检测军团菌从国内水种虫害Arta的县,希腊

文摘

本研究的目的是隔离的军团菌从国内供水网络种虫害Arta的县。共有100个水样,从25房屋、收集。一半的样品有关的冷水和热水供应的一半。目的是检测水网络的殖民军团菌spp。> 500 cfu / L通过使用过滤的方法(ISO 11731)。100个样本,6样本3房子都呈阳性军团菌spp。嗜肺性军团菌血清组在5 6 2 - 14是孤立的样本,而在第六个样本军团菌anisa被确认。只有三个样品的残余氯超过0.2 mg / L,这对饮用水是必要的,根据希腊卫生规范。热水的温度、负的平均温度军团菌样品的平均温度高于阳性军团菌样品(49.9°C和45.5°C)。据估计,有感染的风险通过使用淋浴。低浓度的氯和温度,发现有利的范围内发展军团菌spp。(20-45°C),为细菌的增殖提供肥沃的土壤。

1。介绍

1976年,爆发的严重肺炎在费城召开的美国退伍军人大会上进行的参与者中导致军团病的描述。这种疾病被发现由细菌引起的嗜肺性军团菌(军团菌在退伍军人的约定,被感染的瞭解意思是“lung-loving”),属于家庭Legionellaceae。军团菌一直回顾性确定为军团病暴发的原因,自1947年以来,(1]。

Legionellae全球自然水环境中无处不在。他们通过供水网络传播,公共和私人服务属性。

军团菌在卫生保健设施中影响主要是一种严重的病原体免疫功能不全的患者。这种细菌也会引起社区获得性肺炎,包括住院率很高。军团病也被认为是旅途感染肺炎的主要形式,和大约20%的病例发现军团病在欧洲被认为是相关的旅行;这些情况下存在一个特定的问题,因为在确定感染源的困难。虽然军团菌是一个公认的问题在发达国家,来自发展中国家的数据很少,和的问题吗军团菌可能是低估了(2]。

细菌是通过吸入飞沫传播包含Legionellae,通常被称为气溶胶。悬浮微粒直径小于5μ米更有可能引起严重的疾病,因为他们可以进入深深呼吸系统(3]。军团菌感染来源在3.2公里的距离。最近的证据表明,感染可能在更长时间的距离。军团病,然而,不能从一个人传播到另一个(4]。

军团菌引起的感染,从严重程度轻微发热性疾病(庞蒂亚克热)一个潜在致命的肺炎(军团病)。

这种细菌可以存活的环境条件。它已经被隔绝环境来源与pH值从2.7到8.3不等。温度20到45°C是理想的生物的扩散,35 - 45°C的最佳温度范围。随着温度下降,繁殖率下降,有很少或根本没有细菌数量增加,当温度低于20°C。军团菌低温可以生存很长一段时间,然后扩散,当温度增加。在66°C的温度军团菌死在两分钟,温度高于70°C他们立即被破坏2]。

变形虫和藻类等微生物的存在支持细菌的增殖。其他有利条件被认为是盐水,锈蚀、污泥和生物膜的形成(2]。

关于污染的正相关性军团菌种虫害已经观察到与加热器的类型,是否热水是由石油或燃气热水器或电加热器,以及地区的年龄和水加热系统(5]。

第一个证据,饮用水可能与军团病被托宾等人获得两个报告嗜肺性军团菌肾移植患者的血清组6隔离单元和孤立的类似压力从淋浴搅拌机在同一个单位6]。

有许多报道殖民的水系统等大型建筑物的医院,疗养院,酒店和当前知识军团病的流行病学的研究主要基于收集的数据爆发。另一方面,目前还没有做过任何研究的发展军团菌在小居民,与污染相关的因素,偶尔发生的流行病学情况下群体中获得军团病(7]。

在一个调查在加泰罗尼亚军团菌种虫害是8%的水样本中分离的124名退伍军人的疾病,患者血清组1的优势(8]。在另一项研究在意大利,涉及6个城镇,军团菌种虫害被隔离在22.6%的国内水样,血清组2 - 14的优势(7]。在先前的研究在芬兰和德国的发生Legionellae相似(30%和26%,分别地),血清组2 - 14的优势(9,10]。根据Velonakis等人的研究,在希腊,军团菌种虫害是独立于其他县(未发表的数据)。

考虑到数据的缺乏有关的殖民化军团菌仕达屋优先计划。在国内层面上,我们进行了一项研究,以估计的频率军团菌隔离从小型居民和确定因素促进细菌的生长。

本研究的目的是检测军团菌从国内供水网络种虫害Arta的县。“特殊研究的目的是评估的卫生条件家庭用水的供水网络Arta的县,有关的检测军团菌种虫害和最常见的血清型孤立。此外,研究结果将提供机会进行流行病学监测在发生疑似病例。

