从钩虫Excretory-Secretory产品L₃和成虫抑制促炎细胞因子在感染者

文摘

我们比较的幼虫和成虫的影响蠕虫excretory-secretory (ES)产品从钩虫增生性反应和细胞因子分泌在外周血单核细胞(PBMCs)从hookwormpatients和egg-negative nonendemic控制。与消极的控制,相比mitogen-stimulated PBMC从hookworm-infected个人显示显著减少增生性反应成人蠕虫ES抗原时添加到文化。此外,在hookworm-infected个人炎症的一个重要downmodulation白介素6 (IL)和肿瘤坏死因子(TNF)分泌导致当PBMCs与有丝分裂原刺激结合的幼虫或成虫蠕虫。两者,干扰素(IFN)和il - 10分泌显著降低刺激PBMC感染者;然而干扰素-/ il - 10比值hookworm-infected患者的低得多。类似的效果,虽然在较低的浓度,实现当PBMCs从两组与生活钩虫三级幼虫孵化。我们建议钩虫ES产品downmodulate增殖和炎症反应在慢性阶段的疾病和促进早期幼虫存活率或成人肠道蠕虫的持久性。

1。介绍

寄生虫excretory-secretory产品(ES)包含一个庞大的混合抗原,强有力的调节器的宿主的免疫反应,因此重要的因素在人类感染蠕虫生存和长期的维护。ES产品从不同的寄生虫种类和不同发展阶段的寄生在宿主被证明downmodulate 1型免疫(1]。等机制,早期对树突状细胞功能的影响和先天免疫反应之前描述为肠道线虫模型(2),以及丝虫的感染(3,4)有助于减少炎症反应和诱导2型反应(1]。钩虫,许多组件在ES产品描述到目前为止(5,6];然而,他们对人类影响免疫反应还不是很清楚,,最近,认真调查的主题。

我们最近报道,PBMCsNecator也肿瘤坏死因子-来华的患者较低的生产和il - 10 ES抗原来自成人钩虫属caninum。除了downmodulated细胞因子分泌ES抗原,PBMCs特有的患者在应对原油扩散不佳ES抗原提取物(7]。在目前的研究中,我们比较钩虫成人和幼虫的影响ES抗原准备polyclonal-activated淋巴细胞从两个不同的团体——(1)个人长期感染钩虫,居住在一个区域的高传输和(2)egg-negative(“控制”)和nonexposed个人,住在nonendemic区域。我们发现,增生性反应和促炎细胞因子的分泌hookworm-infected人downmodulated在很大程度上相比egg-negative控制。

2。材料和方法

2.1。选择的病人

在目前的研究中,hookworm-infected成年个体是招募2006年流行病学现场调查期间的Ladainha村,位于东北地区的米纳斯吉拉斯州,巴西。一个粪便样本收集来自个人和鸡蛋每克粪便(epg)由Kato-Katz粪便thick-smear技术(8每个病人)和两个幻灯片。个体发现monoinfected钩虫被录取进入本研究。血液是由静脉穿刺和阿苯达唑的患者随后接受单剂量(400毫克)由当地卫生服务人员。大约20毫升的血液被收集在肝素化管分离外周血单核细胞(PBMCs)。Nonendemic egg-negative控制是从城市招募贝洛奥里藏特,米纳斯吉拉斯,这被认为是低到可以忽略不计的传播,尤其是在贫穷的城市地区。从Centro de Egg-negative控制由志愿者尽管Rene Rachou没有报告任何肠道寄生虫感染。所有志愿者提供书面知情同意参与这项研究,并经伦理委员会批准从Centro de尽管Rene Rachou-FIOCRUZ和巴西“慰问Nacional de Etica em尽管如此”(CONEP)。

2.2。寄生虫ES抗原制备

钩虫属caninum成虫恢复小肠的流浪狗安乐死在贝洛奥里藏特县的狗窝在常规的利什曼病控制程序。成人蠕虫ES产品(ES-AW)获得孵化后寄生虫一段16 - 20小时37°C湿润孵化器和存储在整除−70°C (9]。ES准备好几天的集中为15毫升过滤管5 kDa分子量截止滤光片(微孔)和离心机1小时在4°C和1250克。抗原准备过滤后得到0.22μm低蛋白结合注射器过滤器(微孔)和由此产生的蛋白质浓度测定采用BCA蛋白质分析工具包(皮尔斯)。

