文摘

假丝酵母是一种常见的机会性病原体的过程中人类免疫缺陷病毒(HIV)疾病进展。念珠菌病的临床严重程度和变化假丝酵母物种患病率资料可能是HIV阳性患者的免疫学变化的反映。本研究的目的是记录的变化模式假丝酵母物种患病率在艾滋病毒血清反应阳性的病人从三级保健医院在北印度。一百二十年艾滋病毒血清反应阳性的受试者招募假丝酵母微生物筛选。临床标本包括血液、口腔拭子、咯血或痰诱导/支气管肺泡灌洗标本,和尿液收集取决于病人的症状。总共有128假丝酵母从88例和7个不同的隔离了假丝酵母物种被确定。白念珠菌(50%)是最常见的物种隔离紧随其后c . glabrata(17%)和c . dubliniensis(12.5%)。其他物种隔离c . parapsilosis(7.8%),c . krusei,c . tropicalis(各占4.6%)c酸乳酒(3%)。强大的临床怀疑与最优抽样的准确诊断假丝酵母物种还有很长一段路要走参与减少与非相关的发病率白假丝酵母物种。

1。介绍

艾滋病(获得性免疫缺陷综合征)流行进入第四个十年,艾滋病毒的传播在世界大部分地区没有消退的迹象,尽管取得伟大的进步在应对世界范围内的流行1]。它仍然继续增长的国家的收入和更大的影响在发展中国家更脆弱,已成为一个全球危机以来发现在1981年的夏天(2]。在全球范围内,约有3530万人携带艾滋病毒,230万新的人感染,160万人死亡发生在2012年3]。

由于免疫系统较弱,受感染的人是放置在各种机会性感染的风险增加(4,5]。许多原生动物、真菌、病毒和细菌等负责感染(6,7]。真菌机会性感染的病人感染HIV是发病率和死亡率的主要原因8)和妥协这类人的生活质量。据报道,口腔念珠菌病最常见的真菌机会性感染,一些以前的研究(9,10]。的光谱假丝酵母感染是多样化的,从无症状殖民到口咽念珠菌病(OPC)、食管炎、甲癣,外阴阴道炎,皮肤念珠菌病和系统性念珠菌病或侵袭性念珠菌病,包括candidemia [11]。已经看到,几乎所有的艾滋病毒感染者都是殖民地假丝酵母和90 - 95%发展临床病变的病毒性疾病进展(12]。它也观察到低CD4计数和高血浆HIV RNA与口语水平显著相关假丝酵母马车以及艾滋病患者的口腔念珠菌病(13- - - - - -15]。这些数据表明,口咽的减少假丝酵母马车和口腔念珠菌病在艾滋病毒可以通过启动患者高活性抗逆转录病毒疗法(HAART)不需要特定的抗真菌治疗。因此提示诊断假丝酵母感染艾滋病毒的患者和免疫状态的评估可以有轴承等治疗感染,提高幸福指数的PLWHA(艾滋病毒携带者/艾滋病)。

虽然白色念珠菌经常是最孤立的物种作为一个殖民者和口腔黏膜的病原体,其他假丝酵母物种,如c . tropicalis,c . krusei,c . glabrata,c . dubliniensis,c . guilliermondii,c . parapsilosis,c酸乳酒,c . pelliculosa,已经成为一个重要的原因感染艾滋病毒感染患者(16- - - - - -18]。这些非临床的重要性白假丝酵母物种在于,他们通常更容易更常用的唑类抗真菌药物,一个因素,提出了重大困难的有效治疗(19]。因此现代真菌学实验室的重要作用几个方面有关这些生物,包括检测、鉴定、流行病学分析和治疗,试图更好地理解这些病原体,并提供一个有效的治疗(20.]。

鉴于上述这个研究来确定念珠菌病的患病率,来识别不同假丝酵母物种与因果关系,研究的关系假丝酵母感染HIV阳性患者的免疫状态最大的三级保健医院在新德里,印度。

2。材料和方法

2.1。研究人群

一百二十年艾滋病毒血清反应阳性的成人受试者参加门诊部门,艺术诊所,和那些承认在各个病房Lok Nayak Maulana Azad医学院附属医院,新德里,印度,参与了这个研究不论他们的抗逆转录病毒治疗状态假丝酵母微生物筛选。Lok Nayak医院2500 -层状三级保健设施拥有超过3000名患者参与抗逆转录病毒治疗的诊所。微生物学部门是一个地区的艾滋病毒/艾滋病哨点监测中心。

