文摘

这在体外研究旨在确定的活动粘菌素+ sulbactam和粘菌素+磷霉素对特拉答:baumannii(蟹)。15临床分离株从患者获得承认Phyathai二世国际医院,曼谷,泰国,从2014年8月到2015年4月。粘菌素的抗菌药物敏感性,sulbactam,磷霉素是评估使用电性能测试或肉汤采用和协同活动的抗菌组合(粘菌素+ sulbactam或磷霉素)决心使用棋盘格的方法。克隆的关系探讨了使用重复的元素回文——(代表)PCR。蟹隔离被REP-PCR分类8组[a]。蟹隔离都普遍容易粘菌素容易sulbactam但只有20.0%。粘菌素的麦克风范围、sulbactam和磷霉素是0.75 - 2 mg / L, 2 - 96 mg / L,分别和64 - 256 mg / L。一个棋盘格试验显示协同和添加剂影响利率的利率粘菌素+ sulbactam和粘菌素+磷霉素是隔离的53.3%和73.3%,分别。没有敌对的效果观察colistin-based组合。然而,几乎蟹株克隆一个显示colistin-sulbactam组合的协同作用或添加剂的影响,而影响其他克隆(b - h)主要显示漠不关心。 In conclusion, colistin plus sulbactam and colistin plus fosfomycin against CRAB seem to be interesting option but the efficacy in clinical use has to be evaluated.

1。介绍

特拉答:baumannii(蟹)是全世界最重要的病原体在院内感染导致高发病率和死亡率,增加医疗开支(1,2]。泰国国家抗菌素耐药监测的数据,2015年,显示答:baumannii排名第三和第二病原体分离出所有标本和痰液,分别。考虑到各种蟹菌株,报告显示答:baumannii70%抗imipenem或meropenem(国家抗菌素耐药监测,泰国,2015);因此,蟹感染难以在日益抗菌素耐药治疗时代。的各种策略来改善临床结果,并防止新兴治疗期间产生耐药性抗生素联合治疗(3,4]。

迄今为止,粘菌素(多粘菌素E)或多粘菌素B-based组合推荐治疗蟹,因为几乎所有的蟹仍然敏感菌株多粘菌素(5),而sulbactam和磷霉素有更好的药代动力学资料与中度和低蛋白结合。Sulbactam和磷霉素目前使用的最大剂量覆盖一些耐药菌株6,7]。某些研究侧重于确定的增效剂效果粘菌素+ sulbactam和粘菌素+磷霉素答:baumannii。这些以前的研究在体外合作表明粘菌素+ sulbactam可能联合治疗选择蟹治疗(3]。此外,粘菌素结合磷霉素显示协同效应或添加剂的效果对蟹或广泛耐药菌株a . baumannii但只有两项研究解决colistin-fosfomycin结合不和谐的结果(8,9]。

如前所述,由于不一致的结果colistin-based组合由于多种菌株用于相关研究从大学医学院、反思或很难推广这种协同效应的有益结果。因此,我们进行这项研究确定在体外粘菌素的协同效应+ sulbactam和粘菌素+磷霉素对临床菌株的螃蟹。

2。材料和方法

2.1。菌株

从住院病人临床蟹菌株承认Phyathai二世国际医院,一个拥有550个床位的私人医院住院病例在曼谷,泰国,从2014年8月到2015年4月。螃蟹被定义为抵抗imipenem, meropenem或doripenem根据临床和实验室标准协会特菌株的筛选标准(10]。临床分离株的螃蟹都是首先从各种标本中获得每个病人。蟹菌株都保持在−20°C到测试。机构审查委员会批准了研究协议豁免的知情同意(ID0013/59数量)。

2.2。克隆的关系

使用REP-PCR蟹的克隆关系进行评估的方法。PCR反应混合物被描述的其他地方(11]。短暂,一对引物(REP-forward: 5′-IIIGCGCCGICATCAGGC-3′和REP-reverse: 5′-ACGTCTTATCAGGCCTAC-3′)被用来放大代表地区在下列条件下,从在94°C加热10分钟,其次是30 94°C的周期为1分钟,1分钟45°C, 72°C 2分钟,最后16分钟72°C。REP-PCR产品进行使用琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色。分类的标准不同的克隆是一个模式,它不同于至少三个乐队或多个REP-PCR [12]。

2.3。确定最低抑制浓度

sulbactam的麦克风和磷霉素测定Epsilometer测试(电性能测试;Liochem)方法使用Mueller-Hinton琼脂(Difco、底特律、MI)板,具体来说,磷霉素的电性能测试补充glucose-6-phosphate (G-6-P)。粘菌素的麦克风是由汤采用使用Mueller-Hinton肉汤II (Difco)。抗菌剂的最低浓度,抑制明显增长的生物被定义为麦克风。质量控制应变构成大肠杆菌写明ATCC 25922[医学科学系的类型(DMST)文化收藏,曼谷,泰国),这是用于监控的准确性基于CLSI 2017麦克风的决心。

麦克风的结果sulbactam、粘菌素和磷霉素是使用标准的断点条件解释。粘菌素和sulbactam易感断点被定义为≤2毫克/L和≤4毫克/L,分别按照CLSI 2017。由于缺少一个标准的麦克风对磷霉素对断点答:baumannii在CLSI,麦克风电阻≤32毫克的断点/L建立了磷霉素抗菌药物敏感性测试根据欧洲委员会2017年(EUCAST)。

2.4。协同测试

抗菌组合的协同效应(粘菌素+ sulbactam和粘菌素+磷霉素)是由棋盘格的技术。这种技术进行与Mueller-Hinton肉汤II (Difco),补充了25μg / mL G-6-P磷霉素组合。所有样品都是在孵化37°C 18个小时。部分抑制浓度指数(FICI)计算每一个成对抗生素和被解释为≤0.5 =协同,0.5 - 1.0≤=累加效应,> 1 - 4 =没有交互,≥4拮抗效应。

