文摘

背景。HOX基因的转录因子家族,其特点是守恒的homeodomains,呈正相关抗化疗药物和不良预后,以及启动神经胶质瘤的潜力。然而,很少有研究关于HOXC6基因在神经胶质瘤细胞。因此,在本研究中,我们探讨了监管角色和详细的机制HOXC6之间的关系和“绿带运动”的进展。方法。HOXC6表达水平和预后价值的“绿带运动”从GCCA使用获得的数据进行了评估,GEPIA, ONCOMINE数据库。GBM预后和HOXC6水平之间的关系被确认使用kaplan meier曲线。HOXC6蛋白质含量的“绿带运动”和邻近的正常组织被确定通过免疫印迹和免疫组织化学染色方法(包含IHC)。慢病毒包含完整的HOXC6 HOXC6特定核序列被用来过表达和击倒,分别在U87 HOXC6和U251细胞的表达。HOXC6在GBM细胞的迁移和增殖的调节是通过Transwell访问,伤口愈合,CCK-8和集落形成试验。TGF -的激活β/ Smad信号通路通过免疫印迹检测。结果。正常组织和控制细胞相比,“绿带运动”组织和细胞系表现出更高的HOXC6表达式。HOXC6的表达与无病和GBM患者的总生存期。此外,积极的表达之间的相关性HOXC6和GBM细胞的迁移和增殖在体外。机械的分析表明,HOXC6施加其奖励的影响过程和入侵神经胶质瘤细胞通过促进EMT的激活和TGF -β/ Smad信号通路。结论。HOXC6增强了“绿带运动”的迁移和扩散激活EMT信号通路。

1。介绍

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤(81%的脑部肿瘤)。此外,胶质母细胞瘤(GBM)被认为是最激进的一种神经胶质瘤(1]。基于神经系统肿瘤的分类、低收入和高级别胶质瘤被定义为等级1 - 2和3 - 4,分别。

不管分化水平,神经胶质瘤具有浸润,增长,恶性肿瘤,导致预后不良,死亡率高,复发的可能性非常高。目前,主要治疗神经胶质瘤显微手术、放疗和化疗2]。然而,“绿带运动”的存活率很低以及其他恶性肿瘤。例如,其5年生存率低于5% (3]。考虑精密医学临床实践的逐步推广,缺乏生物活性的大脑渗透剂分子和肿瘤基因的分子特征的理解不足阻碍靶向治疗的应用。因此,更有效的靶向治疗是很有前途的。

HOX基因的转录因子家族,其高度保守的homeodomains,当过表达,能促进神经胶质瘤的初始潜力,预后不良,抵抗化疗药物。HOXC基因位于染色体12 q13.3 [4和理解的一个亚型同源框总科。此外,HOXC6基因是高度保守的,参与胚胎发育的许多过程,细胞形态发生和分化的监管,包括细胞凋亡、受体信号传递、分化、运动性和血管生成5,6]。HOX家族也参与了《创世纪》,增殖、迁移、凋亡,epithelial-mesenchymal转换许多肿瘤细胞(7]。因此,可以使用这些转录因子不仅对肿瘤疾病的检测和作为肿瘤化疗敏感性预测指数8),但也作为标准来评估患者的预后9]。它也提供至关重要的基础HOX基因靶向疗法的使用。HOXC6基因中扮演一个重要的角色在乳腺癌,前列腺癌,血液疾病,宫颈癌,胃肠道肿瘤。此外,其异常表达有重要影响肿瘤细胞发育的不同阶段(10- - - - - -12]。然而,很少有研究关于HOXC6基因在神经胶质瘤细胞的作用,以及在他们的发生和发展。

epithelial-mesenchymal过渡(EMT)是一个过程,将附着上皮细胞转化为间充质细胞侵入细胞外基质(13]。此外,转移和无限增殖是肿瘤细胞的两个重要特征,可以EMT的提升。这种转变也被描述为不可或缺的胚胎发展和伤口愈合,也导致细胞纤维化和癌症的发生和发展14,15]。EMT的起始、扩散、转移和耐药的肿瘤细胞以前被最近的一些研究[16]。研究也表明一个重要的协会之间的EMT和变化在细胞极性的组件,提供一个新的治疗靶点的发展基础,以防止肿瘤恶化[17]。EMT钙粘蛋白的差别是对这些标志,提高粘附连接的不稳定。然而,分子机制参与具体的转换过程是复杂的,和深入研究仍在进行18]。EMT可以由几个生长因子诱导产生的肿瘤相关基质转化生长因子等β(TGF -β)、血小板源生长因子、表皮生长因子、肝细胞生长因子,heparin-binding生长因子(18]。在正常组织中,TGF -β作为一个肿瘤抑制,而在肿瘤发生过程中,它对肿瘤促进活动。TGF -β也被认为是诱导物的receptor-regulated Smads (R-Smads) [19),从而抑制了EMT通过抑制通路的激活相关TGF -β,这可能理解一项新策略来抑制肿瘤的发展。