只有那些艾滋病毒血清反应阳性的受试者没有收到任何特定的抗真菌治疗前三个月了。五十年龄和性别匹配随机选择成人艾滋病毒血清反应阴性的受试者也进入微生物学、真菌学实验室的Maulana Azad医学院,新德里。

2.2。研究设计

这是一个横断面分析确定临床、免疫和微生物假丝酵母艾滋病毒的血清反应阳性的病例和艾滋病毒血清反应阴性的对照组。在报名一个获得知情同意,每个参与者被要求完成一个调查问卷包括社会人口和个人信息,现病史、临床症状和体征,等等。受试者上演按分期系统,范围从无症状的阶段(I期)轻微的症状(第二阶段),先进的症状(第三阶段),和严重的症状(四期)21]。研究期间从2013年5月到2014年12月。

2.3。样品收集

各种临床标本包括血液、口腔拭子、咯血或痰诱导/支气管肺泡灌洗标本,收集和尿液根据病人的临床表现以我们建立实验室协议使用标准的预防措施。所有标本都尽快运到真菌学实验室没有任何延迟和处理当天的集合。

2.4。实验室程序

艾滋病毒感染的诊断是由标准协议后在我们的综合咨询和检测中心,雇用了预备考试和测验后的咨询和艾滋病毒检测之前获得知情同意。三个不同的快速测试用于检测HIV - 1和HIV - 2抗体(CombAids(跨度诊断有限公司),Retrocheck艾滋病毒(Qualpro诊断),和Tri-Line(快速诊断方法)后,制造商的指示。

样品受到直接显微镜用革兰氏染色法,KOH潮湿的山,和印度墨水准备根据标本的类型。真菌文化是Sabouraud葡萄糖琼脂,有或没有氯霉素(16μ和环己酰亚胺(0.3 g / mL)μg / mL) +氯霉素(16μg / mL),脑心浸液琼脂,5%羊血琼脂。标本有一式两份;一组接种偏是孵化25°C和其他孵化在37°C,他们检查了每隔一天增长4 - 6周之前丢弃是负面的。在血琼脂是孵化样本接种24 - 48 h和样品在脑心浸液琼脂培养1 - 2周。真菌生长是通过菌落形态、革兰氏染色法,乳酚棉蓝色的准备,和谜的幻灯片文化按标准推荐程序。识别和物种形成的酵母分离的基础上进行萌发管生产、形态与80年青少年,玉米粉琼脂HiCrome假丝酵母琼脂,碳水化合物发酵试验,碳水化合物同化试验,Staib形态,咖啡酸柠檬酸铁琼脂按标准推荐的程序(22- - - - - -24]。

所有参与者的CD4 T淋巴细胞计数被正欲FACSCount系统决定的。本仪器适用于流式细胞术的原则(单个平台技术)(25]。

2.5。统计分析

数据统计描述的频率和百分比和95%置信区间计算患病率估计。CD4计数等连续定量变量的近似正态分布进行了分析通过计算均值,标准差和95%置信区间由学生的搭配以及。分类数据的手段比较使用单向方差分析测试。统计推断的采用显著性水平为5%。所有统计计算都使用计算机程序完成社会科学统计软件包(SPSS);美国SPSS Inc .,芝加哥,IL) 15 Microsoft Windows版本。

3所示。结果

120名研究参与者招募,有82男性和38岁的女性。参与者和对照组的社会人口资料表所示1。研究人口的百分之九十四属于群21-45岁性生活活跃的群体。我们的研究参与者的年龄范围18-55年。我们的大多数病人来自德里和北印度的邻国。所有研究对象的研究大部分是文盲或收到教育到高中。

表2显示了我们研究对象的临床资料。发热、体重减轻,咳嗽是最常见的症状在艾滋病毒血清反应阳性的情况下。白色口服补丁、口腔溃疡、燃烧排尿,吞咽和痛苦在28%,26%,20%,和13%的病人,分别。大部分患者(72%)属于临床三期或四期。

