文摘
非编码RNA转录后调控已经被证明与强大的能力,使交织在一起的RNA相声和全球分子间相互作用在大量的功能失调的条件包括癌症。竞争内源性rna(龙头)那些竞争力绑定共享小分子核糖核酸(microrna),把同行从miRNA-induced退化,从而积极影响和相互连接。不断更新分析方法提高杰出进步实现在这个新兴的热点在多层细胞内的通信中,为发病机理和临床治疗提供新的见解。在这里,我们总结和相关因素在这种RNA相互作用的机制和放松管制的转录谱在肿瘤和肿瘤进展,凸显龙头、诊断价值的重要意义,监测生物标志物,在癌症和预后评估。
1。普遍的非编码rna基因组范围
众多证据对于非编码RNA转录的属性在过去的几年中,解开他的伟大的能力,远远超出了之前良好的遗传信息载体和不可或缺的信使对蛋白质合成转录后调控和多层交互序列,即广泛交织分子串扰以及快速变化的细胞环境组成一个健壮的胞内连接。标识的验证和非编码RNA的重要性普遍(ncRNAs)进化的复杂性多样性生物部分在于比较,75% -95%的人类基因组转化为RNA转录基本上不同长度和功能,实际上用不到2%,特征21000个基因(1),由于蛋白质编码属性(2,3],然而几乎全基因组翻译已被证实在简单的结构化物种如单细胞酵母(4],秀丽隐杆线虫拥有约等量的基因编码一种蛋白质与人类但小30倍基因组(5]。与多个因素,不同的转录模式生成产品,包括但不限于反义链或非编码基因间的记录,之前未和被认为是无用的余数不成熟的表达机制。以200个碱基对为边界,非编码记录大致分为两类相应的大小,即小ncRNAs和长ncRNAs (lncRNAs) [6]。小ncRNAs一直深深官能团,其中microrna进入复杂的RNA-RNA监管网络是最具代表性的组件之一,将详细澄清后,关于他们的值得注意的角色在生化行为和病理生理条件下(3,7,8]。相反,呈现多向性的影响作为指南,支架,自然的诱饵,在大规模分子相关性和海绵转录,转录后,表观遗传,据说和gene-expressing事件,lncRNAs一直被视为“主监管机构”(9),即便如此,那些迄今为止隐藏方法通过lncRNAs灵活参与细胞内稳态稳定性和响应扰动在很多疾病的发展,在此以癌症,仍等待进一步的探索。基于现有成果凸显的非凡潜力ncRNAs作为调节元素在致癌作用,我们概述ncRNAs的形象,他们的派生身份,电抗器在肿瘤发病机理,以及客观条件影响内心的行动,促进具有高度针对性的预测工具的更新,为未来奠定了根深蒂固的基础研究和临床意义生物标志物检测、预后判断和治疗方案的选择。
2。龙头、假说:推导和扩展
转录主要来自编码基因的内含子,外显子与其他的编码基因以及intronic其实地区的非编码序列(10],microrna是小单链rna组成的一般南港核苷酸,集中龙头、调节和彼此相互作用通过识别microrna的反应元素(研究硕士)的目标记录(2,11,12]。microrna的生物合成是一个顺序enzyme-dependent过程,宗教上地转录前体microrna (pre-miRNAs)在细胞核中,在串联催化RNA聚合酶和核Drosha / DGCR8复杂,释放到细胞质和裂解成双链由骰子microrna与适当的长度,最后纳入Argonaute-loaded miRNA-induced沉默复合体(miRISC)经过变性的互补链6,13),与目标的指导下6 - 8核苷酸碱基配对microrna的5′端(9]。种子在目标匹配和microrna成绩单需要绑定,而完美的互补并不总是必要的。研究硕士通常建立在编码序列(CDS), 2 - 8核苷酸5′非翻译区(5′utr),和大多3′utr rna组成的几个子集lncRNAs,转录伪基因,圆形rna (circRNAs)和mrna (14- - - - - -16],它在表达受到抑制通过完整的退化或翻译镇压,分别发生在高或相对较低的度互补碱基对之间的匹配研究硕士和microrna2,3]。一些人指出,不完美的绑定,这意味着“凸出的海绵”种子区域,更有效地吸收microrna和作为竞争的分子部分是因为长期占领;否则,microrna释放一旦完美配对目标经过退化(17]。相互交互,microrna的可用性和活动是受他们的约束力的目标,其中有些降低,而其他人隔离从选择感兴趣的序列11,18]。更重要的是,3′末端修改microrna RNA和目标函数等数学滴定原理也占减少miRNA级别(19]。鉴于上述,可想而知,microrna在复杂的细胞内串扰可以作为轴中心在稳态状态和干扰生理milieux像癌症。
