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肥胖杂志
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肥胖杂志/<一个class="sc-htpNat bUhGXt link sc-eitiEO jXeALb breadCrumb" href="//www.newsama.com/journals/jobe/contents/year/2010/" aria-label="2010">2010/文章

研究文章|开放获取

体积 2010 |文章的ID 136502 | https://doi.org/10.1155/2010/136502

大智修一，井原优子，南谷正美，丹隆，伊藤贞德，查尔斯·范·伊佩尔塞·德·斯特侯，宫田敏夫， ＂在肥胖、高血压、2型糖尿病大鼠模型中，通过高碳水化合物/低脂饮食控制体重可以减缓糖尿病肾损害的进展"，肥胖杂志， 卷。2010， 文章的ID136502， 11 页面， 2010． https://doi.org/10.1155/2010/136502

在肥胖、高血压、2型糖尿病大鼠模型中，通过高碳水化合物/低脂饮食控制体重可以减缓糖尿病肾损害的进展

Ohtomo秀一，1，2 Yuko Izuhara.，2 Masaomi Nangaku，3. 隆丹，4 Sadayoshi Ito，5 查尔斯·范·伊珀尔塞勒·德·斯特里侯，6 和 Toshio基金经理人4

1郑省药业有限公司研究部，静冈412-8513，日本

2东海大学医学研究所，神奈川259-1193

3.东京大学医学院肾内科和内分泌科，日本东京113-8655

4转型和高级研究中心，东北大学医学研究生院，仙台980-8575

5日本仙台980-8575日本东北大学医学院肾内科，高血压和内分泌科

6鲁汶天主教大学肾学服务处，布鲁塞尔1200，比利时

学术编辑器:特里黄
收到了 2009年6月11日
修改后的 2009年10月07
接受 2009年11月16日
发表 2010年2月17日

摘要

肥胖是涉及糖尿病肾病（DN）的成因的几个因素之一。肥胖，高血压，2型糖尿病大鼠SHR / NDMCR-CP给予12周，持续正常，中碳水化合物/中脂肪饮食（MC / MF组）或高碳水化合物/低脂饮食（HC/ lf组）。两组每日热量摄入量是相同的。然而，HC / LF组的重量减少。尽管等同的高血压程度，高血糖，高脂血症，高胰岛素血症甚至较差的血糖控制，HC / LF组肾脏组织学异常的严重严重较小，内部血糖和氧化胁迫降低。更新的介质，与肥胖和体重控制有关，包括降低的肾炎和TGF-β表达，以及增强水平的脂联素。总的来说，这些数据通过DN进展中的高碳水化合物/低脂饮食鉴定体重控制的特定作用。因此，体重控制因此通过炎症和脂联素水平对局部内部高级糖化和氧化胁迫的影响。

1.介绍

2型糖尿病中糖尿病肾病(DN)的发生显然是多因素的，包括高血压、高血糖、高胰岛素血症和高脂血症[<一个href="#B1">1- - - - - -<一个href="#B6">6］．最近的研究进一步强调了肥胖在患有肥胖相关的肾小球病的患者中观察到的肾脏损伤的作用，而且还涉及2型糖尿病的超重受试者[<一个href="#B6">6- - - - - -<一个href="#B10">10］．

在之前的一些研究中，我们探索了糖尿病大鼠模型，即自发性高血压/ nih -肥胖大鼠(SHR/NDmcr-cp)，以揭示与DN有关的因素。该鼠系与SHR有相同的高血压背景，但瘦素受体基因发生了基因突变，导致了大量的代谢异常，即高体重、高血糖、高脂血症和高胰岛素血症。它会发生蛋白尿，肾小球和肾小管间质损害，模仿人类糖尿病肾病，例如局灶性和节段性肾小球硬化，系膜扩张和肾小管间质纤维化[<一个href="#B11">11，<一个href="#B12">12］．

