体外和体内的抗疟活性测定种子Balanites aegyptiaca:提取的化合物显示出增长抑制和活动对Plasmodial氨基肽酶

文摘

Balanites aegyptiaca(Balanitaceae)是一种广泛种植的沙漠植物,多用途的潜力。在本文中,从原油中提取b . aegyptiaca种子相当于1:比2000年种子提取antiplasmodial筛查活动。坚决的集成电路₅₀值chloroquine-susceptible恶性疟原虫NF54应变是68.26。分析提取的气相色谱分析-质谱法检测6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟,寄生的抑制剂M18天门冬氨酰氨肽酶的化合物负责在体外antiplasmodial活动。原油的植物提取了2.35和显示响应存在剂量依赖的相关性。损耗的化合物后,显著降低抑制决心的4.8。此外,两个酚类化合物,2,6-di -叔丁基苯酚和2,4-di -叔丁基苯酚,决定集成电路₅₀值为50.29和47.82分别被检测到。这些化合物可能导致在体外抗疟活动由于其抗氧化性能。在一个在活的有机体内实验中,与水治疗BALB / c小鼠Balanite提取并没有导致根除寄生虫,虽然减少了寄生虫血症在12天pi观察。

1。介绍

传统医学医疗对很多人来说仍然是第一点在撒哈拉以南非洲,那里有悠久而丰富的传统从草本植物和树木获得治疗。在疟疾的情况下,非洲的传统治疗师使用成百上千的土著植物补救措施。

直到1950年代,当合成化学开始主导药物研究与开发(R和D)的努力,大多数药物开发和注册在药典实际上是基于天然产物。植物生物碱,其中奎宁,是第一个组件的天然草药中提取和精制更有效的使用在19世纪早期。大约150年后,奎宁仍作为一线治疗严重的疟疾,即使它不是推荐的药物用于治疗时使用青蒿素联合疗法(ACTs)是可用的。在这种情况下,这似乎很奇怪,到目前为止没有非洲领导出现了。同时,努力为他们的应用程序评估植物对抗疟疾的补救措施,在卫生保健系统1]。

b . aegyptiaca(l) (Balanitaceae)是一种木本树生长在不同的生态条件(从100 mm到1000 mm年降雨量),但主要分布在非洲热带半干旱和干旱区域(2]。这棵树达到10米(33英尺)通常在高度狭窄的形式和棘手的分支。树产生多种形式的花序轴承黄绿色双性恋花散发出花蜜。在埃及,这是局限于需水网站,也就是说,河谷和河岸。

b . aegyptiaca已经申请了各种传统医学的迹象。果子一直是一个活跃的贸易的基础在许多世纪由于其石油,由线性和支链烷烃在内核包含萜烯和固醇(薯蓣皂苷配基),显示减少肝脏胆固醇(3]。

树皮曾用作鱼毒,大概是因为其甾体皂苷含量的活性成分(4]。皮的水提取物显示抗菌、抗真菌、抗病毒活性(5),但最引人注目的抗真菌作用b . aegyptiaca对白色念珠菌感染(5]。

Balanitin-6和balanitin-7 diosgenyl皂甙b . aegyptiaca内核和他们表现出明显的抗癌效果在人类癌症细胞系在体外(6)抗增殖潜力高于依托泊苷和oxiplatin。抗癌活性主要结果从ATP耗竭导致肌动蛋白细胞骨架的主要瓦解(6]。

balanitins的结构,即balanitin-1, 2, 3,由甾体苷被证明是强大的淡水螺螺剂控制血吸虫病的载体(7]。此外,的功效b . aegyptiaca果实中果皮与吡喹酮与苏丹的受感染的老鼠曼氏裂体吸虫(8]。单剂量200毫克/公斤体重显著减少成虫的复苏。最近,root-derived愈伤组织b . aegyptiaca与500 ppm提取皂苷显示100%的杀灭幼虫的效果埃及伊蚊蚊子的幼虫(9]。