理论上,当各种记录的目标相同的microrna,一边的转录水平升高会减轻miRNA-induced抑制,导致直接或间接调控基因表达。病毒载体转染,人造海绵特定microrna的被利用之前自然目标进入了视野,由强启动子和转录合成为目的microrna熊重复的结合位点,因此表现出迷人的影响derepressing对应目标(20.,21对RNA相声],显示出深刻的意义,更准确地说,电抗器,假说的形成。
第一个发现天然海绵lncRNA IPS1中发现拟南芥观察到的诱饵磷酸starvation-induced mir - 399,随后帮助维持稳定和丰富其合作伙伴的目标PHO2 [22]。植物中与先例澄清完美互补,microrna的裂解位点上的不匹配的循环使IPS1绕过障碍和胜任有效绑定(3,22]。暴露后,这种现象称为“目标模仿”(22),并行发现公布在动物细胞,异位超表达的研究硕士导致适度下降microrna的水平和积累的目标1.5 - -2.5倍21]。在2010年晚些时候,疱疹病毒saimiri据报道了T细胞表达ncRNA h . saimiri U-rich rna (HSURs),这是与miR-27退化和增加FOXO1水平(23]。这些承诺的基本含义和机制发现扩展到癌症领域的假基因PTENP1被证明有着共同的microrna与其同源编码RNA (24]。前期证据组装,电抗器,假设在2011年提出,证明每个microrna的歧管RNA目标和最RNA承担大量的研究硕士,因此内生编码和非编码RNA相互调节和相声的竞争性结合共享但有限的microrna池(12]。同年,其他三个电抗器的研究加强了至关重要的作用的分子鉴定癌细胞(25- - - - - -27]。
分组的所有非编码rna和非编码属性mrna成有功能的复杂性,电抗器,假设基本上打开的窗口多层次、trans-regulatory龙头、网络(ceRNET)转录组,在竞争和相互作用在所有子集的电抗器,发生在直接、间接,或二次礼仪microrna的帮助下,共同揭示了生化机制和post-transcriptional-layered解释发病机理和大量无序的发展条件,比如癌症。此外,与其他因素相关RBPs和转录因子等也会影响电抗器的生物活动(28],microrna同样争夺的绑定与共享目标池(29日]。一些建议,电抗器的概念扩展到任何RNA相声周围共同监管机构(6),而其他同样提出“ceRNome”概念指的是集成的全面的细胞环境中相互地把RNA分子(9),这表明,电抗器相声绝不是独立的但在全球转录后上下文。
3所示。构建块的龙头
3.1。假基因
以前被视为非功能性残遗的祖先基因由于有害突变阻碍他们被翻译成明确的表型(2),假基因逐渐表现为真正的竞争者对其同源基因高度同源的绝笔重叠。独立的表观遗传修饰在伪基因表示主动和稳定进化保护(2]。大约14505个伪基因有助于弥补人类基因组根据GENCODE释放(24版)(2组成的,未加工假基因来自基因重复,通过逆转录加工假基因,从头合成统一的伪基因,没有编码伙伴(30.),其记录参与基因调控作为反义序列或引人注目的microrna的诱饵的子集lncRNAs无所不在地表达和肿瘤特异性模式(31日]。
3.2。lncRNAs
估计约有17910 lnRNAs不同长度从0.2到100碱基(32),显示组织和发展的复杂性,结合功能和空间染色质修饰的多样性,RNA加工在细胞核,细胞质基因编码管理部分(33据报道,抵消低丰度竞争候选人microrna的绑定在给定的条件(3]。更准确地说,lncRNA X-inactive特定记录(Xist)可以在独联体夺去生命整个染色体(34],HOX成绩单反义RNA(热空气)函数在反式驱动转移基因表达调控(35],染色质结构改造的可变剪接相关肺腺癌转移相关记录1 (MALAT1) [36]。研究最多的lncRNA在肝细胞癌,肝癌(HULC)高度调节,能够脱离蛋白激酶催化β(PRKACB) mir - 372克制,因此促进营反应元件结合蛋白(分子)磷酸化和,反过来,放大人类负重外骨骼upregulation [37]。此外,lncRNAs是非常重要的在控制细胞分化和多能性维护对长基因间的非编码rna的影响(lincRNAs) [38]。
