评估子宫肌层的浓度的雌激素和孕激素受体在足月妊娠的子宫下段劳动的存在与否

文摘

客观的。评估孕酮的浓度(PRs)和雌激素受体(ORs)足月孕妇的子宫肌层的子宫肌层的子宫下段与是否存在劳动关系。方法。这是一个代表性的前瞻性研究与21个孕妇、6在劳动(我组)和15名没有劳动(II)组,子宫肌层的活检是意识到在剖腹产手术,切除组织使用免疫组织化学染色技术量化的受体,并借助图像分析软件,为每个激素受体的数量确定spectrophotometrically。Mann-Whitney测试是用来比较每个研究小组的孕妇对口服补液盐和PRs的数量。Wilcoxon测试被用来比较口服补液盐的浓度和PRs分别在每组。结果。孕龄的意思是39周(范围、37 - 41周)。PRs的中位数和口服补液盐在孕妇劳动(我)29.3(范围24.6 - -30.2)和32.3(范围22.9 - -49.0),分别。PRs的中位数和口服补液盐在孕妇劳动(组2)分别为43.6(23.6,-70)和43.9(范围18.3 - -62.6),分别。我们没有观察到显著差异的口服补液盐的数量和PRs两组(和0.37,分别地)。口服补液盐的数量统计PRs的多组二世(Z计算= 16.00)。结论。PRs的浓度和口服补液盐类似子宫肌层的孕妇的子宫下段,没有劳动力,但口服补液盐的浓度超过PRs的子宫肌层与子宫下段的孕妇没有劳动。

1。介绍

荷尔蒙变化的时候分娩子宫肌层的收缩可能构成一个重要的监管机制。在一些物种(如羊),突然改变循环皮质醇,雌激素和孕激素似乎是工党的发病的重要因素,而在人类,这些迹象仍然未知1- - - - - -10]。因此,我们调查的浓度(ORs)雌激素受体和孕激素受体(PRs)在人类女性怀孕,因为当地修改这些受体可能与子宫肌层的条件负责有关分娩的机制(1- - - - - -10]。

之前的研究在激素浓度劳动力未能证明其直接参与重大变化表明劳动力;然而,当地的激素受体的变化被认为是负责分娩(4,5,11]。接近,孕激素的影响可能会被遗传机制涉及一个或多个代理与受体(1,2]。这种遗传机制可能会导致孕酮的衰减的影响,例如,一个特定的基因中断其作用在分子、生化和/或细胞水平(1]。确凿的这些研究回顾,门德尔松假定增加炎症反应发生的核转录因子的激活(κ)β,导致子宫收缩性在两个方面:(1)收缩的直接激活的基因(例如,cox - 2、催产素受体和联接蛋白43)和(2)一个封锁的孕激素受体的能力(PRs)维持子宫静止5]。

根据之前的报道,PRs的浓度下降期间观察到患者劳动力(4- - - - - -12]。尽管如此,抑制的影响gestagenic代理不会导致立即开始劳动,虽然这抑制tslp子宫肌层细胞诱发子宫收缩性的代理。相比之下,雌激素使子宫肌层由诱导催产素受体为分娩做准备,这可能是分娩的第一步(5- - - - - -10,12]。

最近的研究也表明,孕酮的撤军是分娩的发起者,他们展示了A和B的浓度PRs的重要性和他们的关系在分娩机制(5- - - - - -10,12]。目前,其他方面也出现分娩所需的。子宫颈的变化,例如,与受体的表达,修改本地胶原蛋白的改造等机制,炎症细胞的迁移,细胞外基质的变化作为一个整体(9,13- - - - - -15]。

量化的口服补液盐的浓度和PRs子宫肌层在劳动力,一个前瞻性研究,包括21例旨在评估这些受体的浓度在子宫肌层的细胞的表面组织切片的过程中收集的足月孕妇剖腹产与劳动力的存在与否。

2。材料和方法

子宫肌层的组织活检获得的执行在21个足月孕妇剖腹产(37 - 41周)。六名女性在劳动力(意味着39周,37到41),和15没有劳动力(意味着39周,37 - 41周)。所有受试者签署知情同意书之前纳入研究。这项研究是评估和研究伦理委员会批准的联邦大学的圣保罗(UNIFESP)。证实了孕龄末次月经的日期和/或超声的第一和/或第二三学期制。女性被认为是临产的评估的基础上,工党的症状和/或体征:主教得分大于或等于5,两个或两个以上的子宫收缩持续超过40秒10分钟,在初次分娩的妇女宫颈扩张2厘米和3厘米多产的妇女,并暗示胎儿。

剖腹产指征的患者在工党如下:两个或两个以上的前剖腹产胎儿窘迫的演变过程中观察到劳动力,和初次分娩的妇女在臀位。排除标准是难产,患者临床、和/或产科并发症和患者接受感应/办理劳动与催产素或前列腺素,使用药物除了复合维生素。

