文摘
客观的。确定主循环前列腺细胞(年度"特别关注国")被发现在所有的前列腺癌患者。方法和病人。一个前瞻性研究,分析之间的所有男性PSA值偏高4.0和10.0 ng / mL经历最初的活检。主要年度"特别关注国"是通过微分凝胶使用anti-PSA离心和使用标准的免疫细胞化学检测;积极与anti-P504S样品进行了第二个过程。恶性主要共产党被定义为PSA (+) P504S(+)和测试积极发现如果1细胞/ 4毫升。活组织检查结果被注册为癌症/无癌症,积极的核心数量和百分比渗透的核心。结果。研究人口的328/1123(29.2%)在最初的活组织检查,被诊断出患有前列腺癌,42/328(12.8%)为阴性主要年度"特别关注国"。CPC -远比年长,PSA水平较低,格里森评分较低,和更少的积极的核心和渗透的癌症。38/42(91%)的中国共产党负人遵守的标准积极监测相比,34/286(12%)的中国共产党积极的男人。结论。使用初级中共检测作为序贯试验选择男性PSA值偏高活检,缺失的临床重要的前列腺癌的风险最小当病人主要共产党-;不到0.5%的所有主要CPC -前列腺癌有临床意义。
1。介绍
前列腺癌是第二个最常见的癌症和智利男性癌症死亡的第二个原因1]。
前列腺特异抗原(PSA)是最准确的血清标志物前列腺癌和唯一的生物标志物通常用于前列腺癌的早期检测。虽然PSA是非常具体的前列腺癌,前列腺癌的高水平不是特定的,增加的良性疾病(2,3]。因此,大约70%的男性增加血清PSA值,定义为> 4.0 ng / mL,没有前列腺癌(4),从而进行不必要的前列腺活检。4.0 ng / mL的PSA截止目前用于选择男性前列腺活检;然而,这错过许多癌症,有人建议降低截止2.6 ng / mL检测小但临床上重要的癌症5]。前列腺癌预防试验(6)报道,39.2%的男性PSA 2.1 -3.0 ng / mL, 27.7%的男性PSA 1.1 -2.0 ng / mL,和1.3%的男性PSA < 1.0 ng / mL已经结束试用前列腺活检的腺癌灶。换句话说,38%的前列腺癌患者有PSA < 4.0 ng / mL, 70%的男性PSA > 4.0 ng / mL没有癌症。这个问题进一步复杂化的检测到解剖(前列腺癌患病率高7),积极在男性的前列腺活检的高频率与正常直肠指诊(DRE)和PSA < 4.0 ng / mL [8之间的对比),前列腺癌的发病率和死亡率,和需要治疗估计有37人筛选检测前列腺癌预防前列腺癌死亡(9,10]。达到一个相对死亡率降低40%的前列腺癌筛查(11),50%的筛选检测前列腺癌可能overtreated [12]。因此,寻找新的生物标志物来提高诊断产量是必要的。尤其当前列腺活检的风险并不是无关紧要的;Rietbergen et al。13),5802年的一项研究,接受transrectal前列腺活检的患者,报道一个住院治疗的并发症发生率为0.5%,2.1%的直肠出血,血尿持续发烧,2.3%和7.2%。
的使用主要恶性共产党(mCPC)检测的序贯试验决定前列腺活检的需要在一定程度上解决这些问题。228年研究保护接受第一次活检的患者,28.5%的患者癌症诊断的检测主要mCPCs和协会与积极的活组织检查的敏感性为86.2%,特异性为90.8%,阳性预测值为78.9%,阴性预测值为97.1% (14]。使用的检测主要mCPCs序贯试验选择男人,用怀疑的PSA升高,前列腺癌的前列腺活检来确定需要担忧的失踪临床上重要的前列腺癌的可能性。我们目前的结果328名男性被诊断出患有前列腺癌筛查程序的结果和比较的结果主要mCPC检测与活检格里森评分,入渗率样本的癌症,和积极的核心。我们使用相同的方法mCPC检测所述的保护研究。
2。方法和病人
研究伦理委员会批准后使用主要mCPC检测,进行了前瞻性研究。所有患者参加了在武警de智利卫生系统和血清PSA值> 4.0 ng / mL和/或直肠指诊(DRE)对前列腺癌和被称为前列腺活检。立即活检前8毫升静脉血收集EDTA (Beckinson-Vacutainer)和发送到中心实验室。病人编码和临床血清PSA的细节,年龄,活检结果收集。
2.1。检测mCPCs
血液样本被维持在4°C,并在48小时内处理。前列腺活检和初级中共检测进行独立分析,与被评价者盲的临床细节和结果活检或主mCPC测试。
单核细胞是通过差速离心使用Histopaque 1077 (Sigma-Aldrich),水洗,并在100年resuspendedμL自体血浆。25μL整除被用来使幻灯片(美国DAKO使硅烷化),在空气中干燥24小时,和固定在70%的乙醇溶液,5%甲醛、和25%磷酸缓冲盐,pH值7.4。