3.3。circRNAs
circRNAs相当丰富的哺乳动物细胞中,产生近20%的功能基因(39]。Self-circularization取决于共价结合后的3′,5′末端”backsplicing”,赋予高稳定这些循环RNA结构与线性同行相比,由于缺乏自由终端,从而抵抗exonuclease-induced退化和miRNA-mediated镇压[40]。circRNA ciRS-7被确定为miR-7(包含60 - 70研究硕士40),作为重要的监管机构在脑发育和肿瘤发生40,41]。大量证据披露的关键角色circRNAs与占主导地位的龙头、细胞内定位在恶性肿瘤进展42),不同的稳定使他们理想的生物标志物在体液,如血液或唾液临床评估(43,44]。
3.4。mrna
因为60%以上的人类mrna港根据计算预测研究硕士(45),是不足为奇的假定蛋白质编码rna的功能不再局限于翻译模板但传播到活跃的fine-tuners ncRNA-mRNA mRNA-mRNA相声,这可能产生一致的或相反的效果与他们固有的编码功能。CNOT6L,它已被广泛研究,VAPA ZEB2,和VCAN mRNA龙头、肿瘤抑制PTEN mRNA,代表异常转录水平和PTEN的差别导致对这些基因的mRNA Dicer-dependent方式在结肠直肠癌等各种癌症类型(25],乳腺癌[46),和黑素瘤26]。同样,其他经典识别分子包括VCAN和CD44与他们竞争的rna,具有复杂的角色在细胞增殖、侵袭性行为,和其他一些在上下文的癌症(恶性签名47,48]。
4所示。龙头、相声解读
增加计算、数学和实验工具提出了解码龙头、相声和识别假定的候选人的拓扑和动态波动。典型的龙头、交互验证过程先后包括RNA免疫沉淀反应等确定的测试miRNA-ceRNA绑定,确认正相关的转录水平的龙头,重复miRNA-dependency测试通过帽子淘汰赛或者绝笔突变,最后引起的表观遗传改变了电抗器的差别,或者对这些破坏生理条件(6]。预测算法包括皮塔饼,TargetScan、米兰达和rna22已验证有效寻求通过识别研究硕士和得分重叠的龙头、量化评估,形成预测龙头、交互的数据库(ceRDB),然而,不清楚目标规则和不完全互补了限制在某些情况下(49]。利用高通量测序RNA孤立的交联免疫沉淀反应(HITS-CLIP)和photoactivatable ribonucleoside-enhanced交联和免疫沉淀反应(PAR-CLIP)引入广泛使用,RISC-bound目标更有效地、准确地识别(49- - - - - -51]。此外,MS2-tagged RNA亲和纯化(MS2-TRAP)使上下文相关的验证52]。进一步说明ncRNA监管为每个亚型包括PseudoFun假基因(53]和GDCRNATools lncRNAs [54]。HITS-CLIP / PAR-CLIP与亚细胞RNA结合成像(5)和大规模spectrometry-based RBP丰富测量允许分析sublocalization和RBP绑定的6]。综上所述,智能癌症生存预测系统和基因生存分析屏幕系统提出对个人和精确的临床预后评估监督(55]。
5。分子基地为龙头、互动
数学,计算机,和实验室方法如上所述进行枚举,产生结论丰富,电抗器和microrna的亚细胞定位、共享研究硕士,和许多其他的间接因素提出影响ceRNA-miRNA交互效率。
