文摘
背景。美国蟑螂人孔内病原体污染的医院卫生保健系统所面临的一个主要问题。目标。本研究的目的是调查美国蟑螂在伊斯法罕的真菌感染医院污水网络。的原则目标研究蟑螂作为一个向量的真菌和其他病原体。方法。研究descriptive-analytical的类型。共有55个美国蟑螂标本的人孔墙排水系统的7大医院被抓获。样本来自身体的表面,消化道,和蟑螂的血腔。标本被单独Sabouraud葡萄糖琼脂培养,和真菌被确定根据宏观和微观特征。结果。所有蟑螂收集医院感染了真菌。24(13感染和未感染)11(44%)雌性蟑螂,31(18感染和未感染)13(56%)雄性蟑螂,它被发现,40.00%被感染黑曲霉,3.64%的根霉,7.27%的青霉菌,5.45%的毛霉菌。6蟑螂没有酵母污染。17(30.91%)蟑螂被污染假丝酵母glabrata,23(41.82%)蟑螂被污染假丝酵母krusei,22与其他酵母(40%)蟑螂污染物种。这项研究的结果表明假丝酵母krusei患病率最高的孤立和35.37%的消化系统和真菌吗黑曲霉70.97%的蟑螂的身体表面。结论。结果强调蟑螂作为潜在致病性向量所扮演的角色在医院环境。因此,需要适当的管理控制在医院这种昆虫,以防止疾病传播。
1。介绍
蟑螂是地球最古老的居民之一,回溯到石炭纪,在2.5亿岁前(1]。他们缺乏特别适应像吸口器在某些昆虫如蚜虫和其他真正的bug (2]。超过4500种类的蟑螂已确定,其中40个物种与人类栖息地,而四物种是众所周知的害虫3- - - - - -5]。蟑螂有咀嚼口器和以各种材料(杂食性),协助机械传动的各种致病的病毒、细菌和原生动物给人类。蟑螂有一个世界范围内的分布,特别是在热带和亚热带地区,可以适应各种各样的环境从北极寒冷的热带高温(4,5]。他们的人口增长在炎热和潮湿的地方,特别是对食物和水的可用性(6]。
蟑螂吃不加选择地垃圾和污水,所以有大量的机会传播人类病原体(7,8]。同时,夜间和肮脏的习惯让他们理想的各种病原微生物的载体(2]。
Periplaneta美国(Linneaus, 1785)(布莱托帝:蜚蠊科)是世界性的蟑螂在城市污水中频繁出现的画廊和运输在人为环境中,传播的病原体;他们被认为是有害生物对人类,导致严重的健康问题,如过敏、哮喘等(9- - - - - -12]。
Periplaneta美国在伊朗是最大的物种发现的蟑螂。它起源于南美洲,长30 - 40毫米,红棕色的颜色。美国蟑螂的生活在炎热地区的建筑像厨房,加热房间,仓库,和污水处理系统4]。它往往从藏身处夜间喂养和其他活动(13]。成年蟑螂是长寿的,只要可以活到一年或更长时间,生产大量的卵囊在此期间,根据食物可用性(14]。
建立污水收集和传达城市污水,以防止污染的水土资源。一些种类的蟑螂等p .美国殖民污水,把他们变成一个合适的繁殖和生长环境,给人类带来严重的健康问题(15]。
蟑螂可以转移真菌,细菌,病毒,寄生虫,和其他医学上重要的致病剂在身体表面和粪便在感染地区,如国内的栖息地、医院和工业领域。从这样的环境中,这些昆虫收集重要的病原微生物有被隔离13- - - - - -18]。丰富的致病病原包括2种原生动物,15种霉菌和真菌,32种细菌(如志贺氏杆菌和沙门氏菌7)、1病毒和寄生虫导致损害人类粪便中检测到,在肠道,或表皮的蟑螂19- - - - - -21]。
