文摘
子痫前期(PE)的一个主要原因是孕产妇和胎儿的死亡率和发病率。体育与炎症和氧化应激状态,孕产妇循环。我们的目的是评估和比较氧化应激和炎症标记物的水平在孕产妇和脐血(UCB),在正常和PE怀孕。我们测量急性期蛋白(CRP和α1-antitrypsin),促炎细胞因子(il - 6和TNF -α),白细胞激活(弹性蛋白酶、乳铁蛋白、sL-selectin sVCAM, sPECAM)、总抗氧化状态(助教),硫代巴比土酸活性物质(TBARS)和尿酸水平。我们对42例健康孕妇进行了研究,46 PE女人,和他们的新生儿。il - 6的浓度,TNF -α,α1-antitrypsin、CRP、sVCAM、尿酸和TBARS明显更高,和sL-selectin显著低于PE孕妇与血压正常的孕妇相比。在新生儿尿酸,α1-antitrypsin, CRP值明显高于体育;白细胞计数,sL-selectin、乳铁蛋白和比弹性蛋白酶/α1-antitrypsin显著降低。我们的数据表明,PE怀孕与一个增强孕产妇炎症条件有关,这是反映在胎儿血液循环。这种增强的炎症状态似乎与内皮功能障碍和细胞因子的合成增加,而不是与中性粒细胞激活。
1。介绍
子痫前期(PE)是人类特定的怀孕和多系统紊乱,这可能会导致孕产妇和新生儿发病率和死亡率。这种综合症的具体原因尚不清楚,尽管激烈的调查。据报道,血脂的改变(1),白细胞激活(2),增强炎症反应(3),和氧化应激4),在孕产妇循环,经常与这种疾病的发展。在PE, hypoperfused胎盘是一个潜在来源的活性氧(ROS)和细胞因子(5,6),这可能会引起氧化应激和内皮细胞功能障碍,以及炎症反应,在母亲。
炎症反应通常是伴随着促炎细胞因子浓度的增加,急性期蛋白质和可能包括白细胞激活(7]。肿瘤坏死因子-α(tnf)和il - 6的促炎细胞因子在免疫激活似乎发挥了作用在体育8]。c反应蛋白(CRP)和alpha-1-antitrypsin迅速增加在炎症刺激反应(9]。增加循环白细胞炎症,通常观察到和细胞粘附分子(CAM)白细胞和内皮细胞之间的相互作用的关键。L-Selectin是一种糖蛋白表达的几乎所有的白细胞,负责白细胞粘附在血管内皮和滚动(10]。白细胞激活,sL-selectin释放这些细胞的表面,由于蛋白水解乳沟。血管细胞粘附分子1 (VCAM-1),搞笑家族的一员,诱发内皮细胞白细胞粘附,公司也发布了蛋白水解劈理(sVCAM-1)。血小板内皮细胞粘附分子1 (PECAM-1)中扮演一个重要的角色在轮回的白细胞跨内皮细胞层(10]。
中性粒细胞的激活可能发生在一些细胞因子(即的存在。肿瘤坏死因子-α)和炎症过程中一些化学引诱物的释放。中性粒细胞激活期间,有一个代谢活化和释放他们的颗粒在血液和组织,导致增加炎症反应和/或氧化应激(11]。弹性蛋白酶和乳铁蛋白是两个化合物经常以等离子体中性粒细胞激活体内的访问(12]。弹性蛋白酶,存储在azurophilic中性粒细胞的颗粒,有不同的生物效应,如蛋白水解活性和杀菌性能;也参与细胞因子诱导,血小板和淋巴细胞激活13]。乳铁蛋白是一种糖蛋白存储在特定或二次颗粒的中性粒细胞12];它是参与免疫反应的调节和相关联的抗菌活性和抗炎作用。乳铁蛋白的保护作用是由于减少促炎细胞因子的合成,即TNF -α和il - 6 (14]。
PE常与早产和交付的风险增加新生儿小胎龄(SGA)。一些研究注意力集中于胎儿血液循环,这种综合症的存在。在先前的研究中,我们表明,PE怀孕与内皮功能的变化在胎儿血液循环15]。在目前的研究中,我们寻找一个可能的孕产妇和胎儿炎症关系的修改,在正常和PE怀孕。