为了获得L₃ES产品的准备,Harada-Mori粪便文化从hookworm-infected个人拥有超过4000 epg进行(10]。Fifty-mili-liter塑料管充满了5毫升的自来水。粪便是分布在滤纸条上三分之二的滤纸,转移到塑料管子,在垂直位置和孵化代谢途径°C 7 - 10天。管与穿孔封口膜密封的空气循环。粪便文化是每天检查水位,真菌污染,幼虫在水中。7 - 10天的潜伏期后,液体汇集在新管。分离L₃从粪便和真菌管彻底混合在一个漩涡,在30分钟沉积在板凳上。在仔细去除上层清液管的内容合并,颗粒与L₃布鲁里溃疡是resuspended 40毫升的缓冲区在室温下,所述Hawdon et al。(11]。解决方案被转移到一个小Baerman过滤装置,包含几层纱布,孵化一小时在室温下(RT)。布鲁里溃疡产生的颗粒的幼虫是resuspended缓冲区,混合充分,沉积步骤重复。细菌污染,小球是孵化BU / RT(1%盐酸缓冲30分钟11]。幼虫悬架被转移到无菌50毫升塑料管和再悬浮和沉降步骤与布鲁里溃疡缓冲无菌条件下重复一次,两次用最小的基本培养基(Gibco),一旦rpmi - 1640中(Gibco),含10% heat-inactivated正常人血清(ICN), 2% antibiotic-antimycotic解决方案(σ),1%谷酰胺(Winlab,莱斯特,英国)。最后一个沉积步骤后,上层清液被免职,幼虫resuspended 5毫升完成rpmi - 1640中(见上图)。激活的幼虫,1毫升的幼虫,包含大约10000 - 20000的幼虫,在3毫升的孵化完成rpmi - 1640中型8-well细胞multidish板块(NUNC) 16小时37°C和5%的公司₂。最后,幼虫悬挂被移除,汇集到1.5毫升杯,离心机在20800 g 3分钟。上层清液是仔细和抗原准备(ES-L删除₃)从不同的幼虫文化汇集并存储在−70°C到使用。由于血清激活的细胞培养基补充L₃,它是不可能确定的特定蛋白质浓度幼虫ES产品。

2.3。体外淋巴细胞增殖

分离PBMC执行所述其他地方(12]。在96孔细胞培养板、一式三份的250000细胞/添加抗原和有丝分裂原刺激最终成交量为200μL完整的rpmi - 1640 (12]。兴奋剂的最终浓度在细胞培养中确定为最优35μES-AW抗原和2.5 g / mLμg / mL phytohaemagglutinin (PHA) - l(美国Difco实验室、底特律、MI)。与ES-L扩散化验₃抗原,进行剂量反应曲线的实验中,越来越体积的L₃上层清液(5-50μL)添加到mitogen-stimulated PBMCs。25μL L₃上层清液的抑制导致56% PBMC扩散(数据没有显示)和用于所有后续实验的增殖和细胞因子分泌。细胞培养在37°C湿润有限公司5%₂孵化器。氚标记的胸苷(Amersham法玛西亚,圣保罗,巴西;0.5μCi /文化;具体活动6.7 Ci /毫米)添加到文化在48 h,和18 h后细胞收获。结合氚化胸苷测定液体闪烁计数器和数据表示为刺激指数(SIs)(平均增殖刺激文化除以意味着如果文化扩散)。PHA-stimulated淋巴细胞刺激指数作为参考价值(100%),和百分比costimulated细胞培养,PHA + ES-AW或PHA + ES-L₃,计算这个值。

