TIMP-1、微血管浸润和高核级是局限性肾细胞癌肿瘤直径扩大的重要决定因素

摘要

目标．为了明确哪些病理因素对局限性肾细胞癌肿瘤直径的扩大是必要的，我们对局限性肾细胞癌患者进行了研究。方法我们回顾性分析了本研究所237例肾细胞癌患者行肾切除术的病历。我们对所有样本进行了MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和MT-MMP-1的免疫组织学分析。结果在临床病理因素中，多变量分析显示核分级；TIMP-2和MT-MMP-1是局限性RCC的独立预后因素（风险比1.50，，风险比1.12，，风险比为1.84，、职责)。通过pT1a与pT1b的多因素logistic回归分析，TIMP-1是一个独立因素(风险比3.30，)，而所有pT1与pT2a，以及所有pT1 + pT2a与pT2b均为高核级(风险比5.15，)微血管侵犯（MVI，风险比3.08，)是独立因素。对于所有pT1+pT2a与pT2b，核级（风险比3.39，)和MVI(风险比2.91，)为独立因素。结论TIMP-1的高表达对于肿瘤直径从pT1a增加到pT1b是必要的，肿瘤直径扩展到pT1和pT2a以外的过程需要MVI的存在和高核级。

1.介绍

最近，Frank等人[1.和Klatte等[2.]建议根据肿瘤直径将T2肾细胞癌分为pT2a和pT2b，截止值为10 厘米

根据他们的报告，《TNM分类》第7版[3.]， T1 ~ T2 RCC的阈值分为T2a(最高10 cm)和T2b(超过10 cm) [3.］.李等人[4.]报道，对于当代4cm以下的肾细胞癌患者，无论是根治性手术还是保留肾元手术，均可实现局部控制。此外，保留肾元手术后的局部复发率为0-12%。在显微镜下局限于器官的疾病中，这一比率降至0%至3%，在小型肾肿瘤中则降至0%至5% [5.]众所周知，肾细胞癌的直径大于10 cm极有可能引起远处转移，一般推荐的手术方法是根治性肾切除术[1.］.

之前，我们报道了RCC的全身性症状与基质金属蛋白酶9 (MMP-9)的表达有很强的显著相关性[6.］.众所周知基质金属蛋白酶(MMPs)和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)在RCC的进展中都起着重要的作用。然而，目前还没有关于肿瘤直径与MMPs和TIMPs之间关系的报道。为了明确什么样的临床病理特征是扩大肿瘤直径所必需的，我们对局限性肾细胞癌患者进行了研究。

2.材料和方法

1988年1月至2003年12月，共有237名患者在日本大学板桥或Surugadai医院因局限性肾细胞癌接受了根治性肾切除术。男性176例，女性61例，平均年龄分别为60(33-83)和58(25-82)岁。术后平均随访61±3.6个月。所有患者术前均行胸腹对比增强CT检查，如有需要可行骨扫描。根据恶性肿瘤的TNM分型确定病理分期[3.］.

在94例（40%）、74例（31%）、43例（18%）和26例（11%）病例中，肿瘤被分为pT1a、pT1b、pT2a和pT2b。

RCC的核级采用Fuhrman等人提出的标准确定[7.］.因为几项研究发现，1级与2级肿瘤患者和3级与4级肿瘤患者之间的生存结果没有显著差异[8.]共有237名患者根据核级分为两组：低核级组（1级和2级，190名患者）和高核级组（3级和4级，47名患者）。

微血管浸润（MVI）是指肿瘤局部浸润完整的血管壁，包括内皮细胞，导致癌细胞自由延伸至管腔[9］.

病理标本证实肿瘤最大直径(MTD)。我们应用免疫组化技术对肿瘤切面进行了观察，未见坏死和瘤内出血。

MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和MT-MMP-1的免疫组织化学研究采用我们先前报道的方法进行[6.].对于免疫组织化学染色的评估，2+和3+的染色强度被认为是每种蛋白质的强表达（图1.) [6.］.