本研究的目的是评估和比较氧化应激和炎症标记物在孕产妇和脐血(UCB)在正常和PE怀孕。我们测量了一些炎症标记物,即急性期蛋白(CRP和α1-antitrypsin),促炎细胞因子(il - 6和TNF -α)和白细胞激活标记(弹性蛋白酶、乳铁蛋白、sL-selectin sVCAM, sPECAM)。评估氧化应激,我们测量总抗氧化状态(助教),硫代巴比土酸活性物质(TBARS)和尿酸水平。
2。方法
2.1。主题
本研究下进行医院的伦理委员会批准,若昂,波尔图,葡萄牙,和每一个入学孕妇给他们的知情同意参与研究;42个健康的孕妇,46 PE孕妇和新生儿被纳入研究。诊断的临床和超声评估使用正常的孕妇,它们提供了一个正常的怀孕过程和结果的。所有患者孕前的糖尿病史,妊娠(期)糖尿病糖尿病、心血管疾病、肾脏和肝脏疾病,以及胎儿异常的产妇或胎儿感染,被排除在研究之外。
体育的定义根据国际社会研究孕期高血压的分类(舒张压高于110毫米汞柱有一次,或超过90毫米汞柱重复措施;蛋白尿的≥0.3 g / 24小时,或≥1 +蛋白尿试纸测试重复措施妊娠20周后)16]。
根据葡萄牙指南(17),新生儿被定义为小胎龄(SGA)当呈现出生体重低于第十百分位妊娠年龄、足够的孕龄(AGA)呈现出生体重高于第十百分位和胎龄低于90,和大胎龄(LGA)提供出生体重超过第90百分位时胎龄。阿普加分数在1 - 5分钟进行评估的健康护理人员直接负责新生儿的支持。
很难匹配正常和PE为孕龄女性,作为一个正常的怀孕不关联早产,经常发生在PE怀孕。考虑正常的孕龄差异和PE情况下,调整为孕龄进行所有的数据集。
2.2。血液样本的采集和处理
母体血液收集从一个肘前的静脉之前交付。UCB的胎盘分娩后立即收集。血液样本采集后2小时内处理。全血(EDTA抗凝剂)被用来执行血液学检查。血清和血浆与血细胞和整除储存在−70°C到化验。
2.3。生物化学分析
商用特定夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒用于评价血浆il - 6的水平,TNF -αsL-selectin(研发系统,明尼阿波利斯,美国),描述,sPECAM (IBL Immuno-Biological实验室、汉堡),乳铁蛋白(Bioxytech Lactof环评,Oxis研究,促进城市、钙、美国),和弹性蛋白酶(人类中性粒细胞弹性蛋白酶ELISA,本德MedSystems,维也纳,奥地利)。血清中CRP测定样品通过使用一个高灵敏度ELISA技术,所述其他地方(18]。α1-antitrypsin、尿酸和助教浓度测定的常规程序,使用商用设备(α瑞士巴塞尔1-antitrypsin,罗氏,;尿酸和总抗氧化状态,草毒死实验室,英国)。
白细胞计数是由使用一个自动血细胞计数器(60-OT ABX微软、Horiva-ABX、法国)。赖特彩色血液中白细胞微分计算是评价电影。
TBARS值根据Niehaus和萨缪尔森的方法描述了在其他地方(19]。
2.4。统计分析
测量提出了均值±标准差或中位数(四分位范围)。对于统计分析,我们使用社会科学统计软件包(SPSS 17.0版,SPSS . n:行情),芝加哥)的窗口。比较研究团体,我们学生的未配对使用以及,当参数提出了一种高斯分布,Mann-Whitney以及在非高斯分布的情况下。SGA的数量,AGA和LGA病例和阿普加分数低于7之间比较正常和preeclamptic怀孕通过卡方检验。调整统计不同胎龄是由协方差分析(ANCOVA)。斯皮尔曼等级相关系数是用来评估数据集之间的关系。一个值低于0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。患者的临床资料
从正常和PE孕妇临床资料,从他们的新生儿,记录在表1。蛋白尿和高血压是PE患者的特征。胎儿体重、胎盘重量和胎龄显著降低在PE病例,病例数与阿普加≤7在1分钟明显高于体育情况下,比正常情况下;SGA新生儿观察只在体育组。相似的值给出的两组产妇年龄和体重指数(BMI)。考虑到观察妊娠年龄的差异,我们进一步调整孕产妇和胎儿孕周的数据。首先,我们现在的结果总组数据和观察到的,后来,妊娠年龄调整后的结果。