2.4。细胞培养上清液中细胞因子检测

用于生产的细胞因子和趋化因子,PBMCs被种植在48-well组织培养板(美国纽约合演,康宁)总量为400μ在完整的rpmi - 1640 L两天,使用相同的最终分裂素和抗原浓度如上所述。浮在表面的游离是储存在−70°C到细胞因子量化。浓度对il - 1、IL-5、il - 6、il - 10,干扰素-和肿瘤坏死因子-测定酶联免疫吸附试验(ELISA)(研发系统,明尼阿波利斯,美国)。必要时,样本与PBS稀释为了获得一个值范围内的标准曲线。elisa进行根据制造商的协议一式两份,用25的总量μL /在high-binding一半区域板块(美国纽约合演,康宁公司)。在每板、连续稀释的标准运行构建标准曲线的浓度范围:il - 1(3.9 -500 pg / mL);IL-5 (11.7 -1500 pg / mL);il - 6 (4.7 -600 pg / mL);il - 10 (23.4 -3000 pg / mL);干扰素-(7.8 -1000 pg / mL);肿瘤坏死因子-(7.8 -1000 pg / mL)。所有elisa的敏感性低于标准稀释。自动比色反应是确定ELISA读者在450海里。重新计算细胞因子浓度的平均光密度值插值从标准曲线用4-parameter曲线拟合程序(SOFTmax PRO 3.1.2)。

2.5。淋巴细胞的培养和生活L₃

co-cultivation PBMC与感染钩虫幼虫,L₃从钩虫属caninum来华的狗粪文化(见上图)和后获得一种捐赠教授沃尔特·多斯桑托斯利马和Joziana Barcante(米纳Gerais-UFMG联邦大学的)。的在体外细胞培养,PBMCs,种植在24-Transwell板(3.0孔隙大小μm,配角,康宁,纽约,美国),400年的总量μ完全rpmi - 1640 L。细胞被孵化,直接接触或分离板插入,大约20 L₃在48小时内每口井。细胞上清液得到如上所述,并储存在−未来细胞因子测定的70°C。细胞因子elisa进行如上所述。

2.6。统计方法

统计评估,使用SPSS 12.0软件包。值扩散化验检查和细胞因子浓度为正态分布和非参数Mann-Whitney随后被分析了U以及比较的两组。差异与不到的价值。05were considered significant and are indicated in the text, table, or figure.

3所示。结果

3.1。病人和寄生虫学的考试

从Ladainha hookworm-infected患者的平均年龄是高于负,nonendemic控制从贝洛奥里藏特(年和年);但是这种差异不显著()。同时,nonendemic控制一直生活在贝洛奥里藏特的城市地区。egg-negative集团、寄生虫感染时没有诊断寄生虫感染的研究,没有过去的记录被hypoendemic地区的志愿者说。钩虫蛋数量的几何平均数是789 epg(范围:11892 - 684),7个患者窝藏光,2温和,和1重钩虫感染患者,根据世界卫生组织的分类(13]。

3.2。淋巴细胞增殖

图1后显示的个人比例PBMC扩散与PHA和钩虫ES-AW或ES-L聚集有关₃相比PHA-stimulated淋巴细胞。PBMCs钩虫患者显示较低比例的扩散,当钩虫ES抗原被添加到淋巴细胞的文化。后增加ES-AW PHA-stimulated淋巴细胞增殖的百分比显著降低()hookworm-infected个人。值得注意的是,当PBMC文化与PHA刺激,刺激指数无显著差异导致两国病人组(数据未显示)。

3.3。细胞因子的分泌

细胞因子浓度在细胞培养上清液中发现如表所示1。

在如果PBMC培养消极,nonendemic个人低浓度的炎性il - 1、il - 6和TNF -被发现与参与者相比钩虫感染。对il - 1和肿瘤坏死因子-,这些差异具有统计学意义(和、职责)。与PHA刺激时,PBMC hookworm-infected个体分泌更多的il - 1(比egg-negative对照组)。相反如果控制文化,il - 6和TNF -分泌物PHA-stimulated或costimulated文化显著降低PBMCs钩虫患者比egg-negative个人。IL-5,都发现了低浓度,控制和刺激淋巴细胞文化从两组。然而,如果PBMCs钩虫患者分泌更多IL-5 ()比PBMCs egg-negative个人。后添加ES-AW或ES-L₃抗原PHA-stimulated细胞培养,个人在两组显示il - 10分泌增加。然而,这种增加显著()高egg-negative控制。干扰素-分泌的参与者与钩虫感染显著()低刺激淋巴细胞文化与egg-negative相比个人。图2显示了成对干扰素-和il - 10分泌egg-negative两组患者分离的控制(2)和hookworm-infected个人(2 b)。刺激,从egg-negative PBMC个体分泌高水平的干扰素-和大大降低il - 10的水平。相比之下,钩虫患者PBMC分泌干扰素-同样低浓度和il - 10(数据2(一个)和2 (b))。