主要mCPCs检测使用单克隆抗体针对PSA和克隆28 a4(英国Novocastro实验室)和标识使用碱性phosphatase-anti-alkaline磷酸酶系统(美国DAKO LSAB2)为基础,用新的。-fushcin色原体。阳性样本进行了第二个过程anti-P504S克隆13 h4(美国DAKO)和被确定基于过氧化物酶系统(美国DAKO LSAB2)轻拍(3、3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride)发色体。
主要mCPC定义的标准ISHAGE Hematotherapy和基因工程(国际社会)(15)和的表达P504S根据美国病理学家协会的共识16]。恶性主要共产党(mCPC)被定义为一个细胞,表达了PSA和P504S;良性主要共产党(bCPC)表达了PSA但不是P504S和白细胞P504S积极或消极,但没有表达PSA(数字1(一)-1(c))。测试被认为是积极的,至少1细胞检测/ 4毫升血液。测试分为mCPC积极或消极;mCPCs的数量/ 4毫升的血液不是作为一个参数,以简化测试的结果。分析了采用免疫染色的幻灯片一盲法临床和病理的细节。
2.2。活检的病理分析
超声波引导设计的新款高能效型opteron活检是根据标准建议;样本固定在甲醛和发送到病理服务。3μm石蜡包埋部分被削减,deparaffinized沾按标准程序)。如果发现癌症,格里森评分,核阳性癌症,渗透记录的百分比。前列腺活检是由一个病理学家盲法临床分析细节和mCPC测试的结果。超声波被用来指导活检;并不是所有的报告有前列腺体积计算或前列腺是否同构或异构。在智利,因为它不是常规使用前列腺超声prebiopsy,我们没有包括这个参数的分析。
2.3。比较主要mCPC状态会发现又好的标准积极观察作为前列腺癌的治疗选择
机构的指导方针和不错的(英国)指南建议的治疗选择男性的积极监测用以下标准:临床分期T1c或少,格里森评分≤6,少于3核阳性癌症和少于50%或10毫米渗透在任何一个核心。患者的频率相比主要mCPC积极和消极是使用这些指导方针来评估病人的数量符合的标准积极监测。我们用1994的标准,而不是那些Tosoian et al。17注册]并不是所有患者前列腺体积超声报告。
2.4。统计分析
描述性统计被用于人口变量,表示为连续变量的平均值和标准偏差与正态分布。不对称分布的中位数和四分位范围(差)值。非连续变量被当作频率。Shapiro-Wilk测试是用来确定一个正态分布。学生以及用于连续变量与正态分布相比较,Mann-Whitney测试为纵坐标和连续变量与非正态的分布,和卡方频率的差异。统计学意义是定义为一个值小于0.05的测试都是正反。分析使用占据11.0程序(StataCorp LP,大学城,德克萨斯州,美国)。
2.5。道德的考虑
这项研究是导演完全符合赫尔辛基宣言的原则和当地伦理委员会的批准。
3所示。结果
共有328名男性群体的1123名患者前列腺活检阳性癌症,总发病率的29.2%的活检。42/328(12.8%)的男性为初级mCPCs检测阴性。clinic-pathological细节如表所示1。男人负主要mCPCs明显老和血清PSA水平较低,格里森评分较低,低数量的核阳性前列腺癌,与癌症,少核渗透。的1123患者中,90(8%)呈阳性mCPCs但有一个最初的前列腺活检为阴性癌症。
3.1。的男性人数与积极监测遵守的标准治疗
比较男人mCPC消极与mCPC积极使用爱泼斯坦标准[18积极监测),38/42(91%)的mCPC负男人相比之下,34/286 (12%)()mCPC积极的人遵守的标准积极监测前列腺癌(表2)。
四人在中共负集团积极监测不符合标准;他们的细节如表所示3。在病人3号这是一个偶然的发现,癌症微焦点之一。1号病人有一个癌症治疗一样,行根治性前列腺切除术后的患者需要2和4。
4所示。讨论
前列腺癌模型检测和估计的进展表明,23 - 42%的屏幕检测前列腺癌overtreated [19]。爱泼斯坦等的介绍。18]预测前列腺癌病理“微不足道”的标准是有用的但有谨慎使用它作为唯一的参考临床决策多达8%的这些癌症没有器官限制基于手术后的结果(20.]。其他nonograms提出并审阅Bastian et al。21]。积极监测被认为是低风险的癌症患者的最佳选择或短寿命。因此如果有相当比例的男性overtreated前列腺癌和积极监测是一个公认的治疗选择,那么男性的前列腺活检的目的并不是检测PSA值偏高的每个检测那些前列腺癌与前列腺癌而造成伤害的可能性。男性前列腺癌临床微不足道从未注定有症状或影响其寿命可能不会受益于知道他们有“疾病。“临床上无关紧要的检测前列腺癌可以被视为一个前列腺活检的不利影响。因此,有相当大的焦虑和痛苦中发现男性接受积极监测(22]。