在目前的研究中,我们表明,HOXC6的表达显著增加在人类的“绿带运动”组织和细胞系。此外,这种更高的HOXC6表达呈正相关,GBM患者的不良预后。机械的分析表明,“绿带运动”细胞的增殖和迁移是增强通过HOXC6增殖蛋白EMT通路的激活。总体而言,我们的研究结果表明,HOXC6 GBM预后的生物标记和一个潜在的药物“绿带运动”治疗的目标。

2。材料和方法

2.1。生物信息学分析

评估GBM患者的基因档案,TCGA的数据集的大脑,大脑太阳,Murat大脑,李的大脑,大脑Bredel 2从ONCOMINE检索。TCGA HOXC6-related基因表达数据集检索的数据库。对基因表达分析、基因 ,和值=被设置为阈值(20.]。HOXC6的表达之间的相关性和GBM患者的总生存期(OS)分析了使用GEPIA数据库(21]。HOXC6的表达在不同病理阶段,患者的存活率分析使用中国神经胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(22]。

基因集富集分析(GSEAhttp://www.broadinstitute.org/gsea/index.jsp)是用于检测基因的信号通路更高和更低的HOXC6表达式组之间明显不同。功能性HOXC6和其他基因之间的关系是由双边皮尔逊积差相关系数进行测试。

2.2。建设HOXC6击倒

两双短发卡rna(成分)专门针对HOXC6 lentivirus-mediated基因可拆卸的试验设计。引物序列是HOXC6 siRNA-1转发:GUCCCUAUAACCAUCUAGUDTDT和反向:ACUAGAUGGUUAUAGGGACDTDT和HOXC6 siRNA-2转发:CCGUAUGACUAUGGAUCUADTDT和扭转:UAGAUCCAUAGUCAUACGGDTDT。

2.3。定量逆转录聚合酶链反应(存在)

总信使rna提取使用试剂盒(豆类,A7603-1)。PrimeScript rt - pcr试剂盒(豆类,PR036A-1)被用来合成互补。混合的Bestar®Sybr绿色qPCR大师(DBI, DBI - 2043)是用于检测表明基因的表达。基因表达的结果都是归一化β肌动蛋白。

2.4。人类样本和临床信息收集

人类GBM样本( )和正常的大脑相邻组织(电视台)收集在镇江市第一人民医院。没有给出任何放疗或化疗前组织收集。操作系统计算是基于所收集的信息的日期诊断死亡或最后随访的日期从2019年到2021年(23]。电视台被收集到的脑外伤患者。所有程序和使用的人类样本遵循赫尔辛基宣言。所有登记病人检查和签署书面知情同意。所有协议和综述了实验设计和伦理委员会批准镇江市第一人民医院。

2.5。细胞和细胞培养

人类U251 GBM细胞是来源于我们之前实验和U87细胞行从江苏大学附属医院。T98G, A172 H4, SHG44细胞系提供的江苏镇江市第一人民医院中心实验室。

2.6。免疫组织化学(包含IHC)分析

被嵌入到石蜡后,标本切成4μ米的部分。然后,他们清蜡和水化与二甲苯和不同浓度的乙醇。部分被微波抗原检索缓冲区(0.01 M柠檬酸缓冲,pH值6.0)抗原检索。接下来,H₂O₂(0.3%)被用来阻止内生氧化物酶的活性在室温下15分钟,和正常山羊血清用于减少30分钟的非特异性结合。与兔anti-HOXC6隔夜孵化后多克隆抗体(1:200年,AB 252821, Abcam)在4°C,组织与PBS洗了三次。洗后,他们孵化1 h和表示二次抗体。样本沉浸,迈耶的苏木精复染色,脱水。部分安装使用水晶山和盲目地评估两个病理学家。染色分数如下:没有染色= 0,周染色= 1,适度染色= 2,和强大的染色= 3。比的基础上积极染色区域整个区域或整个部分,我们染色程度定义为1(< 25%),2(25 - 50%),3(50 - 75%)和4 (75 - 100%)。肿瘤细胞的百分比沾HOXC6的分数染色强度表示为染色指数。 被认定为高HOXC6表达式和 被确定为低HOXC6表达式。