近年来,抗疟疾寄生虫治疗增加了需要开发替代治疗。自b . aegyptiaca树皮显示有前途的抗感染性能,我们研究了其潜在antiplasmodial活动在种子和相关活动的成分在体外。虽然和药用植物化学的分析评估最近进行了固定油b . aegyptiaca水果(10),在活的有机体内生物化验失踪。这里,我们监控寄生虫血症后应用程序的一个水从植物的种子中提取得到在体外和在活的有机体内在BALB / c小鼠。

2。材料和方法

2.1。植物材料

的种子b . aegyptiaca(Balanitaceae)获得Harraz药房在开罗,收集领域的Ras穆罕默德国家公园和生态被Gortz教授,德国斯图加特大学生物研究所。

2.2。索氏提取

b . aegyptiaca种子粉(5克)和孵化在100毫升蒸馏水37°C。促进类固醇aglyca解散,角鲨烷溶液(1毫升)(Sigma-Aldrich,慕尼黑,德国)由2 N HCl是补充道,和混合物与200毫升甲醇回流24小时在索氏仪器。提取与硫酸钙(卡索干₄h·2₂O)(德国卡尔罗斯,卡尔斯鲁厄)和过滤。随后,甲醇被使用旋转蒸发器蒸发和真空泵。获得的残留在50毫升甲醇稀释声波降解法和分析的气相色谱分析-质谱法(GC / MS)。

水提物的制备,粉5克b . aegyptiaca种子是孵化在100毫升蒸馏37°C,热压处理过的水密封,24小时消毒猎鹰管和过滤在无菌条件下层流气流。

2.3。GC / MS仪器和分析条件

GC / MS测量是使用7890气相色谱仪系列7683 b autosampler和5975 c系列四极质谱仪(安捷伦科技公司,圣克拉拉、钙、美国)在电子碰撞电离(EI)模式。熔融石英毛细管柱,30米长,0.25毫米拿身份证HP-5MS固定相,膜厚度0.25μ使用m。GC / MS数据被处理ChemStation(安捷伦科技)和软件NIST 05质谱库(安捷伦科技)。列的温度从80°C编程(1分钟)在10°C min⁻¹到280°C(50分钟)。氦5.0级(德国威斯特法伦AG)、明斯特)作为载气。恒流氦的1.0厘米³分钟⁻¹在整个使用分析。分流/不分流进样注射器的温度为250°C,分流是10厘米³分钟⁻¹。传输线温度为280°C。EI离子源的温度保持在230°C。电离发生影响电子的动能70 eV(电子伏特)。四极的温度为150°C。质谱和重建色谱(总离子电流(TIC))得到溶剂洗脱后(7分钟溶剂延迟)自动扫描的质量范围30 - 750 u。

2.4。文化的恶性疟原虫隔离NF54

恶性疟原虫隔离NF54,来自疟疾研究和参考中心,马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国维持在连续文化与庆大霉素(40g / mL)在培养皿(直径5厘米)与90%的气相N₂,5%的人啊₂,5%的公司₂根据协议,从马勒尼et al . 199011)和载体和威廉姆斯1992 (12]。寄生虫是培养人类红细胞(血型⁺)1640年RPMI介质(σ)补充25毫米玫瑰,20毫米碳酸氢钠,10% heat-inactivated人类⁺等离子体在10% (v / v)红细胞比容。受感染的红细胞决心的寄生虫血症Giemsa-stained通过光学显微镜涂片。寄生虫血症和形态形式中发现文化取得视觉上100倍油浸物镜,至少1000红细胞计数来确定感染红细胞的百分比(13]。无毒控制(甲醇/水50:50% v, v)是用于实验。