医院,尤其是那些与传染性疾病,已成为主要地区的传播和传播感染和蟑螂、生长和繁殖的好地方,这样他们就可以机械地传送这些传染性病原体和导致各种疾病。因此,他们的斗争和控制创造一个安全的环境将达到的基本目标医院。美国蟑螂,由于特定的生物学行为,导致各种院内真菌感染在医院级别和传输驱散这些微生物在环境和人类的地方。七(内部和外部)被发现在污水网络七医院传染病病房在伊斯法罕。我们的研究的目的是调查美国蟑螂在伊斯法罕的真菌感染医院污水网络。
2。材料和方法
2.1。研究区域
本研究进行了在伊斯法罕城市(51 39°40′E 32 38°30′N)作为中央协调伊斯法罕的一部分,伊朗的中部省份。伊斯法罕的首都城市伊斯法罕省面积250公里2和1695789居民。这是第二个最多的大都市在德黑兰伊朗的中央。它的高度是1571米,纬度32°38′30“N,经度51 39°40′“E(图1)。这个城市坐落在一个干燥的半沙漠地区的年降雨量102毫米,平均夏季最大,冬季最低气温37.1°C和−5.81°C,分别为(22]。伊斯法罕城市有超过55375人孔的污水系统,平均深度9米的侧线条主干线和1米。大多数的井盖是铸铁有两个洞,和平均直径三厘米的洞。人孔的轴是由砖和水泥覆盖物,及其稳定温和的温暖和高湿度蟑螂(提供很好的条件23]。
2.2。收集蟑螂的方法
随机抽样策略本研究集群方法从内部污水网络人孔。基于样本容量的确定公式n=pqz2/d2z= 1.96,p= 70%问= 1−p= 30%d= 0.2,样本量计算∼21个样本。在这个descriptive-analytical研究中,55岁的美国蟑螂集群随机抽样从7所医院的内部污水网络人孔27个活跃的医院的市区城市伊斯法罕,伊朗,2016 - 2017年期间,这一定有大量的传染性,住院,和交通单位。如果没有足够的蟑螂在第一人孔,第二个人孔是使用。这七个医院已经选择这样一种方式,他们的分布表明整个城市伊斯法罕,即。,他们选择在北方,南方,东方和西方,以及伊斯法罕的中心。
直接收集(手捕捉)被用来收集蟑螂。蟑螂感染白色菌丝体是缓慢的。蟑螂收集而不被伤害。医院的名称和样品的确切位置是在一个标签贴在容器。白色的发霉的蟑螂都低于其他蟑螂。每个蟑螂是放置在一个无菌试管(猎鹰管15毫升),消毒前,伊斯法罕和运输到实验室卫生研究和培训中心,德黑兰大学医学科学院,为真菌检查识别和处理。
2.3。隔离蟑螂的真菌
在实验室里,蟑螂被冻结在0°C固定化10分钟。每个麻醉蟑螂在解剖显微镜下检查,使用标准的分类学和物种确认键。识别后,2毫升无菌生理盐水(0.9%氯化钠盐)添加到试管,和蟑螂大力动摇了2分钟。外部清洗后,蟑螂用70%乙醇为2分钟。然后,蟑螂被转移到消毒管和允许干燥。然后,每个蟑螂是麻醉chloroform-impregnated棉纸和固定工作。蟑螂的腿与无菌针固定的工作,和昆虫手术剪刀,蟑螂是回到身体的后面。蟑螂然后在无菌生理盐水洗两次3分钟去除酒精的痕迹,肠道是解剖无菌。肠道被浸渍在无菌条件下2毫升无菌生理盐水。每个蟑螂的血腔部分第一次均质,以及由此产生的混合物在一个无菌的容器,和2毫升生理血清添加到它。 The gastrointestinal tract and cockroach homogenate were individually placed in a microtube and homogenized by the vertex apparatus [24,25]。
2.4。真菌学的研究
