文摘
背景。蜗牛的物种作为中间宿主与寄生虫病传播相关联。生物防治是更好的替代化学控制针对蜗牛。草药制剂的搜索不产生任何不利影响对非靶标生物和易于生物降解的仍然是一个高级研究科学家与替代螺剂控制相关的问题。方法。溶剂提取新鲜成熟的叶子美国初步、仁、和美国sinaicum测试对Biomphalaria alexandrina,一个共同的中间宿主曼氏裂体吸虫。氯仿的植物化学成分分析:乙醇提取物进行寻找活性有毒成分。致死浓度决定。结果。提取分离出成熟的叶子茄属植物物种被发现有molluscicidal属性。美国初步提取记录死亡率最高。不同溶剂提取物的死亡率相比时,最大()死亡率记录在乙醇提取物的浓度90 ppm美国初步。结论。成熟的叶子中提取的美国初步展出molluscicidal活动紧随其后美国sinaicum少一个美国仁。利用当地本土资源的研究提供了相当大的范围为蜗牛的molluscicidal代理。
1。背景
血吸虫病是一种寄生虫病,影响2亿人在不同的国家1,常常被认为是第二个最重要的寄生虫病后疟疾传染病的热带和亚热带国家(2),而被第三世界上最常见的寄生虫病的发病率总体负担,社会经济和公共卫生的重要性,和人类的影响(2]。使用螺剂来消除蜗牛向量被认为是选择的方法来消除血吸虫病(3]。几种不同的策略被用来控制蜗牛数量。尽管可用吡喹酮和一般非常有效,治疗是昂贵的和并不总是成功3,4]。在贫穷国家,schisotsomiasis很常见,生物防治作为血吸虫中间宿主的蜗牛和小束,看起来是可行的和有效的成本。控制寄生虫的中间宿主扰乱了整个生命周期,阻止感染的传播。有机合成螺剂已经广泛用于矢量蜗牛的有效控制5]。然而这些螺剂被认为是有毒的,不属预定目标的动物,可能会对水生环境造成长期的不利影响(3,6]。药用植物代表最古老和最广泛的形式的人类已知的药物,并已成为关注的焦点,molluscicidal代理的来源,因为它们更便宜和更少的有害环境比合成同行(3]。合成螺剂的高成本和毒性刺激植物更新兴趣螺剂(5,6]。
许多种类的茄属植物的叶子有molluscicidal属性但相对较少的工作进行了实地试验中的应用。在田间试验开始之前,更多的实验室测试,然而,需要确定(MLC50)最小致死浓度在50 ppm,值不同的物种,不属预定目标的生物毒性。埃及美国初步提取非常有效地控制寄生虫的中间宿主造成人类血吸虫病和肝片吸虫病7]。在目前研究3茄属植物物种(s .初步s siniacum和仁)为molluscicidal属性检查。
茄属植物仁是一种常见的杂草被称为红色水果龙葵,阿育吠陀草具有多种药用价值(8]。茄属植物siniacum植物与锡的高土地(野外)北西奈沙漠,山脉,已知植物多样性丰富。本研究的目的是为molluscicidal屏幕3茄属植物物种的活动,对成人b alexandrina蜗牛,并比较每一个植物物种的相对毒性。b . alexandrina是主要的蜗牛曼氏裂体吸虫的宿主,人类病原体在埃及。
2。材料和方法
2.1。测试的蜗牛
成人b . alexandrina(壳直径:12 - 14毫米)收集来自灌溉渠在吉萨和卡利亚个省。未感染蜗牛,也就是说,那些没有显示专利吸虫感染,在实验室条件下维持七天之前被用于我们的molluscicidal测试。十个蜗牛被分配给每个组和沉浸在未经处理的dechlorinated自来水或水提物治疗dechlorinated水(积极的和消极的控制)。植物提取物和毒性测试协议的准备和阿普尔顿改编自这些所描述的布兰肯布里(9,10]。
2.2。植物材料
植物研究在本研究中被选中的基础上ethnopharmacological信息来显示他们的医疗使用控制在血吸虫病流行区。的本地植物物种收集它们的自然栖息地,美国初步从尼罗河地区(Skarkia),美国仁,美国sinaicum收集从西奈适当的期间从2007年3月到2008年2月,由植物分类学者(Hesham El - Shamy博士学院农业、Zagazig大学埃及)。一个凭证标本收集的标本已经存入园艺、农业Zagazig大学系埃及。
树叶提取物对蜗牛的molluuscicidal活动进行评估来确定毒性。
2.3。植物提取物的制备和保存
一公斤(1公斤)每个脱水的植物叶子磨成细粒子和提取的两倍与2.5升每72小时的酒精在室温下颤抖。总提取物被过滤,然后集中在真空干燥减压在旋转蒸发器°C和最后的原油的总提取植物的叶子。乙醇提取准备泡叶子粉在晚上冷乙醇。
2.4。制备植物提取物在不同溶剂系统
不同的植物提取物是准备使用四种溶剂,即石油醚、氯仿、丙酮和甲醇应用一个接一个。分别提取收集。每个溶剂提取过滤、浓缩蒸发在旋转蒸发器和固体残留物被称重。每个提取的总收率从1公斤的叶子是:石油醚提取物、4.5 g,氯仿提取物、6.4 g,乙酸乙酯提取物、4.00克;和甲醇提取5.6 g。不同的测试稀溶液,从10到1000 mg / L,(我。e, ppm)准备从股票的解决方案,用去离子的和dechlorinated水,来确定和值。
