文摘
我们报道了Rev-erbα转录抑制因子,减少人类胃癌,并抑制糖酵解在培养胃癌细胞。然而,目前尚不清楚Rev-erbα在胃癌发生转译后的修改。在这里,我们Rev-erb水平决定的α和及其转译后的修改包括磷酸化、类泛素化泛素化在N-methyl-N-nitrosourea (MNU) /幽门螺杆菌(幽门螺旋杆菌全身的)胃癌在老鼠和人类胃癌细胞培养。MNU +管理幽门螺旋杆菌感染成功诱导C57BL / 6 j小鼠胃肿瘤。MNU /幽门螺旋杆菌减少Rev-erb的水平α在小鼠胃肿瘤组织伴随着乳酸水平的增加。Rev-erbα蛋白质SUMOylation和泛素化修饰是显著增加,而磷酸化是不变,在胃癌细胞bgc - 823和MNU /幽门螺旋杆菌全身的小鼠胃癌组织。使用人类胃癌组织,我们发现Rev-erbα具体降低在胃粘膜上皮细胞组织。细胞因子水平增加MNU /幽门螺旋杆菌暴露小鼠相比,控制老鼠。同样,il - 6的水平il - 10, TNF -α,VEGF在bgc - 823细胞系相比GES-1细胞。il - 6和il - 1 Rev-erb孵化并没有影响α在bgc - 823细胞水平。此外,Rev-erbα被招募这些细胞因子基因的启动子,抑制其表达。最终,Rev-erbαSUMOylation和随后的泛素化可能导致其蛋白质减少,从而导致增加糖酵解和异常炎症反应在胃癌的发展。针对Rev-erbα及其SUMOylation代表承诺为胃癌的预防和管理方法。
1。介绍
虽然在人类胃癌是一种常见的恶性肿瘤,其病理机制并不完全理解。胃癌的发生是由于多个生物,遗传和环境因素,以及多个阶段。幽门螺杆菌(幽门螺旋杆菌)感染是最重要的因素。感染后,幽门螺旋杆菌导致胃粘膜炎症反应,诱导宿主产生多种细胞因子,改变微环境包括胃的生理和免疫状态。这可能导致癌变转换和胃粘膜上皮细胞的无限制的增长1- - - - - -3]。代谢组学的发展,最近的研究先进我们理解代谢调节和癌症之间的关系。广泛的研究表明代谢重编程是癌症的一个标志,复杂与肿瘤形成和肿瘤的免疫逃逸。乳酸的浓度不断增加尿液和/或组织样本的胃癌患者,而葡萄糖是大大减少与健康人相比。这些高乳酸水平可能归因于大多数癌细胞,因为肿瘤细胞的特殊代谢消耗大量葡萄糖为糖酵解甚至足够的氧气的条件下(Warburg效应)4]。这糖酵解开关被报道与致癌转换和分子信号转导有关(5]。
Rev-erbα核受体和关键组件的分子时钟驱动的日常节奏的新陈代谢。Rev-erb家庭成员参与病理过程,包括睡眠障碍、糖尿病、动脉粥样硬化、阿兹海默氏症和其它疾病,通过调节生物钟,炎症/免疫反应和脂质代谢。一项研究表明Rev-erbαKO小鼠烟更大的炎症反应,包括增加中性粒细胞肺涌入和促炎细胞因子释放与野生型小鼠相比6]。刺激Rev-erbα活动SR9009大大降低ventilator-induced肺损伤,炎症细胞浸润,促炎细胞因子TNF -的生产α(7]。Rev-erbα至关重要的炎症和代谢相关基因转录的调控。我们已经检查了Rev-erb之间的关系α和肿瘤(8- - - - - -13]。炎症通常是与癌症的发生和发展有关。慢性炎症的刺激会增加癌症的风险或促进癌症发展,包括幽门螺旋杆菌感染(14]。在许多癌症和炎症细胞因子il - 6是高度调节细胞因子被认为是最重要的一个家庭在肿瘤发生和转移15]。炎性细胞因子TNF -α可以触发肿瘤转变的第一步,作为一个肿瘤细胞自分泌生长因子,和转移中发挥重要作用16]。先前的研究表明Rev-erb的减少活动α或Rev-erbα淘汰赛TNF -促进了生产α和il - 6在啮齿动物的肺6,7]。击倒的Rev-erbα有效地调节生产的il - 6 (17]。的Rev-erbα受体激动剂SR9011刺激抗炎细胞因子il - 10的表达(18]。Upregulation VEGF的表达在胃炎症可能与胃癌的发展(19]。我们之前报道Rev-erbα减少人类胃癌(13),并抑制糖酵解培养胃癌细胞(20.]。Rev-erbα可以进行各种修改包括蛋白质磷酸化影响其稳定性。目前的研究调查是否Rev-erbα减少与它的转译后的修改,包括磷酸化,SUMOylation,泛素化在胃癌。炎症和乳酸水平也是衡量在胃癌的发展。