3.2。产妇血
在表2,急性期蛋白细胞因子和氧化应激标志物的研究团体,在正常和PE病例。我们发现尿酸和TBARS值明显高于体育助教组和类似的值。il - 6、TNF -α,α1-antitrypsin, c反应蛋白浓度显著高于在PE孕妇与血压正常的孕妇相比。
我们还发现嗜碱细胞计数和sVCAM水平,显著提高值和趋势在PE(表高白细胞计数3)。可溶性L-selectin浓度在PE孕妇显著降低。无统计差异观察总白细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞计数,sPECAM,群体之间的弹性蛋白酶,乳铁蛋白水平。
3.3。脐带血
当比较近的数据正常,preeclamptic怀孕(表2为il - 6),我们发现了类似的值,TNF -α、助教和TBARS;然而,尿酸显著升高,α在PE 1-antitrypsin和CRP值观察。
相似的价值观被发现的嗜碱细胞计数、sPECAM和弹性蛋白酶的比率/中性粒细胞,乳铁蛋白/中性粒细胞UCB PE新生儿的母亲。然而,从显示的PE组新生儿为白细胞总数显著降低值,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞计数,sL-selectin,乳铁蛋白和弹性蛋白酶的比例/α1-antitrypsin(表3)。
我们调整孕产妇和联合孕龄的数据之后,我们还观察到同样的差异,表明观察到的差异没有显著受到孕龄的影响。
既正常又preeclamptic组包含大约25%的劳动情况下(如在表1eutocic相比),我们与dystocic交付和组之间没有差异被发现。
3.4。相关性
我们发现孕产妇和UCB尿酸之间显著正相关性(图1(一)),在正常妊娠(皮尔逊相关系数0.70;)和PE怀孕(皮尔逊相关系数0.68;);孕产妇和UCB助教之间显著正相关(图1 (b)),在正常妊娠(皮尔逊相关系数0.79;)和PE怀孕(皮尔逊相关系数0.58;);联合银行和孕产妇il - 6之间显著正相关(图1 (c))在正常妊娠(斯皮尔曼相关系数,0.55;)和PE怀孕(斯皮尔曼相关系数,0.44;)和孕产妇CRP和UCB CRP显著正相关性(图1 (d)),在正常妊娠(斯皮尔曼相关系数,0.43;)和PE怀孕(斯皮尔曼相关系数,0.61;)。
(一)
(b)
(c)
(d)
孕产妇sVCAM和蛋白尿的浓度呈正相关,在PE(斯皮尔曼相关系数,0.33;)(图2);UCB sL-selectin与孕产妇蛋白尿水平负相关,在PE(斯皮尔曼相关系数,−0.45;)(图3)。
4所示。讨论和结论
在这项研究中,我们证实了一个增强的炎症过程中产妇流通,在PE。我们观察到在PE女性,与正常孕妇相比,急性期蛋白质水平显著升高,即c反应蛋白和α1-antitrypsin、促炎细胞因子,il - 6和TNF -α(表2)。越高CRP浓度观察PE组与先前的报道是一致的(20.- - - - - -23]。此外,Thilaganathan et al。22)报道,妇女随后发展体育,提出对CRP水平明显高于低胎龄(16周)。据我们所知,这是第一个研究评估α1-antitrypsin PE。我们发现在PE值明显高于女性,这是依法加强急性期反应在PE、所显示CRP。
CRP水平的增加伴随着促炎细胞因子的增加,在PE产妇流通。il - 6和TNF -的增加α水平在PE妇女依照一些先前的研究[4,24];然而,其他作者称没有区别正常和PE怀孕il - 6 (25,26)和肿瘤坏死因子-α(27]。冲突的结果还存在有关细胞因子胎盘生产(28- - - - - -30.]。大多数的胎盘的研究表明,胎盘变成一个相当大的细胞因子在怀孕中干扰的来源PE和可能导致的更高水平的细胞因子,在孕产妇循环。