2.7。测量细胞增殖

首先,细胞(3000)被播种在96孔板孵化CCK-8试剂(10μL) (# GB707, Dojindo分子技术,Inc .,熊本,日本)在37°C 4 h。ELx800板阅读器(美国Winooski BioTek)被用来计数细胞通过测量吸光度在450海里。GraphPad棱镜7软件被用来统计分析结果。 被认为是明显不同的。

2.8。集落形成实验

细胞(500)被播种在6-well板和培养14天。经过14天的文化,4%多聚甲醛和0.5%结晶紫(美国圣路易斯C6158, Sigma-Aldrich)是用来固定和染色的细胞,分别。光学显微镜下的殖民地了。

2.9。伤口愈合实验

细胞( 每口井)被播种和孵化6-well板。经过一天的文化,抓挠伤口生成使用200μL吸管小费。显微镜使用带有摄像头拍摄挠地区表示时间点。最后,划痕的宽度进行了计算评估细胞的迁移活动。

2.10。迁移分析

Boyden室gelatin-coated聚碳酸酯过滤器(孔隙 μ米)是用于访问migrative活动的细胞。简单地说, 细胞被播种在参议院,500μL 10%的边后卫介质添加到众议院。经过24小时的文化、细胞入侵的膜结晶紫染色使用0.1%,其次是PFA固定为4%。基于细胞的总数统计在显微镜下,入侵能力计算(23]。

2.11。免疫印迹

首先,里帕缓冲区(σ)含有蛋白酶抑制剂鸡尾酒(美国罗氏)被用来表示组织和细胞溶解产物如前所述[24]。测定蛋白质浓度后,20μg蛋白的加载和解决使用10% sds - page凝胶。蛋白质乐队被转移到PVDF膜,阻止脂肪5%免费牛奶1 h和孵化表示主要抗体在RT两个小时或隔夜在4°C。洗3次PBST解决方案后,蛋白质被孵化表示二次抗体在RT 1 h。的WesternBright ECL工具包(美国Advansta)和ChemiDoc™XRS C成像系统(Bio-Rad)被用来检测和捕获蛋白质带图片(24]。主要的抗体(1:1000)使用钙粘蛋白(# ab231303, Abcam)、波形蛋白(# ab137321, Abcam), TGF -β41494 (SAB), TGFβR2 (SAB 41495), HOXC6 (SAB 41032), p-Smad2 (# ab53100, Abcam) Smad2 (SAB 41442)和微管蛋白(Immunoway YM3030)。

2.12。在活的有机体内实验

江苏大学提供了BALB / c小鼠(6周)。皮下注射U87 siNC或U87-deficient siRNA1给老鼠。肿瘤体积测量开始两周后注入和重复每五天。老鼠被杀死后27 d确定肿瘤的体积,估计是使用公式: 。

肿瘤石蜡包埋后每个试验(23]。动物福利制度准则的中国医学科学院授权所有动物保健和研究。

2.13。统计分析

GraphPad棱镜7和SPSS软件被用于统计分析。生存分析是使用kaplan meier进行曲线和Cox比例风险模型。进行了生存率较确定的重要性两组之间的差异。所有结果都表示为 。每个实验进行了三次。 被定义为明显不同。

3所示。结果

3.1。高表达的HOXC6及其与GBM患者的不良预后显著相关

使用基因表达谱的GBM患者从ONCOMINE下载,我们表明,与正常健康对照组相比,HOXC6表达式在GBM患者显著增加(图1(一))。这些结果进一步证实了使用数据从TCGA GBM患者的数据集(图1 (b))。

然后,我们使用了GEPIA数据库来确定在163年HOXC6高档神经胶质瘤的表达水平(HGG,: iii iv)和207年正常的大脑组织。我们发现HOXC6在HGG的高水平表达( ,图1 (c))。我们也使用这个数据库来分析518年低级神经胶质瘤(LGG, i ii)和207正常的大脑组织和显示HOXC6还表示在LGG(高水平 ,图1 (c))。CGGA数据库的数据证实了更高水平的HOXC6 GBM样本相比,第二和第三级样品( ;图1 (d))。