2。材料和方法
2.1。病人和样品
六个新鲜胃癌组织对(肿瘤与邻近正常组织)是通过手术切除相似的时候为了避免昼夜变化从安徽医科大学第一附属医院,马上储存在- 80°C。Tumor-adjacent组织得到远至2厘米从胃肿瘤。所有情况下被组织病理学诊断。组织蜡块和部分胃癌病理学系的得到安徽医科大学第一附属医院通过组织病理学诊断,病理学家和确认。特征如表所示1。从每个登记病人知情同意了。
2.2。动物
C57BL / 6 j小鼠(男性和女性)用于目前的研究是购自南京大学模式动物研究中心(中国南京)。总共60还是雄性C57BL / 6 j小鼠被安置在笼子12/12-hour光/暗周期和保持在23°C下特定的无菌(SPF)条件。老鼠被分为以下三组:第1组,控制(n= 10)。组2,N-methylnitrosourea (MNU)(σ化工有限公司,圣路易斯,密苏里州,美国)+幽门螺旋杆菌(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州,6个月,n= 25)。组3,MNU +幽门螺旋杆菌(12个月,n= 25)。MNU溶解在蒸馏水在浓度200 ppm和放置在一个light-shielding瓶作为老鼠的饮用水。MNU组老鼠喂食饮用水含200 ppm MNU 10周的每周两次。MNU治疗完成后,老鼠在MNU +幽门螺旋杆菌组接种orogastrically 5×109克隆形成单位/毫升幽门螺旋杆菌(写明ATCC 49179),每天交替的5倍。老鼠被公司牺牲2窒息后6个月和12个月接种类似的时候为了避免昼夜变化。所有执行的实验研究伦理委员会批准安徽医科大学第一附属医院(合肥,安徽,中国)。
2.3。细胞培养
人类胃粘膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞株bgc - 823和国网公司- 7901)从美国获得类型文化集合(美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。细胞在DMEM培养(热费希尔科学,北京)10%胎牛血清和100国际单位/毫升青霉素和链霉素(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA) 37°C下5%的股份有限公司2和21%啊2条件。
2.4。免疫印迹
细胞颗粒或小鼠胃组织洗了磷酸盐(PBS)和均质与适量的含有蛋白酶抑制剂的鸡尾酒和PMSF•瑞帕裂解缓冲。处理组织孵化在冰30分钟。离心后的上层清液被用作实验样品在4°C 12000 g×20分钟。BCA法测量蛋白浓度。样本10% sds - page分离和转移到PVDF膜。细胞膜被封锁在PBS 5%脱脂牛奶含有0.1%渐变20在室温下2小时,紧随其后的是隔夜与初级抗体(Anti-Rev-erb孵化α抗体:圣克鲁斯,# sc - 393215, 1: 1000)在4°C。接下来,二次抗体孵化1小时在室温下,和乐队的蛋白质被发现使用ECL反应的解决方案。
2.5。乳酸浓度测量
的细胞以及胃肿瘤组织MNU /幽门螺旋杆菌治疗组和相应的组织收集正常组在空腹条件下使用乳酸测定乳酸浓度的测量工具(BioVision苗必达,CA)按照制造商的指示。血清乳酸也是以人类被试。
2.6。苏木精和伊红染色
胃组织中中性缓冲多聚甲醛固定用4%。这些固定的肺是嵌入在石蜡,分为5μm部分使用旋转式切片机,与苏木精和伊红染色。
2.7。免疫荧光
Formalin-fixed石蜡包埋组织被削减int 4μm deparaffinized二甲苯和水化的部分通过一系列分级醇。组织部分被放置在一个装满了柠檬酸抗原修复检索解决方案,并在微波炉抗原进行检索。幻灯片和PBS自然冷却后洗3次,每次5分钟,然后阻止了3% BSA在PBS缓冲了30分钟。组织与初级Rev-erb抗体孵化α(ab174309 Abcam)和Tff1 (ab92377 Abcam) 1: 200稀释一夜之间在4°C调湿室之后,孵化与相应的二次抗体在黑暗中在室温下60分钟。幻灯片是安装后与树脂滴的适量antifluorescence淬火组织。荧光和荧光显微镜检测。荧光检测通过使用徕卡TCS NT激光共焦显微镜。