2.5。监控乘法和疟原虫的生长

文化适应是一个寄生虫血症1.5%。整除(200L)停牌2毫升RPMI-medium (Sigma-Aldrich)补充25毫米玫瑰,20毫米碳酸氢钠,10% heat-inactivated人类⁺等离子体在10% (v / v)比容、分发到12-well微量培养托盘,和孵化37°C在气体的气氛中90%的N₂,5%的人啊₂,5%的公司₂。此后,生长介质是改变了4天,每天一次,2,4-di -叔丁基苯酚和2,6-di -叔丁基苯酚股票的解决方案是溶解在水/甲醇混合(50/50%,v / v)之前被稀释在RPMI生长介质的浓度为每一个实验。

稀释的原油Balanite提取后获得索氏提取进行与RPMI-growth介质扰动的溶剂来保护红细胞膜。

寄生虫血症和阶段分布被估计为一式三份每天从Giemsa-stained涂片红细胞通过计算1000。

2.6。集成电路的决心₅₀值

50%抑制浓度(IC₅₀,定义为相对应的药物浓度抑制寄生增长50%是由非线性回归分析。

数据从inhibitor-dependent获得浓度增长曲线计算到阴谋与非线性回归分析设在(抑制%)设在(抑制剂浓度米)(14]。

2.7。动物

动物研究是根据指导方针的执行德国动物福利法案(牌照号码:50.203。20亿)。Balb / c小鼠动物设施的维护和培育波恩大学和静脉注射感染1×10⁵寄生的红细胞同源供体老鼠,被感染冻结多克隆的股票p .鼠安卡(PbA)压力。BALB / c小鼠发达Th2反应和不屈服于脑型疟疾,但10 ~ 30天后死亡,因为高寄生虫血症和贫血。50l含水原油的植物提取物(1,25 g / 100毫升)应用于BALB / c小鼠腹腔内(i.p)天3、2、1之前感染,感染的日子,天1,2,3,4,5,6,感染后。控制老鼠处理200L PBS-buffer,相同方案的管理应用。

2,6-di -叔丁基苯酚和2,4-di -叔丁基苯酚被应用于BALB / c小鼠腹腔内(i . p。)天在感染前4和2天2,4,6之前感染。氯喹应用在感染后的天1 - 8 i . p . 25毫克/公斤的浓度为每一个鼠标。Giemsa-stained涂片进行天、12、15。5每组小鼠治疗。

2.8。Recloning的恶性疟原虫M18天门冬氨酰氨肽酶(烤瓷18 AAP)

核酸序列恶性疟原虫M18天门冬氨酰氨肽酶被GenScript化学合成(美国新泽西州)与优化密码子的使用被Teuscher et al。(2007)15]。一个subclone随后由BaculoDirect c端线性DNA(英杰公司、德国)和转染成Sf9 (Spodoptera frugiperda)细胞蛋白表达和纯化根据Teuscher et al。(2007)15]。

2.9。活动的分析恶性疟原虫M18天门冬氨酰氨肽酶(烤瓷18 AAP)

根据高通量筛选活动执行分析(htp)所描述的Teuscher et al . 200715)和斯克里普斯研究所的分子筛查中心(http://mlpcn.florida.scripps.edu/)。

试验开始前,2.5L分析缓冲区(50毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液pH值7.5,4毫米CoCl₂,0.1% BSA)包含5μg / mL重组烤瓷18 AAP被分发到12-well微量滴定板。接下来,37L的原油Balanite提取和“耗尽Balanite提取“6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟没有被添加作为一个控制反应到适当的井。损耗的提取是由液体相色谱分析-质谱法(LC / MS)和分数复查通过GC / MS内所述的存在和缺乏6-Phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟。

板块在孵化30分钟25°C。试验是由配药2.5L 100年M H-Glu-NHMec作为fluorogenic肽(美国新泽西州GenScript)缓冲区(50毫米三羟甲基氨基甲烷盐酸,液pH值8.8)在所有井中。荧光立即阅读()ViewLux(美国优秀的,MA)和后90分钟孵化的25°C。进一步计算之前,是减。每个浓度进行了三个不同的实验。