2。材料和方法

共100个样本,从25个私人住宅的淋浴Arta的县,收集。也收集一些额外的数据通过居民的采访,关于以下主题:(1)的年龄属性,(2)加热系统(中央或独立),(3)热水器的年龄,(4)未来的管道发生变化时,(5)在住宅的长度(连续或有时),(6)的频率供水的水泄漏或破坏,(7)居民的年龄和性别,(8)肺炎的病史。

2.1。样品收集

水样(500毫升)收集在黑暗的玻璃管,曾在180°C 2小时消毒。在灭菌前,0.5毫升硫代硫酸钠被添加到管子,以灭活从先前的使用剩余的氯管。管都被转移到实验室在等温冷却器温度之间6°C-18°C (11,12]。

收集关于冷水,两个样品从每个淋浴水龙头。第一个样本收集发布后第一滴冷水(直接样本)。第二收集2分钟后的水流(间接样本)12]。

两个样品的热水也收集。首先是收集发布后第一个下降(直接样本)和第二个1分钟后的水流,以达到最高温度(间接样本)12]。温度、自由氯和pH值在每个样品测定。

2.2。样品浓度和标准培养法

通过膜过滤水样本集中(0.45μ孔隙大小的过滤器)和真空。每个膜转移与10毫升林格氏溶液消毒管vortex-mixed 2分钟。减少其他微生物的污染,2毫升的悬架是热处理(50°C水浴中30分钟);0.1毫升热处理和未经处理的悬浮与定义在盘子里传播军团菌琼脂培养基GVPC。板块是孵化在37°C在湿润环境中至少2.5%的股份有限公司₂为10天。板块进行每两到三天在解剖显微镜。怀疑殖民地,斑驳的表面或一个彩虹色的“切碎玻璃”外观是计算每个采样。三种选择每次和亚文化在缓冲木炭酵母提取物(BCYE)酵母提取物琼脂cysteine-free琼脂半胱氨酸和木炭。只生长在殖民地BCYE凝集试验(随后被确认的2,7]。

3所示。结果

根据收集的数据通过采访居民,56%的房屋超过20岁,20%来自10到20岁,24%被建造在过去十年。所有的属性都独立的水加热系统。没有任何提到最近的水泄漏或水供应的中断。52%的性质发生了一些细微的变化在他们的管道系统。16%的房屋居住只是有时,其中一半人居住着超过50岁。这项研究是在9个月的时间间隔,完成从8月到4月。

3.1。冷水淋浴

关于直接洗冷水澡,36%的样品温度低于20°C,而64%的人的温度超过20°C。关于间接样本40%的人温度低于20°C和60%的人超过20°C(表1)。

样品测定的pH值7.5至7.9 >。更具体地说有4%的pH值7.5,pH值7.7 4%,12%有pH值7.8,4%有pH值7.85,20% pH值7.9,56%的pH值在7.9(表2)。

只有三个样品(8%)所残余氯超过0.2 mg / L,速度,根据希腊所需的饮用水卫生实践,而60%的样品有残余氯小于0.2 mg / L。

军团菌spp 3 50个样本中,检测出的冷水,2是直接样本和1一个间接的示例。1的2直接样品军团菌种虫害检测后热处理。嗜肺性军团菌血清组2 - 14 2的3个样本中,检测出的,而在第三个样本军团菌anisa被发现(表5)。

3.2。热水淋浴

热水澡,12%的直接样品的温度20 - 35°C, 32%有温度35 - 45°C之间,52%有45 - 60°C之间的温度,和4%的温度超过60岁^οC有关间接样本,下面的温度记录:35 - 45°C样本的16%,在64%的样品45 - 60°C,超过60°C的20%(表样本3)。

关于间接的pH值样本,测量在7.4和7.9之间。尤其是样本pH值7.4的4%,有16%的pH值7.6,pH值7.7 16%,16%有pH值7.8,40% pH值7.9,8% pH值7.85(表4)。

军团菌spp 3 50个样本中,检测出的热水,1是一个直接样品和2间接样本。在间接的样品军团菌种虫害检测后热处理。嗜肺性军团菌血清组(表2 - 14被发现在所有的3个样品5)。

4所示。讨论

在我们的研究中,军团菌种虫害被隔离在12%的国内水样。在研究也产生类似的结果,自来水采集标本65年房屋hematooncologic病人从医院出院。军团菌从六种虫害是培养家庭(9.2%)(13]。同样,在加泰罗尼亚的另一项研究中,军团菌种虫害是8%的水样本中分离的房屋124军团病的患者8]。

