞培养根据建立协议(每12个小时35]。本研究中使用的SmTSP-2生产毕赤酵母属pastoris发酵文化和它真诚地提供了亚历克斯博士卢卡(11,36]。提供的蛋白质rSm29和PIII生物科学研究所生物化学和免疫学、UFMG,巴西。

2.3。细胞培养和细胞内表面染色

通过流式细胞术细胞内和表面分子进行评估(FACSort BD生物科学,圣何塞,CA)。为了执行细胞内染色,外周血单核细胞(PBMC, 3×10⁵)通过Ficoll-Hypaque梯度是有文化的在体外与SLA (5μg / mL)重组的存在与否美国曼抗原Sm29 SmTSP-2,旧机器(5μ20 h g / mL), 37°C,和5%的股份₂。在过去4 h(文化、Brefeldin (10μg / mL;σ,圣路易斯,密苏里州)损害蛋白质分泌高尔基氏复合体,添加到文化。之后,这些细胞被洗在PBS和固定在4%甲醛在室温下为20分钟。执行特定的染色与cychrome (CY)标记抗体结合anti-CTLA-4马伯的皂素缓冲区(PBS,补充0.5% BSA和0.5%的皂苷)和藻红蛋白(PE)标记抗体与anti-Foxp3共轭Foxp3染色缓冲区设置(eBioscience)。两倍或三倍染色,mab人类CD4, CD8和/或CD25共轭FITC和CY。

评估co-stimulatory分子表达了PBMCs刺激60 h抗原提到的相同的。细胞培养与异硫氰酸荧光素(FITC), PE或20分钟CY-labeled抗体解决方案在4°C的20倍μL在PBS。染色后,准备洗了叠氮化钠PBS的0.1%,与200年固定μL 4%的甲醛在PBS和保持在4°C。使用的抗体染色是免疫球蛋白同形像controls-FITC, PE和CY anti-CD4-FITC, anti-CD8-FITC, anti-CD25-FITC, anti-CD14-FITC, CD16-CY, anti-CD4-CY anti-CD8-CY, anti-CD80-PE, anti-CD86-PE, anti-HLA-DR-PE, anti-CD28-PE从BD生物科学Pharmingen(所有)。总共获得了50000年和100000年的事件表面和胞内实验,分别。

2.4。流式细胞仪数据的分析

阳性细胞的频率进行了分析通过流式细胞术使用程序flowjo在两个地区。淋巴细胞区域确定使用粒度(SSC)×大小(FSC)的阴谋。单核细胞选择根据他们的粒度和CD14和CD16的表情。限制的象限标记总是基于负数量和同形像控制设置。密度图代表一个实验显示淋巴细胞和单核细胞区域数据所示1(一)和1 (b),分别。

2.5。统计分析

统计分析使用软件GraphPad棱镜(GraphPad软件,圣地亚哥,CA)。阳性细胞百分比来表示时的频率和强度表达式的意思是荧光强度(MFI)。之间的差异意味着评估使用Wilcoxon配对测试。建立了统计显著性在95%置信区间。

3所示。结果

共有30名患者皮肤利什曼病是登记在这项研究中,17岁男性和13是女性,平均年龄(范围6-48年)。大部分患者提供一个病灶(80%)和中位数病变大小是130毫米²(差,66.5 -342;表1)。

3.1。增加的影响美国曼单核细胞表型和表达的抗原Co-Stimulatory分子

我们评估的频率不同的单核细胞子集(古典、中间、和模)和co-stimulatory分子在这些单核细胞的表达在体外刺激与SLA的存在与否美国曼抗原。附加的抗原rSm29和PIII文化扩张模(CD14的频率⁺CD16^{+ +})(均值±SEM = 7.4±1.2%和8.1±1.9%,resp)相比,文化与SLA单独刺激(%;。图2(A))。我们也观察到的频率古典单核细胞在文化不高美国曼抗原(图2(A))。此外,在机器的存在有一个减少在古典HLA-DR (CD14的表达^{+ +}CD16⁻)和中间(CD14^{+ +}CD16⁺)单核细胞(小额信贷机构和小额信贷机构、职责)相比,文化与SLA单独刺激(小额信贷机构和小额信贷机构,分别;。图2(B))。也有减少HLA-DR CD14表达⁺CD16^{+ +}单核细胞在rSm29 (相比单独SLA (MFI)小额信贷机构;。图2(B))。此外,HLA-DR较高的表达在经典和中间存在SLA或SLA +单核细胞美国曼抗原相比nonstimulated文化。