结果浸渍培养Sabouraud的葡萄糖琼脂0.05%氯霉素和孵化37°C为2周。蟑螂悬浮液从每个部分在2000转离心10分钟进行真菌学的研究。然后,外部和内部的部分沉淀是培养在三个独立的板块包含1毫升Sabouraud与氯霉素葡萄糖琼脂。两个培养基从每个样本,准备一个孵化25°C和其他在37°C。盘子都为7 - 14天,在此期间,他们检查真菌生长。样品被纯化培养基,和微观识别最常见的真菌。样品生长在Sabouraud葡萄糖琼脂被净化。识别不同类型的真菌,真菌菌落的宏观性质,如表面颜色和殖民地,殖民表面的皱纹,辐射线或同心圆,平滑或压痕的殖民地,以及表面条件的殖民地,如白粉病、棉花、羊毛、丝滑,和特异性,以及微观特征研究[26]。
为了确定酵母,除了外表和殖民地特点,特别重要的诊断,他们的生理特性,识别和决心,更重要的是使用。为此,输卵管质量或生殖管测试和玉米粉琼脂试验进行调查chlamydoconidia,以及假丝酵母CHROMagar测试(26]。
2.5。输卵管或生殖管测试质量
为白念珠菌,萌发管测试进行区分白念珠菌和nonalbicans假丝酵母(NAC)。通过使用无菌针,一群纯酵母分别添加到无菌管包含人类血清1毫升的新鲜。悬架是储存在2°C 1到2个小时。然后,一滴上面悬挂在显微镜下检查了细菌的存在与否。胚的形成管酵母细胞的直径的两倍多,平行墙,没有低谷的萌发管形成确认酵母的存在白色念珠菌(27]。
2.6。Chlamydoconidia测试玉米粉琼脂渐变80文化
殖民地从CHROMagar SDA镀在玉米粉琼脂渐变80的形态学检查生产厚垣孢子、芽生孢子、菌丝,和支假菌丝(27]。
线性文化是由使用无菌循环的玉米粉琼脂培养基上的每个酵母殖民地包含80二层的1%。媒体被保持在30°C 72小时,直接在显微镜下检查24日,48和72小时。在这种情况下,白色念珠菌产生假菌丝,blastoconidia, chlamydoconidia。其他物种的假丝酵母不会引起所(27]。
2.7。文化CHROMagar假丝酵母媒介
的CHROMagar假丝酵母介质由蛋白胨(10克),葡萄糖(20 g),琼脂(15克),氯霉素(0.5 g),第九和显色(2 g)每升,pH值6.1。这个媒介是根据制造商的指示准备的,不需要高压灭菌,冷却后分发到佩特里板块。文化的浸染,孵化是在37°C。殖民地的出现,包括颜色、大小和质地CHROMagar假丝酵母分析了介质,(27]。
酵母与蟑螂都CHROMagar公司培养基培养(CHROMagar公司,法国巴黎)和保持在35°C 48小时。基于特定的培养基中创建的颜色,种类进行识别。这种媒介对酵母的识别是有效的白色念珠菌,假丝酵母tropicalis,假丝酵母krusei。这些酵母中创建一个殖民地的绿色,灰色,粉红色的颜色。文化的铬琼脂培养基上假丝酵母是有价值的,因为它易于使用,它能够隔离假丝酵母从临床标本,几个和识别的能力假丝酵母物种在临床标本一次(27]。
潜在的本研究的局限性包括如下:(1)从人孔的污水收集蟑螂,(2)真菌的隔离和文化,和(3)PCR方法因高油价和短缺材料由于制裁伊朗。
3所示。结果
总共55美国蟑螂,Periplaneta美国取样,研究污水人孔的研究医院在伊斯法罕。其中有24个(13感染和未感染)11(44%)雌性蟑螂和31(18感染和未感染)13(56%)雄性蟑螂。累积频率分布的结果不同的真菌物种从55分离出真菌隔离的基础上提出了美国蟑螂在桌上1。
所有蟑螂样品感染了8种不同的真菌的物种。35.37%的污染有关假丝酵母krusei和70.97%,至黑曲霉。从美国蟑螂霉菌和酵母都是孤立的。31岁的雄性蟑螂,15被感染黑曲霉1,青霉菌1,根霉,1毛霉菌13没有感染。24岁女性的蟑螂,7是曲霉属真菌感染尼日尔3,青霉菌1,根霉2,毛霉菌,和11没有感染。