之前，我们证明了低热量饮食可以降低代谢和肾脏的改变，这与血压、血脂、葡萄糖和胰岛素水平无关。高碳水化合物/低脂饮食在不限制热量的情况下有效降低体重的观察[<一个href="#B13">13，<一个href="#B14">14[我们在大鼠模型中使用了类似的异蜂理饮食，以更好地识别介导DN的成因中涉及的体重相关因素的因素。

因此，将SHR/NDmcr-cp大鼠给予正常中碳水化合物/中脂肪饮食(MC/MF组)与饲喂高碳水化合物/低脂肪饮食(HC/LF组)的相似大鼠进行比较。如我们所料，在不限制热量的情况下，后一种饮食显著减少了体重增加。尽管高血压、高血糖、高脂血症、高胰岛素血症的程度相当，甚至血糖控制较差，但HC/LF组的蛋白尿明显较低，肾脏组织学异常较轻。在肾脏中，特定体重效应的介质似乎是一种与肥胖相关的炎症，抗炎脂联素水平降低，氧化应激和糖基化加重，tgf - β表达增强，所有这些都可能构成有希望的治疗靶点。

2.材料和方法

2．1．动物

动物实验是按照东海大学动物保护和使用伦理委员会的指导方针进行的。

雄性自发性高血压/ nih肥胖大鼠(SHR/NDmcr-cp)和雄性Wistar-Kyoto大鼠(WKY)购自日本静冈县SLC。它们被安置在独立的笼子里，在一个温度和光线可控的环境中，由认可的动物护理机构进行饲养。年龄在5周,月/ NDmcr-cp老鼠随机分为两组,给12周正常饮食(CE-2克丽日本公司,东京,日本)与自来水(MC / MF组,10大鼠),或高碳水化合物低脂肪饮食(CE-2自来水含30%蔗糖)(HC /低频组,10大鼠)。正常饲粮(CE-2) WKY大鼠5只作为对照组(WKY组，5只)。所有的大鼠都被允许无限制地摄取食物和水，每只大鼠每天的饮食摄入量由实际摄入的食物和液体量每周确定三次。他们在17周大的时候被处死。

2．2.血压和血尿生物化学

在研究开始、2周、4周和随后每4周测定清醒大鼠的收缩压，直到安乐死。将大鼠置于代谢笼中过夜采集尿液，并在同一时间间隔采集血液样本。血浆甘油三酯和尿蛋白浓度用自动分析仪(日立自动临床分析仪7170，日立科学系统，茨城县，日本)测定。使用了以下方法:血浆胰岛素由市售试剂盒(Morinaga生化实验室，东京，日本)，HbA1c由DCA2000 (Bayer Diagnostics, Pittsburgh, PA)，血浆脂联素由市售ELISA试剂盒(AdipoGen Inc.，首尔，韩国)。

2．3.肾小球硬化和间质纤维化的半定量评价

方法已在前面描述过[<一个href="#B11">11，<一个href="#B12">12］．简而言之，在4-中评估肾小球粥样硬化 m厚切片固定在甲基- carnoy溶液中，用PAS染色。对每个动物随机选取的50个肾小球进行形态学测量。肾小球硬化按损伤面积占肾小球总面积的百分比进行分级:(0，无病变;1+， 1%至25%;2+， 25%至50%;3+， 50%至75%;4+， 75%至100%)。4- m厚切片用10%中性缓冲甲醛固定，用马森三色染色。使用Image-Pro Plus (Planetron, Inc.， Tokyo, Japan)软件对随机获得的10张肾皮质数字图像中的间质三色阳性区域进行计数。排除肾小球、鲍曼囊或血管三色阳性区。

2．4．巨噬细胞浸润的半定量分析

小鼠抗大鼠巨噬细胞/单核细胞抗体（抗ED-1，Serotec，牛津，英国）用于染色4- M厚肾切片用10%中性缓冲甲醛固定。在皮质区随机选择10个区域(400个)计数ED -1阳性细胞浸润小管间质 放大)。