CD80的表达也减少模单核细胞相比,文化与SLA刺激。的PIII文化也导致减少的表达co-stimulatory CD80分子模单核细胞(小额信贷机构)相比,文化美国曼抗原(小额信贷机构;。图2(C))。还在中间CD86的表达减少单核细胞小额信贷机构,观察MFI rSmTSP-2时添加到文化(;图2(D))。没有显著差异的水平CD86表达在文化刺激单核细胞后与SLA添加rSm29和旧机器(图2(D))。

3.2。增加的影响美国曼抗原的T细胞表型和表达Co-Stimulatory分子

的CL患者PBMC孵化与SLA的存在与否美国曼抗原T细胞的表型进行了评估。增加rSm29抗原文化增加CD4的频率⁺T细胞(平均±SEM =相比单独文化与SLA (%)%,;图3(A))。CD4的频率没有显著差异⁺添加后的T细胞rSmTSP-2文化或PIII抗原(%,%,resp)相比单独SLA (%;图3(A))。同样,CD8的频率没有显著差异⁺T细胞的存在rSm29, rSmTSP-2和PIII抗原(%,%,%,resp)。文化与文化与SLA没有刺激美国曼抗原(%;图3(A))。CD4的频率⁺T细胞是减少的SLA和SLA + rSmTSP-2或旧机器,而CD8的频率⁺T细胞是更高的SLA和SLA +美国曼抗原相比nonstimulated文化(图3(A))。

我们也评估CD28的表达⁺在文化刺激淋巴细胞与SLA或没有添加美国曼抗原。CD28的表达⁺在CD8⁺在文化刺激T细胞是高rSm29 (小额信贷机构、职责)仅与SLA (小额信贷机构;。图3(B))。rSmTSP-2和PIII抗原的文化没有显著改变对CD4 CD28的表达⁺和CD8⁺T细胞(图3(B))。

关于CTLA-4的表达,rSmTSP-2 PIII抗原能够增加这个分子在CD4的表达⁺T细胞(小额信贷机构和小额信贷机构、职责)仅在与SLA (小额信贷机构,分别;。图3(C))。CTLA-4也高于CD4的表达⁺T细胞、CD8⁺T细胞在文化刺激SLA + rSmTSP-2或者机器相比nonstimulated文化(图3(C))。此外,添加rSmTSP-2和PIII文化扩张的频率CD4抗原⁺CD25^高Foxp3⁺T细胞(%,%,resp)相比与SLA没有文化美国曼抗原(%;。图3(D))。CD4的频率⁺CD25^高Foxp3⁺T细胞也更高的文化刺激与SLA + PIII相比nonstimulated文化(图3(D))。

4所示。讨论

Th1免疫反应与巨噬细胞激活和杀害利什曼虫sp.矛盾相关皮肤和粘膜利什曼病的发展。为了控制寄生虫生长,激活巨噬细胞释放高水平的促炎细胞因子和氮气和氧气反应中间体,导致组织损伤。

促炎反应之间的平衡特点是干扰素的生产γTNF、il - 10的监管回应与生产已观察到的个人接触利什曼虫braziliensis在巴西的利什曼病流行地区。这些人不开发疾病和指定为“隐性”科目(37]。平衡的免疫反应中所描述的这些人可能实现一种无害的开始关系的关键。

还有其他证据,il - 10的downmodulating与人类相关的炎症反应外皮的利什曼病(4,38- - - - - -40]。然而,单核细胞粘膜利什曼病(ML)患者产生这种细胞因子的能力下降,对il - 10在体外引发刺激,原虫抗原(3]。