最佳相声条件的分析表明,只有当相关的化学计量学,电抗器和窄范围的等价的microrna的下跌可能显著cross-regulation发生(18,56,57]。这样迅速发起了threshold-like行为相互影响,占microrna展示他们的角色“开关”当目标记录高度压抑的低丰度和“fine-tuners”龙头、敏感的监管水平浮动阈值(58,59),部分符合假设的microrna为目标,电抗器起到更强的压制作用[60]。此外,研究硕士在平等共享microrna亲和力,更广泛的曲目,电抗器的目标microrna是较弱的影响microrna将对每个目标(57]。换句话说,遥远的电抗器,在同一监管网络双向损害的microrna的功效。值得注意的是,定量测定mir - 122及其龙头、醛缩酶mRNA为龙头、显示显著的脱抑制竞争对手只是观察到当醛缩酶mRNA经历nonphysiological超表达(59),表明特定的龙头、相声可能相当温和的在正常情况下,但普遍在病理情况下。
RNA结合蛋白(RBPs)极大地参与转录后调节通过RNA拼接,运输,和稳定的中介。除了研究硕士,有RBP结合位点位于龙头、序列,即RBPs对抗或合作的microrna直接占领特定的结合位点或间接改变亲和力microrna通过重新排序,电抗器的二级结构。与众多绑定轨迹邻近或重叠miRISC结合位点3′UTR [61年),户珥RBP在很大程度上稳定RNA转录,而AUF1产生协同效应与microrna目标能源(62年]。同样,户珥新兵let-7 RISC镇压转录监管机构原癌基因(63年,原癌基因在microrna的转录控制被广泛接受,包括upregulation oncogenetic集群(mir - 17 - 9264年]。最少、rna可能搬迁到不同的亚细胞分布一旦装满RBPs,也影响时空相互交互的有效性。
水解的腺苷脱氨基作用肌苷(我编辑),utr和intronic序列中存在的最频繁65年),集中体现了广泛的转录后调控RNA编辑事件。已经验证主要在大多数pre-mRNAs依靠腺苷脱氨酶,并相应地创建新的种子区域和相应的目标谱,microrna破坏或产生microrna的匹配基板在电抗器(66年]。其他形式的RNA编辑导致基础插入,删除,核苷酸替换同时丰富的变化和多样性,电抗器网络。
龙头、相声拥抱多层监管特点。除了上述方面,大量的argonaute microrna之间也会导致竞争的瓶颈在酶催化过程miRISC合成(67年]。单核苷酸多态性(SNP)允许微妙的核苷酸组成的差异研究硕士分享集体microrna的游泳池,和可变剪接提供microrna缩短3′utr在各种各样的癌症细胞68年),既体现在改变亲和力的研究硕士microrna的绑定,亲和力较高的具有更强的约束力的能力。因此,整体调节网络在一定条件下,在其他因素考虑。
6。龙头、癌症
染色体重排、点突变、缩短3′UTR,和其他常见的染色体结构改变癌细胞基因组,因此,电抗器,网络的失调与肿瘤发生密切相关,细胞增殖和抗常规治疗发生在这种情况下(表1)。
已经阐明,减少水平的假基因PTENP1导致miRNA-dependent方式抑制抑癌基因PTEN在许多癌症类型。反义lncRNAs, asRNAa asRNAb,来自PTENP1轨迹,分别招收后生监管者PTEN启动子区域,围PTEN转录,稳定PTENP1去阻遏PTEN从microrna的吸收69年]。重合与以前公布的材料,电抗器,对手PTEN信使rna还包括mRNA,其大量microrna的竞争削弱了在给定的病理条件下,从而破坏下游anti-oncogenic PTEN / AKT /p53通路(70年]。
最近的证据加深知识的身体有关circRNAs癌症恶化。没有NUDT21, RNA剪接因子,circRNAs在肝细胞癌发生的差别导致对这些71年)和UGUA元素被指出的关键序列环合通过绑定NUDT21形成二聚体。微阵列显示cirr5615作为一个有效的海绵mir - 149 - 5 - p,及其upregulation导致更糟糕的CRC患者的临床结果,通过抑制解除的β连环蛋白稳定调节器tankyrase(秋明石油公司)72年]。类似的机制和增长之间的正相关关系被发现circTP63和肺癌,FOXM1水平与mir - 873 - 3 - p (73年]。N的预后模型阶段建立了circCRIM1 TNM分类和超表达基于circCRIM1 - mir - 422 - A - foxq1相声在鼻咽癌相关外围植入,epithelial-mesenchymal过渡(EMT),和受损的化学敏感性74年]。