表3显示了免疫学的研究对象。的意思是CD4 T淋巴细胞计数艾滋病毒血清反应阳性的细胞研究参与者为272.3 /μ我在招聘的时候。CD4计数范围从25到758个细胞/μL 17%表现出严重的免疫抑制与CD4计数低于100 /细胞μl .患者单投诉,双投诉,三个投诉,投诉和四个单独相比有显著较高的CD4计数5患者投诉(均值和标准差如表所示3;值< 0.05)。受试者在他假丝酵母发现感染的CD4计数相比有显著降低受试者在谁假丝酵母没有发现感染(值< 0.05)。患者在临床I期,II期和III期有显著较高的CD4计数与病人临床四期(值< 0.05)。的120艾滋病毒血清反应阳性的研究参与者,42例(43%)在鸡尾酒疗法,其中34个患者一线治疗(齐多夫定+拉米夫定+奈韦拉平)和8例二线治疗(司他夫定+拉米夫定+奈韦拉平),其中4活性肺结核和四个表现出齐多夫定在一线治疗后引起的贫血。治疗病人的平均持续时间是10个月6天。

总共352 120位病人收集的样本。假丝酵母物种在128年被孤立样本88例,通常从口腔拭子(82 120)收集痰液和尿液标本,如表所示4。基于生殖管测试,形态学上玉米粉琼脂和HiCrome琼脂,发酵碳水化合物,碳水化合物同化试验白念珠菌(50%)是最常见的物种隔离紧随其后c . glabrata(17%)。c . dubliniensis(12.5%)被发现的基础上,菌落形态和厚垣孢子形成尼日尔种子琼脂,琼脂,咖啡酸柠檬酸铁和热测试45°C。其他物种隔离c . parapsilosis(7.8%),c . krusei,c . tropicalis(各占4.6%)c酸乳酒(3%)。64白念珠菌菌株,最大数量(38/64)是口腔拭子紧随其后痰(18/64)和尿液(6/64),而大多数的c . glabrata菌株(12/22)从尿液样本被孤立。c . dubliniensis,c . parapsilosis,c . krusei,c . tropicalis,c酸乳酒主要是检测在口腔拭子。在40/120的情况下,我们发现两个不同假丝酵母隔离但不相同的临床标本。

口腔拭子从60岁年龄和性别匹配的处理和艾滋病毒血清反应阴性的健康成年人白色念珠菌从17例孤立使用上述识别方法。

4所示。讨论

假丝酵母物种随处可见真菌导致免疫力低下的个人严重疾病如艾滋病患者非常不同的临床表现。他们可能是局部的嘴、肺、胃肠道或可能成为系统性败血症、心内膜炎、脑膜炎。念珠菌病是因延误诊断和管理缺乏可靠的诊断方法,允许检测物种水平。协助临床医生在治疗决策和优化治疗,临床微生物学家应该确定假丝酵母物种水平尤其是在HIV阳性的病人谁非白假丝酵母物种日益被造成严重感染。记住这一观点进行了这项研究建立的形象假丝酵母感染HIV阳性的病人和他们的免疫状态联系在一起有缺乏这些数据来自印度艾滋病毒血清反应阳性的人群。

艾滋病毒血清反应阳性的受试者的平均年龄在我们的研究中年的年龄范围18-55和年龄组21-45年是最常受影响的年龄段。有男性优势在我们的研究中观察到的男女比例2.2:1。这与人口相关变量的HIV阳性的人,突显出一个事实:男性相比,风险增加女性,因为他们的工作和习惯导致他们迁徙的女性相比。其他一些调查人员研究了假丝酵母概要文件和频谱机会性感染的HIV阳性的病人也报告了类似的结果(11,26]。

最常见的临床表现投诉我们的艾滋病毒血清反应阳性的研究参与者发热(70%)、体重(50%),和咳嗽(47%)。这些临床症状的HIV阳性的病人从医院临床情况的代表国家的艾滋病毒/艾滋病,非常类似于已经被研究者报道在印度其他地区(27,28]。出现白色口服补丁(28%)、口腔溃疡(26%)、吞咽和痛苦的患者(13%)出现在我们的研究构成口腔鹅口疮和食管念珠菌病的临床特征。这些有助于口腔摄入,减肥和明显影响患者的生活质量和被认为是临床疾病进展和免疫抑制的重要标志9]。燃烧排尿出现在30%的患者可能是由于尿念珠菌病。如与其他研究[10,29日),多数(79.9%)的HIV阳性患者伴有多个临床症状,72%的患者出现临床三期或四期事件在招聘的时候。