最近,它已被证明在慢性曼氏裂体吸虫感染细胞的先天免疫反应,如单核细胞和调节性T细胞产生高水平的il - 10 (24,41- - - - - -43]。我们小组进行了研究,试图识别美国曼抗原与监管属性,使他们能够表达下调与某些免疫介导的疾病相关的炎症过程。例如,我们已经表明美国曼抗原rSm29、rSmTSP-2 PIII诱导PBMC il - 10和IL-5生产的皮肤利什曼病的病人,他们能够控制在体外炎症反应在一组患者中,独立的临床特性,比如病变的大小和数量8]。在当前的研究中我们扩展的评估潜在的抗原rSm29 rSmTSP-2,旧机器修改在皮肤利什曼病的免疫反应。具体来说,我们评估的影响除了这些抗原的细胞培养和刺激利什曼虫在单核细胞和淋巴细胞抗原和激活状态。

CD4⁺T淋巴细胞和单核细胞保护利什曼病的关键细胞;然而他们相关的炎症过程和组织病变皮肤疾病的形式(20.,44- - - - - -46]。在利什曼病和其他疾病的作用不同子集的单核细胞在病理被描述47]。二十多年来,单核细胞分为古典(CD14⁺CD16⁻)和炎症,那些表达分子CD16并产生高水平的肿瘤坏死因子-α(48]。CD14的频率⁺CD16⁺CL患者被发现明显高于健康对照组相比,他们与病灶大小呈正相关,22]。

最近,一个新的术语已经被用于人体血液单核细胞进行分类分为三个子集:古典(CD14^{+ +}CD16⁻)、中级(CD14^{+ +}CD16⁺非经典数理(CD14),⁺CD16^{+ +})[15]。经典的单核细胞约占单核细胞总数的85%,具有IL-13R的表达α1、il - 10和咆哮,与抗凋亡相关基因的表达和伤口愈合属性。中间单核细胞代表5%的单核细胞,表达高水平的HLA-DR和相关抗原处理和表示T细胞和T细胞活化。模子集的特点是低表达CD16 (CD14的CD14和高表达⁺CD16^{+ +})。他们代表人类单核细胞的10%,研究表明,基因表达与细胞骨架重排占的高度流动性和巡逻的行为在活的有机体内(16,47]。

自的角色不同的单核细胞在皮肤利什曼病尚不清楚子集,我们不仅决定评估他们的频率在利什曼病病人,而且是否添加美国曼抗原会改变这些细胞的形象在体外研究。

附加的抗原rSm29和PIII PBMC文化刺激与SLA模单核细胞的频率增加。这是出乎意料的高迁移率和迁移能力的细胞(16,47),他们可能导致利什曼虫转移和顺向发展更严重形式的疾病,如粘膜和传播形式。

然而,我们发现,美国曼抗原用于这项研究,尤其是旧机器,减少HLA-DR的表达以及co-stimulatory B7.1、B7.2分子的表达在不同的单核细胞的子集。downmodulation的单核细胞活化在利什曼病是可取的,可能会导致降低炎症过程。

在这项研究中,我们也评估co-stimulatory分子T细胞的表达。我们观察到显著增加CD4的频率⁺T细胞通过rSm29抗原的存在的文化。rSmTSP-2和PIII抗原与SLA的文化刺激CTLA-4在CD4的表达增加⁺T细胞和CD4的频率扩展⁺CD25^高Foxp3⁺T细胞。我们之前显示,美国曼感染CD4扩大⁺T细胞数量的监管概要文件美国曼来华的哮喘个体(24]。在这种过敏性疾病,美国曼抗原downmodulate Th2加剧炎症反应在体外通过诱导il - 10的生产和监管的表达分子,CTLA-4 T淋巴细胞(9,24,43]。ovalbumin-induced哮喘小鼠模型,抑制肺部炎症过程,美国曼鸡蛋或美国曼抗原、Sm22.6 PIII, rSm29与CD4的数量的增加⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞和高水平的il - 10生产(49,50]。