（a）

（b）

（c）

（d）

肿瘤特异性生存期(Cancer-specific survival, CSS)定义为首次手术至死亡的时间间隔，采用Kaplan和Meier方法计算。采用log-rank检验确定统计学显著性。进行Cox多因素分析以确定任何独立的预测值。

为了确定T分类与RCC的8个病理特征（组织病理学类型、核分级、MVI、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和MT-MMP-1）之间的关系，我们使用多元逻辑回归分析比较定量结果。组间差异在．所有分析均使用JMP4.0 (SAS Institute, Cory, NC, USA)进行。

使用这些标本的研究是在日本大学医学院伦理委员会（IRB编号106-1）的批准下进行的。

3.结果

在这些肿瘤中，194（82%）为常规透明细胞癌，42（17%）为乳头状癌，1（0.3%）为嫌色性癌。肿瘤分为pT1a、pT1b、pT2a和pT2b，分别为94（40%）、74（31%）、43（18%）和26（11%）例。肿瘤中位直径为50 毫米（15-250毫米）在总共237名患者中，190名被归类为低核级（1级和2级），而47名被归类为高核级（3级和4级）。

pT1a、pT1b、pT2a和pT2b的癌症特异性10年生存率分别为88.8%、69.5%、80.3%和50.0%(图)2.,）.

关于癌症特异性死亡率，单变量分析显示pT1a与pT2a、TIMP-1和TIMP-2作为决定因素没有显著性差异，而其余8个因素是247名患者术后特异性死亡率的显著因素（表1）1.）.通过临床病理因素的多因素分析，核分级、TIMP-2和MT-MMP-1是独立的预后因素(风险比1.50，，风险比1.12，，风险比为1.84，职责。)(表1.）.


类别	单变量分析		多元分析
类别	危险比(95% CI)	价值	危险比(95% CI)	价值

pT1a与pT1b 94年和74年	2.38 (1.02–5.55)	0.046	1.35 (0.96 - -1.88)	0.086
pT1a与pT2a 94对43	1.40 (0.49 - -4.0)	0.53	1.07 (0.93 - -1.42)	0.74
pT1a与pT2b 94对26	4.0 (1.51–1.020)	0.005	1.09 (0.66 - -1.85)	0．71
清晰与非清晰 190对47	2.05 (1.00 - -4.019)	0.048	1.12 (0.77–1.65)	0.53
核等级1和2与3和4的对比 190对47	1.79 (1.76–6.84)	<0.001	1.50 (1.03 - -2.22)	0.037
MVI(−)vs (+) 154对83	1.95 (0.92 - -2.94)	0.025	1.04 (0.33 - -1.21)	0.94
MMP-2弱与强 82年和155年	3.69 (1.43 - -9.52)	0.0069	1.26 (0.30–5.23)	0.74
MMP-9弱对强 181对56	4.29 (2.17–8.16)	<0.0001	2.88 (0.92 - -2.94)	０．７５
TIMP-1弱对强 42和195	2.52 (0.77 - -8.26)	0．12	1.014 (0.709 - -1.45)	0.34

TIMP-2弱对强 201和36	2.07 (0.99–4.31)	0.052	1.12 (1.36–3.29)	0.020
MT-MMP-1弱对强 194对43	3.44 (1.73–6.84)	0.005	1.84 (1.21 - -2.82)	0.045

我们比较了三种类型的临床病理因素:pT1a与pT1b、所有pT1与pT2a、以及所有pT1 + pT2a与pT2b。经Cox多因素分析(表2.)，在pT1a和pT1b组中，TIMP-1是一个独立因素(风险比3.30，）.对于pT1和pT2a，两者的核级别(风险比5.15，)和MVI（风险比3.08，)为独立因素。对于剩余的pT1 + pT2a和pT2b，两者的核级别(风险比3.39，)和MVI(风险比2.91，)是显著因素。


	pT1a与pT1b	pT1a和pT1b与pT2a的对比	pT1a, pT1b, pT2a和pT2b
	优势比(95% CI)价值	优势比(95% CI)价值	优势比(95% CI)价值
	94年和74年	168对43	211和26
	各类案件	各类案件	各类案件