意味着CD4 T淋巴细胞计数的艾滋病毒血清反应阳性的研究人群在招聘/ 272.3细胞μL射程从25 - 758细胞/不同μl .类似的结果已经被他的另一位研究人员报道调查在中国艾滋病病毒感染者,其中平均CD4细胞计数253.4细胞/毫米³,范围从2到1050个细胞/毫米³在所有的病人30.]。在目前的研究意味着在88年患者CD4 T淋巴细胞计数假丝酵母142.6细胞/感染μL, 25 - 463细胞/μL和72±标准差。这是发现明显低于平均32名患者的CD4计数假丝酵母感染(412.3细胞/μL;256 - 583细胞/μL 93年和标准偏差;值< 0.05)。这表明细胞介导免疫反应是一个重要的宿主防御念珠菌病。这个观察已经支持的其他调查人员有很强的相关性的报道的发生念珠菌病在HIV阳性病人的CD4细胞计数较低(30.- - - - - -32]。这也强化了2013年世卫组织的建议开始治疗成人艾滋病毒感染者当他们的CD4细胞计数下降到500细胞/毫米³或少为了最大化,防止药物的好处假丝酵母在PLWHA相关的发病率。

在我们的研究口腔拭子最多的假丝酵母隔离其次是痰液和尿液标本。血培养标本展出的最低收益率假丝酵母物种。这些观察记录了其他一些研究也报道的最高收益率假丝酵母从口腔拭子和种虫害的最低收益率假丝酵母种虫害从血液HIV阳性患者的标本9,11]。无论艺术地位和样品处理的类型白色念珠菌(隔离总数的50%)的主要物种在我们的研究中恢复过来。这么高的隔离率白色念珠菌HIV阳性的患者符合先前的许多从印度以及国外发表的报告9,31日,33,34]。最常见的非白假丝酵母物种确认在我们的研究人群c . glabrata(隔离)总数的17.1%c . dubliniensis(隔离总数的12.5%)。表5显示的分布假丝酵母物种与HIV阳性的病人在印度在过去的几年里通过各种调查。较高的检测率c . dubliniensis在我们的研究可能是由于这一事实以前,这个物种由于其表型相似的面孔白念珠菌它现在正在越来越认可。

我们研究的另一个重要发现是普遍存在的假丝酵母物种明显高于值< 0.05)在HIV阳性的研究小组(88例的120招募;73.3%)和HIV阴性对照组(60招募了17例;28.3%),类似于其他研究的结果(30.,31日]。没有非白假丝酵母物种隔离在HIV血清反应阴性的对照组。

这项研究有一些局限性。以来在本研究样本量小,与更大的样本量要求进一步研究证实结果。缺乏使用基于PCR的基因型鉴定的方法假丝酵母物种可能会导致一些错误,误诊的假丝酵母物种。我们这里没有报道其他比真菌病原体假丝酵母种虫害孤立于临床样本作为本研究属于流行的假丝酵母种虫害。患者报告的临床症状可能是由于其他真菌以及nonfungal病原体。

5。结论

我们的研究提供了一个洞察的场景假丝酵母种流行的HIV阳性人群从新德里最繁忙的和最大的三级保健医院。假丝酵母物种是更频繁地孤立艾滋病毒血清反应阳性的人群和患者的CD4 T淋巴细胞计数假丝酵母感染明显低于那些没有的人假丝酵母感染。的比例假丝酵母引起的感染白念珠菌在艾滋病毒血清反应阳性的个体已经和分布的变化假丝酵母物种向非HIV阳性的患者白假丝酵母物种。这一物种都很少受抗真菌制剂,这占了他们成为一个重要的病原体。复发性真菌感染导致免疫功能不全的状态,反复接触抗真菌制剂负责这一转变的频谱在HIV阳性的情况下。使用准确、可靠的诊断方法,容易识别非白色的物种可能协助临床医生做出正确的治疗选择和检查抗真菌耐药菌株的出现。也为只有保留抗真菌药物预防严重和频繁的复发念珠菌病的艾滋病患者可以在避免抗真菌耐药性。

附加分

微生物学,研究执行部门,Maulana Azad医学院和Lok Nayak医院,阁下沙征服者高山草地,新德里,印度。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者要感谢Ritu Goyal博士Anupriya Wadhwa博士和Hitender Gautam援助。