与酵母真菌在雄性蟑螂,10例假丝酵母glabrata感染,15例假丝酵母krusei感染,16例假丝酵母kluyveri感染,5例假丝酵母viswanathii感染,5例没有污染的报道。
关于蟑螂的女性,11例假丝酵母glabrata感染,14例假丝酵母kudriavzevii感染,8例假丝酵母kluyveri感染,3例假丝酵母viswanathii感染,2例noncontamination报告(表2)。没有显著差异丰富的酵母真菌在雄性和雌性蟑螂,如模具真菌。
根据宏观和微观的观察,24蟑螂(43.63%)没有感染霉菌,22(40%)感染黑曲霉2(3.64%)感染根霉4(7.27%)感染青霉菌3(5.45%)被感染毛霉菌。
没有酵母分离出蟑螂白色念珠菌根据发芽管测试的结果,玉米粉琼脂,琼脂铬。基于特定的颜色在铬琼脂中创建假丝酵母中,酵母物种的鉴定。殖民地中创建绿色,灰色,粉色,确认的酵母白色念珠菌,假丝酵母tropicalis,假丝酵母krusei(26]。大型pink-to-purple酵母的殖民地假丝酵母glabrata据报道(27]。
酵母真菌分离的频率分布的结果从蟑螂显示6蟑螂没有酵母真菌污染。同时,17例(30.91%)被感染假丝酵母glabrata23岁(41.82)假丝酵母kudriavzevii,22(40%)与其他模具(表受到了污染2)。
4所示。讨论
本研究的主要目的是研究人类病原微生物(细菌和真菌)在外部和内部美国蟑螂的身体部位(Periplaneta美国)从医院在伊斯法罕城市下水道系统,伊朗。美国蟑螂收集来自不同人孔的下水道系统。这项研究表明,美国蟑螂的主导和积极的蟑螂在伊斯法罕的健康中心。
不同的致病性和不致病的真菌特工被从这只蟑螂在人类环境中恢复过来。Periplaneta美国可以携带致病真菌在其内部器官。因此,p .美国不仅仅是骚扰,它具有重要的健康危害机械向量。因此,大量的美国蟑螂的人口已经减少了各种控制方法,如垃圾的正确管理和有机废物处理、卫生、和使用安全的杀虫剂。显然,蟑螂的存在在敏感的环境中,医院,和房子比其他部分更危险由于特殊情况和特殊的人住院,会影响环境,人,和社区卫生。蟑螂的密度在大多数地区的医院和住宅,喂养的分泌物和粪便,传播广泛的致病原的能力使他们理想的矢量传输大多数医学上重要的微生物。现在,蟑螂获得感染来源,人类的食物,和粮食生产的地方,他们在该疾病的传播中的作用是不可否认的。Dehghani等人研究了蟑螂动物群和频率在人类居住的栖息地在伊斯法罕的北部,在萨因Shahr城市(28]。675年1000年研究房屋(67.5%)被所有生命阶段的蟑螂出没,和32.5%没有侵扰。出没的房子几乎没有的46%,30%中,24%有很高的侵扰。浴室和厕所是公认最出没的地方(41%)(28]。美国蟑螂的倾向自由移动和住在下水道,厕所、下水道使问题变得更糟。蟑螂的能力在病原体的传播是强调在许多类型的研究在这方面。传染性病原体由蟑螂可以感染人类,动物,食物资源在某些情况下(29日,30.]。本研究证实,这些昆虫在居民区被真菌污染的医学的重要性。总共有8种不同的真菌物种隔离从美国蟑螂。在这项研究中,大量的蟑螂从下水道系统标本(55号)被发现携带真菌病原体包括根霉sp。,毛霉菌sp,青霉菌spp。假丝酵母spp。,曲霉属真菌spp。因此,医学上重要的真菌的分离表明严重风险关心病人。虽然直接参与美国蟑螂的传染性病原体的传播难以证明,其他研究也孤立的,从蟑螂居民区和医院,医学上重要的真菌(24,31日,32]。