2.8。免疫沉淀反应(IP)
细胞和实验胃癌组织细胞溶解在IP裂解缓冲包含50 mM玫瑰(pH7.4), 100毫米氯化钠,MgCl 5毫米2甘油NP-40 0.5%, 10%,氟化钠1毫米,1毫米Na3签证官4,1×蛋白酶抑制剂鸡尾酒20分钟的冰。细胞溶解产物在13000×g离心20分钟的4°C。适量的上层清液被测定蛋白质浓度和准备输入样本。溶菌产物含有约400μg - 2毫克的蛋白质和等于总额预冷的免疫沉淀反应缓冲区包含一个适当的比例的蛋白酶抑制剂和antibody-coupled添加了琼脂糖珠,分别。上述混合物孵化了一夜之间在4°C。离心沉淀复杂收集的3000 rpm为1分钟,然后洗TBST三次。免疫复合物的分离的蛋白质印迹的珠子。
2.9。测定il - 6、il - 10 TNF -α和VEGF水平
根据制造商的指示,浓度il - 6、il - 10, TNF -α通过酶联免疫吸附试验,VEGF是量化的。il - 6、il - 10 TNF -α及VEGF板得到从研发系统(研发系统,CA)。
2.10。转染
一个RNA-guided CRISPR / Cas9-mediated基因组编辑方法用于删除Nr1d1基因bgc - 823细胞。Rev-erbα针对sgRNAs买来圣克鲁斯(猫#:sc - 401211),这是克隆成lentiCRISPRv1质粒(Addgene、剑桥、马)。这个生成lentiCRISPR-Rev-erbα-sgRNA向量。lentiCRISPRv1质粒表达EGFP的定位sgRNA (Addgene)仅用于生成控制lentiCRISPR-EGFP-sgRNA向量(21]。细胞被播种在2×10 6-well细胞培养板5在中等和lentiCRISPR-Rev-erb转染细胞/好α-sgRNA矢量或控制lentiCRISPR-EGFP-sgRNA 48 h (21]。细胞被选中在介质含嘌呤霉素(1μg / ml) 2周。Nr1d1基因表达是由存在决定的。
2.11。染色质免疫沉淀反应(芯片)的测定
细胞被固定为1%甲醛和终止与2.5毫米甘氨酸。溶解的刮细胞用PBS和硫代硫酸钠。溶菌产物分为三个整除,其中一个是一个积极控制和没有接受治疗,其中一个是一个消极的控制,这是孵化与靶蛋白。三分之一的细胞溶解产物担任测试组和与抗体对Rev-erb孵化α(1μg PLUS-Agarose g)和蛋白质。RNA和蛋白质去除后,分别与phenol-chloroform DNA提取。接下来,浓缩在基因启动子的程度用实时定量PCR检测。
2.12。统计分析
SPSS 20.0软件使用进行统计分析。结果受到单向方差分析和参数研究,并表示为均值±SEM。统计显著性水平的被接受值< 0.05。
3所示。结果
3.1。MNU /幽门螺旋杆菌在老鼠身上诱发胃肿瘤
胃肿瘤进行宏观和微观的病理学家在盲目的方式。总的来说,表2显示,29.2%的老鼠发达MNU /后胃肿瘤幽门螺旋杆菌治疗6个月,而86.4%的老鼠被美联储MNU后胃肿瘤/开发幽门螺旋杆菌为12个月。这些结果说明MNU /幽门螺旋杆菌在老鼠身上诱发胃癌。
3.2。Rev-Erb水平α蛋白质是专门减少胃粘膜上皮细胞在临床胃癌组织
确定Rev-erbα在人类胃癌组织减少,Rev-erb吗α和胃粘膜上皮细胞特定的标记(Tff1)被发现在人类胃癌组织和相应的相邻组织免疫荧光染色。首先,我们证实胃癌组织与中度分化腺癌)染色(图1)。与对应的相邻组织相比,Rev-erb的荧光强度α蛋白质在人类胃癌组织显著降低。Rev-erb的荧光强度α蛋白质也减少Tff1-positive细胞由co-localization分析(数据1 (b)和1 (c)),而免疫球蛋白(图控制显示没有信号1 (d))。这些结果表明,Rev-erbα蛋白质是减少胃粘膜上皮细胞在临床人类胃癌组织。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.3。Rev-Erb水平α减少胃组织中,乳酸水平增加小鼠MNU /幽门螺旋杆菌全身的胃癌和人类胃癌组织