3.4。淋巴细胞的培养和生活L₃

表2展示了细胞因子分泌水平的结果从PBMC cocultured生活L₃的答:caninum。虽然浓度较低,如果与之前的数据相比,差异的分泌炎性细胞因子(il - 6、TNF -)与生活co-cultivation后L₃显示同样的趋势为可溶性ES-L描述₃准备从联合国也(表1)。这些结果表明,这种监管效应可能是由可溶性L分泌的因素₃。另一方面,与可溶性抗原准备,co-cultivation PBMC和L₃不诱导细胞因子il - 10分泌的增加和保持低浓度两组之间没有显著差异(表吗2)。IL-5和干扰素-分泌在PBMC cocultured生活L₃保持在边际水平在两个病人组(数据未显示)。

4所示。讨论

抑制细胞反应、抗原或多克隆和倾斜Th2免疫反应的的两个特点是寄生虫感染和丝虫的感染都进行了广泛的描述(14,15[]和血吸虫病16- - - - - -18]。在两个独立的研究中,我们发现减少抗原细胞响应钩虫患者以响应蠕虫的幼虫和成虫可溶性提取物(7,19]。有趣的是,增生性反应和细胞因子分泌模式截然不同的不同的抗原准备,与成年ES抗原诱导低1型和炎症反应特别是hookworm-infected个人(7]。

在本文中,我们集中在ES抗原的细胞反应的准备工作从两个发育阶段的hookworms-infective三级幼虫(L₃)和成虫(AWs)。我们可以显示两个ES准备,L₃哦,引起相当大的减少细胞增殖反应的多克隆淋巴细胞刺激hookworm-infected病人。我们观察到在多克隆激活PBMCs减少受感染的参与者与L₃ES抗原,表明down-modulatory机制发生在早期的L₃寄生虫的感染阶段个体先前激活的寄生虫抗原或当前的感染。这对钩虫感染和观察是小说无疑是主要的疫苗发展的重要性。在这种背景下,感应的监管/抑制反应诱导ES L₃抗原可能产生重大影响的维护寄生虫生存以及在流行人群再感染。重要的是,卢卡et al。20.)表明,L₃和成虫答:caninum分享ES和体细胞抗原;这些结果与本文中给出的结果表明,L的共同机制₃和成虫的调节免疫反应可能促进寄生虫逃避和生存。相反,它还显示了其他的免疫调节机制和病理变化的感应不同钩虫物种之间不能全面和诱导炎症反应的人类感染联合国也更微妙的,例如,在肠吗答:caninum感染(21]。在主实验感染在人类志愿者和仓鼠是表明,减少细胞响应的状态慢慢建立开放的发病期间,最有可能的更重要的贡献成人蠕虫人口建立时间22,23]。

由于明显的困难,获得足够的从人类ES材料钩虫物种,我们在实验中使用成人蠕虫ES产品,以及生活的幼虫答:caninum和比较人类的细胞反应的L₃ES的产品联合国也。我们都知道人类和狗钩虫感染之间的区别(24),从成年ES产品a . caninum和联合国也已被证明有个别蛋白质模式和绑定到不同的白细胞数量(25),不同的组件可能会因此对人体免疫系统有截然不同的影响(26]。然而,总ES提取的影响,在这里,似乎比较狗和人类钩虫ES产品的准备工作。我们也了解统计限制由于每组的个体数量低,这可能损害发现小群体之间的差异。然而,我们认为在目前的实验设置的不具体的多克隆淋巴细胞的有丝分裂原刺激PHA我们能够画出了结论,即使有限数量的ES抗原迫使我们使用血液从数量限制的个人。

实验人类感染进行胶囊内镜仍然表明,成虫造成很大程度的肠道炎症和新抵达的过早蠕虫开除小肠急性嗜酸性的肠炎(27]。然而,成人钩虫也被证明能够抵抗肠道炎症和继续寄生于小肠(28]。此外,在反复接种实验人类感染,即使250 L₃,最初的与每一个新应用感染肠道症状似乎消失(29日]。在我们看来,这表明时间和剂量依赖性钩虫免疫抑制机制与降低肠道炎症,导致寄生虫的持久性。已经有描述机制成人蠕虫ES组件诱导抑制人类的免疫反应,例如,在反应性T细胞诱导的细胞凋亡,从而渗透活性主机白细胞成人虫附件并促进生存的地方(30.),或通过影响树突状细胞的成熟和调节性T细胞的分化31日]。