在目前的研究中,所有蟑螂样品感染了8种不同的真菌的物种。35.37%的污染有关假丝酵母krusei和70.97%,至黑曲霉。从美国蟑螂霉菌和酵母都是孤立的。31岁的雄性蟑螂,15被感染黑曲霉1,青霉菌1,根霉,1毛霉菌13没有感染。24的雌性蟑螂,7被感染黑曲霉3,青霉菌1,根霉2,毛霉菌,和11没有感染。本研究的结果对医学上重要的真菌分离出蟑螂同意一些研究者的结果。在一项研究在泰国,青霉菌种虫害和曲霉属真菌种虫害频繁出现在皮肤的16(35.6%),11(24.4%)蟑螂,分别为(32]。在另一项研究在巴西,假丝酵母sp。(38.6%),曲霉属真菌sp。(30.7%)青霉菌sp。(8.9%)是最常见的真菌恢复在蟑螂31日]。此外,在纱丽(伊朗),假丝酵母spp。曲霉属真菌spp。,红酵母属种虫害是最常见的真菌出现在蟑螂的表皮30.]。Kasseri et al。33]在库泽斯坦省,阿瓦士城,显示,真菌隔离的消化系统Periplaneta美国从住宅(Blattaria:蜚蠊科)被困33]。他们的研究结果表明,高百分比的蟑螂(88.6%)被发现携带真菌医学的重要性。总的来说,23真菌物种/属孤立的从美国蟑螂的消化道。真菌分离从蟑螂从住宅区域的物种曲霉属真菌,根霉,青霉菌,毛霉菌目,链格孢属,枝孢属,菌丝,Chrysosporium,假丝酵母,红酵母属,Zygosaccharomyces,Debaryomyces。假丝酵母仕达屋优先计划。(41.4%),曲霉属真菌spp。(37.1%)红酵母属spp。(27.1%)是最常见的真菌恢复蟑螂。白色念珠菌和假丝酵母glabrata最常见的属的物种吗假丝酵母。此外,黑曲霉和答:flavus最常见的属的物种吗曲霉属真菌(33]。
在Kashan调查(伊朗)2004年由Droodgar,真菌制剂在蟑螂的患病率是41.1%和22.8%,分别。假丝酵母spp。(39.5%),曲霉属真菌spp。(37。2%),青霉菌spp。(5.4%)有一个最大的流行所观测到的真菌(34]。在印度,假丝酵母种虫害和曲霉属真菌种虫害是最常见的真菌医学上重要的属蟑螂从医院和一个居民区35]。本研究的发现也显示黑曲霉(70.97%)是最常见的物种从蟑螂分离。此外,答:flavus和答:来自烟是最常恢复物种从蟑螂31日]。黑曲霉更频繁的居民区和医院24]。一项研究在医院环境中在阿瓦士城市,28真菌物种从成年苍蝇都被孤立。主要的真菌分离曲霉属真菌spp。(67.4%),青霉菌sp。(11.6%),毛霉菌目sp。(11%),假丝酵母spp。(10.5%)红酵母属sp。(8.4%)35]。
在目前的研究中,从外部表面研究的蟑螂,黑曲霉,青霉菌,毛霉菌,根霉模具、蟑螂,黑曲霉模具和胃肠道的蟑螂,黑曲霉和青霉菌是孤立的。假丝酵母glabrata被孤立于血腔、胃肠道和外表面,分别和2,12日和9例吗假丝酵母krusei分别也被孤立。铬琼脂试验是用于识别白色念珠菌,假丝酵母tropicalis,假丝酵母krusei和其他酵母铬琼脂法属于孤立的假丝酵母物种或其他酵母。Mirhendi和同事确定候选菌株分离患者样本和标准菌株假丝酵母通过培养假丝酵母铬琼脂培养基和显示,结果是在良好的协议与PCR_RFLP分子试验(26]。