确定MNU /引起的胃肿瘤的形成幽门螺旋杆菌与Rev-erbα,我们测量Rev-erbα蛋白质含量在实验胃组织。与对照组相比,显著降低Rev-erb的水平α观察蛋白质在胃组织MNU /幽门螺旋杆菌时间的方式(数字2(一个)和2 (b))。此外,乳酸的水平在胃组织MNU /幽门螺旋杆菌治疗组明显高于对照组(图2 (c))。此外,乳酸增加人类胃癌组织相比,在相邻的正常胃组织(表1)。这些结果表明,胃肿瘤的形成与Rev-erb下降有关α水平,增加糖酵解。
(一)
(b)
(c)
3.4。Rev-Erbα磷酸化水平变化在bgc - 823细胞系或MNU /幽门螺旋杆菌全身的谅解备忘录胃肿瘤组织
我们检查了Rev-erb的变化α蛋白质磷酸化在人类胃癌细胞株(bgc - 823)在胃癌组织从MNU /幽门螺旋杆菌暴露小鼠,以确定是否与Rev-erb的表达下降有关α蛋白质。相对于正常的人类胃粘膜上皮细胞(GES-1),没有明显改变在Ser55/59磷酸化或Thr275 Rev-erb的氨基酸残基α蛋白质在bgc - 823(数据3(一个)和3 (c))。同样,在MNU /幽门螺旋杆菌全身的小鼠胃癌组织,磷酸化Ser55/59或Thr275 Rev-erb的氨基酸残基α蛋白质与控件(数据没有显著改变3 (b)和3 (d))。这些结果表明,Rev-erbα磷酸化水平不变在bgc - 823细胞系或MNU /幽门螺旋杆菌全身的谅解备忘录胃癌组织。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
3.5。相扑修改Rev-Erbα在bgc - 823和显著增加MNU /幽门螺旋杆菌全身的小鼠胃癌组织
Rev-erb的水平α在bgc - 823细胞系和SUMOylation MNU / H。pylori-induced备忘录胃癌组织中检测到免疫沉淀反应。如数据所示4(一)和4 (c)与正常人相比,胃粘膜上皮细胞(GES-1) Rev-erb之间的相互作用α蛋白质和泛素显著增加在bgc - 823细胞系。此外,Rev-erb之间的相互作用α蛋白质和SUMO1增加在bgc - 823细胞系GES-1相比。同样,泛素化和SUMOylation Rev-erbα增加MNU /幽门螺旋杆菌暴露小鼠胃肿瘤组织(数字4 (b)和4 (d))。然而,Rev-erb之间的交互α蛋白质和SUMO2持平在bgc - 823细胞系或MNU /幽门螺旋杆菌全身的小鼠胃癌组织。这些数据表明,Rev-erbαSUMOylation和随后的泛素化可能导致其在胃癌组织的退化。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.6。il - 6的分泌il - 10, TNF -α,VEGF在bgc - 823细胞系,增加血清MNU /幽门螺旋杆菌暴露小鼠和人类胃癌组织
我们量化il - 6和TNF -α水平从小鼠血清样本以确定任何显著差异之间的细胞因子浓度实验组和正常的。该方法也被用来比较GES-1细胞和bgc - 823细胞系。我们发现,il - 6和TNF -显著增加α血清样本中浓度观察MNU /幽门螺旋杆菌暴露小鼠相比,控制老鼠(图5(一个))。水平的il - 6、il - 10, TNF -α,VEGF在bgc - 823细胞系相比GES-1细胞(图5 (b))。同样,这些细胞因子的水平增加了胃癌组织与邻近正常组织相比(表1)。这些结果表明,炎症反应在胃癌增加,这与减少Rev-erb相关联α。
(一)
(b)
3.7。il - 6和il - 1治疗不影响Rev-Erbα蛋白质但提高乳酸水平在人工培养的胃癌细胞
bgc - 823细胞对il - 6和il - 1(5和10 ng / ml) 24 h。Rev-erbα用免疫印迹。如图6,il - 6和il - 1治疗并不影响Rev-erbα蛋白质含量(图6(一))。有趣的是,乳酸的水平显著增加在这些细胞il - 6和il - 1(数据处理6 (b)和6 (c))。这表明,炎症可能不会导致Rev-erbα但在人类胃癌细胞糖酵解增加减少。