T细胞介导免疫是主机防护的基础利什曼虫sp.和T细胞的激活依赖于信号从co-stimulatory CD28分子之间的相互作用的配体B7.1、B7.2抗原呈递细胞(apc) [23]。我们评估在淋巴细胞CD28的表达文化与SLA有或没有的刺激美国曼抗原,发现CD8这个分子的表达⁺在文化刺激T细胞是高rSm29与SLA。这些结果表明,CD8⁺T细胞变得更加激活rSm29的存在。然而,增加CTLA-4在CD4的表达⁺T细胞,分子表示rSmTSP-2时抑制T细胞的活化和机器被添加到文化。在体外研究表明,添加CTLA-4-Ig阻止CD28-B7交互CL病人,PBMC文化刺激利什曼虫抗原导致downmodulation干扰素-γ、il - 10和TNF分泌(27]。我们的研究表明,CD4细胞⁺T细胞是downmodulated rSmTSP-2的存在和旧机器。这些抗原也能够增加CD4的频率⁺CD25^高Foxp3⁺调节性T细胞。

在一项调查由奥尼尔et al。51),的患病率美国曼感染皮肤利什曼病流行地区的病人科尔特大学岩石,巴伊亚,巴西是16.7%51]。作者还显示,个人倾向于合并小病灶大小,然而在单变量模型中,蠕虫的存在合并感染与延迟病变愈合。当他们评估感染美国曼和类圆线虫属stercoralis相比没有差别在损伤愈合患者感染geohelminths等蛔虫,钩虫属duodenale,和鞭虫trichiura。

研究由同一组巴西的利什曼病流行地区证明免疫调节药物的使用如粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(gm - csf)和pentoxifylline TNF抑制剂生产,可能会导致更快的恢复时间和更高的治愈率皮肤利什曼病(52- - - - - -55]。它也被报道,intralesional注射gm - csf CL溃疡的愈合时间减少50%。此外,桑托斯et al。53)表明,gm - csf应用在低剂量作为五价锑的辅助治疗,显著减少CL溃疡的愈合时间,减少剂量的锑管理和/或锑的治疗的持续时间。这些研究表明,down-modulation CL患者的炎症反应与损伤治疗和支持的想法抑制强后早期炎症反应利什曼虫感染可以避免组织损伤。

在这种背景下,本文提供的数据表明美国曼抗原能够表达下调单核细胞和T淋巴细胞反应利什曼虫抗原在体外,可能通过CTLA-4机制涉及负面信号和调节性T细胞的作用。这些知识可能有助于未来的发展策略来预防和治疗皮肤和粘膜利什曼病。

利益冲突

作者没有利益冲突有关的工作报告。

确认

作者要感谢科尔特大学德Pedra-Bahia leishmaniasis-endemic地区的人民为他们参与我们的研究;博士路易斯恩里克吉马良斯,保罗博士马查多,Ednaldo Lago协助数据收集和韩亚Khidir和惠特尼奥丽埃纳的审查。这项工作得到了巴西国家研究委员会(CNPq)和由美国国立卫生研究院资助。088650年NIH AI。Araujo, a . m ., s . o·科斯塔和e·m·卡瓦略被CNPq调查人员支持。