2.10。统计数据

使用GraphPad棱镜软件统计分析进行评估在活的有机体内抑制剂与BALB / c小鼠实验进行。正常的数据分布评估Kolmogorov-Smirnov正常测试。Nonparametrically分布式数据分析使用Mann-Whitney测试水之间的差异Balanite提取和氯喹治疗组。

3所示。结果

粗提取物提取Balanites aegyptiaca种子显示恶性疟原虫氯喹敏感菌株antiplasmodial活动NF54体外。

在体外氯喹敏感的抑制增长恶性疟原虫应变NF54粗提取物进行了测试b . aegyptiaca(相当于1数量:2000种子)通过索氏提取导致的根除寄生虫(图3天内1(一))和一个集成电路决定₅₀68.26克/L±3、5(图1 (b))。相比之下,未经处理的NF54应变显示正常生长。原油Balanite提取和稀释的提取,提取种子的比例是1:200年,细胞溶解红细胞(RBC;数据未显示)。因此,数量相当于1:2000的种子应用RPMI-medium作为溶剂,以避免任何扰动红细胞的膜。

(一)

(b)

图1

恶性疟原虫 Balanite Balanite (一)chloroquine-susceptible的增长应变NF54提取物稀释的存在种子从1:获得2000年种子中提取的比例。寄生虫是生长在12-well微量培养托盘。三角形表明寄生虫血症的治疗NF54控制在矩形指示服药治疗压力。每个点代表四个不同的决定的平均值±标准差。(b)粗提物的剂量反应曲线种子(提取毫克/毫升)和比例的确定寄生虫血症。

图2显示的总离子流色谱图(TIC)获得的GC / MS分析原油Balanite活性化合物的提取识别和描述索氏提取后的粗提物。数据3(一个)- - - - - -3 (c)代表确定峰的质谱使用纯标准物质的峰NIST 05化合物的质谱库进行比较,说明检测到的物质的化学结构2,6-di -叔丁基苯酚(18.43分钟),2,4-di -叔丁基苯酚(19.36分钟),6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟(39.44分钟),分别。离子[M]^+。在m / z206年,碎片离子[M ch₃]⁺在m / z191 (C₄H₉]⁺离子在m / zdi - 57特征叔丁基苯酚同分异构体(图3(一个)- - - - - -3 (b))。

图2

Balanite 叔叔总离子流色谱图(TIC)获得的GC / MS分析原油提取。的设在每个GC / MS的色谱图代表了分钟的保留。色谱图显示检测到的物质的保留时间2,6-di -丁基苯酚(18.43分钟),2,4-di -丁基苯酚(19.36分钟),6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟(39.44分钟)。

(一)

(b)

(c)

图3

NIST 05 叔叔质谱鉴定化合物的结构式,使用纯物质和标准质谱库。的设在每个质谱显示了(质量)的单位。(一)2,6-di -丁基苯酚,(b) 2, 4-di -丁基苯酚和(c) 6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟。

原油Balanite提取抑制重组M18天门冬氨酰氨肽酶恶性疟原虫(PFM18AAP)决定2.34m .的试验进行商用fluorogenic肽底物H-Glu-NHMec。乳沟PFMAAP重组酶的底物释放的NHMec肽,导致增加荧光。不同浓度的原油植物提取物(图4,蓝色曲线)被应用于研究重组PFMAAP的剂量反应。抑制PFM18AAP严格剂量依赖性。在平行,我们决定重组PFM18AAP分馏后的抑制作用的索氏提取池分数6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟缺席(图4粉色曲线)。没有证实了化合物的GC / MS分析。粉色曲线在图4表明6-phenyl-2枯竭(H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟的提取会导致低50%抑制浓度从2.7 ng干重每毫升每毫升73.5 ng干重比化合物的提取。的决定是4.8克/l