2．5．基因表达分析

通过先前描述的方法进行实时PCR [<一个href="#B12">12利用One Step RT-PCR Kit (Takara Bio Inc.， Shiga, Japan)、SYBR Green I试剂(Cambrex Bio Science, Rockland, Maine)和iCycler PCR系统(Bio- rad Laboratories, Hercules, CA)检测转化生长因子(TGF)- β、结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1、Nox2、p 、肿瘤坏死因子(TNF)- α、细胞间粘附分子(ICAM)-1、血管细胞粘附分子(VCAM)-1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)。引物序列列于表中<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/tab1/" target="_blank">1．用GAPDH mRNA表达量对这些基因的表达进行归一化。数据以相对于MC/MF组的值表示。
基因 正向引物( 5 ” 来 3. ” ） 反向引物( 5 ” 来 3. ” ）
鉴定及 tgcgcctgcagagattcaag. AGGTAACGCCAGGAATTGTTGCTA
CTGF CACCCGGGTTACCAATGACAA AGCCCGGTAGGTCTTCACACTG
PAI-1 GCCCAGCATTCAGCCTTTG AAGACTTTGCTGAGTGAAGGCGTAG
Nox2 CGGGACTTCGGACCCATATTC ATTCCTGTGATGCCAGCCAAC
47 phox CCACGGGTATTGCTAGGATGAGA AGACTAAGGCAGCGGGTAATCAGA
tnf AACTCGAGTGACAAGCCCGTAG GTACCACCAGTTGGTTGTCTTTGA
ICAM-1 ACAAGTGCCGTGCCTTTAGCTC GATCACGAAGCCCGCAATG
VCAM-1 GGATGCCGGAGTATACGAGTGTG CAATGGCGGGTATTACCAAGGA
GAPDH gacaacttggcatcgtgga. Atgcagggatgatgttttgg.
表1
实时PCR引物。
2．6．细胞培养

IRPTC由Julie Ingelfinger博士好心提供。IRPTC是一种源自雄性Wistar大鼠近端管状细胞的细胞系，通过原缺陷SV 40 DNA转化永生[<一个href="#B15">15］．irptc在添加10%胎牛血清的Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) (Invitrogen, Carlsbad, CA)中培养。

2.7。tnf - α体外刺激试验

irptc在96孔板中培养并生长至融合。随后用含0.01,0.1,1 ng/ml人tnf - α (SIGMA-ALDRICH, Inc.， St. Lois, MO)的血清饥饿DMEM洗涤并孵育4小时(n= 8）。根据制造商的说明，使用RNEasy Mini Kit与IRPTC分离的总RNA。

2.8。肾Pentosidine内容

该方法已在前面描述过[<一个href="#B11">11］．简而言之，一个20- 用PBS稀释肾组织酸水解液，注入反相高效液相色谱系统，用C18反相柱分离(Waters，东京，日本)。用荧光检测器(RF-10A;岛津，京都，日本)的激发发射波长335/385 nm。以合成戊二苷为标准品。

2.9。统计分析

数据报告为平均值±SEM。使用SPSS for Windows version 15.0 (SPSS, Chicago, IL)进行统计分析。对于多重比较，单因素方差分析(ANOVA)和Dunnettt测试进行。两组之间的比较使用未配对的t测试。采用spearman相关检验进行相关评价。 被认为是显著的。

3.结果

3．1.体重

在整个研究过程中，两组动物每天的热量摄入量从100到120千卡不等，几乎是相同的(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig1/" target="_blank">1(一))．MC/MF组碳水化合物、脂肪、蛋白质和钠的日摄入量分别为16.7 g、1.5 g、7.0 g和100 mg/d, HC/LF组分别为22.6 g、0.5 g、4.0 g和35 mg/d(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig1/" target="_blank">1 (b)- - - - - -<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig1/" target="_blank">1 (e)， )．