在剖腹产(胎盘驱逐之后),子宫肌层被删除的一小块的中上部分切口(子宫切开术)研究员(JSA),总是使用相同的技术:0.5厘米³的切除的子宫肌层借助手术刀,排除子宫内膜和内脏腹膜,然后进行正常的子宫切除缝合。从每个活检获得的材料放置在10%缓冲甲醛最多48小时,随后在一个Autotechnicon (Autotechnicon处理,昌西,纽约,美国)12小时(一夜),使用酒精、二甲苯和石蜡。处理后,样本被放置在磁带和嵌入在石蜡(苏丹细胞学产品有限公司,阿雷格里港,RS,巴西)。包含组织的石蜡块加工材料在冰箱里冷却,减少旋转切片机获得4-micron-thick组织学部分使用一次性剃须刀(莱卡)适合这一目的。获得的石蜡丝带的切片机切片过程仔细地放置在一个组织学水浴,和部分沉积在precleaned幻灯片涂有一层特殊胶改善组织粘连(VER-SA + Euriegas)。幻灯片被放置在一个实验室烤箱1小时。

免疫组织化学准备过程如下。(1)制备的组织学部分:在二甲苯在室温下15分钟,洗两次,其次是100%的乙醇(3次)30秒,95%乙醇为30秒,80%乙醇为30秒,30秒,70%乙醇,最后在跑步和蒸馏水清洗。(2)抗原检索:在温湿的孵化,孵化柠檬酸缓冲(10 nM, pH值6.0)在轮船t (fal) 20分钟。

免疫组织化学可视化包括以下步骤在使用streptavidin-biotin过氧化物酶的反应复杂(StreptABC)。(1)幻灯片是孵化与特定的抗体(单克隆ER (1 b) /公关(2 b)) 30分钟在一个潮湿的室。(2)幻灯片在Tris-buffered盐水洗(Dako TBS)和缓冲交换每3分钟。(3)幻灯片被孵化与生物素化的二次抗体(anti-immunoglobulin动物物种的特定的抗体得到)在一个潮湿的室为30分钟37°C。(4)幻灯片在缓冲与三个交易所再次清洗,每隔3分钟。(5)启示和安装:幻灯片被孵化基质溶液(diaminobenzidine;轻拍,60毫克%)3分钟37°C在黑暗中。积极控制幻灯片然后通过显微镜观察发展的金沉淀,最终产品的反应;幻灯片是在跑步和蒸馏水洗3分钟,与哈里斯苏木精复染色30秒,并在运行和蒸馏水清洗。幻灯片被脱水在50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇和100%乙醇(3 x)其次是二甲苯(3倍),安装在Entellan盖滑(默克公司1.07961)和光学显微镜下检查由三个病理学家确认组织样本的适用性。 The pathologists also verified whether scarring from previous caesarean sections would interfere with the results, which was avoided by observing specific areas for study.

口服补液盐和PRs的定量分析进行了使用计算机图像分析程序(ImageLab)。量化的地区被这两个激素受体,微观领域的422年μm×322μ米被抓获的放大100倍光学显微镜的同时保持几个标准化设置(Leitz则Carbelux模型6 mbh)。Leitz则一个Wetzlar-160/0.17计划10/0.45镜头在最大光强度与最大电容器使用光圈从滑动的距离6.5厘米。

数字化领域的水平和垂直分辨率的分辨率为640像素480像素在24位颜色(1600万色),同样的颜色范围中使用的区域是量化的每个领域。隔离的颜色范围是调整区域代表了口服补液盐和PRs的形象。从获得的平均价值分析领域每个幻灯片都是由考虑两个参数:所占据的比例的区域激素受体和反射光的光密度的受体。为了避免可能的主体性,所有检查材料被每个病人的病历号码识别,收集到的数据和结果只在研究结束的比较。病理解剖学实验室技术员根据条目的顺序编号的患者的活检材料实验室,使病人编号1至21日的统计分析。医疗记录的姓名和电话号码被保留,便于识别。因此,患者相比,劳动而不是劳动可以轻易地在研究结束后,考试的幻灯片。

所有数据都存储在Excel 2007(美国雷德蒙的微软公司(Microsoft Corp .),佤邦)的电子表格和分析社会科学统计软件包(SPSS)计划,19.0版本Windows(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。Mann-Whitney测试是用来比较每个研究小组的孕妇对口服补液盐和PRs的数量。Wilcoxon测试是用来比较的数量与PRs的数量每组口服补液盐。斯皮尔曼相关系数(r)被用来研究可能分别口服补液盐和PRs每组之间的关系。重要性水平(P)< 0.05。重要值都标有星号。

3所示。结果

PRs的中位数和口服补液盐在孕妇劳动(我组)分别为29.3±2.38(范围24.6 - -30.2)和32.3±10.92(范围22.9 - -49.0),分别。PRs的中位数和口服补液盐在孕妇劳动(第二组)分别为43.6±14.94(23.6,-70),和43.9±13.17(范围18.3 - -62.6),分别。我们没有观察到显著差异的口服补液盐和两组PRs Mann-Whitney测试(P= 0.13和0.37,分别地)。