图4

Balanite 恶性疟原虫 Balanite 在体外 Balanite 剂量反应曲线的原油提取上M18天门冬氨酰氨肽酶(PFM 18 AAP)。不同浓度的原油提取(g / mL)的应用活动分析烤瓷18 AAP酶在实验部分所述。抑制的比例(设在)策划与提取浓度(设在)。蓝色曲线代表了原油提取与6-phenyl-2 (H) 1、2、4-triazin-5-one肟在粉红色的曲线显示了耗尽提取化合物的缺席。

衍生品的6-phenyl-2 (H) 1、2、4-triazin-5-one最近确定为重要的抑制剂导致结构重组plasmodial M18氨基肽酶(PfM18AAP)生化大规模筛选试验(htp) fluorogenic肽底物(斯克里普斯研究所的分子筛查中心,http://mlpcn.florida.scripps.edu/)。的导数6-phenyl-2 (H) 1、2, 4-triazin-5-one, 3 - (benzylamino) 4-ethyl-6-phenyl-1, 2, 4-triazin-5-one肟是应用于浓度为7.35M和抑制酶重组到31%。这种抑制作用归因于金属螯合物的形成与寄生cocatalytic锌金属离子的酶。综上所述,这些结果表明,发现6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟antiplasmodial活动。

两个酚类化合物的出现促使我们去执行在体外抑制剂和剂量反应实验恶性疟原虫应变NF54浓度从10毫米到100毫米。这个实验的商用纯酚类化合物(丙烯酰胺,德国)。抑制经济增长开始独立的浓度为10毫米的化合物。最突出的增长逮捕在100毫米的浓度观察与2,4-di -叔丁基苯酚或2,6-di -叔丁基苯酚(图5(一个)和5 (c)、职责)。坚决的集成电路₅₀值是50.29为2 M±3, 6-di -叔丁基苯酚(图5 (b))和47.82M±2 5 2 4- - - - - -迪叔,丁基苯酚(图5 (d)),分别。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

图5

在体外 恶性疟原虫 叔叔 ₅₀ 叔 ₅₀ 叔 ₅₀ ₅₀ 抑制和chloroquine-susceptible的剂量反应曲线应变NF54。寄生虫血症确定抑制后(100年)米2,6-di -丁基苯酚,(c) 100米2,4-di -丁基苯酚,(e)两者的结合与100年化合物M。三角形表明寄生虫血症的治疗NF54控制在矩形指示服药治疗压力。每一个点代表了四种不同的平均值±标准差的计算。剂量反应曲线得到抑制后的化合物10的范围m - 100M和集成电路测定值。(b) 2, 6-di -丁基苯酚,决定集成电路= 50.29M±3, (d) 2, 4-di -丁基苯酚,决定集成电路= 47.82M±2、5、(f)两者的结合化合物决定集成电路= 42.5M±3。

完全根除寄生虫没有观察到,这表明这些化合物可能导致原油植物提取物的生物活性。2,4-di -叔丁基苯酚比2更有效,6-substituted复合,但没有完全根除寄生虫。在第二组实验中,这两个化合物(100毫米)申请综合治疗。这两个化合物的组合显示一个集成电路₅₀值为42.5M±3(图5 (f))。总的来说,这些结果表明,这两种药物的组合似乎有相加作用。