同时,GBM患者的存活率较低或高HOXC6表达式使用GEPIA数据库和kaplan meier曲线进行了分析。共有81个神经胶质瘤患者高HOXC6表达式比81年神经胶质瘤患者低HOXC6表达式。病人表达低水平的HOXC6相比,高表达式提供了一个低生存率和患者高风险率( ;图1 (e))。

然后,我们构造kaplan meier曲线为高、低表达患者LGG HOXC6。总共有236 LGG患者分类与较低的高表达和211的表情。患者的预后和存活率LGG高HOXC6表情明显低于低HOXC6表达,及其风险率也明显高于( ;图1 (f))。

然后,使用CGGA数据库,我们构造kaplan meier高低HOXC6患者的曲线表达式。共有111个神经胶质瘤患者高表达HOXC6比111年较低的表达式。神经胶质瘤患者的预后和存活率高HOXC6表情明显低于低表达式( ;图1 (g))。

3.2。HOXC6高度表达在人类“绿带运动”样本

的蛋白质含量与正常组相比,HOXC6增加肿瘤组织,包括组T1、T2、T3、T4, T6, T7和T11-T16(数字2(一个)和2 (b))。HOXC6在其他肿瘤组织的蛋白质含量也高于正常组,除了T9和T10样本(数据2(一个)和2 (b))。验证的表达HOCX6在GBM患者中,电视台( )和“绿带运动”( )样本使用包含IHC镇江市第一人民医院进行了分析。HOCX6的表达被发现在大多数GBM样本(21/24),但没有观察到在正常表达控制组织(0/5)(图2 (c))。根据IHC结果,8例显示相对较低HOCX6表情和16例相对较高。

免疫印迹实验,我们评估的水平HOXC6六个神经胶质瘤细胞系,发现HOXC6的水平不同程度的增加。因此,选择细胞系在接下来的实验中,灰度值的计算表明,神经胶质瘤U251的HOXC6水平和U87细胞线明显高于A172相比,T98G, H4, SHG44细胞(图2 (d))。因此,U251, U87细胞用于后续实验。

3.3。HOXC6促进细胞的增殖和Clonogenicity GBM

此外,我们利用RNA干扰(RNAi)击倒HOXC6神经胶质瘤U251和U87细胞。HOXC6被成功的表达下调,转染细胞被分为三组:siNC集团HOXC6 siRNA-1,和HOXC6 siRNA-2。

的抑制作用HOXC6神经胶质瘤U251的扩散和U87细胞CCK-8试验观察。U87细胞的光密度(OD)三组没有差别( )在1和2。然后,OD siNC组显著增加,和HOXC6 siRNA-2集团增加速度比HOXC6 siRNA-1组。然而,这两个群体的OD相似和siNC组相比显著降低( ,图3(一个))。

板克隆试验表明,扩散HOXC6-deficient U87和U251细胞,介导的转染HOXC6-siRNA1或HOXC6-siRNA2,相比明显受损细胞转染和控制核(图3 (b))。U87和神经胶质瘤U251细胞的三组中,使用siRNA1 HOXC6击倒,siRNA2抑制细胞增殖与控制( ,图3 (c))。

3.4。HOXC6促进GBM细胞的迁移和入侵

神经胶质瘤U251的迁移和U87细胞后被抑制HOXC6击倒。相比U251 U87细胞转染siRNA-1或siRNA-2,控制细胞的迁移能力(siNC)明显高于( ,数据4(一)和4 (b))。在Transwell细胞迁移实验中,神经胶质瘤U87和U251细胞的迁移减少HOCX6表达被抑制后(图4 (c))。细胞的数量在U87 siNC组 ,理解增加了61.6和67.7%的迁移能力比U87 siRNA1 ( )和siRNA2 ( )组,分别。U251细胞的数量siNC组 ,理解增加了68.3%和66.8相比U251 siRNA1 ( )和siRNA2 ( )组,分别。总的来说,与siRNA1和siRNA2组相比,siNC组细胞的数量显著增加以及其迁移能力( ,图4 (d))。

入侵Transwell室实验,减少HOXC6 U87和神经胶质瘤U251细胞的显微照片(图所示4 (e))。siNC U87细胞组的数量 ,理解增加了76.9%和70.7相比,迁移能力siRNA1 ( )和siRNA2 ( )组,分别。此外,siNC组U251细胞的数量 ,理解siRNA1相比增加了67.5%和72.4 ( )和siRNA2 ( )组,分别。,控制细胞(siNC组)相比,击倒HOXC6使用HOXC6-siRNA1或HOXC6-siRNA2 U87 U251细胞明显受损的增殖和migrative能力( ,图4 (f))。