2.5。Molluscicidal活动测试
Molluscicidal评价植物提取物进行根据世卫组织的指南(11]。10组未感染蜗牛被放置在玻璃坦克(容器)和一些沙子,蜗牛的食物,和1000毫升的去离子的dechlorinated池塘或自来水都洋溢着大气。试验在室温下进行(°C)。在每个设置,蜗牛被禁止爬行的玻璃容器通过细不锈钢网放在水面上。测试蜗牛是挑战与不同浓度的植物提取物(从10到1000 mg / L。经过24小时的暴露在植物提取物,蜗牛也会转移到新鲜dechlorinated和去离子水和维护另一个24小时。死蜗牛的坚决和确认,没有心跳和缺乏刺激的反应的脚冲木调查引起典型的撤军动作。控制解决方案也用去离子的,dechlorinated自来水。仅用去离子的控制实验和dechlorinated水(负控制)或氯硝柳胺(Baylucide WP70)(积极的控制)。Molluscicidal测试每个植物提取物剂量分别重复三次。蜗牛是无论是美联储还是不安暴露和恢复时期。LD50和LD90年(指植物提取物剂量在ppm,杀死50%和90%的测试蜗牛,分别)测定的方法Leitchfield和Wilcoxon (1949) (12与95%置信上限)。植物提取物引起,没有死亡率在1000 ppm被认为是不活跃的,并没有进一步的调查。
3所示。结果与讨论
3.1。长椅边观察
未经处理的水箱中的每个蜗牛(控制)最初撤回到壳但恢复正常活动大约45分钟后,移动的容器扩展。机械刺激作用于footsole时,蜗牛立即收回到它的壳。在测试蜗牛,活跃的植物提取物的毒性作用变得明显。有一个部分收缩(戒断反应)部分死蜗牛或任何收缩(死蜗牛)的机械刺激脚底钝针。有一个明显的肿胀cephalopodal质量。发展出血性“水泡”的腹侧表面脚底也会被记录下来。高剂量的活性植物提取物引起每一个蜗牛的cephalopodal质量成为严重肿胀,浮夸,未能回应与钝针机械刺激。观察粘液分泌在大部分的脚。
3.2。实验发现
从表1和2LC50,信用证90年叶中提取的s .初步sinaicum和年代。仁被提供。目前的数据显示,乙醇提取的美国初步叶子显示molluscicidal活动(LC最高90年= 5.95 mg / L),紧随其后美国sinaicum(6.04 mg / L)美国仁(8.95 mg / L)。这些类似于其他报告数据13]。丰富的植物在世界各地蜗牛传播疾病流行。可能表明许多植物具有molluscicidal特性仍有待发现。几种有前景的植物螺剂已确定。先前的研究已经证明效力显著水平的植物样本根据季节和地理位置的植物,这些植物的力量不可预测的趋势螺剂产生作用,对他们的选择控制程序(14]。超过100种茄属植物产于非洲和一些这些物种有被开发出来的15]。几个茄属植物物种的茄科被广泛用作绿叶蔬菜水果和药在不同的国家,在这项研究中美国初步,(图1),美国仁、(图2),美国sinaicum(图3)等功能美国初步测试对b . alexandrina蜗牛的中间宿主Schistosma曼。目前调查显示暴露的影响的不同浓度的三种茄属植物蜗牛,结果是同意的其他记录的结果(7,8,16,17]。
在暴露于活跃的植物提取物研究了在目前的研究中,蜗牛显示几个行为反应,包括描述的“窘迫综合征”(其他planorbid物种的18- - - - - -21表明中毒。肿胀的组织并不局限于触手,但涉及整个cephalopodal质量。根据(21),从这个观察是推理,cephalopodal质量的组织有积水,造成出血致死浓度的活跃的植物提取物。不过观察了在这个研究表明,活跃的植物提取物的毒性原则打扰脚底表面上皮的通透性,防止其正常osmo-regulatory功能(21]。亚致死剂量的毒性作用的植物提取物,然而,可逆接触后如果蜗牛搬到有毒extract-free水为复苏时期。这个观察是在协议与掠夺的结果和奥德里奇(1963)(18),和范Aardi Coertze (1981) (20.]Bulinus tropicus和Biomphalaria在暴露于铜。
4所示。结论
提出了研究的结果表明美国初步、美国sinaicum和仁拥有对蜗牛molluscicial属性b . alexandrina。乙醇提取物的美国初步有更强的molluscicidal活动比其他提取,因此它是最适合生物应用程序提供一个潜在的简单,容易获得,廉价的植物来源和环境安全molluscicidal代理控制人类血吸虫病。使用植物螺剂不仅可以消除合成螺剂进口昂贵的经济负担,而且还将刺激经济增长的小规模工业在发展中国家。如果植物螺剂成功应用,在长期可持续控制血吸虫病。
作者的贡献
第一作者构思的想法,设计了实验,训练助理样本采集、解释实验结果,并提供了重要的修订手稿。
第二作者实验室进行生物测定实验和植物化学的分析提取。
第三作者进行了数据分析和辅助规划的研究。
所有作者手稿准备和批准最终的手稿。
承认
作者感谢所有参与者分享他们的时间在这项研究工作。