(一)
(b)
(c)
3.8。Rev-Erbα细胞因子基因的启动子是招募,压制他们的表情吗
自从Rev-erb il - 1和il - 6没有影响α蛋白质含量,我们想要评估是否Rev-erbα抑制细胞因子的基因表达。首先,我们Rev-erb删除αNr1d1编码基因和细胞因子基因的表达。如数据所示7(一)和7 (b),Nr1d1基因表达显著降低Nr1d1 KO细胞。Nr1d1基因删除评论il - 6的表达增加,TNF -α、VEGF、il - 10水平在bgc - 823细胞。此外,Rev-erbα蛋白质招募启动子的il - 6、TNF -α、VEGF、il - 10基因(图7 (c))。这些结果表明,Rev-erbα招募了细胞因子基因的启动子,压制他们的表情。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
Rev-erb是核受体和转录抑制因子,这两个家庭成员Rev-erbα和Rev-erbβ分别由Nr1d1和Nr1d2基因编码。Rev-erbs参与病理过程包括睡眠障碍、糖尿病、脂肪肝、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病,和骨吸收异常/重构通过调节生物钟,炎症/免疫反应和脂质代谢22- - - - - -24]。数据从Sulli等人的研究表明,Rev-erb受体激动剂减少脑癌的生存,白血病、乳腺癌、直肠癌、黑色素瘤细胞系(10]。此外,Rev-erb的激活α/β抑制小鼠胶质母细胞瘤的生长(10,11]。我们最近报道,Rev-erbα减少人类胃癌组织增加TMN阶段。此外,Rev-erb的低表达α与胃癌患者的不良预后相关(13]。Rev-erbα也减少了MNU /幽门螺旋杆菌全身的胃癌组织。具体来说,Rev-erbα在胃粘膜上皮细胞减少胃组织,表明上皮细胞分化和肿瘤发生。Rev-erb的作用α在胃癌的发展将在未来使用KO小鼠。进一步的研究是必要的,以确定的机制减少Nr1d1基因表达在胃癌(12,13]。
Rev-erbα可以进行各种蛋白质的修改通过泛素化/通路蛋白酶体依赖降解影响其稳定性。例如,磷酸化的丝氨酸(Ser)残留Rev-erb 55 - 59α蛋白质增加其稳定性,而苏氨酸残基磷酸化(刺)275减少了稳定25,26]。此外,磷酸化Rev-erb的氨基端区域α调节细胞内定位和信号通路(26,27]。基于这些发现,我们测试是否Rev-erbα在人类胃癌细胞株和磷酸化MNU /幽门螺旋杆菌全身的小鼠胃癌组织。没有明显的变化Rev-erb的水平α蛋白质磷酸化(Ser55/59和Thr275)在人胃癌细胞系和引起的小鼠胃癌MNU /幽门螺旋杆菌,表明Rev-erb的减少α相关蛋白在胃癌组织中可能不是其磷酸化。尽管如此,Rev-erb的泛素化α蛋白质在人类胃癌细胞株和显著增加小鼠胃癌组织。这些结果表明,Rev-erbα在胃癌组织中蛋白质可能接受其他修改,使它与泛素结合,导致其。蛋白酶体依赖降解
在HEK293细胞中,Rev-erbα蛋白质可以接受相扑修改炎性因子的刺激下,导致其泛素化和[蛋白酶体依赖降解28]。相扑是ubiquitin-like蛋白质有四个家庭成员:SUMO1, SUMO2 SUMO3, SUMO4。SUMO1-SUMO3表示在所有组织,而SUMO4表达特别是器官。相扑修改共价结合相扑目标蛋白质的氨基酸残基通过激活酶E1,结合酶E2 (Ubc9)和连接酶E3。它是一个动态的可逆过程,并由SUMO-specific deSUMOylation蛋白酶家族成员。我们第一次发现,相扑Rev-erb的修改α蛋白质在人类胃癌细胞株和显著增加小鼠胃癌组织。这可能是显著增加相关SUMO1表达在人类胃癌组织(29日]。进一步研究使用蛋白酶体抑制剂、ubc9 SUMO1胃癌细胞中转染将进一步了解是否Rev-erbαSUMOylation使其蛋白质降解。