3.5。HOXC6参与EMT通路的激活

GSEA显示高表达HOXC6与增强表达TCGA EMT信号通路组件的数据库(图5(一个))。钙粘蛋白的表达在siRNA1 siRNA2组相比显著调节来控制细胞(siNC组),而蛋白质含量N-cadherin明显U87神经胶质瘤细胞中表达下调,以及波形蛋白的蛋白质含量。为神经胶质瘤U251细胞也发现类似的结果(图5 (b))。根据灰度值计算,upregulation siRNA1钙粘蛋白水平和siRNA2组相比有统计学显著性siNC集团U87神经胶质瘤细胞( ,图5 (c))。N-cadherin和波形蛋白差别同样,对这些基因的蛋白质含量显著控制相比,在神经胶质瘤U87细胞( ,图5 (c))。为神经胶质瘤U251细胞也发现类似的结果(图5 (d))。

3.6。HOXC6激活EMT TGF -β/在GBM Smad通路

TGF -的蛋白质含量β1、TGF -β2 Smad4 p-Smad2 siRNA1和siRNA2组相比明显下调siNC集团U87神经胶质瘤细胞。另一方面,Smad2没有不同的蛋白质含量U87神经胶质瘤细胞相比,控制(siNC集团)(图6(一))。对U251细胞(图也发现类似的结果6(一))。的差别根据灰度值计算,对这些TGF -β1、TGF -β2、Smad4和p-Smad2 siRNA1蛋白质含量和siRNA2组相比有统计学显著性控制U87神经胶质瘤细胞( ,图6 (b))。Smad2没有不同的蛋白质含量U87神经胶质瘤细胞( ,图6 (b))。为神经胶质瘤U251细胞也发现类似的结果(图6 (c))。

3.7。HOXC6的功能在活的有机体内

HOXC6击倒和控制细胞(神经胶质瘤U87细胞)瘤内注射到皮下移植瘤模型。HOXC6击倒抑制胶质母细胞瘤细胞生长在活的有机体内肿瘤体积分析(数据显示,7(一)和7 (b))。

4所示。讨论

胶质母细胞瘤(GBM)被认为是最致命的和积极的人类癌症25]。此外,奖励的效果HOXC6过度GBM细胞的增殖和migrative能力也是其他研究人员观察到(20.]。在目前的研究中,我们表明,神经胶质瘤患者的不良预后明显与HOXC6表达呈正相关。然后,我们表明,HOXC6施加对GBM奖励的影响细胞的生长和迁移增强EMT的激活。先前的研究显示HOXC6表达增加多种癌症,以及经济增长促进能力在神经胶质瘤细胞8,20.,26]。基因从ONCOMINE获得配置文件数据,TCGA, GEPIA和CGGA数据库之前用于分析和验证HOXC6在神经胶质瘤的表达3,21)和增加HOXC6表达式的影响在神经胶质瘤患者的不良预后。

在这里,我们使用数据从GEPIA CGGA和发现的表达HOXC6增加HGG和LGG病人和在GBM显著增加,这也证实,TCGA数据库中。然后,GBM患者的生存及预后进行分析。基于神经胶质瘤数据库分析、GBM患者显著增加HOXC6表达式显示相比显著降低预后和生存与相对较低的HOXC6表达式。对LGG病人也发现类似的结果。HGG和LGG病例分析,我们得出结论,在神经胶质瘤患者的预后和存活率显著降低高HOXC6的表达。总的来说,HOXC6明显的表达水平与患者的预后较差。考虑到这些结果,我们推测,在胶质瘤组织标本,HOXC6的表达有上升趋势。因此,我们在医院和患者神经胶质瘤标本收集进行蛋白质和免疫组织化学分析。IHC结果证实了我们的假设;即HOXC6表达增加中高档神经胶质瘤患者。 Therefore, HOXC6 can be used to predict the outcomes of GBM patients.