不断新兴lncRNA主角还提供精致的新途径解除龙头、癌发展的相互作用。基于这个领域的巨大成就,综合分析丰富地上升,深入研究组织的差异表达基因和特异的(度),利用密集的数据库,如癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合(GEO),统计方法支持生物信息学分析。lncRNA转录的概要文件中列出多种癌症如肝癌、乳腺癌、恶性胶质瘤,GC,转移性黑色素瘤(75年- - - - - -80年),为预后评估提供有前途的生物标志物和早期检测这些病理变化。
无数的突破,电抗器无疑闪闪发亮对癌症诊断和治疗有效;什么值得额外的关注,另一方面,是,有时候,它是综合监管的一部分轴为更多outward-extending调查铺平了道路。它在2018年被发现,支架蛋白质disabled-2 (DAB2),其最初发现在卵巢癌抗肿瘤的作用,下调了mir - 191通过绑定其研究硕士3′UTR雌激素刺激,预示着提升细胞活力,肿瘤的生长了,可怜的长期生存患者乳腺癌ER + (81年]。同时,mir - 203 / SNAI2轴具备干细胞在肿瘤成为引人注目的象征,EMT,在前列腺癌血管生成,抑制的mir - 203转录抑制剂SNAI2松了一口气是由于减少mir - 203存在,呈现下游致癌GSK-3的复活β/β连环蛋白信号通路的激活SNAI2 [82年]。在2019年晚些时候,类似分子活动,有些补充前,公布在肿瘤发生的肺腺癌(LUAD),在过表达lncRNA chromatin-associated RNA 10 (CAR10)和lncRNA组织相容性白细胞抗原复杂P5 (HCP5), TGF后由SMAD3转录上调βLUAD交流晚期,都促使细胞增殖和转移完全通过mir - 203 /培训管理访问(83年,84年]。这些发现表明,与先前的研究未来发展的巨大潜力。
7所示。抗免疫治疗和化疗
尽管不断升级胜利在典型的免疫疗法,如单克隆抗体、免疫检查点(IC)抑制剂,嵌合抗原受体(汽车)转基因T细胞疗法,和T细胞受体基因改造(TCR),分为收养的T细胞治疗(ACT),肿瘤细胞固执地逃离内部或体内免疫监督管理,通过内在适应性,或获得住宿,导致恶性性能和接受免疫疗法。细胞毒性T-lymphocyte-associated蛋白4 (CTLA4)对T细胞研究作为免疫检查点,块T-cell-stimulating绑定CD28和APC B7分子,诱导T细胞失活(85年]。监管miR-29趋势和B7-H3相反,八个亚型的B7家族之一,被证实在神经母细胞瘤等实体肿瘤,肉瘤,皮肤黑素瘤、乳腺癌86年- - - - - -88年]。癌症的另一个常见调节IC是PD-1的绑定与配体PD-L1诱发T细胞残疾。体细胞突变的胞嘧啶鸟嘌呤PD-L1 3′UTR导致改变绝笔序列在不同胃肠道癌症(GCs),释放PD-L1 mRNA的限制mir - 570 (89年,90年]。此外,microrna的数组被发现异常的超表达相关PD-L1固体和血液肿瘤和激励化学抗性和转移。lncRNA-miRNA-PD-L1法规也广泛地发现肿瘤的生长,细胞增殖,迁移GCs和nonsmall细胞肺癌(NSCLC) (91年- - - - - -94年]。可能的解释为抵抗IC抑制剂(ICI)免疫疗法存在异质性的MHC损失和易感性自发突变,与恶化识别和免疫反应异常的刺激。
TCR-engineered T细胞疗法的发展和CAR-T细胞疗法反映,在很大程度上代表的长期探索收养T细胞疗法。授予的突破指定CD19-targeting CAR-T细胞疗法CD19 + B细胞血液恶性肿瘤导致临床试验,完全或部分缓解癌症免疫疗法关注完全激发或协助自体免疫系统发挥加强监督和限制肿瘤进展,但事实上,免疫逃避总是不可避免的归因于不断变化的肿瘤微环境免疫抑制细胞因子途径(例如,干扰素γTGF PD-L1表达式β在移行细胞癌,VEGF在生产myeloid-derived抑制细胞(MDSCs), Wnt /β连环蛋白信号在结直肠癌,和缺乏敏化- 2等细胞因子,il - 12,和IL-15),受损的功能或表达的抗原分子和异常转录后,电抗器的背景,让肿瘤细胞巧妙地逃脱免疫监控(95年- - - - - -One hundred.]