我们观察到高浓度的il - 1、il - 6和TNF -浓度如果PBMC文化从感染者表明这些志愿者持续的炎症过程。然而,在在体外感染患者PBMC刺激显示分泌il - 6和TNF -的能力降低PHA刺激后或结合ES抗原来自寄生阶段。一起低干扰素-分泌与钩虫感染人,我们的研究结果的主要作用为降低炎症/ ES产品1型免疫反应过程中人体钩虫感染。另一方面,低到没有IL-5分泌,回应ES准备工作或生活的寄生虫,分别表明ES抗原是2型的可怜的诱发者免疫力。这也证实了先前的抗原刺激的PBMC hookworm-infected科目(7),和类似的结果中描述PBMCs从nonexposed个人孵化了生活L₃从丝虫的寄生虫与象皮病马来(32]。像其他机制影响免疫调节和细胞因子和趋化因子环境,据报道,主机eotaxin专门从成人metalloproteases劈裂联合国也ES分泌物,防止招聘和嗜酸性粒细胞的活化可能是重要的,甚至可能影响Th2反应(33]。因此,这将是有趣的在将来的研究中收集额外信息il - 4或IL-13淋巴细胞分泌模式,甚至在IL-21, Th2细胞因子确定高度相关的寄生虫感染(34]。此外,通过皮肤血吸虫感染和迁移过程中,il - 10似乎是一个免疫反应的关键调节器(35]。然而,在这项研究中我们观察到显著降低il - 10分泌hookworm-infected患者PBMC文化相比,消极的人。另一方面,产生的免疫反应也抵消细胞因子之间的相互作用不同。因此,配对干扰素-和分泌il - 10对每个患者PBMC与ES抗原刺激后显示两组病人之间的一个完全不同的模式;例如,在刺激干扰素-较高同样比egg-negative il - 10水平控制和低水平的干扰素-和il - 10在hookworm-infected个人。在我们看来,这种干扰素- ES antigen-induced低/ il - 10比值hookworm-infected患者可能有助于增强免疫反应的抑制,细胞反应性降低,减少炎症反应。有趣的是,一个优雅的研究Heligmosomoides polygyrus来华的老鼠最近表明,成人蠕虫ES产品从这个啮齿动物线虫抑制树突状细胞的成熟和功能的分化和可能驱动产生il - 10 T_注册细胞。因此,T细胞、细胞因子和抗体反应被抑制在一个广义的方式(36]。的假定的角色树突状细胞表型和功能的改变在hookworm-infected患者观察到免疫反应的抑制/监管这些病人最近发表的我们组(37]。的重要贡献或者激活巨噬细胞在肠道寄生虫感染最近回顾,强调通过Kreider et al。38),可能是重要的指导在人类钩虫感染的免疫反应。因此,钩虫的影响ES抗原呈递细胞产品,以及诱导调节性T细胞的细胞因子,如TGF -或IL-17,值得进一步调查。

总之,我们能够表明,钩虫ES的产品答:caninum成虫或L₃诱导免疫机制,显著减少增生性反应增殖PBMC hookworm-infected个人。此外,相当downmodulation的炎性细胞因子的分泌,以及较低的干扰素-/ il - 10比值,导致刺激钩虫患者PBMC, nonendemic相比,egg-negative控制,可能是决定性的因素,早期幼虫存活率或成人肠道蠕虫的持久性。

确认

作者感谢病人从Ladainha nonendemic志愿者Centro de尽管Rene Rachou协作。提供的金融支持研究j·福格蒂基金会和pap Fiocruz / CNPq V程序。同时,他们要感谢教授沃尔特·多斯桑托斯利马和Joziana Barcante(联邦大学的米纳Gerais-UFMG)捐赠的感染钩虫幼虫。s·m·盖革和r . t .藤原同样这项工作。