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图1
P < ． 01 P < ． 001 日常饮食摄入。(a)每日卡路里摄入量，(b)碳水化合物摄入量，(c)脂肪摄入量，(d)蛋白质摄入量，(e)钠摄入量，以MC/MF(封闭方)和HC/LF(开放方)计算。**，＊＊＊与mc / mf。

尽管摄入的热量几乎相同，HC/LF组大鼠的体重比MC/MF组小( ):分别为505±21和577±16 g(图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig2/" target="_blank">2(一个))．

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图2
P < ． 05 P < ． 01 P < ． 001 组合 P < ． 01 ††† P < ． 001
代谢异常。(a)体重，(b)糖化血红蛋白，(c)甘油三酯，(d)胰岛素，(d)收缩压。WKY(闭三角形)、MC/MF(闭正方形)、HC/LF(开正方形)。＊，＊＊，＊＊＊与wky;，与mc / mf。
3.2。高血压和代谢异常

实验大鼠的物理生物学数据汇总如图所示<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig2/" target="_blank">2．两组SHR/NDmcr-cp大鼠由于SHR遗传背景而逐渐发展出相似程度的高血压。与对照组WKY大鼠相比，MC/MF和HC/LF组均出现了广泛的由过度吞咽引起的代谢异常，即高体重、高血糖(以HbA1c水平为证)、高胰岛素血症和高甘油三酯血症。

与MC / MF组相比，HC / LF组的重量明显减少（ ），并且HBA1C水平明显更差（ )．其他代谢异常，即高甘油三酯血症和高胰岛素血症，在两组之间是相等的。

3.3。肾脏参与

在整个研究中，MC / MF组观察到的蛋白尿中的蛋白尿中的渐进升高显着减弱（图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig3/" target="_blank">3.)．在研究结束时，MC/MF组的蛋白尿为59.8±7.2 mg/天，而HC/LF组的蛋白尿为19.6±2.2 mg/天( ），值将值与Wky大鼠的9.8±0.6 mg /天进行比较（ )．


图3
P < ． 01 P < ． 001 ††† P < ． 001
蛋白尿的变化。WKY(闭三角形)、MC/MF(闭正方形)、HC/LF(开正方形)。**，＊＊＊与wky;与mc / mf。

图中所示为研究结束时各动物组具有代表性的周期酸-希夫-(PAS-)或Masson三色-(MT-)染色的肾脏图像<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4．肾小球硬化(数据<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4(一)- - - - - -<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4 (c))和小管间质纤维化(图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4 (d)- - - - - -<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4 (f)）在两组中可见，但在HC / LF组中少于MC / MF组。

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图4
×
肾小球硬化，小管间质纤维化，巨噬细胞浸润。pas染色(a) - (c)， Masson三色染色(d) - (f)，或ed -1免疫染色(g)和(h)肾组织。WKY大鼠(a)、(d) MC / MF (c), (f), (h)和HC /低频(b)、(e), (g)的研究。箭头表示ED-1阳性细胞。400年最初的放大(一)- (c)， (g)， (h))和200× (d) - (f)。

半定量分析(表<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/tab2/" target="_blank">2)，两组肾小球硬化和间质纤维化程度均明显高于WKY组( 和 ，但HC/LF组较MC/MF组轻( 和 、职责)。
WKY MC / MF HC /低频
肾小球硬化的分数 0．13 ± 0．02 0．63 ± 0．03 ＊＊＊ 0．43 ± 0．02 * * *†††
Tubulointerstitial纤维化(%) 1．8 ± 0．1 4．6 ± 0．3 ＊＊＊ 3.3. ± 0．4 * __
＊ P < ． 05 , * * * P < ． 001 与wky;__ P < ． 05 ， ††† P < ． 001 与mc / mf。
表2
肾小球硬化和肾小管间质纤维化的形态学评价。
3．4．分子生物化学分析

通过对肥胖相关细胞因子(如脂联素和tnf - α)水平、炎症、转化生长因子(TGF)- β、氧化应激和晚期糖基化进行评估，以确定HC/LF组肾脏预后较好所涉及的生物学机制。