的Z两组之间的关键是1.96(雌激素Z计算= 1.56和孕激素Z= 0.93)计算,证明不同浓度的两种受体在子宫下段的孕妇的子宫肌层,没有劳动力(表1)。

口服补液盐的数量统计超过PRs的子宫肌层的子宫下段组II(组我计算= 0.94和第二组计算= 16.00)。我们观察到,PRs和口服补液盐浓度较小的子宫肌层的子宫下段组我,这些浓度较高组II(组我计算= 0.49和第二组= 0.74)(表计算2)。

4所示。讨论

分娩知识的机制应该允许患者早产和postterm怀孕患者得到及时的治疗,减少并发症的条件(2,3,14,16]。最近的工作表明,减少孕酮B受体的数量,有利于提高孕激素受体的表达,结果在一个触发机制,提升者的劳动(5- - - - - -7,9,10]。因此,这些作者建议孕激素功能撤出。

本研究的结果表明,PRs浓度的差别,对这些可能与人类有关分娩,或者至少启动。因为没有重大变化在口服补液盐指出数字在劳动力或nonlabour条件,雌激素行动可能会保持不变。一个常数的雌激素水平也保持口服补液盐和PRs的状态,考虑到知名upregulation激素受体,雌激素和孕激素受体的差别,对这些基因(1,2,4,11]。持续的另一个含义或水平可能是由于雌激素刺激子宫肌层的观察,增加催产素受体的水平,并诱发炎症过程目前已知参与分娩(5,6,9]。

本研究证实了以前的一些研究的结果,尤其是来自担任我们的模型的研究,也就是说,upregulation口服补液盐和PRs。当公关数减少,更少的表达下降或数字,和PRs显然倾向于减少病人在劳动力8,10]。我们注意到,本研究进行了子宫肌层的子宫下段,类似于Rezapour等所做的研究。8)和温克勒et al。10),我们观察到低浓度的PRs子宫肌层的子宫下段。这项研究由Merlino et al。6需要修正的受体分析由于小数量的子宫颈癌,子宫肌层的细胞也与本研究的结果一致。

类似的研究温克勒et al。10),在目前的研究中,倾向于减少数量的PRs观察在初孕妇劳动主教得分等于或小于5。根据研究[6),低浓度的PRs的事实被发现可能是由于缺少特定的受体类型分析。作者表明,PR-A PR-B期间增加劳动力的比率。他们也研究了孕妇受到选择性剖腹产,在这两个术语和早产怀孕,虽然不是在劳动。他们的研究结果表明,PR-A / PR-B比率0.5维护和早产怀孕这个词,而在劳动,支持PR-A的比例翻了一倍,一个值的2.5/1。他们得出结论,“这些发现与之前的研究相一致,支持假设人类分娩涉及特定的比率增加PR-A / PR-B子宫肌层由于PR-A表达增加(6]。这个结果引起特别注意的不同激素浓度的孕妇没有劳动的迹象或症状。浓度之间的显著差异被发现在nonparturient女性激素受体,而在分娩的女性没有区别;似乎存在一个恒定不变的类固醇受体在子宫肌层的数量显然是在劳动活动中,这也可能被解释成上述假设的门德尔松(5]。

不同的方法用于评估研究激素受体的浓度在我们的研究和其他允许的确证在其他分析使用不同方法获得的结果。因此,值得注意的是,这项研究和量化或公关不费力而昂贵的使用方法在目前的研究开发。此外,这种方法可以广泛应用于其他研究。本研究之间的相似之处(6),目前的研究如下:患者进行选择性剖腹产;也就是说,他们不是在劳动力;由于产科产妇受到剖腹产要求根据临床标准和分布式劳动力存在与否的评估;活检得到子宫肌层的子宫下段,上部的帝王剖腹术切口;我们试图把整个组织,不是子宫肌层。然而,作者指出,尽管严格采用子宫肌层的组织切除,可能是有一些污染与其他组织。

在子宫肌层上的其他研究,Merlino et al。7]调查核孕酮受体的表达在胎儿膜和蜕膜,前后生产的开始。他们的研究结果表明,蜕膜,而不是胎儿膜,在怀孕期间的直接目标是核公关,因为受体只是蜕膜中检测到。

本研究的局限性是小样本。我们很难只包括孕妇的标准与自发的劳动力(I)组和排除难产,剖腹产的迹象导致这个小样品。

目前的研究是按照文学,显示类固醇受体的改变网站和协助理解劳动的可能机制和如何干预在这种情况下如果必要,例如,在妊娠早产和延长。最后,需要一个动物模型类似人类的分娩的生理系统也是必需的,允许进行更详细的研究在活的有机体内。

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