水提物从b aegyptiaca种子和两个酚类化合物2,4-di -叔丁基苯酚和2,6-di -叔丁基苯酚测试在BALB / c小鼠体内不减少寄生虫血症。

迄今为止,没有在活的有机体内生物活性试验已经完成调查的antiplasmodial活动Balanite提取。因此,我们监控在活的有机体内保护感染BALB / c小鼠感染后10⁵寄生的红细胞p .鼠安卡(PbA)管理后应变Balanite提取和两个酚类化合物,2,4-di -叔丁基苯酚和2,6-di -叔丁基苯酚。原油水植物提取物(50 mL的25克干提取/ 100毫升溶剂)腹腔内应用于天3、2、1之前感染,感染的一天,在天感染后,8。两个酚类化合物(每个剂量6毫克/公斤体重)腹腔内应用于天4和2在感染和天2,4,6感染后。在第八天皮。,parasitemia was significantly increased in mice treated with the extract whereas, at day 12 p.i., a reduction could be observed compared to controls (Figure6)。失去体重疟疾感染的指标。治疗和extract-treated动物,减少体重可以观察到而氯喹治疗预防减肥(数据未显示)。在一个平行实验,我们监测感染BALB / c小鼠的存活率与每一个酚类化合物剂量的6毫克/公斤体重(数据没有显示)。然而,酚醛树脂相比,并没有减少寄生虫血症的控制,因此,没有延长的生存p .鼠受感染的老鼠。

图6

鼠体内 Balanite 寄生虫血症的安卡来华strain-infected BALB / c小鼠治疗后50我的水提取(25 g / 100毫升)相比PBS-buffer-treated控制。政府进行腹腔内天3 2和1之前感染,感染的日子和天1,2,3,4,5,6,7,8感染后。Giemsa-stained涂片进行天4,6,8,10,12,15。

4所示。讨论

b . aegyptiaca(Balanitaceae)是一种广泛分布的植物在非洲和报道显示许多不同的生物活性,是由其皂苷成分(16)主要源于薯蓣皂苷配基作为唯一的糖苷配基。最近的一项调查证明固定油的药用评估b . aegyptiaca水果在体外(10]。在过去,温和在体外在一个从antiplasmodial活动决定的b . aegyptiaca茎皮IC₅₀价值55克/毫升(17]。没有发现antiplasmodial活动的中果皮水果从这个物种。因为据报道,生物合成途径薯蓣皂苷配基的存在在发芽的种子植物18),这些研究结果挑战了我们调查的提取Balanite通过索氏提取种子。

从原始提取一个水稀释的比例相当于种子的比例1:2000年种子检测在体外抑制的chloroquine-susceptible恶性疟原虫应变NF54,导致一个集成电路₅₀值为68.26克/L±3、5。尽管没有皂素苷派生的糖苷配基薯蓣皂苷配基通过GC / MS (Kaiser未发表),原油,未稀释的提取似乎含有成分溶解红细胞表面。

在体外活动(图相关联4蓝色曲线)发生的肟6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazine-5-one,因为没有复合的Balanite提取导致低50%抑制重组plasmodial M18天门冬氨酰氨肽酶(PfM18AAP)(图4粉色曲线)相比,粗提物的肟6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazine-5-one在场(图4蓝色曲线)。然而,提取的化合物的浓度过低对于一个成功的隔离和证明的原则分析抑制增长疟原虫体外。据我们所知,没有先前的研究化合物的文献。

综上所述,这些数据支持的决定2.35克/L的原油Balanite提取的提取是耗尽6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazine-5-one肟与确定4.8克/l

氨肽酶是metalloproteases裂开aminoterminal氨基酸在蛋白质生物合成。的天门冬氨酰氨肽酶展品外肽酶活动只对氨基酸性氨基酸谷氨酸和天冬氨酸盐从主机hemoglobin-derived肽。酶主要位于胞质但也可以贩卖parasitophorous液泡。Antisense-mediated击倒PfM18AAP结果以来致死表型恶性疟原虫在所有红细胞的阶段中表达的蛋白质是15]。

这两个酚类化合物2,4-di -叔丁基苯酚和2,6-di -叔丁基苯酚被GC / MS分析(数据确定2- - - - - -3)和适度的贡献在体外生物活性(图5)。坚决的集成电路₅₀值是50.29为2 M±3, 6-di -叔丁基苯酚和47岁的82M±2 5 2 4- - - - - -迪叔,分别丁基苯酚(数字5 (b)和5 (d))。然而,决定集成电路₅₀值为42.5M±3,当两个化合物结合,似乎有一个小的累加效应,但没有导致根除恶性疟原虫体外。