3．5.炎症和肥胖相关的细胞因子

炎症与肥胖有关[<一个href="#B16">16］．HC/LF组的巨噬细胞浸润较MC/MF组轻(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4 (g)和<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig4/" target="_blank">4 (h))．半定量分析显示，小管间质浸润显著( ) HC/LF组比MC/MF组更温和(图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig5/" target="_blank">5(一个))．

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(一)
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(b)
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(c)
图5
P < ． 05 P < ． 01 肾组织炎症。(a)小管间质区ED-1阳性细胞，(b) tnf - α、ICAM-1、VCAM-1基因表达，(c) MC/MF(白条)、HC/LF(黑条)血浆脂联素水平。＊，＊＊．

肾组织中tnf - α mRNA表达显著( )， HC/LF组细胞间粘附分子(ICAM)-1和血管细胞粘附分子(VCAM)-1的表达水平均低于MC/LF组(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig5/" target="_blank">5 (b))．

脂联素是脂肪细胞分泌的一种抗炎细胞因子[<一个href="#B17">17，<一个href="#B18">18］．其血浆水平显著( ) HC/LF组高于MC/MF组(图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig5/" target="_blank">5 (c))．有趣的是，所有SHR/NDmcr-cp大鼠血浆脂联素水平与体重呈负相关(r= 0.602, )及蛋白尿症(r= 0.654, )．值得注意的是，在所有实验大鼠中，体重也与蛋白尿显著相关( ，r= 0.708)。

3.6。鉴定及

tgf - β与糖尿病肾损伤的发展有关[<一个href="#B19">19，<一个href="#B20">20.］．肾组织tgf - β mRNA表达显著( ) HC/LF组低于MC/MF组，tgf -beta相关基因，即结缔组织生长因子(CTGF)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1的表达也相应降低(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig6/" target="_blank">6(一))．

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(一)
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(b)
图6
P < ． 05 P < ． 01 P < ． 05 P < ． 01
肾组织中tgf - β的表达及tnf - α对其的体外诱导作用。(a) TGF-beta、CTGF、PAI-1在MC/MF(白条)和HC/LF(黑条)中的基因表达，＊＊．(b) tnf - α对体外培养大鼠近端小管细胞(IRPTC) tgf - β mRNA表达的影响。＊，＊＊．

进一步在体外培养的大鼠近端小管细胞(IRPTC)中检测tgf - β和tnf - α表达的相互关系[<一个href="#B15">15］．在tnf -强化培养基中孵育4小时( )以剂量依赖的方式增加tgf - β的mRNA表达(图<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig6/" target="_blank">6 (b))．这些数据证实了先前的结论[<一个href="#B21">21，<一个href="#B22">22］．

3.7。高级糖化

晚期糖基化及其蛋白修饰，即晚期糖基化终末产物(AGEs)，与糖尿病肾损伤有关[<一个href="#B23">23- - - - - -<一个href="#B25">25］．在研究结束时，肾脏戊二苷含量(晚期糖基化的替代标记)显著( LC/HF组低于MC/MF组(图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig7/" target="_blank">7(一))．

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(b)
图7
47 phox P < ． 05 P < ． 01
肾组织的晚期糖基化和氧化应激。(a)肾脏戊二苷含量;(b) Nox2和p在MC/MF(白条)和HC/LF(黑条)。*，＊＊．
3.8。氧化应激

氧化应激是糖尿病肾损伤的中介，涉及NADPH氧化酶，细胞活性氧(ROS)的主要来源之一[<一个href="#B26">26］．NADPH氧化酶两个亚基Nox2和p ，均显著( ， HC/LF组低于MC/MF组(见图)<一个href="//www.newsama.com/journals/jobe/2010/136502/fig7/" target="_blank">7 (b))．