接下来,在人类SHG44 HOXC6的蛋白质含量,H4, U87 A172,神经胶质瘤U251细胞被免疫印迹测量。所有的细胞系HOXC6表达增加。外侧的表达HOXC6更加明显和适合U251 U87细胞。因此,我们在后续实验使用。

不良预后和肿瘤的发展主要是由于他们的无限的侵入性和增殖活动(27]。我们假设之间的关系HOXC6过度和不良预后受促进神经胶质瘤细胞增殖和迁移的影响。因此,我们与RNAi转染U87和神经胶质瘤U251细胞,撞倒了HOXC6来研究其对神经胶质瘤细胞的增殖和migrative能力的影响。在功能性实验中,我们表明,HOXC6扮演重要的角色在神经胶质瘤的增殖和迁移。U87和U251细胞的增殖和迁移能力与HOXC6击倒显著降低,这将有利于使用HOXC6作为治疗目标改善预后,存活率,神经胶质瘤患者的生活质量。我们也证实了这些结果在活的有机体内。

EMT是指附着的变换上皮细胞向间充质细胞入侵的细胞外基质的能力。在人类癌症细胞的入侵,肿瘤上皮细胞需要,至少暂时,转变成入侵和转移的间质表型。因此,EMT明显与转移,传播,癌细胞的入侵28]。获得迁移和入侵细胞外基质的能力被认为是EMT的标志。此外,钙N-cadherin,波形蛋白也扮演了一个重要的角色在肿瘤细胞29日]。N-cadherin是一个单链的糖蛋白膜域,可以调节异形的,同型的信息粘连和参与造血微环境的规定,血管,骨骼肌肉,心脏,大脑和神经系统(30.]。N-cadherin也被认为是一个EMT标记因为这个过程特点是间充质标记的积累,包括N-cadherin,减少钙粘蛋白的表达。因此,N-cadherin表达式中增加EMT (31日]。我们进行了GSEA基于TCGA GBM数据库和发现EMT信号通路是丰富HOXC6高表达组。钙粘蛋白的表达在siRNA1和siRNA2组显著调节与控制相比,虽然N-cadherin和波形蛋白在神经胶质瘤细胞中表达下调。因此,控制相比,siRNA1和siRNA2团体EMT过程的抑制作用。HOXC6可以影响差别这些结果表明,对这些基因的表达相关蛋白在EMT,表明这个基因也可以促进人类的入侵和migrative能力通过EMT神经胶质瘤U251和U87细胞。

TGF -β发挥其监管影响GBM通过控制EMT Smad-independent和Smad-dependent的激活模式,最终导致糟糕的预测(32]。先前的研究描述了增强的E / N-cadherin过渡,波形蛋白,和neurocadherin表达式,以及衰减上皮钙调蛋白表达的TGF -β(33]。TGF -β结合受体TGF -βRI / II激活下游信号通路,包括Smad、MAPK和PI3K / Akt。我们目前的实验表明,HOXC6可以调解这两种受体。其中,TGF -β1 / Smad途径证明调解TGF -β全身的EMT。此外,第一种和第二种serine-threonine激酶受体的激活,如TbRI和TbRII TGF -β,结果在R-Smads激活,和磷酸化Smad2和/或Smad3,促进heterotrimeric复合物的形成和Smad4 co-Smads [34]。把进入细胞核后,这些复合物可以增强基因的表达与EMT激活通过相互作用不同的转录因子。因此,许多EMT相关转录因子激活激活Smad2/3 [35]。在这里,我们发现TGF -的表达β1、TGFβR2的下游分子TGF -β1 /通过免疫印迹Smad信号通路。此外,一个主要的角色Smad2/3通路的激活引起的EMT TGF -β在GBM细胞以前观察到(18,36]。癌症的发病机制,包括神经胶质瘤,会导致失调的TGF -β及其下游Smad通路(37,38]。在此,TGF -的激活β/ Smad Smad通路和随后的磷酸化蛋白质被HOXC6沉默受损,表明HOXC6发挥其监管影响migrative和侵入性神经胶质瘤细胞的能力通过促进TGF -的激活β/ Smad通路。

我们目前的研究也有一些局限性。首先,一个小偏差可能是由于有限的人口登记。因此,未来的大样本大小应该使用来验证我们的结论。第二,致癌基因异常表达和其他一些因素也会影响患者的生存,如辅助治疗、肿瘤分化、肿瘤阶段,和年龄,不纳入本研究。因此,更全面的分析包含临床信息应该进一步进行准确地评估在GBM HOXC6的预后价值。第三,进一步在活的有机体内调查与动物模型需要核实HOXC6在GBM的功能和显示的确切分子机制之间的关系HOXC6和EMT通路的激活。

数据可用性

部分或全部数据、模型或代码支持本研究的发现可以从相应的作者在合理的请求。

的利益冲突

我们没有利益冲突的披露。

作者的贡献

太阳Eryi和李郑的贡献同样这项工作。

确认

研究由镇江市级卫生委员会(BRA2020161),江苏大学(JLY20180050),江苏大学附属人民医院(Y2019002)。