当前Rev-erbs在代谢的研究主要集中在脂类代谢。例如,当Rev-erbα小鼠的基因被淘汰,在肝脏和血清载脂蛋白CIII的表达增加,和极低密度脂蛋白和甘油三酯的水平显著增加(30.]。此外,脂肪酸代谢的关键基因的表达(CD36 Fabp3, Fabp4)减少细胞内含有Rev-erbs突变体(31日]。葡萄糖代谢,Rev-erbα抑制糖质新生。当血红素结合Rev-erbα在肝细胞,提高其活性,抑制基因表达的关键酶(磷酸烯醇丙酮酸carboxykinase, PEPCK)所需的糖质新生(32]。我们报道了Rev-erbα减少导致胃癌细胞增殖上调糖酵解、磷酸戊糖途径(PPP) (20.]。MNU的血清中乳酸增加/幽门螺旋杆菌暴露的老鼠,这可能是由于Rev-erb减少α。幽门螺旋杆菌有能力利用葡萄糖代谢通过PPP的葡糖激酶活性和酶和糖酵解途径33,34]。有趣的是,反幽门螺旋杆菌观察活动时接受高水平的外生乳酸(35]。因此,它是可能的幽门螺旋杆菌对胃癌细胞增殖乳酸产量提高,减少细菌活动的回报。是否Rev-erbα体内抑制胃癌细胞的增殖和生长的胃癌仍不清楚。
炎症反应在癌症发展上发挥了关键作用,包括肿瘤发生,推广、进展、转移。细胞因子被认为是重要的炎症介质连接胃癌(36]。我们的数据表明,il - 6水平明显增加,il - 10, TNF -α血清样本中,VEGF实验小鼠与正常小鼠相比。此外,水平的il - 6、il - 10, TNF -α,VEGF在胃癌细胞株是高于正常人胃黏膜上皮细胞。研究已经表明,Rev-erb的活动减少α或Rev-erbα淘汰赛促进il - 6和TNF -的生产α在啮齿动物的肺6,7]。这证实了我们的研究结果显示这些基因的表达增加Nr1d1 KO细胞。这些发现表明,增加炎症反应与减少Rev-erb相关联α在胃癌的发展。需要指出的是,幽门螺旋杆菌诱发炎症(37,38]。还需要进一步的研究来剖析的角色幽门螺旋杆菌和减少Rev-erbα在胃癌的调节炎症反应。
il - 1 Rev-erb原因αSUMOylation,导致其退化HEK293T细胞(28]。有趣的是,il - 6和il - 1 Rev-erb孵化并没有影响α在胃癌细胞中蛋白质含量。细胞因子可以刺激糖酵解促进癌症细胞增殖(39- - - - - -41]。这是在我们的研究结果显示乳酸增加了il - 1和il - 6孵化。我们推测,细胞因子的浓度的增加可能促进胃癌患者的糖酵解途径。
5。结论
总之,本研究首次表明,相扑Rev-erb的修改α蛋白在胃癌组织中观察到,与蛋白质降解。Rev-erbα减少导致细胞因子基因的表达,由于减少了招聘的推动者。增加细胞因子的释放增加糖酵解,看到在胃癌(图7 (d))。针对Rev-erbα或其相扑修改可能代表承诺为胃癌的预防和管理方法。
数据可用性
使用的数据来支持我们目前研究的结果可从相应的作者。
附加分
对这个领域的贡献。虽然在人类胃癌是一种常见的恶性肿瘤,其病理机制了解甚少。我们报道了Rev-erbα蛋白质是人类胃癌下降,与分化不良、TMN阶段,预后不良。然而,目前尚不清楚Rev-erbα蛋白质经过转译后的修改导致其在胃癌的退化。在这里,我们发现Rev-erbαSUMOylation和随后的泛素化增加培养胃癌细胞和N-methyl-N-nitrosourea /幽门螺杆菌全身的小鼠胃肿瘤组织。这是与增加糖酵解和异常炎症反应有关。因此,针对Rev-erbα和屏蔽SUMOylation-mediated蛋白质降解是一种很有前途的方法胃癌的预防和管理。
伦理批准
研究的协议是安徽医科大学的伦理委员会批准。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
概念和设计是由ZW。数据采集和分析是由XC, KC, YW, RJ, JW, DL。数据的解释是由赫兹和ZW。XC KC, YW起草了手稿。KC和ZW修订后的手稿。陈客、程晓文和Wan宇贡献同样这项工作。
确认
这项研究得到了国家自然科学基金(81302150)、安徽省自然科学基金(1608085 mh182和1608085 mh294),以及国家自然科学基金委的培养计划为年轻学者的安徽医科大学第一附属医院(批准号2012 kj10)。