引用

1. r . m .该种a . Balic n . Gomez-Escobar m·奈尔·m·d·泰勒和j·e·艾伦,”寄生虫parasites-masters的规定,“免疫学检查卷,201年,第116 - 89页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a . Balic y Harcus, m . j .荷兰,和r . m .该种“选择性成熟的树突细胞Nippostrongylus取代巴西橡胶树分泌蛋白驱动Th2免疫反应。”欧洲免疫学杂志,34卷,不。11日,第3059 - 3047页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. r·t·Semnani m法,j . Kubofcik和t . b . Nutman Filaria-induced免疫逃避:抑制感染阶段与象皮病马来最早开始界面”,免疫学杂志,卷172,不。10日,6229 - 6238年,2004页。视图:谷歌学术搜索
4. h . s .之一f·a·马歇尔k . j . et al .,“免疫调节通过小说使用TLR4的丝虫的线虫phosphorylcholine-containing分泌产品,es - 62”免疫学杂志,卷174,不。1,第293 - 284页,2005。视图:谷歌学术搜索
5. a .卢卡和p . Prociv钩虫感染免疫反应”,临床微生物学检查,14卷,不。4、689 - 703年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. a·l·威廉姆森p . j .布林德利d·p·诺克斯·j·霍特兹和a .卢卡,“食血线虫的消化蛋白酶,”寄生虫学的趋势,19卷,不。9日,第423 - 417页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. s·m·盖革,i r .卡尔达斯b e Mc Glone et al .,在人类“Stage-specific免疫反应Necator也感染。”寄生虫免疫学卷,29号7,347 - 358年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. n . Katz, A·查维斯和j . Pellegrino”一个简单的装置定量凳子thick-smear技术在血吸虫病曼,“航空杂志上做研究院药物热带de圣保罗,14卷,不。6,397 - 400年,1972页。视图:谷歌学术搜索
9. 答:卡尔和d·普里查德,“人体钩虫的抗原表达在开发过程中,Necator也(线虫纲),“寄生虫免疫学,9卷,不。20日,第234 - 219页,1987年。视图:谷歌学术搜索
10. l . r .火山灰和t . c . Orihel人体寄生虫学的阿特拉斯芝加哥ASCP出版社,生病,美国,第四版,1997年版。
11. j . m . Hawdon s纳史木汗和p . j . Hotez钩虫属分泌蛋白2:克隆和表征的第二个家庭成员线虫分泌蛋白钩虫属caninum”,分子和生化寄生虫学,卷99,不。2、149 - 165年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. s·m·盖革,c . l . Massara j . Bethony p t . Soboslay o . s .卡瓦略和r . Correa-Oliveira细胞反应和细胞因子配置文件蛔虫和鞭虫trichiura被感染的病人,”寄生虫免疫学,24卷,不。11 - 12,499 - 509年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. 世界卫生组织,预防和控制血吸虫病和土壤传播的蠕虫病技术报告系列,卷。912年,世界卫生组织,2002年瑞士,日内瓦。
14. e·a·奥特森p·f·韦勒,l .见鬼,“在人类丝虫病特定的细胞免疫反应迟钝,”免疫学,33卷,不。3、413 - 421年,1977页。视图:谷歌学术搜索
15. w·f·Piessens p·b·McGreevy p . w . Piessens et al .,”在人类感染的免疫反应与象皮病马来。特定的丝虫的抗原细胞反应迟钝,”临床研究杂志,卷65,不。1,第179 - 172页,1980。视图:谷歌学术搜索
16. 维亚纳i r·c·a·谢尔o·s·卡瓦略et al .,外周血单核细胞的移行细胞生产”流行地区的居民曼氏裂体吸虫”,事务皇家热带医学和卫生学会的,卷88,不。4、466 - 470年,1994页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. c·l·王,a . Medhat Malhotra et al .,即“细胞因子控制parasite-specific无力在人类尿血吸虫病。il - 10调节淋巴细胞反应性。”免疫学杂志,卷156,不。12日,第4721 - 4715页,1996年。视图:谷歌学术搜索
18. j·l·甘p·g . Kremsner a . m . Deelder和m . Yazdanbakhsh高架核扩散和interleukin-4释放CD4 +细胞化疗后的人类血吸虫heamatobium感染。”欧洲免疫学杂志,26卷,不。6,1365 - 1370年,1996页。视图:谷歌学术搜索
19. s·m·盖革,c . l . Massara j . Bethony p t . Soboslay和r . Correa-Oliveira”细胞反应和细胞因子治疗钩虫患者从一个流行地区生产在巴西,“临床和实验免疫学,卷136,不。2、334 - 340年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 卢卡,j . Croese j . Opdebeeck和p . Prociv免疫连累的钩虫属caninum作为一个人类的肠道病原体,”美国热带医学和卫生杂志》上,50卷,不。1,第77 - 69页,1994。视图:谷歌学术搜索