3所示。结果

十五蟹分离获得从不同的网站。反复在同一病人没有特殊菌株(表1)。根据克隆关系研究,15个样品可以分为8克隆包括a -。大多数菌株在克隆一个( ),而剩下的7株被磁化的每个成员。

表1
最低抑制浓度(MIC)决心通过电性能测试和粘菌素的敏感性解释,sulbactam,磷霉素对特拉答:baumannii隔离。

在15蟹隔离,麦克风范围粘菌素,sulbactam,磷霉素0.75 - 2毫克/L, 2 - 96毫克/L, 64 - 256毫克/分别L。敏感菌株的比例是100和20粘菌素和sulbactam分别按照CLSI断点,但所有蟹菌株显示抗磷霉素EUCAST断点。

抗生素组合研究的棋盘格发现如表所示2。协同和添加剂的影响被发现粘菌素+ sulbactam 2 15 15隔离隔离(13.3%)和6(40.0%),分别为。协同和添加剂影响colistin-fosfomycin组合也见过15隔离(26.7%)和7中4例15分离株(46.7%),分别为。冷漠的影响被认为colistin-sulbactam和colistin-fosfomycin组合7 15隔离(46.7%)和4 15隔离(26.7%),分别为。同样,没有敌对的效果观察与任何抗菌药物组合的研究。

表2
抗菌素对特拉组合测试答:baumannii临床分离株利用棋盘格的技术。

4所示。讨论

根据这些结果,蟹隔离都普遍对粘菌素敏感。我们发现类似的几个相关研究在泰国,表明粘菌素仍然是大多数选择治疗选择蟹感染(8,13,14]。在几乎所有的蟹菌株耐sulbactam和磷霉素很高中等收入国家,86.7%的蟹隔离sulbactam麦克风≤32毫克/ L。这样一个麦克风阈值可以使用临床最大程度上的每日剂量处理12通用sulbactam [15]。这个12-gm日常养生也评估MDR的疗效和安全性答:baumanniiVAP [7]。因此,高剂量的sulbactam似乎是另一种选择,只要蟹感染病原体有麦克风多达32毫克/ L。

据说sulbactam不同,磷霉素作为高剂量疗程24 g /天,静脉注射和药代动力学研究8 g-fosfomycin每8 h在以稳定的速度上面显示的时间百分比麦克风是只有61%的中等收入国家32毫克/ L,分别。根据我们蟹菌株的麦克风有超过64 mg / L,磷霉素是不可接受的单一疗法由于固有电阻,但磷霉素的作用组合可用于蟹感染。

根据目前的发现,中等收入国家粘菌素+ sulbactam演示了在协同测试ΣFICI≤1(协同效应加上累加效应)53.3%。我们的结果类似于Pongpech等人,Cikman协同等人的研究报道53.3%和45.5% +添加剂对MDR colistin-sulbactama . baumannii分别为(13,16]。此外,Santimaleeworagun等人表现出协同作用+添加剂colistin-sulbactam组合对蟹率高达75% (8]。相反,Thamlikitkul和Tiengrim报告只有一个协同加添加剂18.2%这样一个组合(14]。

粘菌素+磷霉素组合的协同作用是有争议的。colistin-fosfomycin组合目前的研究和协同加添加剂的利率,而不同于Santimaleeworagun等人的结果显示,73.3%和37.5%,分别为(8),但魏等人表现出协同效应的colistin-fosfomycin一半的测试隔离(9]。只有两个报告colistin-fosfomycin组合,这种抗菌组合进一步研究证明colistin-fosfomycin对MDR的好处答:baumannii。

正如前面提到的,一个不和谐的合作发现了。几种解释包括各种协同测试方法(如棋盘格测试、电性能测试或time-kill方法)和不同的耐药机制进行测试答:baumannii在每一个在体外协同研究。在不同的协同测试方法的影响,Sesli Cetin等人发现,检出率之间的协同与sulbactam +添加剂多粘菌素的效果相同的样本答:baumannii菌株之间的显著不同的棋盘(5%)和电性能测试方法(35%)(17]。

关于克隆的关系在这项研究中,克隆一个(53.3%)是主要的。几乎蟹菌株在这一组显示的协同或相加作用粘菌素+ sulbactam,而其他REP-PCR组(b - h)主要显示冷漠一些抗菌素的效果。此外,某些菌株显示不同colistin-sulbactam和colistin-fosfomycin之间协同作用的发现。这些不同的影响个体克隆可能来自不同的耐药机制。雷特等人发现答:baumannii隔离窝藏blaOXA-23-like, colistin-vancomycin的结合,表现出协同作用但窝藏的菌株blaoxa - 143,只有40%的人给了合作colistin-vancomycin组合(18]。

尽管的协同效应在体外研究似乎是治疗的选择,最近的荟萃分析的临床研究发现,临床反应,死亡,住院的长度,或毒性,除了微生物反应,colistin-based联合治疗和粘菌素之间没有明显变化单一疗法答:baumannii感染(19]。因此,还需要更多的研究来证实的好处粘菌素组合蟹感染。

此外,我们只有棋盘格执行测试,但这是最广泛使用的方法(3]。然而,协同测试如time-kill研究或电性能测试方法应该执行。

5。结论

粘菌素+ sulbactam和粘菌素+磷霉素显示协同或相加作用一些螃蟹隔离。然而,由于高麦克风sulbactam或磷霉素,最大剂量被认为是在临床实践中。进一步的研究与一个更大的样本和更多的协同方法来评估在体外活动是必需的。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢Phyathai二世国际医院作为资金提供者。