毫无疑问对体育的参与炎症过程的生理病理学;然而,没有协议关于白细胞激活在体育的作用2,31日]。一些研究报道,PE女性提供了一个数量的增加总白细胞和中性粒细胞计数较高(32]。松尾et al。33]表明,白细胞总数和中性粒细胞数更高的PE患者,血压正常的女性相比,在PE的有症状的阶段。在我们的研究中,没有发现显著差异在白细胞和中性粒细胞计数;然而,我们观察到的趋势更高的PE组(表中的值3)。嗜碱细胞计数明显高于在体育,但这不是一个一致的发现在文献[34- - - - - -36]。
矛盾的发现对细胞粘附分子,已报告在胎盘和孕产妇循环,在PE。Tziotis et al。37PECAM-1胎盘)报告了类似的值表达式,ICAM-1 VCAM-1,在正常和PE怀孕。在目前的研究中,我们发现母亲的血液中,在PE,明显高于sVCAM浓度,显著降低sL-selectin sPECAM浓度和类似的值。这些结果符合Chaiworapongsa et al。38];然而,有争议的结果已发表(27,39- - - - - -41]。
sVCAM的增加可能反映了白细胞粘附到内皮细胞或内皮功能障碍。结果关于sL-selectin在PE仍有争议2,42]。一些作者提出,在急性炎症条件下,sL-selectin上涨(43),而在慢性炎症条件下,减少循环sL-selectin水平发生(44]。减少sL-selectin白细胞L-selectin的差别可能是由于对这些基因的表达(44),这可能反映了一种机制来抵消增强炎症过程中观察到体育。另一个可能的解释是,白细胞L-selectin可溶性表达伴随着相反的变化形式(45,46),因此,我们的结果(sL-selectin下降水平)可能实际上反映了upregulation白细胞L-selectin表达,改善leukocyte-endothelial上的相互作用。
sL-selectin sVCAM的增加和减少,在PE,表明白细胞粘附内皮细胞,尽管类似sPECAM水平表明白细胞组织轮回不太可能发生。
在一项研究15),我们描述了PE女性tPA和PAI-1值显著升高,与正常孕妇相比。tPA和PAI-1 sVCAM一样,是由内皮细胞。在相同的研究中我们还描述,肺动脉栓塞并没有改变,尽管它是将更高,依照tPA的增加,这是纤溶系统的激活。所有数据显示一个内皮功能障碍,也可以解释sVCAM中观察到,在PE女性。此外,疾病的严重程度可能与内皮功能障碍有关。事实上,我们发现sVCAM之间显著正相关,蛋白尿(PE)的一个公认的严重程度标记(图2),我们还发现tPA相同类型的相关性和PAI-1,蛋白尿,PE女性(15]。
关于中性粒细胞脱粒的标志,我们研究了弹性蛋白酶和乳铁蛋白,但没有发现差异之间的正常和PE孕妇(表3)。一些研究测量弹性蛋白酶和乳铁蛋白水平在产妇流通PE和数据不一致47,48]。
初看,我们可以认为升高α1-antitrypsin水平可能掩盖了不变弹性蛋白酶的水平,α1-antitrypsin参与弹性蛋白酶抑制,但类似的价值观被发现后,研究小组之间计算弹性蛋白酶/α1-antitrypsin比率。类似的结果,在正常和PE孕妇、弹性蛋白酶和乳铁蛋白水平和弹性蛋白酶的比率/中性粒细胞,乳铁蛋白/中性粒细胞弹性蛋白酶/α1-antitrypsin似乎表明,PE与中性粒细胞脱粒无关。我们的结果与先前的研究显示,体育和嗜中性粒细胞脱颗粒之间的联系;Mellembakken et al。49]显示髓过氧物酶的增加;比罗et al。20.),古普塔et al。47),和洛克等人。2]在PE观察弹性蛋白酶水平较高;然而,没有发现差异对乳铁蛋白浓度(20.,49]。