。LncRNA MALAT1驱动器树突状细胞(dc)与分泌il - 10和低级的耐受性类型表达式CD80和MHC作为海绵mir - 155 (101年]。同时,PD-L1在mir - 195的规定在弥漫型大b细胞淋巴瘤和Linc00473 MALAT1胰腺癌(91年,102年]。上述lncRNA热空气释放人类白细胞antigen-G mir - 152 (HLA-G)表达式,压迫免疫反应在胃癌(夺去生命NK细胞活性103年,104年]。CD8 + T细胞疲劳和疲惫,积极与T细胞免疫球蛋白和粘蛋白域蛋白3 (Tim-3),是一种常见的免疫逃逸路线可以恢复肝细胞癌和抑制nuclear-enriched常染色体成绩单1 (NEAT1)增强Tim-3捕获通过mir - 155 (94年]。此外,NEAT1直接结合DNMT1, DNA甲基转移酶家族中的一员,与启动子区异常甲基化导致epigenetically antioncogene使之抑制P53表达和注册会计师/刺通路T细胞滋补[105年]。这里,我们仅仅触及了有限元素的龙头、监管过继免疫治疗,而治疗的理解代理和监管铰链通知T细胞疗法的可行的组合与选择的趋化因子,细胞因子,艾多酷,单克隆抗体,预感访问应用程序和可选的策略在癌症治疗的好处。
药物抗性发展的致命弱点,恶性肿瘤的预后不满意,总是伴随着失谐的生物机制包括药物流出,细胞增殖,遥远的迁移,EMT。最利用化学抗性的监管机构之一是lncPVT1-representing非编码序列的转录癌变8抓起染色体(106年)(表2)。lncPVT1授权三种调节方法。首先,它新兵修饰符如EZH2 epigenetically抑制肿瘤抑制,包括p53在肝细胞癌(107年),大的肿瘤抑制激酶2 (LATS2)在非小细胞肺癌(108年],mir - 195 (109年]。第二,微分处理lncPVT1 lncPVT1-derived microrna的产生,例如在NSCLC mir - 1204细胞增殖加速通过针对paired-like homeodomain 1 (PITX1) [110年]。最后,主要lncPVT1失调在抵抗化疗药物对各种癌症相其巨大的生命力,电抗器。
8。结论
在本文中,我们提出一个全基因组分子间相互作用由ncRNAs转录后调控的深入程度对不同类型的癌症,动态网络的详细机制,强大的预测工具,和典型的龙头、相声在发病机理,发展,和耐药性在癌症都一起草拟了一个令人鼓舞的蓝图深入的科学研究和临床应用的翻译。尽管如此,我们还是不得不承认,尽管广泛努力努力拓宽我们对这个领域的理解,有更多的未知领域剩余雕刻出来。为主,与大多数当前的研究进行整体细胞团级别,intratumor异质性癌细胞中一直被忽视,这也是抗肿瘤和治疗的关键。在这里,我们把重点放在两个点的问题。首先,即使调节节点牵扯很多潜在的临床治疗目标,准确地操纵这些中心不参与其他无关紧要的轨迹等微妙的波兰。考虑到每一个分子的结,或者间接地由独立的监管途径协同,敌对的,或不相关的功能、可控性和单向干预将最远的避免不良反应,实现想要的结果。第二,表型观察到通过降低单龙头、表达式或超表达/ microrna的轴可能需要辩证看待,其意义可能是过多的夸张的在中和其他看似不重要的问题进行研究时,或是紧紧拖着许多其他更高的连锁,仅执行目标轴变化太弱在生理条件下脱颖而出。无可否认,繁荣进步电抗器,网络提供了一个激动人心的起点为临床实践和未来研究癌症。
数据可用性
参考文献综述主要从PubMed检索,ClinicalKey和奥维德从本网站下载(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/,http://www.clinicalkey.com,http://ovidsp.ovid.com/),http://www.yz365.com/。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
香高提出了主题;倪杨,杨郭刘,Mengxuan文献检索和分析。倪杨起草的手稿;郭刘、杨Mengxuan和香高帮助修正。所有的作者都阅读和批准。