引用

1. p . Desjeux“利什曼病:公共卫生方面和控制,”在皮肤科诊所,14卷,不。5,417 - 423年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a . Schriefer a . l . f . Schriefer Multiclonal Goes-Neto et al。。利什曼虫braziliensis人口结构及其临床意义的地区风土性对美国外皮的利什曼病,”感染和免疫,卷72,不。1,第514 - 508页,2004。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. o . Bacellar h . Lessa a Schriefer et al ., "老年病Th1-type反应粘膜利什曼病的病人,”感染和免疫,卷70,不。12日,第6740 - 6734页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. a . Ribeiro-de-Jesus r·p·阿尔梅达h . Lessa o . Bacellar和e·m·卡瓦略,“细胞因子和病理人类利什曼病,”巴西医学和生物学研究杂志》上没有,卷。31日。1,第148 - 143页,1998。视图:谷歌学术搜索
5. 斯维尔·d·z清,大肠Reinke et al .,“实验性自身免疫性脑脊髓炎的免疫调节的寄生虫卵巢免疫,”国际免疫学,15卷,不。1,59 - 69年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. a·库克·唐克斯f·m·琼斯et al。”感染曼氏裂体吸虫防止在非肥胖糖尿病小鼠胰岛素依赖型糖尿病,”寄生虫免疫学,21卷,不。4、169 - 176年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. o . Atochina d .低质粗支亚麻纱,“预防psoriasis-like病变发展的烟度寄生虫聚糖/烟度的老鼠,”实验皮肤病学,15卷,不。6,461 - 468年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. a . m . Bafica l·s·卡多佐s c·奥利维拉et al。”曼氏裂体吸虫体外抗原改变细胞因子的反应在皮肤利什曼病,”Oswaldo Cruz记忆做网页卷,106年,第863 - 856页,2011年。视图:谷歌学术搜索
9. a·j·g·辛普森·哈根·哈克特,p .俄梅珥阿里和s r·史密瑟斯“非常低的M (r)表达的抗原表位曼氏裂体吸虫成人tegumental抗原符合生命周期大的一般模式,”寄生虫学,第100卷,第1部分,73 - 81年,1990页。视图:谷歌学术搜索
10. f·c·卡多佐j·m·r·Pinho诉代理和s c·奥利维拉,”新一的识别曼氏裂体吸虫膜结合蛋白通过生物信息学分析,“遗传学和分子研究,5卷,不。4、609 - 618年,2006页。视图:谷歌学术搜索
11. j·m·m·h·Tran m . s .皮尔森Bethony et al .,“Tetraspanins表面曼氏裂体吸虫保护性抗原对血吸虫病”,自然医学,12卷,不。7,835 - 840年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. c·赫希和a . m .,”表征的分馏曼氏裂体吸虫可溶性成人虫抗原,引起人类体外细胞增殖和肉芽肿形成,”寄生虫学,卷112,不。6,529 - 535年,1996页。视图:谷歌学术搜索
13. c·赫希c . s . Zouain j·b·阿尔维斯和a . m .,“诱导保护性免疫调制的小鼠肉芽肿性过敏使用旧机器,一个阴离子的一部分曼氏裂体吸虫虫。”寄生虫学,第115卷,第1部分,第21至28,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. l·s·卡多佐s c·奥利维拉r . p . Souza et al .,”曼氏裂体吸虫抗原体外调节过敏反应在哮喘的个体细胞,”药物开发研究卷,72年,第548 - 538页,2011年。视图:谷歌学术搜索
15. l . Ziegler-Heitbrock p . Ancuta s Crowe et al .,”命名的单核细胞和树突细胞血液,“血,卷116,不。16日,pp. e74-e80, 2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. j·j·k·l . Wong Tai, w . c . Wong et al .,“基因表达分析揭示了古典的定义特征,中间,和非经典的人类单核细胞子集,”血卷。118年,16-31,2011页。视图:谷歌学术搜索
17. j .横n . Cagnard k Woollard et al .,“人类CD14dim单核细胞巡逻和核酸和病毒通过TLR7和TLR8受体,”免疫力,33卷,不。3、375 - 386年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. j . y, z s .邹a黄et al .,“超激活炎性CD16⁺单核细胞与肝损伤的严重程度在慢性乙型肝炎患者肝纤维化,”《公共科学图书馆•综合》》第六卷,没有。第三条ID e17484, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. y Rodriguez-Munoz, s . Martin-Vilchez r . Lopez-Rodriguez et al .,“外周血单核细胞子集预测慢性丙型肝炎抗病毒反应,”滋养药理学和治疗34卷,第971 - 960页,2011年。视图:谷歌学术搜索