嗜肺性军团菌血清组2 - 14被确认在5 6阳性样本的研究。隔离的血清组引起兴趣,因为血清组1在环境样品中占主导地位。在加泰罗尼亚的研究军团菌pn。血清组1被隔离在6从9军团菌军团病的患者的积极的家庭。相同的血清组隔离在只有1的6积极控制房屋。其他5血清组2 - 14和其他的房屋Legionellae被确定。在我们的研究中没有参与者有病史的肺炎。这些数据可以支持先前的发现的理论辩护军团菌血清组1是最常见的导致人类疾病(14]。它也必须提到Legionellae物种和血清型不同变量水环境中生存的能力。特别是,退伍军人血清组1显示了一个特殊的生存能力在压力条件下,如更高的温度和氯水平,不符合其他血清型的生存。这使我们的结论是,通过使用常见的实践,例如增加水的温度或经常改变莲蓬头,我们可以减少水污染的风险军团菌血清组2 - 14。

1我们的6阳性样本的孤立的物种军团菌anisa。有必要记住,污染军团菌anisa有时可以掩盖一个进一步的污染嗜肺性军团菌血清组1 (15,16]。可能有一些原因可以解释上面的观察。一个可能的原因是,如果军团菌anisa污染水平高,尽管仔细观察每个可疑菌落,稀少l。瞭解殖民地可能掩盖了。另一个原因是,嗜肺性军团菌更耐化学和热冲击。热休克可能因此不太成功的影响l。瞭解比l . anisa废除内细菌干扰,使其更容易检测样品l。瞭解微生物。此外,热休克应用于供水系统可能扰乱了生物膜,导致之前的循环固着细菌(15]。

关于热水,负样本的平均温度军团菌的平均温度高于阳性军团菌样品(49.9°C和45.5°C)。这些发现同意研究在芬兰,平均水温加热后稍高军团菌,负系统比军团菌阳性系统(53.5°C和51.5°C),以及在研究在俄亥俄州,热水器温度与较低军团菌殖民(9,17]。另一方面,在一个调查在意大利的存在军团菌是不受水温影响7]。

残余氯中起着非常重要的作用在水的清洁度。余氯检测我们的样品显示,只有三个样品都超过0.2 mg / L,而60%的样品有残余氯小于0.2 mg / L。国际文献的研究报告,没有发现军团菌种虫害残余氯超过0.4 mg / L时(18]。然而,其他研究已经揭示了相反的结果,根据l。瞭解反复隔绝氯化水系统,表明这种治疗不是有效地防止殖民19]。

贝茨等人的研究中使用相同的诊断方法在我们的研究中,没有一个100年收集的样本阳性军团菌spp。同样的样本检查与其他两个方法:PCR和DFA。12个阳性样品产生的PCR方法军团菌spp。,其中6个是积极与DFA方法(20.]。类似研究的结果是Edagawa等人在130年总共只有4个样品给了积极的结果军团菌种虫害使用文化方法,而26个样本显示积极当PCR法(21]。

它也必须考虑,当使用PCR方法恢复环境样品的微生物,总有风险,孤立的DNA可能不会来自活的微生物细胞(22]。

样品收集发生在8月和4月之间,因此包括所有季节。尽管所有积极的样本收集在九月和十月初,季节,通常与退伍军人的疾病,很难讲水污染的季节性变化,由于这项研究没有进行第二次重复检验的样品在冬天。上面的模式被认为反映了气象因素如温度和湿度增加观察在夏季和初秋(23]。此外,据研究国内水龙头在美国中北部(美国)独立生存的变形虫,Vahlkampfia和Naegleria变形虫检测主要是在秋天(24]。

最近的研究表明,污染的水常年稳定,不仅涉及的物种军团菌孤立的,但同样浓度(17]。

我们的观察表明,军团菌物种检查时应考虑环境污染,这是至关重要的,以更好地评估环境风险因素和选择最合适的预防和控制措施。限制军团菌殖民在国内层面上,我们建议简单和通用措施:(1)保持较高的清洁标准,(2)增加水的温度,和(3)定期更换组件的系统可能存在或传播的细菌。

5。结论

根据我们的研究,据估计,有感染的风险通过使用淋浴,考虑的两三个房子,在那里军团菌发现,居住着与其他慢性疾病的老年人。

我们研究的结果同意在希腊Velonakis等人的研究,在那里军团菌种虫害已经独立于其他县(未发表的数据)。

的温度,发现不仅有利于开发范围内军团菌spp。(20-45°C)还在风险最高范围内(35 - 45°C)的发展的理想区域军团菌spp,低浓度的氯的发展和扩散提供肥沃的土壤细菌和其他微生物。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

引用

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