21. p . Prociv和j . Croese”人类的肠道感染钩虫属caninum:钩虫来说的一种“新”的人畜共患病,”Acta Tropica,卷62,不。1,23-44,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. 诉赖特和Bickle,“人类钩虫感染后免疫反应实验,”临床和实验免疫学,卷142,不。2、398 - 403年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 门德斯,j·g . Valenzuela w·吴和p . j . Hotez宿主细胞因子的生产、lymphoproliferation和抗体反应过程中钩虫属ceylanicum金色的叙利亚仓鼠感染。”感染和免疫,卷73,不。6,3402 - 3407年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. r·t·藤原s . m .盖革,j . Bethony和s·门德斯,“比较免疫学钩虫感染的人类和动物模型,”寄生虫免疫学,28卷,不。7,285 - 293年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. g .张炳扬。谢长廷,卢卡,A . m . Wahl et al .,”从人类分泌蛋白钩虫Necator也结合选择性NK细胞,诱导干扰素-$\mathrm{吗?}$生产。”免疫学杂志,卷173,不。4、2699 - 2704年,2004页。视图:谷歌学术搜索
26. h·j·麦克和卢卡,“人类钩虫感染的免疫学,”寄生虫免疫学,32卷,不。8,549 - 559年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. j . Croese m·j·伍德,w·梅尔罗斯和r . Speare过敏控制的人口密度Necator也在小肠,”胃肠病学,卷131,不。2、402 - 409年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. j·m·本克先生,r·罗斯和j .小钩虫的“抵抗钩虫属ceylanicum和Necator也不同的感染引起的肠道炎症反应。”国际寄生虫学杂志,24卷,不。1,第101 - 91页,1994。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. b . m .奥美a . Bartlett r·c·戈弗雷·j·a . Turton m . j .蠕虫和r·a·耶茨、“self-infections抗体反应Necator也”,事务皇家热带医学和卫生学会的,卷72,不。1,第71 - 66页,1978。视图:谷歌学术搜索
30. s . c . Chow a .布朗,d。普里查德。”人类钩虫病原体Necator也在T淋巴细胞凋亡寄生虫免疫学,22卷,不。1、21、2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. c . Cuellar w·吴,s·门德斯,“metalloproteases的钩虫组织抑制剂(Ac-TMP-1)修改树突状细胞功能和诱导代CD4和CD8抑制T细胞”《公共科学图书馆·被忽视的热带疾病,3卷,不。5 p . e439 2009。视图:谷歌学术搜索
32. 美国先生和t . b . Nutman促炎细胞因子在早期免疫反应丝虫的寄生虫,”免疫学杂志,卷171,不。12日,第6732 - 6723页,2003年。视图:谷歌学术搜索
33. f . j . Culley a .布朗,d·m·康罗伊Sabroe, d . i、t·j·威廉姆斯,“Eotaxin专门由钩虫metalloproteases阻止其行动在体外和体内,”免疫学杂志,卷165,不。11日,第6453 - 6447页,2000年。视图:谷歌学术搜索
34. j . Pesce m . Kaviratne t·r·Ramalingam et al .,“IL-21受体增加Th2效应函数和替代激活巨噬细胞,”临床研究杂志,卷116,不。7,2044 - 2055年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. j·詹金斯,j . p .款g·r·詹金斯和a . p . Mountford”调制血吸虫幼虫的宿主的免疫反应,”寄生虫免疫学,27卷,不。年级,385 - 393年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. c . Piccirillo Segura m z苏,m·m·史蒂文森“树突状细胞功能的损伤excretory-secretory产品:一个潜在nematode-induced免疫抑制的机制,”欧洲免疫学杂志,37卷,不。7,1887 - 1904年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. r·t·藤原g . g . l . Cancado p . a . Freitas et al。”Necator也感染:改变树突状细胞分化的可能原因和嗜酸性粒细胞在慢性感染个体,”《公共科学图书馆·被忽视的热带疾病,3卷,不。第三条e399, 2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. t·罗斯·r·m·安东尼j . f .城市和w·c·高氏,“或者激活的巨噬细胞在寄生虫感染,”当前舆论免疫学,19卷,不。4、448 - 453年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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