20. j .汉b . Wang n .汉等。”${\text{CD14}}^{\text{高}}$CD16⁺而不是${\text{CD14}}^{\text{低}}$CD16⁺单核细胞在慢性感染艾滋病毒的患者与疾病相关进展,”获得性免疫缺陷综合征杂志》上,52卷,不。5,553 - 559年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. e . l . Azeredo p c . Neves-Souza a。r . Alvarenga et al .,“微分调节toll样受体2,toll样receptor-4, CD16和人类白细胞antigen-DR在外周血单核细胞轻微和严重的登革热、”免疫学,卷130,不。2、202 - 216年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. g .苏亚雷斯a . Barral j·m·科斯塔m . Barral-Netto CD16和j·范Weyenbergh。⁺单核细胞在人类皮肤利什曼病:增加体外水平和相关临床资料,”《白细胞生物学,卷79,不。1》,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. k . s . Hathcock g . Laszlo c . Pucillo·格鲁和r . j .赫德”比较分析B7-1和B7-2 costimulatory配体:表达和功能,“实验医学杂志,卷180,不。2、631 - 640年,1994页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. r·r·奥利维拉k . j . Gollob j.p. Figueiredo等。”曼氏裂体吸虫感染改变co-stimulatory分子表达和细胞的激活在哮喘、”微生物和感染,11卷,不。2、223 - 229年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. T . l . Walunas d . j . Lenschow c . y . et al .,他“CTLA-4可以作为负调节T细胞的激活,“免疫力,1卷,不。5,405 - 413年,1994页。视图:谷歌学术搜索
26. j . f .深色、f . Denizot和m . f . Luciani“免疫球蛋白superfamily-CTLA-4的新成员,”自然,卷328,不。6127年,第270 - 267页,1987年。视图:谷歌学术搜索
27. c . Favali d·科斯塔·l·阿方索et al .,“costimulatory分子在免疫反应的患者皮肤利什曼病,”微生物和感染,7卷,不。1,第92 - 86页,2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. c . i Brodskyn g·k . DeKrey和r . g .提多,“costimulatory分子对免疫应答的影响利什曼虫主要由人类细胞体外,”感染和免疫,卷69,不。2、665 - 672年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. 野村t·h·八木,中村k . et al .,“关键作用FOXP3的人类CD25的发育和功能⁺CD4⁺调节性T细胞,”国际免疫学,16卷,不。11日,第4656 - 1643页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. c . Baecher-Allan j·a·布朗·g·j·弗里曼,CD4和d·a·哈。⁺ ${\text{CD25}}^{\text{高}}$监管人类外周血细胞,”免疫学杂志,卷167,不。3、1245 - 1253年,2001页。视图:谷歌学术搜索
31. c . Romagnani m·德拉基美国科勒et al .,“人类NK细胞的激活血浆树突细胞和CD4的调制⁺辅助T细胞和CD4细胞⁺CD25hi T调节细胞。”欧洲免疫学杂志,35卷,不。8,2452 - 2458年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. y Belkaid和k·塔”,调节性T细胞在host-microorganism交互的控制,”年度回顾的免疫学27卷,第589 - 551页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. y Belkaid, c . a . Piccirillo门德斯,e . m . Shevach CD4和d . l .麻袋。⁺CD25⁺调节性T细胞控制利什曼虫主要持久性和免疫力,”自然,卷420,不。6915年,第507 - 502页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. s g·里德·e·m·卡瓦略,c . h .果汁牛奶冻et al .,”利什曼虫抗原的淋巴细胞在体外反应患者利什曼病或恰加斯病,”临床研究杂志,卷85,不。3、690 - 696年,1990页。视图:谷歌学术搜索
35. l·s·卡多佐Araujo, a . m ., l . g .预期r·r·奥利维拉和s c·奥利维拉,”多粘菌素B作为有限合伙人的污染的抑制剂曼氏裂体吸虫重组蛋白在人类细胞因子分析”微生物细胞工厂》第六卷,第1条,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. d . a . m . s .皮尔森皮克林,h·j·麦克索利et al .,“增强保护效力的嵌合的血吸虫病疫苗抗原Sm-TSP-2形式,“《公共科学图书馆·被忽视的热带疾病》第六卷,e1564条,2011年。视图:谷歌学术搜索
37. Follador, c . Araujo o . Bacellar et al .,“亚临床流行病学和免疫学研究的形式利什曼虫braziliensis感染。”临床感染疾病,34卷,不。11日,E54-E58, 2002页。视图:谷歌学术搜索