这些化合物与抗氧化作用相关的最近的methanolic蜈蚣提取物蜈蚣subspinipes mutilans(蜈蚣科),在中国和韩国传统医学用于治疗疾病,如痉挛、童年抽搐、白喉和破伤风(19]。此外,2,4-di -叔丁基苯酚表现出对参与生物抗氧化活性在体外活动分析(19]。符合2的观察,4-di -叔丁基苯酚显示抗氧化活性,这种药物也彻底清除活动展出。最近,油的抗氧化能力也被证明存在于Balanites aegyptiaca水果在体外(10]。

这两个酚类化合物2,4-di -叔,丁基苯酚和2,6-di -叔丁基苯酚已发现多种植物提取物。他们发生在芳香成分挥发油分数5个不同种类的沉香(20.),如Aquilaria sinensis(瑞香科),在鲜花的Gynura cusimbua(菊科)[21),在鲜花的Clusia物种(藤黄科)[22),在叶子的Pereskia bleo(仙人掌科)[23]。迄今为止,两个酚类化合物在植物的生物起源尚未阐明。可能的前体分子结构模拟这些三级酚醛塑料可能是叔丁基羟基茴香醚甲羟戊酸途径的推导。

其次,提取获得Pereskia bleo,阿里et al。24]讨论了发生这两种成分的吸收土壤中的化合物从塑料垃圾。我们没有数据支持最新发现的成分是植物起源或由于两组分的吸收。甲醇提取物总酚类化合物的含量是3.5%这是可比的Pereskia bleo(23),可能保护种子从氧化的脂肪油。

尽管固定油b . aegyptiaca水果展出抗癌活动肺、肝脏和大脑人类癌细胞系,细胞毒性无法被探测到的种子提取(数据未显示)。

迄今为止,只有两个在活的有机体内老鼠实验已经进行了纯植物成分或原油Balanite提取(6,24]。甾体皂甙balanitin-6和balanitin-7小鼠的存活率增加轴承鼠L1210白血病移植到相同的程度报告长春新碱(6]。

第二个在活的有机体内进行实验时原油Balanite提取证明温和antihepatotoxic活动与标准相比王亚南水飞蓟素(24]。的冻干提取Balanites aegyptiaca连续5天是口服药物的剂量1克/公斤。最后一天的治疗,肝毒素的口服剂量的扑热息痛(0.6克/公斤),诊断肝酶的活性测定。b . aegyptiaca只有一个相对温和的王亚南活动(24]。分析寄生虫血症,治疗感染BALB / c小鼠原油、水Balanite提取(50毫升的1,25 g干燥提取/ 100毫升溶剂)每天腹腔注射,天开始之前感染,感染的日子,持续到8天皮。虽然减少寄生虫血症可以观察到12天(图6),治疗没有明显的寄生虫,因此在这个时间;没有延长生存。的plasmodial M18天门冬氨酰氨肽酶抑制剂提取存在,然而,它的浓度可能太低了无法根除寄生虫。毒性问题预防剂量的性能升级研究。除草剂metamitron 4-amino-3-methyl-6-phenyl-1, 2, 4, triazin-5-one,因此,从其结构密切相关的6-phenyl-2 (H) 1, 2, 4-triazin-5-one肟。LD的₅₀metamitron雌鼠大约是1.4,和雄鼠在2.9毫克/公斤体重。它是一种神经毒性化合物。鉴于6-phenyl-2 (H) 1、2、4-triazin-5-one肟具有相同的效果,这将增强神经系统症状的感染BALB / c小鼠独立于寄生虫感染。由于缺乏知识的半衰期,吸收、分布和消除三个确定化合物的一种哺乳动物的生物,我们,因此,得出原油植物提取物以当前的形式和浓度并不减少寄生虫血症在活的有机体内。

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