氧化应激的贡献体育已被接受,虽然确切的抗氧化剂/氧化剂的变化仍有争议(4,6,50,51]。在我们的研究中,我们发现在PE TBARS水平明显高于孕妇,怀孕与正常相比,但助教(表中未发现差异2)。TBARS生物标志物的脂质过氧化,提高孕产妇循环水平按照贡献PE的氧化应激。助教作为整个抗氧化能力的指标,因此,不同的分子具有抗氧化特性可能导致助教,如白蛋白、尿酸、胆红素、维生素C、维生素E、和生物黄酮素52]。
更高水平的尿酸是PE患者的共同特点和可能导致疾病的发病机理53]。抗氧化性能一直也归因于尿酸(54]。在我们的研究中,尿酸水平显著高于在PE和可能有助于助教水平。此外,TBARS /助教比率明显升高PE女人,很有可能,这种不平衡可能会造成一个增强氧化应激或减少特定的抗氧化化合物,甚至两者的贡献。
一些数据存在关于UCB的PE炎症;本研究为了执行分析如果母体循环中观察到的修改PE也观察到的联合。我们发现在胎儿血液循环增加炎症的证据,在体育的存在。我们观察到,在脐带血PE孕妇、CRP和显著增加α1-antitrypsin水平,更高的趋势值的il - 6和TNF -没有差异α。与我们的结果相反,Braekke et al。55新生儿之间]报道没有差异,PE和血压正常的怀孕,关于calprotectin和CRP水平。
这从体育例炎症在UCB也相关,作为母亲,发生显著减少sL-selectin和sVCAM显著升高,表明一个类似的机制可能是这些变化的基础。
总白细胞数显著低于脐带血的PE怀孕,以及中性粒细胞计数。这一发现似乎contrasense,通常炎症的特征是嗜中性白细胞增多。曹et al。56]表明,妊娠高血压与低中性粒细胞计数和粒细胞集落刺激因子(g - csf)在早产新生儿水平。我们没有测量g - csf在我们的样品,但是,事实上,g - csf的减少可能导致白细胞减少,g - csf是一个重要的造血生长因子为粒细胞分化和增殖57]。加强这一假设,一个较低的病例数呈现中性髓细胞和PE晚幼粒细胞被确认。我们也假设这些白细胞变化可能包括生理响应,以抵消增强炎症。
不同的中性粒细胞粘附分子的表达,即整合蛋白,selectins,和搞笑总科,被证明是调节婴儿从PE怀孕46,58]表明中性白细胞和内皮细胞之间的交互。然而,Mellembakken et al。46)也报道,在相同的样本,等离子体水平的可溶性L-selectin在PE婴儿显著下降。
没有发现公布的数据关于等离子体水平的产品发布在胎儿血液循环中性粒细胞颗粒。在目前的研究中,PE婴儿呈现显著降低值弹性蛋白酶和乳铁蛋白;经过计算的弹性蛋白酶/中性粒细胞和乳铁蛋白/中性粒细胞,失去了统计学意义。这些发现表明,在母亲,中性粒细胞脱颗粒似乎并没有发生在胎儿血液循环。
冲突的结果在PE胎儿血液循环氧化应激发表(59- - - - - -61年]。在目前的研究中,发现类似的助教和TBARS值从正常新生儿和PE怀孕之间。然而,婴儿从PE怀孕尿酸浓度显著升高,这可能有助于体育助教水平,当我们观察母亲的血液中。
考虑到变化观察到在正常和PE病例(在孕产妇和脐带血),我们研究了一些孕产妇和UCB值之间的相关性,建立它们之间可能的关系。孕产妇CRP和il - 6的浓度增加,在PE条件,反映在胎儿血液循环,因为积极的相关性被发现之间的孕产妇和UCB CRP和il - 6的分泌。
总之,我们的数据表明,PE怀孕与一个增强孕产妇炎症条件有关,也反映在胎儿血液循环。这种增强的炎症状态似乎与内皮功能障碍与中性粒细胞活化和细胞因子合成增加,而不是。
确认
作者感谢医院产科服务的托儿所集团若昂,尤其是护士西莉亚里贝罗的慷慨帮助孕产妇和脐带血收集。本文由FCT支持和FSE博士。格兰特(SFRH / BD / 7056/2001)。