38. l . r . v .安东内利,w . o .南美洲,r·r·奥利维拉et al .,“不同的免疫调节双重否定潜力(CD4细胞^{- - - - - -}CD8^{- - - - - -})αβ和γδ从人类皮肤利什曼病的患者的T细胞,”感染和免疫,卷74,不。11日,第6323 - 6317页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. s . t .注视,w . o .南美洲m . Lessa et al .,“粘膜利什曼病病人显示炎症激活t细胞表型与非平衡单核细胞的人口,”斯堪的纳维亚免疫学杂志,卷63,不。1,第78 - 70页,2006。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. p . n .罗查r·p·阿尔梅达o . Bacellar et al .,”下调Th1类型的响应在美国早期人类皮肤利什曼病,”《传染病杂志》上的研究,卷180,不。5,1731 - 1734年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. m . i . a . s . Araujo b·霍普m . Medeiros et al .,“受损辅助T 2应对高空过敏症helminth-infected patiente与哮喘、”《传染病杂志》上的研究,卷190,不。10日,1797 - 1803年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. m . Hesse c . a . Piccirillo y Belkaid et al .,“血吸虫病的发病机制是由合作IL-10-producing先天效应和调节性T细胞,”免疫学杂志,卷172,不。5,3157 - 3166年,2004页。视图:谷歌学术搜索
43. m . i Araujo b·s·霍普m . Medeiros Jr .)和e·m·卡瓦略,”曼氏裂体吸虫感染调节对过敏和自身免疫性疾病的免疫反应。”Oswaldo Cruz记忆做网页,卷99,不。5,新,2004页。视图:谷歌学术搜索
44. m . Rossol克劳斯,m .码头c·贝瓦尔德和美国瓦格纳${\text{CD14}}^{\text{明亮的}}$CD16⁺单核细胞子集是类风湿性关节炎,促进扩大Th17细胞扩张的人口,”关节炎与风湿病卷,64年,第677 - 671页,2011年。视图:谷歌学术搜索
45. w·k·金,y太阳,h . et al .,“单核细胞异质性基础单核细胞表型变化根据疾病阶段,SIV”《白细胞生物学,卷87,不。4、557 - 567年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. l . Ziegler-Heitbrock”CD14⁺CD16⁺血液单核细胞:他们在感染和炎症的角色,”《白细胞生物学,卷81,不。3、584 - 592年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. w·h·k·l . Wong易普j·j·泰,s m . Ong t . m .党和s . c . Wong“人类单核细胞三个子集:对健康和疾病的影响,“免疫学研究卷,53 41-57,2012页。视图:谷歌学术搜索
48. b . Passlick d飘扬,h·w·lom Ziegler-Heitbrock,“识别和表征的新人类外周血单核细胞亚群,”血,卷74,不。7,2527 - 2534年,1989页。视图:谷歌学术搜索
49. l·s·卡多佐、s c·奥利维拉和m . i Araujo”曼氏裂体吸虫抗原的调节器在哮喘、过敏性炎症反应”内分泌、代谢和免疫紊乱卷,12个/,2012页。视图:谷歌学术搜索
50. l . g . g .预期f . a . v .马里奥·c·t·丰塞卡et al。”曼氏裂体吸虫抗原调节实验性过敏性哮喘小鼠模型:CD4的重要作用⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞白细胞介素- 10”独立的。”感染和免疫,卷77,不。1,第107 - 98页,2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. s e·奥尼尔l . h .吉马良斯p . r . Machado et al .,“寄生虫感染的临床过程和影响免疫反应利什曼虫braziliensis皮肤利什曼病,”《传染病杂志》上的研究,卷195,不。1,第148 - 142页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. h·a·Lessa p . Machado f·利马et al .,“成功的治疗难治性粘膜利什曼病pentoxifylline加锑,”美国热带医学和卫生杂志》上,卷65,不。2、87 - 89年,2001页。视图:谷歌学术搜索
53. a·r·j·b·桑托斯·德·耶稣,p . r . Machado et al .,”加锑重组人类集落刺激因子局部使用低剂量增强皮肤利什曼病溃疡的治疗:一项随机、双盲、安慰剂对照研究中,“《传染病杂志》上的研究,卷190,不。10日,1793 - 1796年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. r·p·阿尔梅达,j·布里托,p . l . Machado et al .,“成功治疗难治性皮肤利什曼病与gm - csf和锑的”美国热带医学和卫生杂志》上,卷73,不。1,第81 - 79页,2005。视图:谷歌学术搜索
55. r·阿尔梅达,a D 'Oliveira Jr . p . Machado et al .,“随机、双盲研究stibogluconate加上人类粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和stibogluconate单独治疗皮肤利什曼病,”《传染病杂志》上的研究,卷180,不。5,1735 - 1737年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2012艾琳米歇尔•巴博萨Bafica等。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。