我们有显示,美国蟑螂运输大量的医学上重要的真菌物种的消化系统,不道德,院内感染的重要药物。院内真菌感染发病率的职业的人被认为是重要的原因,尤其是那些长期留在医院(36]。2003年phelan研究的结果也表明,德国小蠊病原体的传播中发挥了非常重要的作用在医院(37]。蟑螂住在人类环境病因的重要媒介代理和所有组可能的病原体,如原生动物、细菌、寄生虫和病毒等。各种细菌普遍与这些昆虫是公认的相关适用腹泻,痢疾,在人类和食物中毒。在目前的研究中,黑曲霉和四种假丝酵母(假丝酵母kudriavzevii,假丝酵母kluyveri,假丝酵母glabrata,假丝酵母viswanathii从蟑螂)被孤立。黑曲霉模具是单独研究菌株的分离,黑曲霉和青霉菌从他们的胃肠道是孤立的。最后,所有的四个假丝酵母物种是孤立的血腔和胃肠道和蟑螂的外表面。正如前面提到的,不同种类的真菌在这个研究和其他类似研究孤立的蟑螂。在目前的研究中,第一次四个酵母菌株(假丝酵母kudriavzevii,假丝酵母kluyveri,假丝酵母glabrata,假丝酵母viswanathii)不是孤立的在以前的研究都是孤立的。高污染的蟑螂肯定与病原体会导致真菌传染病医院。鉴于蟑螂致病真菌的重要性,关注公共卫生和控制他们的需要控制不同的方式在我们的医院和医疗中心是必要的(30.]。每个医院都有真菌疾病的预后良好,医院和周边地区,是重要的及时诊断、治疗和控制的病人。由于所有这些医院传染病病房,偶尔感染发送到研究人员的报告。有时候,很多人从这些病原体感染,特别是,他们生活在这些医院。因此,这些医院的选择和抽样的美国蟑螂可以推广到整个城市。当然,这项研究的结果将使人们和政府官员意识到,将更容易和更实际控制这些疾病的向量。Zahraei-Ramazani et al。23)使用各种化学和物理方法来控制美国蟑螂(Periplaneta美国)人孔的市政污水处理系统在城市伊斯法罕,伊朗中部,伊斯法罕的城市互联网络(23]。他们的结果表明,几乎所有的产品(不包括硼酸鱼饵配方)导致适当的控制应用程序的一个月内。适当的产品化学防治蟑螂的毒死蜱5%制剂(EC),二嗪农(EC) 5%,二嗪农(EC) 0.05%,氯氰菊酯5%雾。这些杀虫剂实现最优人口减少,提供超过90%的控制蟑螂连续五个月。他们得出结论,能乳化的集中和雾配方与其他方法相比,更成功,因为他们能深深地穿透蟑螂的藏匿的地方(23]。
因此,真菌疾病的传播等因素的城市和医院的传播,特别是与传染病医院,以及城市污水卫生网络的装备和相关安装和分散的人孔检查在市政污水处理系统,将蟑螂从医院住宅和公共场所和传播真菌疾病。因此,执行各种方法控制蟑螂入侵前的城市空间网络蟑螂从人孔进入的地方,做和观察卫生点的人不建议防止蟑螂进入他们的居民区。蟑螂的控制,在医院尤其推荐。
5。结论
在这项研究中,酵母在伊斯法罕孤立的从美国蟑螂。病原体会导致真菌流行的高污染的蟑螂在医院和周边地区。基于这项研究的结果,黑曲霉,青霉菌,毛霉菌,根霉,假丝酵母glabrata,假丝酵母krusei模具从伊斯法罕蟑螂被孤立。当然,这项研究的结果将使人们和政府官员意识到,将更容易和更实际控制这些疾病。由于上述的致病性真菌的重要性,有必要注意公共卫生和消除这些昆虫。另一方面,认识常见的真菌在每个地区和每个医院真菌疾病的预后提供了一个很好的医院,这是很重要的,及时的诊断和治疗的病人。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
m . Kh。和M M导致了研究设计,数据分析和解释和提供最终版本的批准出版的手稿。l . SH。b和a z . r .导致了数据收集、准备、修订,编写和修订手稿。
确认
联合进行的这项研究是伊斯法罕卫生研究车站附属的德黑兰大学医学科学和伊斯兰自由大学。因此,这篇文章的作者从伊斯兰自由大学研究委员会,Falavarjan分支,批准这个项目作为硕士学生的论文。这是由于微生物学领域。本研究(项目编号:17230507942003)资助的伊斯兰自由大学研究委员会,Falavarjan分支。