细胞类型	2.43 (0.85–6.89) 0.09	0.13 2.28 (0.76 - -6.82)	0.10 2.32 (0.84 - -6.36)
明确与其他	139比29	175对36	190对47
核级	0.31 1.79 (0.57 - -5.56)	5.15 (1.87–14.2) 0.0015	3.39 (1.20–9.58) 0.020
低对高	147和21	176对35	190对47
MVI	1.95 (0.92–4.16) 0.08	3.08 (1.47–6.48) 0.002	2.91 (1.19–7.11) 0.018
(−)和(+)	123和45	144年和67年	154对83
基质金属蛋白酶-2	1.14 (0.55–2.36) 0.71	0.84 2.13 (0.90 - -5.0)	1.24 (0.41–3.70) 0.70
弱对强	60对108	76对135	82年和156年
基质金属蛋白酶-9	0.205 1.79 (0.65 - -4.90)	0.43 1.47 (0.55 - -3.94)	1.31 (0.40–4.21) 0.64
弱对强	134对34	163年和48	181对56
TIMP-1	0.010 3.30 (1.32 - -8.26)	1.18 (0.43–3.26) 0.74	0.42 1.59 (0.49 - -5.10)
弱对强	31对137	37和174	42和195
TIMP-2	0.53 1.41 (0.48 - -4.13)	0.84 2.14 (0.65 - -6.99)	0.13 3.03 (0.71 - -12.98)
弱对强	142和26	178对33	201和36
MT-MMP-1	1.93 (0.65–5.71) 0.096	2.28 (0.76–3.50) 0.15	0.26 1.98 (0.60 - -6.54)
弱对强	144和26	176对35	194对43

MVI：微血管侵犯。

4.讨论

一旦MMP受到刺激，它们就容易受到一般血清蛋白酶抑制剂的抑制α2-巨球蛋白和一家族特异性组织抑制剂(TIMPs)。另一方面，由于TIMPs对细胞生长和凋亡有额外的作用，因此它可能是多功能的。在某些情况下，这些活动似乎与它们的MMP抑制能力不同[10］.

在此之前，我们报道MMP-9的高表达水平与肾细胞癌的不良预后相关[11]基本上，已知TIMP通过与活性MMP形成复合物来抑制MMP活性，并且被认为对该家族的酶具有特异性，例如TIMP-1与MMP-9和TIMP-2与MMP-2[12]TIMP家族的成员也与癌症有关。在一些病例中，恶性肿瘤的TIMP水平升高而不是降低[12］.

MMP-9与高核级肾细胞癌有显著关系，多变量分析发现MMP-9是一个独立的预测因子。此外，核分级和TIMP-2是偶发肾细胞癌患者的独立预后因素[13］.

关于MVI，Ishimura报道，MVI不是局限性RCC患者的重要预后因素；另一方面，它是pT1和pT2疾病患者根治术后无病复发的唯一重要预后因素[14]此外，Dall'Oglio等人在95例4岁以下肿瘤中显示MVI与临床分期之间存在显著关系直径为cm的肿瘤中，11例（12%）检测到MVI，而74例（4.1-7%）的肿瘤中检测到MVI 在20例（27%）患者中检测到cm、MVI，在7例以上患者中检测到61例 cm，28（48%）有MVI[15］.

先前我们报道，高核级肿瘤（3.4级）患者的肿瘤特异性5年生存率为45.0%，低核级肿瘤（1.2级）患者的肿瘤特异性5年生存率为83.3%() [16］.Zhang等人报道了肿瘤大小和核分级之间的显著相关性。G1、G2、G3肿瘤直径差异有统计学意义(3.27±1.46 cm、4.87±2.23 cm、7.39±3.11 cm)。).肿瘤直径越大，核分级越高。这些结果与我们的结果一致[17］.

5.结论

综上所述，TIMP-1的高表达是肿瘤直径由pT1a进展到pT1b所必需的，肿瘤直径超出pT1范畴的过程需要MVI的存在和高核级的存在。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

工具书类

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