在所有糖尿病大鼠中，Nox2和 mrna表达水平与tnf - α显著相关(r= 0.450, ；r= 0.727, ，)与TGF-beta (r= 0.764, ；r= 0.699, ，)，肾脏戊托sidine含量(r= 0.719, ；r= 0.565, 、职责)。

4。讨论

本研究强调体重控制是减缓DN进展的一个显著因素。它确定了炎症、氧化应激、晚期糖基化、tgf - β和脂联素可能是这种作用的介质。

在我们之前的几项研究中使用了相同的大鼠模型[<一个href="#B11">11，<一个href="#B12">12，<一个href="#B27">27- - - - - -<一个href="#B29">29]提供了一幅关于SHR/NDmcr-cp患者在自由摄取标准饮食条件下所观察到的肾脏疾病的特征的详细图片。在本研究中，中碳水化合物/中脂肪饮食的对照组大鼠表现出相同的异常谱，即高体重、高血压、高血糖伴高胰岛素血症、血脂和tgf - β表达升高，并伴有蛋白尿，肾小球和间质纤维化伴肾内晚期糖基化和氧化应激。阐明该模型中导致DN的事件顺序是很重要的，因为它可能为更好地预防和治疗糖尿病患者的肾脏疾病并发症提供线索。

目前的数据表明，通过高碳水化合物/低脂饮食控制体重在减缓DN的发展中发挥了作用，而与热量摄入无关。与我们的研究结果一致的是，在人体中，高碳水化合物/低脂饮食在不限制热量的情况下有效地降低了体重[<一个href="#B13">13，<一个href="#B14">14］．高碳水化合物/低脂肪饮食控制体重的机制仍不清楚。在HC/LF组，尽管相同的热量摄入和类似程度的高血压、高脂血症、高胰岛素血症，以及更差的血糖控制，但其缓解导致蛋白尿降低和肾脏损害减轻。在之前的一项研究中，在相同的大鼠模型中，通过低热量摄入实现了体重控制的类似效果，提供了同样的肾保护，同样与血压、葡萄糖、胰岛素和血脂水平无关[<一个href="#B28">28］．因此，体重控制的好处似乎与后一种因素以及热量摄入无关。重要的是，在等热量和低热量的大鼠模型中，肾脏保护和肾内晚期糖基化和氧化应激的平行减少都得到了实现，这两者显然在DN的发展中发挥了关键作用。

肥胖对DN的影响仍有待确定的待识别。TGF-Beta及其调节的产品，CTGF和PAI-1可能是此前在DN中涉及的代理人[<一个href="#B19">19，<一个href="#B20">20.，<一个href="#B30">30.- - - - - -<一个href="#B32">32］．在同一大鼠品系中，我们先前提出的证据表明胰岛素提高tgf - β的表达，并且这种表达的增加与肾损伤有关[<一个href="#B12">12］．我们现在发现，HC/LF组诱导的体重降低降低了tgf - β的表达，以及伴随而来的CTGF和PAI-1的表达。有趣的是，尽管胰岛素水平不变，tgf - β的表达却下降了，这表明体重控制独立于葡萄糖和胰岛素水平改变了tgf - β的表达。

肥胖引发的炎症反应被认为与DN的发展有关[<一个href="#B16">16，<一个href="#B33">33- - - - - -<一个href="#B35">35］．我们的数据支持这一假设。MC/MF组的肾脏在该研究和之前的研究中都有报道[<一个href="#B28">28]被巨噬细胞渗透。下半身重量HC / LF大鼠的特征在于通过巨噬细胞降低肾渗透和TNF-α及其相关蛋白质的mRNA表达，ICAM-1和VCAM-1的平行降低。有趣的是，我们在培养的大鼠近端管状细胞中证明TNF-α和TGF-β是相互关联的：TNF-α本身上调tgf - β mRNA，一项先前报道的观察[<一个href="#B21">21，<一个href="#B22">22］．两种细胞因子水平之间的相关性证实了这一结论。