没有直接相关的研究比较直接和延迟活检在男性PSA水平。一些观察性研究报告的优质男性的前列腺癌的风险因素进行活检,与年龄相关,PSA, DRE结果,前列腺活检之前,黑人种族,和前列腺体积(23- - - - - -25]。然而,有担忧推迟前列腺活检的不确定性治疗前列腺癌的自然历史,错过的机会发现和治疗可治愈的癌症,或者由于执行延迟活检更大或更激进的癌症的治疗可能会导致一个更复杂的手术与更大的副作用。
的使用主要中共检测选择男性前列腺活检失败检测男性CPC -癌症。这代表了大约5%的所有主要CPC -男性和PSA升高的4.0和10.0 ng / mL[之间14]。这项研究表明,这些5%的初级CPC -男性,9%会有一个治疗前列腺癌遵守这些指南或大约99.5%的所有主要CPC -男人不会需要治疗前列腺癌或在大多数情况下主CPC -良性前列腺增生(14]。因此从这些结果错失重要的前列腺癌是最小的关注,远远低于38%的前列腺癌错过当使用PSA水平的4.0 ng / mL作为推荐前列腺活检的分界点(6]。正在进行一项研究跟踪的所有主要CPC -男性PSA值偏高是目前在进步。
我们使用了爱泼斯坦标准定义积极监测而不是那些Tosoian et al。17];男人不经常接受前列腺超声检查前列腺癌筛查项目的一部分;因此参考病人的前列腺活检的决定基于PSA和mCPC决定不包括前列腺体积决定。之前我们曾报道使用年度"特别关注国"的数量/毫升血液检测;然而,特异性的增加使用4细胞/毫升血液的分界点是最小的,下降8%,其中一个重要的灵敏度(14]。
有两个问题没有回答的研究,目前正在进行的调查的一部分。首先,mCPC正面的男性负面活检是这些人在增加前列腺癌的风险,他们患癌症但活组织检查未能发现它;研究表明,大约有20%的男性癌症检测重复活检(26]。如果后续研究表明,这些人确实有癌症,它可能是可取的重复活检前或饱和的活检。其次,mCPC负人,我们目前正在重复总与mCPC游离PSA测试在6个月的基础上;男人变得积极,与DRE异常或重大变化总PSA和/或免费的PSA,被称为活组织检查。这将是重要的变化来确定mCPC消极到积极与clinic-pathological参数的变化来表示积极治疗。在智利,几个男人选择进行主动监测,而是积极治疗,我们没有这种类型的患者数据。重要的是要强调,这些都是初级mCPCs和不是与预后相关;这些细胞的最激进的治疗后消失;男人保持积极,二级mCPC积极,有更高的频率生化失败(27]。
一个担忧循环肿瘤细胞技术的使用是不和谐的结果通过使用不同的检测方法。使用双PSA /前列腺特异膜抗原rt - pcr方法Eschwege et al。28]只发现37%的术前患者中共积极。戴维斯et al。29日)没有发现中共检测使用CellSearch系统之间的关联和男人之间的临床参数根治性前列腺切除术前或与本地PC或控制。然而,斯托特et al。30.)发现主要年度"特别关注国"局部癌症患者的42%;Fizazi et al。31日),使用anti-BerEP-4上皮抗原结合端粒酶活性,发现主要年度"特别关注国"局部癌症患者的79%,一个类似的图,使用同样的方法(14]。我们相信不同记录的一部分是由于相对较高的检测控制病人;可以找到一个解释是,中国共产党在男性前列腺炎和良性增生;然而,这些年度"特别关注国" P504S负(32]。我们还设计了测试使用年度"特别关注国"产生结果视为正面或负面;的根本问题是“有癌症,会伤害病人吗?”;因此我们认为单细胞的存在足以为积极或消极的癌症患者进行分类。
我们还需要强调的是,这是一个单一的机构的研究;因此需要用于其他测试中心来确定测试的重现性。这部分将取决于观察者的技能。在我们的机构preanalytical变量控制是有限的;采用免疫染色可以自动执行,因此主要的变量是观察者。观察者变异可以最小化经适当培训的不过是一个需要考虑的变量。inter-observer报道格里森评分的变化一直是问题;最近发表interobserver变化的临床意义的数据显示整体协议80.7 - -89%,但这将导致10%的患者建议积极观察会收到不同治疗基于inter-observer变化(33]。
5。结论
本研究的目的是解决问题的前列腺癌检测潜在的有害使用P504S表达的检测主要年度"特别关注国"。结果表明大多数的癌症,测试未能发现,当用作顺序筛选试验的男性PSA水平在4.0和10.0之间ng / mL,低品位体积小肿瘤这将符合标准活动的观察。因此在初级CPC -男人错过了有害的癌症的可能性是最小的;在这些男性前列腺活检可以避免或推迟,因此不暴露病人活检的副作用或活动观察的焦虑或痛苦。
利益冲突
作者报告没有利益冲突。
确认
作者感谢安娜玛丽亚Palazuelos太太她的帮助在这个项目和写作。这项研究是由医院de武警de智利研究基金。