脂联素是一种在肥胖患者中下调的抗炎、抗动脉粥样硬化和抗氧化肽[<一个href="#B18">18］．它的血浆水平与糖尿病患者的蛋白尿呈负相关[<一个href="#B36">36，<一个href="#B37">37，这一发现已被本研究证实。HC/LF组血浆脂联素水平较高，DN进展较慢，表明体重控制可提高血浆脂联素水平，增强其抗炎作用，从而保护肾功能。Ohashi等对脂联素敲除小鼠肾次全切除术的观察支持了这一假设[<一个href="#B38">38:脂联素缺乏加重了蛋白尿和肾损害，同时炎症、tgf - β水平和氧化应激增加。

脂联素在预防DN中的益处是重要的。我们之前在相同的糖尿病大鼠品系中证实，吡格列酮(噻唑烷二酮类)通过改善高胰岛素血症和tgf - β表达来保护糖尿病肾病[<一个href="#B12">12］．在这种情况下，值得注意的是，TZDs上调血浆脂联素水平，提高了TZDs的肾保护作用的可能性，这可能至少部分归因于脂联素的特异性诱导[<一个href="#B17">17，<一个href="#B37">37］．

晚期糖基化和氧化应激都明显与DN有关[<一个href="#B23">23- - - - - -<一个href="#B26">26］．实际上，几岁抑制剂，例如吡哆胺，ALT-711和LR-90，预防糖尿病肾病的发育[<一个href="#B39">39- - - - - -<一个href="#B42">42，提示AGEs的积累是糖尿病肾损伤的重要危险因素。已知血管紧张素II受体阻滞剂(arb)也可以保护糖尿病人的肾脏，至少部分通过抑制晚期糖基化和氧化应激，而不依赖于体重[<一个href="#B11">11，<一个href="#B29">29］．在HC/LF组观察到的肾戊糖苷含量降低证实了这一观点。它具有特殊的意义，因为它是在血糖水平高于MC/MF对照组的情况下发生的，因此可能反映了较低的氧化应激。高级糖基化和氧化应激确实是相互关联的。在糖尿病条件下，AGEs、TGF-beta和促炎细胞因子通过NADPH氧化酶产生活性氧(ROS)，而活性氧氧化酶反过来放大AGEs的形成、TGF-beta的表达和炎症[<一个href="#B26">26，<一个href="#B43">43- - - - - -<一个href="#B45">45］．在HC/LF组中，无论是通过肾脏戊二苷含量来评估晚期糖基化，还是通过NADPH氧化酶两个亚基的mRNA表达来评估氧化应激 ,显著降低。在我们的模型中，体内局部氧化应激和晚期糖基化的变化可能最终介导肥胖相关的糖尿病肾脏影响。

我们不能排除潜在的高血压、糖尿病和肥胖在这个模型中没有发挥作用。此外，脂肪的摄入与脂质堆积、炎症和肾血流动力学变化的进展有关[<一个href="#B46">46，<一个href="#B47">47］．在HC/LF组观察到的有益变化可能是由于低脂肪含量的饲粮，而不是由于体重的变化。HC/LF组的钠摄入量也较低。因此，局部肾小球血流动力学的改变可能会发生，而与全身血压无关[<一个href="#B48">48］．诚然，在我们的两个实验大鼠组中，饮食中的蛋白质含量也有所不同。虽然不能正式排除这种可能性，但似乎不太可能，因为其他研究表明，在SHR大鼠中，饮食蛋白质含量不影响蛋白尿和肾脏病变的发展[<一个href="#B49">49］．

总之，通过高碳水化合物/低脂饮食控制体重可以通过抑制炎症、硬化变化和氧化应激来减缓糖尿病肾病的进展。他们确定了脂联素、tnf - α、tgf - β和AGEs作为预防2型糖尿病肾脏后果的潜在治疗靶点。

利益冲突陈述书

没有声明。

承认

本研究由美国医药和医疗器械管理局(PMDA)健康科学基础研究促进计划(Program for Promotion of Fundamental Studies in Health Sciences)资助。

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